средство для лечения шизофрении на основе гидрированных пиридо(4,3-b)индолов (варианты), фармакологическое средство на его основе и способ его применения

Формула изобретения

1. Применение гидрированных пиридо(4,3-b)индолов формулы (1) в качестве средства для лечения шизофрении

в которой R¹ выбран из группы, содержащей СН₃-, СН ₃СН₂- или PhCH₂ -,

R² выбран из группы, содержащей Н-, PhCH₂- или 6-СН₃ -З-Ру-(СН₂)₂-, а

R³ выбран из группы, содержащей Н-, СН₃- или Вг-.

2. Применение по п.1, где R¹ соответствует СН ₃СН₂- или PhCH₂ -, R² соответствует Н-, a R ³-Н-.

3. Применение по п.1, где R ¹ соответствует СН_3-, R ² соответствует PhCH₂-, а R ³-СН_3-.

4. Применение по п.1, где R¹ соответствует СН ₃-, R² соответствует 6-СН ₃-3-Ру-(СН₂)₂ -, a R³-H-.

5. Применение по п.1, где R¹ соответствует СН ₃-, R² соответствует 6-СН ₃-3-Ру-(СН₂)₂ -, а R³-СН₃-.

6. Применение по п.1, где R¹ соответствует СН₃-, R² соответствует Н-, a R³-Н- или СН₃ -.

7. Применение по п.1, где R¹ соответствует СН₃-, R² соответствует Н-, a R³-Br.

8. Применение по п.1, где указанные соединения представляют собой соли с фармацевтически приемлемыми кислотами.

9. Применение по п.1, где указанное соединение представляет собой дигидрохлорид 2,8-диметил-5-[2-(6-метил-пиридил-3)этил]-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-пиридо[4,3-b] индола (Димебон).

10. Фармакологическое средство, обладающее антишизофренической активностью, содержащее активное начало и фармацевтически приемлемый носитель, отличающийся тем, что в качестве активного начала содержит эффективное количество соединения формулы (1).

11. Способ лечения шизофрении, заключающийся во введении пациенту фармакологического средства, содержащего эффективное количество соединения формулы (1) в дозе 0,1-10 мг/кг массы тела по крайней мере один раз в день в течение периода, необходимого для достижения терапевтического эффекта.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к использованию химических соединений в области медицины и может быть использовано как средство при изготовлении фармакологических препаратов для лечения шизофрении.

До последнего времени внимание исследователей в области биохимии психозов было сосредоточено в основном на двух медиаторных системах: дофаминовой и серотониновой.

Дофаминовая гипотеза своим происхождением обязана общему свойству традиционных (типичных) антипсихотиков вызывать побочные неврологические эффекты, сходные с симптомами болезни Паркинсона. Эта же особенность дала и общее имя препаратов - нейролептики.

Нейробиохимия паркинсонизма связывается с нарушением баланса между дофаминовой и холинэргической системами в нигростриатуме, при котором активность дофаминовых структур падает, а активность холинэргических структур растет. Способность типичных нейролептиков контролировать продуктивную симптоматику у пациентов, страдающих шизофреническим расстройством (бред, галлюцинации, дезорганизация поведения), коррелирует со способностью вызывать паркинсонизм и обусловлена свойством подавлять активность дофаминовой системы. Таким образом, был сделан вывод о том, что позитивная симптоматика психоза обусловлена чрезмерной активностью дофаминергической системы. Еще одним аргументом в пользу такого заключения явились результаты исследования метаболитов дофамина в спинномозговой жидкости - был обнаружен более высокий уровень гомованилиновой кислоты (продукт обмена дофамина) у психотических пациентов в сравнении со здоровыми людьми. В настоящее время эта гипотеза получила дальнейшее развитие под влиянием новых данных - результатов посмертного исследования мозга и прижизненной позитронно-эмиссионной томографии.

Прицельное исследование изменений функции дофаминэргической системы под воздействием нейролептиков обнаружило большую регуляторную роль дофаминовых рецепторов. Было описано несколько типов дофаминовых рецепторов, каждый из которых имел свои особенности локализации и функции.

Вторая гипотеза предполагает, что фундаментальной причиной является нарушение во взаимодействии между дофаминовой и серотониновой системами. Серотонинэргические структуры осуществляют сложное модулирующее действие на функцию цофаминэргической системы, повышая ее активность в мезолимбической и мезостриарной структурах и снижая - в префронтальной области, обусловливая клинические феномены гипофронтальности.

Весомым аргументом для этой гипотезы принято считать внедрение в клиническую практику прототипа атипичных антипсихотиков - клозапина. Нейрохимический спектр активности клозапина отличал его от всех известных на то время нейролептиков, так как клозапин блокировал серотонинэргические рецепторы значительно сильнее, чем дофаминэргические. Кроме того, он оказался эффективен в отношении тех расстройств, где преобладали первичные дефицитарные расстройства, а также в большинстве случаев, обнаруживших резистентность к традиционным нейролептикам. При этом клозапин значительно реже вызывал нейролептические побочные эффекты (Kane J.M. The new antipsychotics, J Pract Pychiatry Behav Health 1997; 3:343-354).

Описанные выше гипотезы имеют достаточную объясняющую силу в отношении большого количества фактов. Однако в них укладываются не все данные. Известно, что блокада дофаминергических рецепторов происходит значительно быстрее, чем проявляется клинический эффект. Кроме того, у больных, хорошо реагирующих на антипсихотическую терапию и резистентных к ней, степень блокады этих рецепторов одинакова (Heckers S. Neural models of schizophrenia Dialogues in clinical neuroscience, 2000, v.2, N3, pp.267-280). С другой стороны, попытки психофармакологов создать препарат с антипсихотическим эффектом, но не имеющем влияния на дофаминергическую систему, до настоящего времени не привели к успеху (Kapur S., Remington G. Dopamine D(2) receptors and their role in atypical antipsychotic action: still necessary and may even be sufficient. Biol. Psychiatry. 2001 Dec 1; 50(H):873-83).

Помимо широко признанного значения дофаминовой и серотониновой активности антипсихотических средств для реализации их клинической активности, еще одна нейромедиаторная система привлекают к себе внимание. Речь идет о глутаматергической нейромедиаторной системе ЦНС.Так как многие исследователи в последние годы склоняются к мнению о том, что когнитивные нарушения играют фундаментальную роль в формировании шизофренического расстройства (Andreasen N.C. Schizophrenia: the fundamental questions. Brain Res Rev 2000 Mar; 31(2-3):106-12), глутаматергическая нейромедиаторная система вызывает все больший не только теоретический, но и практический интерес (Hashimoto K., Iyo M. Glutamate hypothesis of schizophrenia and targets for new antipsychotic drugs. Nihon Shinkei Seishin Yakurigaku Zasshi 2002 Feb; 22(1):3-13). Стимуляция глутаматергической трансмиссии может приводить к стимуляции активности центральной нервной системы, но с определенного момента и к токсическим для мозга эффектам. Угнетение же глутаматергической системы может приводить к нейропротекторным эффектам, но и, наряду с этим, к когнитивному дефициту (Heckers S., Konradi С. Hippocampal neurons in schizophrenia. J Neural Transm 2002 May; 109(5-6):891-905). Способность оказывать глутаматергическое влияние некоторые исследователи представляют как один из возможных нейрохимических механизмов антидеффицитарной активности клозапина (Chen L., Yang C.R. Interaction of dopamine Dl and NMD A receptors mediates acute clozapine potentiation of glutamate EPSPs in rat prefrontal cortex. J Neurophysiol 2002 May; 87 (5):2324-36). Кроме того, глутаматергической системе приписывают роль координации функционирования других медиаторных структур головного мозга. Эта функция может осуществляться, в частности, благодаря предполагаемому свойству мозжечка (в функционировании которого глутаматергическая система принимает важное участие) формировать временную организацию ментальных процессов (Andreasen N.C. Schizophrenia: the fundamental questions. Brain Res Rev 2000 Mar; 31(2-3): 106-12). Контроль над этой функцией малодостижим для традиционных антипсихотиков. Но глутаматная активность клозапина, в этой связи, дает возможность для формирования новых гипотез, объясняющих его необычную клиническую активность в ходе длительного курса лечения (Chen L., Yang C.R. Interaction of dopamine Dl and NMDA receptors mediates acute clozapine potentiation of glutamate EPSPs in rat prefrontal cortex. J Neurophysiol 2002 May; 87 (5):2324-36), формирования новых гомеостатических отношений, требующих длительного времени. Несмотря на моментальную блокаду дофаминовых рецепторов, первые признаки клинического эффекта антипсихотиков (контроль продуктивных симптомов) реализуются постепенно, в течение нескольких недель, а улучшение состояния продолжается в течение многих месяцев.

Таким образом, наряду с относительно давно развиваемой и широко принятой теорией патогенеза шизофрении, где главная роль отводится гиперфункции дофаминергической нейромедиаторной системы ЦНС, а также дисбалансу в серотонинергической медиаторной системы, в последние годы интенсивно развивается теория патогенеза, где основную роль в развитии этого заболевания играют нарушения в глутаматергической нейромедиаторной системе ЦНС. Предполагается, что с гипофунцией глутаматергической системы связаны многие элементы психического расстройства, наблюдаемые у больных шизофренией. Доказательствами глутаматной теории шизофрении являются следующие установленные факты: 1) Блокатор ионного канала NMDA-рецептора,- одного из главных подтипов глутаматных рецепторов, - фенциклидин вызывает у людей-добровольцев комплекс поведенческих симптомов, наиболее схожих с поведением больных шизофренией. У них наблюдаются отчуждение, аутизм, негативный настрой; они становятся неспособными решать познавательные задачи; делаются эксцентричными, а их речь и мышление становятся бедными. В настоящее время фенциклидиновая модель шизофрении считается наиболее близкой и адекватной поведению больных шизофренией (Alien R.M., Young S.J. Phencyclidine-induced psychosis. Amer.J.Psychiatry, 1978, 33:1425-8. Javitt D.C., Zukin S.R. Recent advances in the phencyclidme model of schizophrenia. Amer. J. Psychiatry 1991,148: 1301-8). Подобные эффекты вызываются и другими блокаторами ионного канала NMDA-рецептора - кетамином и МК-801 (Lahti A., Koffel В. et al. Subanesthetic doses of ketamine stimulate psychosis in schizophrenia. Neuropsychopharmacology 1995, 13:9-19). 2) Было показано, что у больных шизофрении наблюдается пониженный уровень глутаминовой кислоты в цереброспинальной жидкости по сравнению с нормальными людьми (Kim J.S., Komhuber Н.Н. et al. Low cerebrospinal fluid glutamate in schizophrenic patients and a new hypothesis on schizophrenia. Neurosci. Lett. 1980, 20:379-82). В последующих работах было показано, что шизофренией наблюдается увеличение на 30% глутаматергических волокон большого диаметра и одновременное снижение на 78% глутаматергических волокон маленького диаметра по сравнению с мозгом людей, не болеющих шизофренией (Benes F.M. Is there a neuroanatomic basis for schizophrenia? An old question revisited. Neuroscieitist, 1995, 1:104-115). Кроме того, у больных шизофренией определено увеличение количества NMDA-рецепторов в коре головного мозга, но также уменьшение обратного захвата глутамата в базальных ганглиях (Ishimaru M., Kurumaji А., Тоги М. Increases in strychnine-insensitive glycine binding sites in cerebral cortex of chronic schizophrenics: evidence for glutzmate hypothesis. Biol. Psychiatr. 1994, 35:84-95. Simpson M.D.C., Slater P., et al. Regionally selective deficits in uptake sites for glutamate and gamma-aminobutyric acid in the basal ganglia in schizophrenia. Psychiatry Res., 1992, 42:273-82).

Согласно дофаминовой теории шизофрении для лечения больных широко используются дофаминергические вещества, в первую очередь блокаторы D2 подтипа допаминовых рецепторов, такие, в частности, как галоперидол, аминазин, клозапин, и многие другие. Они эффективно снимают фазу острого психоза у больных шизофренией, но часто оказываются гораздо менее эффективны в лечении других фаз этого заболевания. Поэтому в последние годы ведутся интенсивные исследования по изучению механизма патогенеза шизофрении и созданию новых лекарств для эффективного лечения этого заболевания.

Задачей, на решение которой направлено предлагаемое изобретение, является расширение арсенала средств, которые могут быть использованы в качестве новых эффективных лекарств для лечения шизофрении - одного из самых тяжелых и плохо поддающихся лечению психических заболеваний.

Поставленная задача решается применением гидрированных пиридо([4,3-b])индолов формулы (1) в качестве средства для лечения шизофрении.

в которой R' выбран из группы, содержащей СН₃-, СН₃СН ₂- или PhCH₂,

R ² выбран из группы, содержащей Н-, PhCH ₂- или 6-СН₃-3-Py-(СН ₂)₂-, а

R³ выбран из группы, содержащей Н-, СН₃- или Br-.

Указанные соединения могут представляют собой соли с фармацевтически приемлемыми кислотами.

Одним из соединений, которое можно применять в качестве средства для лечения шизофрении, может быть соединение формулы (1), в котором R ¹ соответствует СН₃СН ₂- или PhCH₂-, R² соответствует Н-, а R³ - H-.

Или соединение, где R¹ соответствует СН ₃-, R² соответствует PhCH ₂-, a R³ - СН₃ -.

Или соединение, где R¹ соответствует СН₃-, R² соответствует 6-СН₃-3-Py-(СН₂) ₂-, а R³ - Н-.

Или соединение, где R¹ соответствует СН ₃-, R² соответствует 6-СН ₃-3-Py-(СН₂)₂ -, а R³ - СН₃-.

Или соединение, где R¹ соответствует СН₃-, R² соответствует Н-, а R³ - Н- или СН₃ -.

Или соединение, где R¹ соответствует СН₃-, R² соответствует Н-, а R³ - Br-.

Любое из выше указанных соединений может применятся в качестве средства для лечения шизофрении.

Соединения формулы (1) являются известными соединениями, широко применяемыми в фармакологической практике. Были проведены обширные исследования ряда известных соединений, представляющих производные тетра- и гексагидро-1H-пиридо[4,3-b]индола и проявляющих широкий спектр биологической активности. В ряду 2,3,4,5-тетрагидро-1Н-пиридо[4,3-b]индолов были обнаружены следующие виды активности: антигистаминная (OS-DE N 1813229 от 6 декабря 1968, N 1952800 от 20 октября 1969), центрально-депрессантная, противовоспалительная (USP N 3718657 от 13 декабря 1970), нейролептическая (Herbert C.A., Plattner S.S., Wehch W.N., Mol. Pharm., 1980, v.l7, N I, p.38-42) и другие. Производные 2,3,4,4а,5,9b-гексагидро-1Н-пиридо[4,3-b]индола проявляют психотропную (Welch W.H., Herbert C.A., Weissman А., Кое К.В., J.Med.Chem., 1986, vol.29, N 10, p.2093-2099), антиагрессивную, антиаритмическую и другие виды активности.

На основе производных тетра- и гексагидро-1Н-пиридо[4,3-b]индола выпускается несколько лекарственных препаратов: диазолин (mebhydroline), димебон, дорастин, карбидин (дикарбин), стобадин, гевотролин. Диазолин (2-метил-5-бензил-2,3,4,5-тетра-гидро-1Н-пиридо[4,3-b]индол)дигидрохлорид (Клюев М.А. Лекарственные средства, применяемые в медицинской практике СССР. - М.: Медицина, 1991, стр.512) и димебон (дигидрохлорид 2,8-диметил-5-(2-(6-метил-пиридил-3)этил)-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-пиридо[4,3-b]индола) (Машковский М.Д. Лекарственные средства. В 2 ч., ч.1, 12-е изд. - М.: Медицина, 1993, с.383), а также его близкий аналог дорастин (2-метил-8-хлор-5-(2-(6-метил-3-пиридил)этил)-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-пиридо[4,3-b]индол)дигидрохлорид (USAN and USP dictionary of drugs names (United States Adopted Names 1961-1988, current U.S. Pharmacopeia and National Formular for Drygs, and other nonproprietary drug names), 1989, 26th Edition, p.196) известны как антигистаминные препараты. Карбидин (дикарбин) (дигидрохлорид цис(±)-2,8-диметил-2,3,4,4а,5,9b-гексагидро-1Н-пиридо[4,3-b]индола) является отечественным нейролептиком с антидепрессантным эффектом (Яхонтов Л.Н., Глушков Р.Г. Синтетические лекарственные средства. / Под ред. А.Г.Натрадзе. - М.: Медицина, 1983, с.234 - 237), а его (-)-изомер, стобадин, известен как антиаритмическое средство (Kitlova М., Gibela P., Drimal J., Bratisi. Lek. Listy, 1985, V.84, N 5, p.542-546); гевотролин (дигидрохлорид 8-фтор-2-(3-3-пиридил)пропил)-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-пиридо[4,3-b]индола) является антипсихотическим и анксиолитическим средством (Abou-Gharbi М., Patel U.R., Webb M.B., Moyer J.A., Ardnee Т.Н., J.Med.Chem., 1987, v.30, p.1818-1823).

В последние годы было найдено, что производные гидрированных пиридо[4,3-b]индолов формулы (1), в частности димебон, способны действовать на два основных подтипа ионотропных глутаматных рецепторов ЦНС млекопитающих - АМРА- и NMDA-рецепторы. Димебон потенцирует трансмембранные токи, вызываемые активацией АМРА-рецепторов, и одновременно блокирует NMDA-рецепторы (В.В.Григорьев, О.А.Драный, С.О.Бачурин. Сравнительное исследование механизма действия препаратов димебона и мемантина на АМРА- и NMDA-подтипы глутаматных рецепторов нейронов головного мозга крыс // Бюлл. Экспер. Биол.мед., 2003, №11, с.535-538).

Неожиданно было найдено, что соединения формулы (1), являясь блокатором NMDA-рецепторов, способны уменьшать блокирующее действие МК-801 на NMDA-рецепторы. Поскольку установлено, что фенциклидин и МК-801 действуют по одному и тому же механизму, конкурируя за один и тот же внутриканальный участок NMDA-рецептора (Keana J.F., Scherz M.W., Quarum M. et al. Synthesis and characterization of a radiolabelled derivative of the phencyclidine. / N-methyl-D-bspartate receptor ligand (+) MK-801 with high specific radioactivity. Life Sci. 1988; 43(12):965-73; MacDonald J.F., Bartlett M.C., Mody I. et al. Actions ofketamine, phencyclidine and MK-801 on NMDA receptor currents in cultured mouse hippocampal neurones. J Physiol. 1991 Jan; 432:483-508), то следует ожидать, что соединения формулы (1), точно таким же образом будет ослаблять блокирующее действие фенциклидина на NMDA-рецептор. Поскольку психотомиметические свойства фенциклидина обусловлены его способностью прочно связываться с определенным участком внутри ионного канала NMDA-рецептора и блокировать ионные токи, проходящие через его ионный канал, то ослабление этого блокирующего действия соединениями формулы (1) должно приводить к уменьшению психотомиметических свойств фенциклидина.

Таким образом, соединения формулы (1), благодаря обнаружению у них новых неожиданных свойств, которые не вытекают из химической структуры этих соединений и ранее известных свойств (в частности, блокаторов NMDA рецептора), могут быть использованы в качестве лекарственного средства для лечения шизофрении.

Согласно изобретению фармакологическое средство для лечения шизофрении, содержащее активное начало и фармацевтически приемлемый носитель, в качестве активного начала содержит эффективное количество гидрированного пиридо(4,3-b)индола формулы (1).

Понятие «фармакологическое средство» подразумевает использование любой лекарственной формы, содержащей соединение формулы (1), которые могли бы найти профилактическое или лечебное применение в медицине в качестве средства для лечения шизофрении.

Понятие «эффективное количество», используемое в данной заявке, подразумевает использование того количества соединений формулы (1), которое в соединение с его показателями активности и токсичности, а также на основании знаний специалиста должно быть эффективным в данной лекарственной форме.

Для получения фармакологического средства одно или несколько соединений формулы (1), смешиваются как активный ингредиент с фармацевтически приемлемым носителем известным в медицине согласно принятым в фармацевтике способам. В зависимости от лекарственной формы препарата носитель может иметь различные формы.

Согласно изобретению способ лечения шизофрении заключается во введении пациенту фармакологического средства, содержащего эффективное количество гидрированного пиридо(4,3-b)индолов формулы (1), в дозе 0,1-10 мг/кг массы тела по крайней мере один раз в день в течение периода, необходимого для достижения терапевтического эффекта.

Соединения формулы (1) могут вводиться в виде общепринятых оральных композиций, таких как таблетки, таблетки с покрытием, желатиновые капсулы с твердым и мягким покрытием, эмульсии или суспензии. Примерами носителей, которые могут использоваться для изготовления таких композиций, являются лактоза, кукурузный крахмал или его производные, тальк, стеариновая кислота или ее соли и т.п. Приемлемыми носителями для желатиновых капсул с мягким покрытием являются, например, растительные масла, воски, жиры, полутвердые и жидкие полиолы и т.п. Кроме того, фармацевтические препараты могут содержать консерванты, солюбилизаторы, стабилизаторы, смачивающие агенты, эмульгаторы, подсластители, красители, корригенты, соли для изменения осмотического давления, буферы, покрывающие агенты или антиоксиданты. Они могут также содержать и другие вещества, обладающие ценными терапевтическими свойствами. Препаративные формы могут представлять собой обычную стандартную дозу и могут быть приготовлены известными в фармации способами.

Техническим результатом, который может быть получен при осуществлении изобретения, являются значительное ослабление блокирующего действия на NMDA-рецепторы эндогенных лигандов, вызванного при заболевании шизофренией.

Возможность осуществления изобретения с реализацией заявляемого назначения и получением технического результата подтверждается, но не исчерпывается следующими сведениями.

Пример 1. Метод оценки блокирующих NMDA-вызванные токи свойств соединений.

В качестве представителя соединений общей формулы (1) был взят лекарственный препарат «Димебон», дигидрохлорид 2,8-диметил-5-[2-(6-метил-пиридил-3-)этил]-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-пиридо[4,3-b]индола:

Эксперименты были проведены методом patch-clamp на культивируемых нейронах гиппокампа крыс. Нейроны для культивирования получали из гиппокампов новорожденных крыс (1-2 суток) способом трипсинизации с последующим пипетированием. Суспендированные в культуральной среде клетки вносили по 3 мл в лунки 6-луночного планшета (Nunc) или в чашки Петри, куда предварительно вносили стекла, покрытые поли-b-лизином. Концентрация клеток, как правило, была 2.5×10^-6-5×10 ^-6 6 кл/мл. Культуральная среда состояла из минимальной среды Игла и среды DME/F12 (1:1), дополненной 10% телячей сыворотки, глютамином (2 мМ), гентамицином (50 /мл), глюкозой (15 мМ) и 20 мМ KCl, рН среды доводили до 7-7.4 NaHCO₃. Планшеты с культурами помещали в CO₂-инкубатор при 37°С и 100% влажности. На 2-3 день культивирования добавляли цитозинарабинозид 10-20 м/мл. Через 6-7 дней культивирования в среду добавляли 1 мг/мл глюкозы или проводили смену среды в зависимости от последующего эксперимента. Культивируемые нейроны гиппокампа помещались в рабочую камеру объемом 0.4 мл. Рабочий раствор имел состав (в мМ): NaCl 150.0, KCl 5.0, CaCl₂ 2.6, MgSO ₄×7H₂O 2.0, HEPES 10.0, глюкоза 15.0, рН 7.36.

Регистрация трансмембранных токов, вызываемых аппликацией NMDA, осуществлялась электрофизиологическим методом patch-clamp в конфигурации whole cell. Аппликация веществ осуществлялась методом быстрой суперфузии. Регистрация токов была осуществлена при помощи боросиликатных микроэлектродов (сопротивление 3.0-4.5 мОм) заполненных следующим составом (в мМ): KCl 100.0, EGTA 11.0, CaCl₂ 1.0, MgCl₂ 1.0, HEPES 10.0, АТР 5.0, рН 7.2. Для регистрации использовали прибор ЕРС-9 (НЕКА, Germany). Запись токов осуществлялась на жесткий диск ПК Pentium-IY при помощи программы Pulse, также закупленной в фирме НЕКА. Обработка результатов осуществлялась при помощи программы Pulsefit (НЕКА).

Аппликация NMDA вызывала в культивируемых нейронах гиппокампа входящие токи. Димебон оказывал блокирующее действие на токи, вызываемые аппликацией NMDA. IC ₅₀ Димебона варьировала от 6.0 до 10 мкМ, в среднем составляла 7.7±1.9 мкМ. МК-801 также вызывал блокаду NMDA-вызванных токов. Эта блокада имела явную "use dependence", другими словами, величина блокирующего эффекта, оказываемого МК-801, зависела от предшествующего действия агониста, т.е. NMDA: блокирующий эффект нарастал и ряду последовательных аппликаций агониста до некоторого финального значения, зависящего от концентрации МК-801. 1 мкМ МК-801 вызывал блокаду NMDA-вызванных токов на 70±15%. Предварительная перфузия нейронов раствором, содержащим Димебон в концентрации 10 мкМ, вызывала уменьшение блокирующего эффекта МК-801 до 40±18%. Для сравнения было исследовано действие конкурентного антагониста NMDA-рецептора D-AP5 (D-2-амино-5-фосфонавалериановая кислота - избирательный антагонист NMDA-рецептора). Сама D-AP5 в дозе 5 мкМ блокировала NMDA-вызванные токи на 60-80%. Предварительная аппликация D-AP5 не уменьшала блокирующий эффект МК-801. В таблице 1 представлены данные, свидетельствующие о действие веществ на NMDA-вызванные токи в культивируемых нейронах гиппокампа крыс.

Пример 2. Промежуточные результаты двойного слепого плацебо-контролируемого рандомизированного исследования эффективности и безопасности препарата Димебон у больных шизофренией параноидного типа, получающих стабильную дозу атипичных антипсихотических препаратов.

В исследование включались пациенты-мужчины - всего 33 человека - проходящие лечение в ЦМОКПБ, страдающие параноидной формой шизофрении (критерии DSM-4), предоставившие информированное согласие на участие в программе. Выраженность тяжести клинического состояния оценивалась по шкалам PANSS (шкала оценки позитивных и негативных синдромов при шизофрении) и NSA (шкала оценки негативных симптомов). Димебон давали в дозе 20 мг на человека в день.

Характеристика материала.

Средний возраст пациентов - 35,4±10,3 лет.

Средний возраст начала заболевания - 24,4±7,6 лет.

Клиническая тяжесть согласно балам PANSS на момент начала приема Димебона

PANSS суммарный (общий балл) - 71,8±17,5

PANSS кластер позитивных симптомов - 15,1±5,1

PANSS кластер негативных симптомов 20,7±5,9

PANSS кластер общепсихопатологических симптомов - 36±9,1

После стабилизации клинического состояния пациентов на монотерапии атипичным антипсихотиком (рисперидон) пациенты были случайным образом распределены в две терапевтические группы. В первой пациенты получали рисперидон+плацебо, во второй - рисперидон+Димебон.

Гомогенизация групп.

На начало исследования между группами не было статистически достоверных различий (Statistika 6.0, Mann-Whitney U test) по следующим характеристикам:

1. возраст

2. предшествующая терапия

3. семейный анамнез

4. курение

5. возраст манифестации

6. длительность заболевания

7. показатели PANSS

В таблице 2 приведены данные, отражающие наличие или отсутствие положительной разницы между группами к концу первого месяца лечения (Statistika 6.0, Mann-Whitney U test). Анализ приведенных данных применения димебона в пилотных клинических испытаниях показал статистически достоверное улучшение ряда интеллектуально-психических показателей у больных шизофренией. Ранее такого прямого доказательства действия веществ подобного рода на больных получено не было.

Статистическое исследование действия глутаматергических веществ при шизофрении, приводимое University of Helsinki (Tuominen HJ, Tiihonen J, Wahlbeck K., «Glutamatergic drugs for schizophrenia». Cochrane Database Syst Rev. 2006 Apr 19; (2):CD003730. University of Helsinki, Helsinki, Finland, hxtuomin@mappi.helsinki.fi) показало, что каких-либо положительных эффектов их применения не обнаружено.

Полученные результаты свидетельствуют, что Димебон вопреки тому, что сам является антагонистом NMDA-рецепторов, способен уменьшать блокирующее действие МК-801 на NMDA-вызванные токи в культивируемых нейронах гиппокампа крыс. Хотя механизм блокирующего действия Димебона на NMDA-рецепторы до сих пор не установлен, он не обладает нейротоксическим действием, характерным для неконкурентых блокаторов ионного канала NMDA-рецепторов - фенциклидина, МК-801, кетамина. Исходя из полученных новых результатов, можно предположить, что уменьшение каналоблокирующего действия МК-801 (и аналогичным образом - фенциклидина) NMDA-рецепторов может приводить к уменьшению их психотомиметического действия и, таким образом, к устранению симптомов, характерных для шизофрении.

Полученные результаты свидетельствуют, что Димебон, наряду с его описанными ранее свойствами, может быть использован для эффективного лечения шизофрении.

Таблица 1
Вещества	Блокада (%) NMDA-вызванных токов
Димебон	На 50-70% при 10 мкМ
МК-801	На70±15% при 1 мкМ
Димебон+МК-801	На 40±18%
D-AP5	На 60-80% при 5 мкМ
D-AP5+МК-801	На 75±17%

Таблица 2
	рисперидон +	рисперидон +
	плацебо	Димебон
PANSS пункт 6 - «подозрительность/преследование»	»	Р=0,03
NSA пункт 1 - «длительные паузы перед ответами»	»	Р=0,016
NSA пункт 2 - «ограниченный объем речевой информации»	»	Р=0,016
NSA пункт 3 - «обедненное содержание речи»	»	Р=0,015
NSA пункт 12 - «ослабленное чувство цели»	»	Р=0,027
NSA пункт 13 - «ослабленный интерес»	»	Р=0,0017
NSA пункт 14 - «сниженная целенаправленность»	»	Р=0,04
NSA пункт 15 - «ослабленный интерес к хобби и увлечениям»	»	Р=0,098
NSA пункт 16 - «сокращенный объем повседневной активности»	»	Р=0,065
NSA пункт 18 - «замедленность движения»	»	Р=0,0097
NSA пункт 19 - «глобальная оценка негативных симптомов»	»	Р=0,03