способ лечения гепатита с

Формула изобретения

1. Способ лечения хронического гепатита С путем проведения курса лекарственной терапии рибавирином и интерфероном альфа-2а, отличающийся тем, что перед началом лекарственной терапии проводят 5 процедур криоплазмосорбции с интервалом 2 суток, а в дальнейшем эти процедуры повторяют однократно 1 раз в месяц до окончания курса лекарственной терапии.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что во время первой процедуры криоплазмосорбции проводят плазмаферез с удалением 25-30% объема циркулирующей плазмы, которую замещают равным объемом физиологического раствора, из полученной плазмы выделяют и удаляют криопреципитат и плазму используют для заместительной терапии на второй процедуре плазмообмена, на которой производят забор 40-45% объема циркулирующей плазмы и после удаления криопреципитата используют для заместительной терапии на третьей процедуре плазмообмена, на которой производят забор 55-60% объема циркулирующей плазмы, и после удаления криопреципитата используют для заместительной терапии на четвертой процедуре плазмообмена, на которой также производят забор 55-60% объема циркулирующей плазмы и после удаления криопреципитата используют для заместительной терапии на пятой процедуре плазмообмена, на которой также производят забор 55-60% плазмы, которую после удаления криопреципитата используют для заместительной терапии на шестой процедуре плазмообмена, на которой производят забор 70-75% объема циркулирующей плазмы, которую после удаления криопреципитата используют для заместительной терапии на седьмой процедуре плазмообмена, на которой производят забор 85-90% объема циркулирующей плазмы, которую после удаления криопреципитата используют для заместительной терапии на восьмой процедуре плазмообмена, на которой производят забор 95-100% объема циркулирующей плазмы, в дальнейшем последнюю процедуру повторяют 1 раз в месяц до окончания курса лекарственной терапии.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к медицине, а именно терапии, и может быть использовано при лечении вирусного гепатита С, особенно в случаях заболевания с внепеченочными проявлениями.

Вирусом гепатита С заражено около 10% населения Земли. В двух третях случаев при гепатите С развивается хронический гепатит, который обычно протекает бессимптомно до развития цирроза, рака печени или печеночной недостаточности. Эффективность используемой сегодня комбинированной лекарственной терапии гепатита С не превышает 45-56%.

Известен способ лечения гепатита C с использованием противовирусного препарата рибаверина (см., например, [1] Патент США №4211771, МПК А61К 31/41, 1980 г.; [2]; Патент РФ №2255735, А61К 31/41, 2005).

Недостатком способа является низкая терапевтическая эффективность (около 25%), невозможность профилактики и лечения внепеченочных проявлений заболевания.

Известен также способ лечения вирусного гепатита C с использованием рекомбинантного интерферона-альфа (IFN-alfa). По этому способу введение IFN-alfa подкожно, внутримышечно приводит к стойкому клиническому эффекту в 10-25% случаев [1]. Способ используется для лечения гепатита у взрослых путем введения IFN-alfa в дозе от 3 до 10 млн ME 3 раза в неделю на протяжении 0.5-1 года в зависимости от генотипа вируса [2].

Недостстками способа, как и в предыдущем аналоге, является его низкая терапевтическая эффективность, невозможность профилактики и лечения внепеченочных проявлений заболевания. Так, вирусологический ответ на лечение составляет только 19%, а при использовании пегилированной формы препарата (пегасис) - 39% [3].

Известен также способ лечения вирусного гепатита С, где с целью уменьшения дозы IFN-alfa используют метод экстракорпоральной фармакотерапии, когда цельную гепаринизированную кровь больного в объеме 10% циркулирующей крови в присутствии 0,5-1 млн ME рекомбинантного интерферона-альфа инкубируют при температуре +37°С в течение 90-180 мин, после чего кровь подвергают реинфузии в сосудистое русло того же больного, причем процедуру выполняют 1-2 раза в неделю в течение 1-2 месяцев (см., например, патент №2158604, 2000 г.).

Основной недостаток данного способа состоит в том, что несмотря на полученный авторами 50% положительный ответ непосредственно после окончания лечения, через 1 год после окончания лечения (это время оценки результатов лечения гепатита С в соответствии с международными критериями) процент выздоровлений был гораздо меньшим и составил только 21%.

Забор 10% ОЦК (для взрослого человека приблизительно 500 мл) является предельной дозой даже для здоровых адаптированных к кровопотере людей (доноры) и может вызывать осложнения со стороны сердечно-сосудистой системы. По нашим наблюдениям, использование данного способа в 4% случаев приводило к снижению артериального давления, несмотря на проводимую заместительную терапию кристаллоидными растворами.

IFN-alfa не разрешен Фармакологическим комитетом РФ для внутривенного введения. Поскольку он является веществом белковой природы, такой путь введения может вызывать различные патологические реакции, вплоть до развития шока.

Введение интерферона-альфа указанным способом в течение 1 месяца лечения в 43% случаев приводило к различной выраженности лейкопении и тромбоцитопении. При попытке увеличения дозы препарата до принятых в международных протоколах для разового введения (3 млн ME, n=1) эти изменения существенно нарастают.

Технология ориентирована только на те фармакологические эффекты, которые присущи действию IFN-alfa. В то же время в механизмах развития и прогнозе лечения гепатита С и его внепеченочных проявлений имеется целый ряд других факторов. Одним из этих факторов является вирусная нагрузка. Известно, что увеличение титра HCV RNA возрастает по мере прогрессирования болезни. Более высокий уровень виремии коррелирует с более серьезным повреждением органов, т.е. одним из факторов степени тяжести гепатита С является вирусная нагрузка [4, 5, 6, 7, 8]. Более высокий уровень HCV RNA позволяет прогнозировать худший результат лечения [9, 10, 11] или является предиктором его недостаточной эффективности терапии [12].

Наиболее близким к заявляемому техническому решению является способ лечения гепатита C с использованием комбинации рекомбинантного IFN-alfa-2b и рибавирина, которая дает эффект синергизма. Этот способ признан наиболее эффективным вариантом лечения хронического гепатита С [13].

Недостатками способа являются:

а) Недостаточная терапевтическая эффективность. Так, вирусологический ответ на лечение составляет только 44%, а при использовании пегилированной формы препарата (пегасис) - 56% [14]. Учитывая стоимость медикаментозного лечения (около $2500 в месяц), соотношение «цена-качество» такого лечения является чрезвычайно низким.

б) Невозможность целенаправленного лечения внепеченочных проявлений гепатита С, таких как антифосфолипидный синдром, криоглобулинемия и др. Частота (45%) и тяжесть этих осложнений оказывает существенное влияние на течение и прогноз заболевания [13].

Задача предлагаемого способа состоит в повышении эффективности лечения вирусного гепатита С, профилактике и лечении его внепеченочных проявлений.

Поставленная задача достигается тем, что перед началом лекарственной терапии рибавирином и интерфероном альфа-2а, проводят 5 процедур криоплазмосорбции с интервалом 2 суток, а в дальнейшем эти процедуры повторяют однократно 1 раз в месяц до окончания курса лекарственной терапии.

Во время первой процедуры криоплазмосорбции проводят плазмаферез с удалением 25-30% объема циркулирующей плазмы, которая замещается равным объемом физиологического раствора. Из полученной плазмы выделяется и удаляется криопреципитат. Она используется для заместительной терапии на второй процедуре плазмообмена, на которой производится забор 40-45% объема циркулирующей плазмы. После удаления криопреципитата она используется для заместительной терапии на третьей процедуре плазмообмена, на которой производится забор 55-60% объема циркулирующей плазмы. После удаления криопреципитата она используется для заместительной терапии на четвертой процедуре плазмообмена, на которой также производится забор 55-60% объема циркулирующей плазмы. После удаления криопреципитата она используется для заместительной терапии на пятой процедуре плазмообмена, на которой также производится забор 55-60% плазмы. После удаления из плазмы криопреципитата, она используется для заместительной терапии на шестой процедуре плазмообмена, на которой производится забор 70-75% объема циркулирующей плазмы. После удаления криопреципитата эта плазма используется для заместительной терапии на седьмой процедуре плазмообмена, на которой производится забор 85-90% объема циркулирующей плазмы. Эта плазма после удаления криопреципитата используется для заместительной терапии на восьмой процедуре плазмообмена, на которой производится забор 95-100% объема циркулирующей плазмы. В дальнейшем последняя процедура повторяется 1 раз в месяц до окончания курса лекарственной терапии (табл.1).

Криоплазмосорбция - полуселективная технология модификации плазмы, полученной методом плазмафереза, сочетающая в себе метод криоафереза и плазмосорбции. В основе метода криоафереза лежит способность ряда биологически активных веществ плазмы к холодовой полимеризации и осаждению в присутствии гепарина (липопротеины низкой плотности, иммуноглобулины, иммунные комплексы, фибриноген и др.). В отличие от плазмафереза, после удаления патогенных продуктов плазма вновь возвращается пациенту. Предлагаемый способ позволяет:

1. Повысить эффективность лекарственной противовирусной терапии за счет удаления из крови вместе с криопреципитатом значительного количества вирусных частиц (см. таблицу 3). Понятно, что в этих условиях действие противовирусных препаратов и препаратов, активирующих противовирусный иммунитет, будет тем эффективнее, чем с меньшим количеством вирусных частиц придется справиться.

2. Удалить из плазмы крови криоглобулины, которые накапливаются в ней при вирусном гепатите, вызывая развитие смешанной криоглобулинемии. Такое воздействие позволяет профилактировать и лечить свойственные для криоглобулинемии внепеченочные проявления гепатита С [13]:

- Лимфоцитарный сиалоаденит

- Кожный некротизирующий васкулит

- Мультиформная и узловатая эритема

- Неходжкинская В-лимфома

- Крапивница

- Артриты, артралгии

- Гломерулонефрит

- Легочный васкулит

- Миопатический синдром

- Периферическая полинейропатия

3. Удалить из плазмы крови крупномолекулярные белки, парапротеины, антитела, циркулирующие иммунные комплексы и факторы свертывания, вызывающие развитие характерных для гепатита С вторичных заболеваний (например, макроглобулинемия Вальденстрема, синдром Гийена-Барре, антифосфолипидный синдром и др.) [13].

Таким образом, применение предлагаемого способа позволяет избежать недостатков прототипа и достичь поставленной задачи.

Техническое решение поясняется 4 таблицами и 2 чертежами, где:

- в таблице 1 представлены некоторые показатели плазмы пациентов с вирусным гепатитом С до и после криоафереза;

- в таблице 2 - некоторые технологические характеристики процедур криоафереза;

- в таблице 3 - изменение уровня виремии в плазме при проведении эксперимента in vitro;

- в таблице 4 - показатели исследования крови пациентки К. до и после лечения;

- на фиг.1 - схема проведения процедуры;

- на фиг.2 - кратность и время проведения процедур криоафереза.

- На фото 1-5 - вид плазмы на разных этапах проведения криоплазмосорбции.

Предлагаемое техническое решение соответствует критерию "новизна", так как сочетание терапии рибавирином и интерфероном альфа-2а с криоплазмосорбцией ранее описано не было.

Практически способ осуществляют следующим образом.

1. Пациенту проводят плазмаферез с получением гепаринизированной плазмы из расчета 25-30% от объема циркулирующей плазмы больного (ОЦП) с последующим замещением дефицита объема циркулирующей плазмы кристаллоидным раствором в том же объеме. В полученную плазму добавляют гепарин из расчета 12.5 МЕ/мл и замораживают при -25°С.

2. Через 1 сутки замороженную плазму помещают в среду с температурой +4-6°С, где после размораживания в течение 24 часов формируется осадок (криопреципитат). После этого плазму подвергают центрифугированию 15 мин при 700g, осадок удаляют, а надосадочную жидкость дополнительно пропускают через колонку с углеродным гемосорбентом (например, СКН, Симплекс-Ф, ВНИИТУ-1 и др.). К этому времени (примерно через 48 часов) повторно проводят плазмообмен с удалением гепаринизированной плазмы из расчета 40-45% ОЦП, а дефицит объема циркулирующей плазмы восполняют модифицированной аутоплазмой, полученной при проведении 1 сеанса плазмафереза и подвергнутой криоплазмосорбции, остальной дефицит объема циркулирующей плазмы восполняют кристаллоидным раствором. Повторно взятую плазму вновь подвергают замораживанию при -25°С.

3. Еще через 48 ч осуществляют криоплазмосорбцию удаленной плазмы и проводят третий сеанс плазмообмена с удалением плазмы в объеме 55-60% ОЦП, дефицит объема циркулирующей плазмы восполняют аутоплазмой, полученной при проведении 2 сеанса плазмообмена и подвергнутой криоплазмосорбции, остальной дефицит объема циркулирующей плазмы восполняют кристаллоидным раствором. Взятую плазму вновь подвергают замораживанию при температуре -25°С.

4. Еще через 48 ч осуществляют криоплазмосорбцию удаленной плазмы и проводят четвертый сеанс плазмообмена с удалением плазмы в объеме 55-60% ОЦП, дефицит объема циркулирующей плазмы полностью возмещают аутоплазмой, полученной при проведении 3 сеанса плазмообмена и подвергнутой криоплазмосорбции. Полученную плазму замораживают при -25°С.

5. Еще через 48 ч осуществляют криоплазмосорбцию удаленной плазмы и проводят пятый сеанс плазмообмена с удалением плазмы в объеме 55-60% ОЦП, дефицит объема циркулирующей плазмы возмещают аутоплазмой, полученной при проведении 4 сеанса плазмообмена и подвергнутой криоплазосорбции. Полученную плазму замораживают при -25°С.

6. После пятой процедуры начинают лекарственную терапию препаратами интерферона-альфа-2а (например, пегасис 180 мкг п/к 1 раз в неделю) и рибавирина в дозе 800-1200 мг/сутки в зависимости от веса пациента. Длительность медикаментозной терапии составляет 6-12 мес в зависимости от генотипа вируса.

7. Через 1 месяц после проведения пятой процедуры осуществляют криоплазмосорбцию удаленной плазмы и проводят 6 сеанс плазмообмена с удалением плазмы в объеме 70-75% ОЦП, дефицит объема циркулирующей плазмы восполняют аутоплазмой, полученной при проведении 5 сеанса плазмообмена и подвергнутой криоплазмосорбции, остальной дефицит объема циркулирующей плазмы восполняют кристаллоидным раствором. Полученную плазму замораживают при -25°С.

8. Через 1 месяц после проведения 6 процедуры осуществляют криоплазмосорбцию удаленной плазмы и проводят 7 сеанс плазмообмена с удалением плазмы в объеме 85-90% ОЦП, дефицит объема циркулирующей плазмы восполняют аутоплазмой, полученной при проведении 6 сеанса плазмообмена и подвергнутой криоплазмосорбции, остальной дефицит объема циркулирующей плазмы восполняют кристаллоидным раствором. Полученную плазму замораживают при -25°С.

9. Через 1 месяц после проведения 7 процедуры осуществляют криоплазмосорбцию удаленной плазмы и проводят 8 сеанс плазмообмена с удалением плазмы в объеме 95-100% ОЦП, дефицит объема циркулирующей плазмы восполняют аутоплазмой, полученной при проведении 7 сеанса плазмообмена и подвергнутой криоплазмосорбции, остальной дефицит объема циркулирующей плазмы восполняют кристаллоидным раствором. Полученную плазму замораживают при -25°С.

10. В дальнейшем процедуру повторяют аналогично п.9 один раз в месяц до окончания курса медикаментозной терапии.

11. Количество плазмы, удаляемой во время первого сеанса плазмафереза, обусловлено профилактикой развития гемодинамических и метаболических нарушений в результате дефицита объема циркулирующей плазмы. Удаление плазмы в объеме 30% ОЦП с замещением равным объемом кристаллоидного раствора не сопровождается подобными нарушениями. Удаление больших объемов плазмы в процессе 2 и последующих сеансов плазмообмена также не вызывает гемодинамических и метаболических нарушений, поскольку значительный объем удаленной плазмы параллельно замещают аутоплазмой, удаленной во время предыдущего сеанса плазмообмена и подвергнутой криоплазмосорбции, а также кристаллоидным раствором.

12. Количество проводимых сеансов до начала лекарственной терапии позволяет обработать около двух объемов циркулирующей плазмы. Обработка достаточно большого объема плазмы вызвана необходимостью удаления патогенных факторов не только из циркулирующей плазмы, но и из тканей и ликвора, которые могут поступать в системный кровоток по принципу градиента концентрации.

13. Промежуток между 1-5 сеансами плазмообмена (48 ч) обусловлен временем, необходимым для вторичной обработки плазмы и адаптации организма больного после проведенного сеанса экстракорпоральной гемокоррекции (А.П.Гаврилов, 1988).

Промежуток времени между процедурами, проводимыми на фоне лекарственной терапии (1 раз в месяц) обусловлен необходимостью поддержания низкого уровня виремии до конца медикаментозной терапии и удалением из кровотока патологических продуктов, накапливающихся при внепеченочных проявлениях гепатита С и образующихся при постоянном и длительном использовании лекарственных препаратов (антитела, ЦИКи и др.).

ПРИМЕРЫ КОНКРЕТНОГО ВЫПОЛНЕНИЯ.

Пример 1. Проведение экстракорпоральной модификации плазмы:

В эксперименте использовано 400 мл (1 пластиковый пакет) бедной тромбоцитами плазмы, удаленной во время аппаратного плазмафереза у пациента с вирусным гепатитом С. В полученную плазму был добавлен 1 мл гепарина и плазма была заморажена при -25°С. Через 2 суток замороженная плазма была разморожена при температуре +4°С, в процессе чего сформировался рыхлый криопреципитат. После этого пакет с плазмой был подвергнут центрифугированию 15 мин при 700g, в результате которого на дне пакета сформировался плотный осадок. В стерильных условиях надосадочная жидкость была переведена в другой пластиковый пакет, пакет с осадком удален, а надосадочная жидкость с целью удаления мелких преципитатов дополнительно пропущена через колонку с 50 г углеродного гемосор-бента (симплекс Ф). Результаты исследования плазмы на присутствие в ней вирусных частиц до и после процедуры представлено в таблице 3.

Пример 2. Больная К. 39 лет, поступила клинику гравитационной хирургии крови медицинского центра «Столица» 30.08.05 г. Жалобы при поступлении на тошноту, потерю аппетита, головные боли, быструю утомляемость, кожную сыпь на наружной поверхности плеч и в области молочных желез, боли в суставах и в мышцах (синдром Мельтцера). 17.08.04 закончила 6-месячный курс лечения пегасисом и рибовирином (по стандартной схеме). Исследование крови, проведенное при обращении, выявило следующие величины маркеров вируса гепатита С и его осложнений (см. таблицу) После проведенного обследования установлен диагноз: хронический активный вирусный гепатит С, генотип 2а, вторичный антифосфолипидный синдром, смешанная криоглобулинемия, узловатая эритема.

Было проведено лечение по предлагаемой схеме в течение 6 месяцев. При расчете объемов эксфузии плазмы учтены следующие показатели: пол женский, вес - 71 кг, рост - 165 см, Ht - 38, объем циркулирующей плазмы 2600 мл. Процедуры выполнялись на гематологическом сепараторе крови «Haemonetics PCS ²». Гепаринизация системная дробная из расчета 2,5 ME на 1 мл получаемой плазмы.

1. При первой процедуре получено 780 мл плазмы (30% ОЦП) (Фото 1). Для возмещения объема циркулирующей плазмы введено 800 мл физиологического раствора. В пакеты с полученной плазмой введено 9750 ME гепарина, и плазма заморожена при температуре -25°С (Фото 2). Через 24 часа пакеты с замороженной плазмой переведены в среду с температурой +4°С. Еще через 1 сутки после оттаивания плазмы в пакетах сформировался криопреципитат (см. фото 3). После этого плазма была отделена от образовавшегося осадка (Фото 4) и пропущена через колонку с гемосорбентом Симплекс-Ф (Фото 5).

2. Обработанная таким образом плазма использована для плазмозамещения на 2-й процедуре криоплазмосорбции, которая выполнена через 2 суток после первой. Во время второй процедуры удалено 1170 мл плазмы (45% ОЦП). Для плазмозамещения, помимо собственной плазмы, дополнительно использовали 400 мл физиологического раствора. В пакеты с плазмой добавлено 14625 ME гепарина и плазма заморожена при температуре -25°С. Через 24 часа пакеты с замороженной плазмой переведены в среду с температурой +4°С. Еще через 1 сутки после оттаивания плазмы в пакетах сформировался криопреципитат. После этого плазма была отделена от образовавшегося осадка и пропущена через колонку с гемосорбентом Симплекс-Ф.

3. Обработанная таким образом плазма использована для плазмозамещения на 3-й процедуре криоплазмосорбции, которая выполнена через 2 суток после второй. Во время третьей процедуры удалено 1560 мл плазмы (60% ОЦП). Для плазмозамещения помимо собственной плазмы дополнительно использовали 400 мл физиологического раствора. В пакеты с плазмой добавлено 19500 ME гепарина и плазма заморожена при температуре -25°С. Через 24 часа пакеты с замороженной плазмой переведены в среду с температурой +4°С. Еще через 1 сутки после оттаивания плазмы в пакетах сформировался криопреципитат. После этого плазма была отделена от образовавшегося осадка и пропущена через колонку с гемосорбентом Симплекс-Ф.

4. Обработанная таким образом плазма использована для плазмозамещения на 4-й процедуре криоплазмосорбции, которая выполнена через 2 суток после третьей. Во время четвертой процедуры удалено 1560 мл плазмы (60% ОЦП). В пакеты с плазмой добавлено 19500 ME гепарина и плазма заморожена при температуре -25°С. Через 24 часа пакеты с замороженной плазмой переведены в среду с температурой +4°С. Еще через 1 сутки после оттаивания плазмы в пакетах сформировался криопреципитат. После этого плазма была отделена от образовавшегося осадка и пропущена через колонку с гемосорбентом Симплекс-Ф.

5. Обработанная таким образом плазма использована для плазмозамещения на 5-й процедуре криоплазмосорбции, которая выполнена через 2 суток после четвертой. Во время пятой процедуры удалено 1560 мл плазмы (60% ОЦП). В пакеты с плазмой добавлено 19500 ME гепарина и плазма заморожена при температуре -25°С.

Непосредственно после пятой процедуры была начата лекарственная терапия, длительность которой составила 6 месяцев. Лекарственные препараты назначались по схеме: Пегасис 180 мкг п/к 1 раз в неделю (№24) + рибавирин 400 мг 2 раза в день (курс - 24 нед).

6. Через 1 месяц после проведения пятой процедуры пакеты с замороженной плазмой переведены в среду с температурой +4°С. Еще через 1 сутки после оттаивания плазмы в пакетах сформировался криопреципитат. После этого плазма была отделена от образовавшегося осадка и пропущена через колонку с гемосорбентом Симплекс-Ф. Обработанная таким образом плазма использована для плазмозамещения на 6-й процедуре криоплазмосорбции, которая выполнена через 1 месяц после пятой. Во время шестой процедуры удалено 1950 мл плазмы (75% ОЦП). Для плазмозамещения использована собственная плазма, полученная при пятой процедуре. Для плазмозамещения, помимо собственной плазмы, дополнительно использовали 400 мл физиологического раствора. В пакеты с плазмой добавлено 24375 ME гепарина и плазма заморожена при температуре -25°С.

7. Через 1 месяц после проведения шестой процедуры пакеты с замороженной плазмой переведены в среду с температурой +4°С. Еще через 1 сутки после оттаивания плазмы в пакетах сформировался криопреципитат. После этого плазма была отделена от образовавшегося осадка и пропущена через колонку с гемосорбентом Симплекс-Ф. Обработанная таким образом плазма использована для плазмозамещения на 7-й процедуре криоплазмосорбции, которая выполнена через 1 месяц после шестой. Во время седьмой процедуры удалено 2340 мл плазмы (90% ОЦП). Для плазмозамещения использована собственная плазма, полученная при шестой процедуре. Для плазмозамещения, помимо собственной плазмы, дополнительно использовали 400 мл физиологического раствора. В пакеты с плазмой добавлено 29250 ME гепарина и плазма заморожена при температуре -25°С.

8. Через 1 месяц после проведения седьмой процедуры пакеты с замороженной плазмой переведены в среду с температурой +4°С. Еще через 1 сутки после оттаивания плазмы в пакетах сформировался криопреципитат. После этого плазма была отделена от образовавшегося осадка и пропущена через колонку с гемосорбентом Симплекс-Ф. Обработанная таким образом плазма использована для плазмозамещения на 8-й процедуре криоплазмосорбции, которая выполнена через 1 месяц после пятой. Во время шестой процедуры удалено 2600 мл плазмы (100% ОЦП). Для плазмозамещения использована собственная плазма, полученная при пятой процедуре. Для плазмозамещения, помимо собственной плазмы, дополнительно использовали 400 мл физиологического раствора. В пакеты с плазмой добавлено 32500 ME гепарина и плазма заморожена при температуре -25°С.

В дальнейшем еще 2 процедуры криоафереза проводили 1 раз в месяц (до окончания срока лекарственной терапии) в соответствии с протоколом, описанном в п.8. При этом каждый раз объем получаемой, обрабатываемой и возвращаемой плазмы составил 2600 мл. Плазма, полученная при проведении последней процедуры, была утилизирована.

Описанные клинические проявления заболевания купировались после 3-4 процедур криоплазмосорбции. После 5 процедуры полностью прошла кожная сыпь. Контрольные исследования крови проведены через 12 недель после начала лечения и через 1 год после его окончания. Результаты исследований представлены в таблице 4.

На момент подачи заявки предлагаемым способом проведено лечение 15 больным. Осложнений и побочных реакций выявлено не было. Клинические проявления гепатита С и его осложнений были купированы у всех пациентов, однако у 2-х из них (13%) через год после окончания лечения была выявлена виремия.

Технико-экономические преимущества:

- повышение эффективности лечения хронического вирусного гепатита С;

- купирование внепеченочных проявлений хронического вирусного гепатита С.

Литература

3. Fried M.W., Hoofhagle I.H. Therapy of hepatitis С - Semin. Liver. Dis., 1995, v.15, № 1, p.82-91.

4. Sharara A.J., Hunt С.М., Hamilton J.D. Hepatitis С - Ann. Intern. Med., 1996, v.125, p.658-668.

5. Zeuzem S., Feinman S.V., Rasenack J., et al. Peginterferon alfa-2a in patients with chronic hepatitis С N Engl J. Med 2000; 343(23):1666-72.

6. Gretch D., Corey L., WilsonJ. et al. Acessment of hepatitis С virus RNA levels by quantitative competitive RNA polymerase chain reaction: high-titer viremia correlates with advanced stage of disease. // J. Infect. Dis. - 1994. - V.I 69. - P.1219-1225.

7. Cho S.W., Hwang S.G., Han D.S. et al. In situ detection of hepatitis С virus RNA in liver tissue using a digoxigenin-labeled probe created during a polimerase chain reaction. // J.Med. Virol. -1996. - V.48. - N3. - P.327-333.

8. Adinolfi L.E., Andreana A., Utili R. et al. HCV RNA levels in serum, liver, and peripheral blood mononuclear cells of chronic hepatitis С patients and their relationship to liver injury.//Am. J. Gastroenterol. - 1998. - V.93. - N11. - P.2162-2166.

9. Dries V., von Both I., Muller M. et al. Detection of hepatitis С virus in paraffin-embedded liver biopsies of patients negative for viral RNA in serun V./Hepatology. - 1999. - V.28. - N1. - P.223-229.

10. Jamal M.M., Soni A., Quinn P.G. et al. Clinical features of hepatitis C-infected patients with persistently normal alanine transaminase levels in the Southwesten United States. // Hepatology. - 1999. - V.30. - №5. - P.1307-1311.

11. Martinot-Peignoux M., Marcellin P., Pouteau M., Castelnau C., Boyer N., Poliquin M., et al. Pretreatment serum hepatitis С virus RNA levels and hepatitis С virus genotype are the main and independent prognostic factors of sustained response to interferon alfa therapy in chronic hepatitis С. Hepatology 1995; 22:1050-6.

12. Крель П.Е. ИФН альфа-2b в лечении вирусных гепатитов. // Вирусные гепатиты. - 1998. - Т.2, №3. - С.3-8.

13. Bellobuono A., Monadazzi L., Tempini S. et al. Early addition of ribavirin to interferon in chronic hepatitis С not responsive to interferon monotherapy. // J.Hepatol. - 2000. - Vol.33, №3. - P.463-468.

14. Созинов А.С., Бакеев Д.В. Предикторы эффективности лечения хронического вирусного гепатита С. Нижегородский медицинский журнал. - 2002.

15. Т.Н.Лопаткина. Хронический гепатит с внепеченочными проявлениями, особенности клиничекого течения и диагностика. - Вирусные гепатиты: Достижения и перспективы. Информационный бюллетень N2 (9), 2000) (Прототип).

16. Fried M.W, Shiftman M.L., Reddy KR, et al. Peginterferon alfa-2a plus ribavirin for chronic hepatitis С virus infection. N. Engi J. Med. 2002; 347(13):975-82.

17. Manns M.P., McHutchison J.G., Gordon S.G., et al. Peginterferon alfa-2b plus ribavirin compared to interferon alfa-2b plus ribavirin for the treatment of chronic hepatitis C: 24 week treatment analysis of a multi-center, multinational phase III randomized controlled trial. Hepatology. 2000; 32:297A

Таблица 1
Изменение исследуемых показателей у пациентов с вирусным гепатитом С до и после криоплазмосорбции (КПС) (M±m, n=8-15)
Исследуемые показатели	До курса КПС	После курса КПС
Количество HCV RNA (копий/мл)	2*106±3*102	7*103±280
Криоглобулины (гл)	1.8±0.4	0.2±0.03
Антикард иол и пин (МЕ/мл)	28.5±6.2	7.1±0.29
Парапротеины (гл)	54±7.6	28±5.4
IgG (гл)	19.81±1.37	9.5±0.68
IgM (rVi)	3.2±0.47	1.1±0.39
Фактор VIII, %	205.44±54.71	112.57±20.48
Фибронектин нг/л	1238±109	320±101

Таблица 2
Объемные характеристики удаляемых и вводимых в организм жидкостей при проведении курса криоплазмосорбции у пациента 70 кг
№	Объем эксфузируемой плазмы	Объем возвращаемой плазмы	Объем кровезаменителя
Процедуры, выполняемые через 1 день перед началом медикаментозной терапии
1	780	0	800
2	1170	780	400
3	1560	1170	400
4	1560	1560	400
5	1560	1560	400
Процедуры, выполняемые 1 раз в месяц параллельно с медикаментозной терапией
6	1950	1560	400
7	2340	1950	400
8	2600	2340	400
9	2600*	2600*	400*
* - Объемные показатели не меняются до окончания курса лечения

Таблица 3
Уровень HCV RNA в плазме до и после ее обработки предлагаемым способом (in vitro)
До криопреципитации	После криопреципитации
8*106	9*10 3

Таблица 4
Показатели плазмы пациентки К. до и после лечения предлагаемым способом
Исследуемые показатели	До лечения (27.03.04)	Через 12 недель - после начала лечения	Через 1 год после окончания лечения (2.10.06)
HCV RNA (копий/мл)	2*106	9.5*103	Не определяется
АЛТ (ммоль/л)	78	31	26