способ прогноза эффективности интерферонотерапии при раке почки

Формула изобретения

Способ прогноза эффективности интерферонотерапии при раке почки путем иммунологического исследования периферической крови больных, заключающийся в том, что до начала интерферонотерапии в лимфоцитах крови определяют показатель активности фермента глюкозо-6-фосфатдегидрогеназа, и при значении этого показателя выше 3,11 мкЕ/10000 лимфоцитов прогнозируют положительный эффект интерферонотерапии.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к медицине, а именно к онкоурологии, и может найти применение при лечении больных раком почки.

Одной из актуальных проблем современной онкологии является высокий уровень заболеваемости почечно-клеточным раком (ПКР), на долю которого приходится около 97% всех опухолей почек [1, 2].

В настоящее время наиболее целесообразным подходом в лечении ПКР считается комбинация хирургического метода и адъювантной иммунотерапии препаратами интерферона (ИФН), среди которых широкое распространение получил рекомбинантный ИФН альфа-2а [3, 4, 5]. Данный препарат обладает не только противовирусным действием, но и выраженным антипролиферативным и иммуномодулирующим эффектом: усиливает экспрессию опухоль-ассоциированных антигенов; ингибирует синтез РНК и белков опухолевой клетки; стимулирует активность естественных киллеров, процессы фагоцитоза и цитотоксичность нейтрофильных гранулоцитов.

Эффективность интерферонотерапии (ИФН-терапии) при раке почки, по сведениям разных авторов, составляет от 10% до 40%, что определяется отсутствием единых подходов при оценке показаний к проведению данного метода терапии [6].

Известно, что важную роль в эффективности лечения опухолевых заболеваний, в том числе и ПКР, играет состояние противоопухолевой реактивности организма, уровень которой связывают, главным образом, с функциональной активностью клеток иммунной системы [7, 8, 9, 10]. Учитывая, что все модуляторы функциональной активности лимфоцитов, являющихся основным структурно-функциональным элементом иммунной системы, прежде всего изменяют функциональный метаболизм клетки, переключая субстратные потоки с одного метаболического пути на другой и влияя на энергетические и синтетические процессы, нарушения иммунной системы не могут не иметь метаболической основы. В связи с высокой значимостью метаболических процессов в проявлении функциональной активности клеток иммунной системы представляется целесообразным для прогноза эффективности ИФН-терапии при раке почки использовать метаболические показатели.

Известны способы прогнозирования эффективности интерферонотерапии при хроническом гепатите В [11] и при урогенитальных инфекциях [12].

Известен также способ определения тактики лечения диссеминированного почечно-клеточного рака, согласно которому иммунохимиотерапию проводят в соответствии с иммунограммой пациента [13].

Источников по прогнозу эффективности интерферонотерапии у больных ПКР в доступной литературе нами не обнаружено.

Задачей изобретения является создание информативного способа прогноза эффективности интерферонотерапии при раке почки.

Поставленную задачу решают за счет того, что до проведения ИФН-терапии при раке почки в лимфоцитах периферической крови больных определяют показатель активности глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы (Г6ФДГ) и при значении этого показателя выше 3,11 мкЕ/10000 лимфоцитов прогнозируют положительный эффект интерферонотерапии.

Способ осуществляется следующим образом. У больного ПКР перед проведением ИФН-терапии проводят забор венозной крови. Лимфоциты выделяют из 2 мл венозной крови путем центрифугирования на градиенте плотности фиколл-верографин ( =1,077 г/см³) по методу A. Boyum [14]. После подсчета концентрации клеточной суспензии, например, в камере Горяева, выделенные лимфоциты в количестве 1 млн клеток используют для определения уровня активности Г6ФДГ с помощью биолюминесцентного анализа с бактериальной люциферазой по методу А.А.Савченко, Л.Н.Сунцовой [15].

Значение показателя активности Г6ФДГ выше 3,11 мкБ/10000 лимфоцитов свидетельствует об эффективности интерферонотерапии. Значение 3,11 мкЕ/10000 клеток получено опытным путем на основании сопоставления уровня активности Г6ФДГ в лимфоцитах крови у больных ПКР с оценкой эффективности интерферонотерапии.

Предлагаемый способ был апробирован в урологическом отделении Красноярского краевого онкологического диспансера (ККОД).

№ п/п	Показатель активности фермента Г6ФДГ (мкЕ/10000 кл.)	Прогноз эффективности до проведения ИФН-терапии	Установленная эффективность ИФН-терапии	Совпадение прогноза
1	6,014	Должна быть	Да	+
2	1,216	Не будет	Нет	+
3	0,000	Не будет	Нет	+
4	4,637	Должна быть	Да	+
5	3,196	Должна быть	Да	+
6	7,144	Должна быть	Да	+
7	0,368	Не будет	Нет	+
8	0,593	Не будет	Нет	+
9	6,326	Должна быть	Да	+
10	5,356	Должна быть	Да	+
11	0,000	Не будет	Нет	+
12	6,742	Должна быть	Да	+
13	1,165	Не будет	Нет	+
14	11,241	Должна быть	Да	+
15	0,005	Не будет	Нет	+
16	0,639	Не будет	Да	-
17	15,979	Должна быть	Да	+
18	14,135	Должна быть	Да	+
19	0,007	Не будет	Нет	+
20	1,464	Не будет	Нет	+
21	1,893	Не будет	Да	-
22	3,824	Должна быть	Да	+
23	4,191	Должна быть	Да	+
24	3,988	Должна быть	Да	+
25	8,302	Должна быть	Да	+
26	10,058	Должна быть	Да	+
27	4,089	Должна быть	Да	+
28	4,828	Должна быть	Да	+
29	5,244	Должна быть	Да	+
Совпадение прогноза:93,1%

В таблице представлены результаты обследований 29 больных ПКР, проведенных в урологическом отделении ККОД до начала ИФН-терапии через 4 недели после радикальной нефрэктомии. Все наблюдаемые больные получали реаферон (ИФН- 2а) парентерально 3 раза в неделю. ИФН-терапия включала: количество инъекций на цикл - 12; интервал между циклами - 3 недели; количество циклов - до 4-х. Суточная доза вводимого реаферона определялась с учетом индивидуальной клеточной чувствительности in vitro к препарату [16]. Эффективность ИФН-терапии оценивали по показателям безрецидивной и безметастатической выживаемости. Клиническая оценка токсичности интерферонотерапии проводилась с использованием критериев Национального института рака Канады (CTC-NCIC). Статус активности пациентов определялся в соответствии со шкалой ВОЗ-ECOG.

Представленные в таблице данные показывают, что у 27 из 29 больных этой группы отмечено совпадение прогноза эффективности ИФН-терапии по предложенному способу с реальным клиническим эффектом лечения ПКР (93,1% случаев).

Клинический пример. Больной М., 39 лет (№14 в таблице). История болезни №1196/105. Находился на стационарном лечении в урологическом отделении ККОД с 19.02.04 по 30.03.04 с диагнозом: рак левой почки, T ₃N₀M₀. Операция 3.03.04, проведена лапаротомия, радикальная нефрэктомия слева, остановка кровотечения, спленэктомия, дренирование забрюшинного пространства и брюшной полости. Гистологическое исследование №9827-46: в препарате картина почечно-клеточного рака, светлоклеточный солидно-тубулярный тип с инвазией в капсулу. Течение послеоперационного периода гладкое.

Через 4 недели после хирургического лечения больному проведена ИФН-терапия (четыре 30-дневных цикла с интервалом между циклами 3 недели) реафероном (интерферон- 2а), вводимым внутримышечно 3 раза в неделю. Суммарная доза препарата составила 228 млн ME. Обследование, проведенное по предложенному способу перед началом ИФН-терапии, показало, что активность Г6ФДГ равна 11,24, т.е. выше 3,11 мкЕ/10000 лимфоцитов. Согласно изобретению, следует ожидать положительного эффекта интерферонотерапии. Действительно, в процессе лечения лекарственная лихорадка отсутствовала, лейкопения была незначительной (3,2-3,4×10 ⁹/л). С каждым последующим циклом интерферонотерапии повышалась индивидуальная клеточная чувствительность к реаферону, что дало основание к снижению дозы вводимого препарата (I цикл - суточная доза 8 млн ME; II цикл - суточная доза 5 млн ME; III цикл - суточная доза 3 млн ME; IV цикл - суточная доза 3 млн ME). Рецидива ПКР и метастазирования рака почки не отмечалось. Динамические наблюдения, проводимые в течение 3-х лет, не выявили случаев рецидива ПКР, метастазирования рака почки не обнаружено.

Технический результат от реализации предложенного способа:

- возможность прогнозирования результатов ИФН-терапии при раке почки до начала лечения;

- инвазивное вмешательство ограничено однократным забором из вены малого объема крови (2 мл);

- снижение затрат на лечение за счет освобождения пациентов от неэффективного воздействия лекарственных средств, а также назначения адекватных, причем не всегда высоких, терапевтических доз;

- высокий уровень совпадения прогноза - 93,1%.

Таким образом, предложенный способ позволяет достоверно прогнозировать эффективность ИФН-терапии при ПКР до начала лечения. Способ может быть рекомендован для применения в клинической практике.

Источники информации

1. Ершов Ф.И. Интерфероны и их индукторы (итоги и перспективы) // Клиническая фармакология и терапия. - 2001. - №4. - С.71-77.

2. Мавричев А.С. Почечноклеточный рак. Минск: Белорусский центр науч. мед. информации, 1996. - 334 с.

3. Долгих В.Т. Опухолевый рост. - М.: Медицина, 2001. - 81 с.

4. Зимушко Е.И., Белозеров Е.С., Митин Ю.А. Клиническая иммунология. - СПб. - 2001. - 576 с.

5. Кадагидзе, З.Г. Иммуномодуляторы в онкологии // Медицинский научный Internet журнал "MedWeb". - 2002. - №1. - С.70-74.

6. Бережная Н.М. Иммунитет и злокачественные новообразования // Вестник РАМН. - 1998. - №1. - С.20-31.

7. Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия. - М.: Медицина, 1998. - 704 с.

8. Демидов Л.В., Харкевич Г.Ю. Современные возможности профилактической иммунотерапии рекомбинантным интерфероном -2_b у больных меланомой кожи с повышенным риском метастазирования // Современная онкология. - 2000. - №4. - С.116-121.

9. Ершов Ф.И. Интерфероны и их индукторы (итоги и перспективы // Клиническая фармакология и терапия. - 2001. - №4. - С.71-77.

10. Заридзе Д.Г., Мень Т.Х. Приоритетные направления противораковой борьбы в России // Российский онкологический журнал. - 2001. - №5. - С.5-14.

11. Ягода А.В и др. Способ прогнозирования эффективности интерферонотерапии при хроническом гепатите В. RU 2287826, дата публ. 20.11.2006.

12. Юцковская Я.А. и др. Способ подбора иммунокорректора и прогнозирования эффективности иммунотерапии при урогенитальных инфекциях. RU 2216739, дата публ. 20.11.2003.

13. Молчанов О.Е. и др. Способ определения тактики лечения диссеминированного почечно-клеточного рака. RU 2216325, дата публ. 20.11.2003.

14. Boyum A. Isolation of lymphocytes from blood and bone marrow // Scand. J. Clin. Lab. Invest. - 1968. - Vol.21 (Suppl. 97). - P.77-80.

15. Савченко А.А., Сунцова Л.Н. Высокочувствительное определение активности дегидрогеназ в лимфоцитах периферической крови биолюминесцентным методом // Лаб. дело. - 1989. - №11. - C.23-25.

16. Куртасова Л.М., Савченко А.А. и др. Способ оценки чувствительности к интерферону у больных раком почки. RU 2293988 С2, дата публ. 20.02.2007.