способ прогнозирования частой заболеваемости у детей раннего возраста с перинатальными поражениями цнс
Классы МПК: | G01N33/53 иммунологический анализ, анализ биоспецифического связывания, материалы для этого |
Автор(ы): | Сотникова Наталья Юрьевна (RU), Филькина Ольга Михайловна (RU), Матвеева Екатерина Александровна (RU), Вторушина Валентина Валентиновна (RU), Воробьева Елена Анатольевна (RU), Пыхтина Людмила Артемьевна (RU), Долотова Наталья Васильевна (RU), Кочерова Ольга Юрьевна (RU) |
Патентообладатель(и): | Федеральное государственное учреждение "Ивановский научно-исследовательский институт материнства и детства им. В.Н. Городкова Федерального агентства по высокотехнологичной медицинской помощи" (RU) |
Приоритеты: |
подача заявки:
2007-05-14 публикация патента:
10.11.2008 |
Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии, и может использоваться для прогнозирования частой заболеваемости ОРВИ у детей раннего возраста с перинатальными поражениями центральной нервной системы в анамнезе. Способ заключается в том, что после 1-го года у ребенка в периферической венозной крови определяют относительное содержание CD16+ лимфоцитов и при его значении, равном 10,1% или более, прогнозируют частую заболеваемость ОРВИ у детей до 3-х лет с точностью 80,0%. Способ позволит своевременно назначить необходимое наблюдение за детьми раннего возраста с перинатальными поражениями ЦНС, ввести профилактические и лечебные мероприятия, снизить заболеваемость и предотвратить развитие хронической патологии у детей 1-3 лет. 1 табл.
Формула изобретения
Способ прогнозирования частой заболеваемости ОРВИ у детей раннего возраста с перинатальными поражениями центральной нервной системы в анамнезе, включающий иммунологическое исследование периферической венозной крови ребенка старше 1 года, отличающийся тем, что в крови определяют относительное содержание CD16+ лимфоцитов и при его значении, равном или более 10,1%, прогнозируют частую заболеваемость до 3-х лет.
Описание изобретения к патенту
Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии, и может быть использовано для прогнозирования частой заболеваемости ОРВИ у детей раннего возраста с перинатальными поражениями ЦНС.
Актуальность разработки способа определяется высокой распространенностью у детей перинатальных поражений ЦНС, которые по данным разных авторов составляют от 27 до 85% [1, 2, 3]. Общая заболеваемость у детей с перинатальными поражениями ЦНС в 2 раза выше, чем у детей без этой патологии, причем на долю ОРВИ приходится 60-90% [4, 5]. Дети с перинатальной патологией ЦНС формируют группу часто болеющих детей (Критерии включения детей в группу часто болеющих (А.А.Баранов, В.Ю.Альбицкий, 1986). В возрасте одного года к группе ДЧБ относятся дети, перенесшие 4 и более эпизодов ОРВИ, в возрасте от 1 до 3 лет - 6 и более эпизодов ОРВИ. [Балеева Л.С., Балясинская Г.Л., Блистинова З.А и др. Современные подходы к лечению и реабилитации часто болеющих детей // Медицинская технология. - М., 2006. - 46 с.]) и имеют потенциальную возможность перейти в 3 группу здоровья (больные с хроническими заболеваниями) [6, 7]. Разработка способа прогнозирования частой заболеваемости позволит своевременно проводить профилактические и лечебные мероприятия, предотвратить формирование хронической патологии у детей раннего возраста с перинатальными поражениями ЦНС.
Известен способ прогнозирования частой заболеваемости у детей до 1-го года путем определения в пуповинной крови относительного содержания лимфоцитов и нейтрофилов с рецепторами к эритроцитам барана (Е-РОЛ и Е-РОН) и С3 компоненту комплемента (ЕАС-РОЛ и ЕАС-РОН) методом розеткообразования [А.с. №1777081 Копилова Е.Б., Сотникова Н.Ю., Шиляев P.P. Способ прогнозирования частой заболеваемости у детей 1-го года жизни (Россия) // Открытия. Изобретения. - 1992. - №43. - С.121]. Для прогнозирования авторами предлагаются интервалы для этих показателей и при попадании индивидуальных значений хотя бы в один интервал прогнозируют частую заболеваемость на первом году жизни.
Недостатки способа:
1. При выполнении методики розеткообразования используются нестандартизованные реактивы: эритроциты барана, антисыворотка кролика и эритроциты быка.
2. Известны возрастные изменения иммунного статуса детей, которые не позволяют использовать критерии, предложенные в данном способе, для прогнозирования частой заболеваемости у детей раннего возраста [8, 9].
3. Оценка результатов метода розеткообразования осуществляется визуально при световом микроскопировании, что не исключает субъективный компонент.
Наиболее близким по техническому решению к заявляемому способу является способ прогнозирования частой заболеваемости у детей раннего возраста с минимальной мозговой дисфункцией (Минимальная мозговая дисфункция является одним из последствий перинатальных поражений центральной нервной системы. Барашнев Ю.И., Лицев А.Э. К генезу минимальных мозговых дисфункций у детей. // Российский вестник перинатологии и педиатрии. - 1995. - №6. - C.11-17), заключающийся в том, что у детей старше 1 года определяют в периферической венозной крови содержание CD72+ лимфоцитов и при повышении их более 20,31% прогнозируют частые острые респираторные заболевания до 3-х летнего возраста [Патент №2142639 Филькина О.М., Кочерова О.Ю., Шанина Т.Г., Чиненова Н.С., Сотникова Н.Ю., Кудряшова А.В. Способ прогнозирования частой заболеваемости у детей раннего возраста с минимальной мозговой дисфункцией (Россия) // Изобретения. - 1999. - №34; 4.2. - С.319]. Точность способа составляет 78,5%. Указанный способ выбран в качестве ближайшего аналога (прототипа).
Недостатки способа:
1. Узкое применение способа только для детей с минимальной мозговой дисфункцией, не применяется у детей с другими последствиями перинатальных поражений ЦНС.
2. Не указаны чувствительность и специфичность способа.
3. Большие временные затраты (1 час 40 мин).
4. Забор большого объема крови - 1 мл.
Указанные недостатки предлагается устранить в заявляемом способе.
Техническим решением заявляемого способа является повышение точности прогнозирования частой заболеваемости ОРВИ у детей раннего возраста с перинатальными поражениями ЦНС в анамнезе путем определения в периферической венозной крови ребенка старше 1 года относительного содержания CD16+лимфоцитов, и при значении показателя, равном 10,1% или более, прогнозируют частую заболеваемость ОРВИ у детей до 3-х лет в 80,0 % случаев.
Новизна способа:
Впервые предлагается прогнозировать частую заболеваемость ОРВИ у детей раннего возраста (от 1 до 3 лет) с перинатальными поражениями ЦНС в анамнезе по определению относительного содержания CD16+ лимфоцитов в периферической венозной крови детей старше 1 года.
Ранее было выявлено повышение содержания CD16+ лимфоцитов в периферической крови женщин с бесплодием и эндометриозом [10], привычным невынашиванием беременности [11]. Увеличение лимфоцитов с маркерами CD16+ отмечалось у новорожденных с локальными нетяжелыми формами инфекционно-воспалительной патологии, с внутриутробной пневмонией [12], от матерей с эндемическим зобом [13] и угрозой прерывания беременности [14].
Стабильно повышенный уровень CD16+ лимфоцитов при отсутствии инфекционно-воспалительной патологии, возможно, приводит к истощению их функциональной активности, ведущей к затруднению реакций цитотоксичности и, следовательно, к более частой заболеваемости детей.
Отличительные признаки способа:
Установлен прогностический параметр относительного содержания CD16+ лимфоцитов в периферической венозной крови детей, и при значении этого параметра, равного 10,1% или более, прогнозируют частую заболеваемость.
Способ осуществляется следующим образом:
1. У детей старше 1 года с перинатальными поражениями ЦНС в анамнезе производят забор 0,5 мл периферической венозной крови.
2. Выделение лимфоцитов из периферической венозной крови осуществляется стандартным методом - центрифугированием в градиенте плотности фиколл-верографин при 1500 об/мин в течение 30 минут [15].
3. В пробирку, содержащую 100 мкл лимфоцитов в концентрации 1×106 кл/мл, добавляют 20 мкл моноклональных анти-СВ16+ антител, меченных FITC или РЕ. Клетки инкубируют с моноклональными антителами в течение 30 минут при комнатной температуре в темноте, после чего отмывают 1 раз 1 мл физиологического раствора центрифугированием при 1500 об/мин в течение 2 минут. Клетки в пробирках ресуспендируют в 500 мкл физиологического раствора [16].
4. Учет реакции проводят на проточном цитометре, определяя в лимфоцитарном гейте процентное (относительное) содержание CD16+ клеток.
Сущность заявляемого способа поясняется следующими примерами.
Пример 1.
Ребенок А. 1 года 2 месяцев родился от второй беременности, вторых своевременных родов в срок 39 недель. Беременность у матери протекала на фоне анемии, ожирения, хронического пиелонефрита. Вес при рождении - 3350 г, рост - 50 см, оценка по шкале Апгар 8-9 баллов. Диагноз при рождении: Гипоксически-ишемическое поражение ЦНС, гипертензивный синдром, синдром гипервозбудимости. На первом году жизни перенес ОРВИ 1 раз. В 1 год поставлен диагноз: Последствия перинатального поражения ЦНС, гипертензивный синдром, фаза компенсации, задержка речевого развития. Забор крови производился в 1 год 2 мес. при отсутствии признаков инфекционно-воспалительной патологии и не менее чем через 1 мес. после вакцинации. При иммунологическом обследовании в анализе крови содержание CD 16+ лимфоцитов составило 10,1%. Прогнозировалась частая заболеваемость. При последующем наблюдении на втором году жизни перенес ОРВИ 7 раз, в том числе ОРВИ, осложненную острым простым бронхитом, и ОРВИ, осложненную острым средним двухсторонним катаральным отитом. На третьем году жизни переболел ОРВИ 6 раз, в том числе, осложненную острым обструктивным бронхитом, и ОРВИ, осложненную острым левосторонним катаральным средним отитом, перенес ветряную оспу. Таким образом, прогноз частой заболеваемости у детей раннего возраста с перинатальными поражениями ЦНС по предлагаемому способу подтвердился.
Пример 2.
Ребенок Б. 1 года 5 месяцев родился от первой беременности, первых своевременных родов в 40 недель. Беременность протекала на фоне угрозы прерывания в первом триместре, водянки беременных. Течение родов осложнилось преждевременным излитием околоплодных вод. Вес при рождении - 3500 г, рост - 51 см, оценка по шкале Апгар 7-8 баллов. Диагноз при рождении: Перинатальное гипоксически-ишемическое поражение ЦНС, синдром гипервозбудимости, синдром двигательных нарушений. На первом году жизни перенес 2 эпизода ОРВИ. В 1 год поставлен диагноз: Последствия перинатального поражения ЦНС, синдром внутричерепной гипертензии, фаза компенсации. Забор крови производился 1 год 3 мес. при отсутствии признаков инфекционно-воспалительной патологии, не менее чем через 1 мес. после вакцинации. При иммунологическом исследовании в анализе крови содержание CD16+ лимфоцитов составило 8,2%. Частая заболеваемость не прогнозировалась. На втором году жизни перенес ОРВИ 2 раза и ОРВИ, осложненную простым острым бронхитом. На третьем году жизни переболел ОРВИ 3 раза.
Таким образом, прогноз по предлагаемому способу подтвердился.
Пример 3.
Ребенок В. 1 года 11 месяцев от 3 беременности, первых своевременных родов. Беременность протекала на фоне отягощенного акушерско-генекологического анамнеза (2 медицинских аборта), анемии в первой половине беременности, нефропатии. Роды осложнились первичной слабостью родовой деятельности, проводилась медикаментозная стимуляция родов. Диагноз при рождении: Гипоксически-ишемическое поражение ЦНС, гипертензивно-гидроцефальный синдром, синдром повышенной нервно-рефлекторной возбудимости. На первом году жизни перенес однократно ОРВИ, осложненную острым левосторонним катаральным отитом. В 1 год поставлен диагноз: Последствия перинатального поражения ЦНС, гипертензивный синдром, фаза компенсации, задержка нервно-психического развития. Забор крови производился в 1 год 2 нед. при отсутствии признаков инфекционно-воспалительной патологии, не менее чем через 1 мес. после вакцинации. При иммунологическом исследовании в крови обнаружено содержание CD16+ лимфоцитов, равное 13%. Прогнозировалась частая заболеваемость. На втором году перенес ОРВИ 7 раз, в том числе 2 раза ОРВИ, осложненные острым бронхитом, и ОРВИ, осложненную стенозирующим ларинготрахеитом. На третьем году переболел ОРВИ 7 раз, в том числе 2 раза ОРВИ, осложненные острым обструктивным бронхитом.
Таким образом, прогноз частой заболеваемости по предлагаемому способу подтвердился.
Преимущества способа:
1. Заявляемый способ не требует больших временных затрат и осуществляется за 1 час 10 мин.
2. Предлагаемый способ имеет высокую точность - 80,0%.
3. Исследуется малый объем крови (0,5 мл).
4. Позволяет своевременно назначить необходимое наблюдение за детьми раннего возраста с перинатальными поражениями ЦНС в анамнезе, ввести профилактические и лечебные мероприятия, снизить заболеваемость и предотвратить развитие хронической патологии у детей 1-3 лет.
Указанным способом обследовано 60 детей раннего возраста с перинатальными поражениями ЦНС.
Результаты исследования представлены в таблице 1.
Таблица 1 | |
Количество обследованных | 60 |
Истинно положительные результаты | 32 |
Истинно отрицательные результаты | 16 |
Ложно положительные результаты | 7 |
Ложно отрицательные результаты | 5 |
Точность способа | 80,0% |
Чувствительность способа | 86,5% |
Специфичность способа | 69,6% |
Литература
1. Буркова А.С., Володин Н.Н., Медведев М.И., Рогаткин С.О. Новые подходы к диагностике перинатальных поражений нервной системы у детей первого года жизни и их классификация // Педиатрия. - 2004. - №1. - С.5-9.
2. Попов С.В. Состояние спланхитического кровотока у новорожденных с гипоксически-ишемическим поражением ЦНС // Педиатрия. - 2003. - №1. - С.30-34.
3. Тонкова-Ямпольская Р.В. Состояние здоровья детей с учетом факторов анте- и постнатального риска // Российский педиатрический журнал. - 2002. - №1. - С.61-63.
4. Какорина Е.П. Перинатальная энцефалопатия - ведущая патология детей первого года жизни и ее медико-социальные последствия // Проблемы социальной гигиены и истории медицины. - 1995. - №6. - C.11-14.
5. Кокорева С.П., Семенченко Л.В., Шишлова С.А., Рагозина В.Н., Куприна Н.П. Новые подходы к реабилитации часто болеющих детей // Часто болеющие дети: сборник трудов. - СПб., 2007. - С.11.
6. Володин Н.Н., Дегтярев Д.Н., Шунгарова З.Х., Лукина Л.И., Байдин С.А. Эффективность новой организационной формы преемственного лечения и реабилитации детей с тяжелой перинатальной патологией // Российский вестник перинатологии и педиатрии. - 1999. - №4. - С.23-29.
7. Капранова Е.И., Мельникова Е.В., Соколова Т.А., Белоусова Н.А. Причины и исходы перинатального поражения центральной нервной системы // Педиатрия. - 1994. - №5. - С.102-103.
8. Лебедев К.А., Понякина И.Д. Иммунограмма в клинической практике. - М., 1990. - 223 с.
9. Усов И.Н. Здоровый ребенок // Справочник педиатра. - Минск, 1994. - 445 с.
10. Калинина И.М., Михнина Е.А., Давыдова Н.И., Эллиниди В.Н. Некоторые иммунологические аспекты эндометриоза у женщин детородного возраста с нарушением фертильности // Иммунология и репродукция: Материалы Республиканской научной конференции. - Иваново, 2005. - С.23-33.
11. Соловьева Е.А., Сотникова Н.Ю., Вторушина В.В. Соотношение различных популяций естественных киллеров и уровень их активации у женщин с привычным невынашиванием беременности // Иммунология и репродукция: Материалы Республиканской научной конференции. - Иваново, 2005. - С.179-184.
12. Беликова М.Э., Чаша Т.В., Сотникова Н.Ю., Кудряшова А.В., Панащатенко Н.Н. Особенности иммунологических параметров слюны и иммунологических показателей периферической крови у новорожденных с инфекционно-воспалительной патологией // Иммунология и репродукция: Материалы Республиканской научной конференции. - Иваново, 2005. - С.217-218.
13. Жукова Т.П., Сотникова Н.Ю., Кудряшова А.В., Чаша Т.В., Жмойдик Е.В. К вопросу антенатальной профилактики иммунологических нарушений у новорожденных от матерей с эндемическим зобом // Иммунология и репродукция: Материалы Республиканской научной конференции. - Иваново, 2005. - С.222-223.
14. Левкова Е.А. Антенатальные аспекты формирования иммуно-дефицитных болезней у детей: Автореферат дис. ... д.м.н. - Хабаровск, 2006. - 49 с.
15. Boum A. Isolation of mononuclear cells and granulocytes from human blood and bone marrow // Scand. J. Clin. Invest. - 1968. - V.21. - №97. - P.77.
16. Ohta G., Fujiwara K., Nishi Т., Oka H. Normal values of peripheral lymphocyte populatuon and Т cell subsets at a fixed time of day: A flow cytometric analysis with monoclonal antibodies in 210 healthy adults // Clin. Exp. Immunol. - 1986. - V.64. - P.146-149.
Класс G01N33/53 иммунологический анализ, анализ биоспецифического связывания, материалы для этого