антимикробные консерванты для достижения мультидозовых рецептур с использованием 
-циклодекстринов для жидких лекарственных форм
| Классы МПК: | A61K31/46 8-азабицикло [321] октан; его производные, например атропин, кокаин A61K47/10 спирты; фенолы; их соли A61K47/32 получаемые реакциями с участием только ненасыщенных углерод-углеродных связей |
| Автор(ы): | АДАМИ Роджер Кристофер (US), ДАВИД Фредерик (GB), ВУД Джулия Энн (US) |
| Патентообладатель(и): | ПФАЙЗЕР ПРОДАКТС ИНК. (US) |
| Приоритеты: |
подача заявки:
2005-01-17 публикация патента:
10.09.2008 |
Настоящее изобретение относится к области лекарственных средств, в частности к фармацевтической композиции для лечения заболевания, состояния или нарушения, для которого требуется применение антагониста нейрокининового рецептора, содержащей терапевтически эффективное количество соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли, где композиция содержит сульфобутиловый эфир -циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332020/946.gif" BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -циклодекстрина, консервант мета-крезол и фармацевтически приемлемый носитель. Кроме того, изобретение относится к применению указанной композиции и способу лечения заболеваний, для которого требуется применение антагониста нейрокининового рецептора. Технический результат заключается в обеспечении стабильности рецептуры и приемлемой толерантности в месте инъекции продукта при использовании консерванта, обеспечивающего предотвращение бактериального и грибкового роста в рецептуре. 4 н. и 7 з.п. ф-лы, 4 ил., 9 табл.
-циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997.gif" BORDER="0" TI="CF" HE="69" WI="43">
Формула изобретения
1. Фармацевтическая композиция для лечения заболевания, состояния или нарушения, для которого требуется применение антагониста нейрокининового рецептора, содержащая терапевтически эффективное количество соединения формулы I:
-циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-22.gif" BORDER="0" TI="CF" HE="69" WI="43">
или его фармацевтически приемлемой соли,
в которой R2 выбирают из группы, состоящей из метила, этила, изопропила, втор-бутила и трет-бутила, где композиция дополнительно содержит -циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332020/946.gif" BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -циклодекстрин, который представляет собой сульфобутиловый эфир
-циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332020/946.gif" BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -циклодекстрина, фармацевтически приемлемый консервант, который представляет собой мета-крезол, который проявляет антимикробную консервирующую активность, и фармацевтически приемлемый носитель.
2. Фармацевтическая композиция по п.1, в которой R 2 представляет собой втор-бутил, а соль представляет собой цитрат моногидрат.
3. Фармацевтическая композиция для лечения заболевания, состояния или нарушения, для которого требуется применение антагониста нейрокининового рецептора, содержащая терапевтически эффективное количество соединения формулы Iа:
-циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-23.gif" BORDER="0" TI="CF" HE="69" WI="73">
или его фармацевтически приемлемой соли, где композиция дополнительно содержит -циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332020/946.gif" BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -циклодекстрин, который представляет собой сульфобутиловый эфир
-циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332020/946.gif" BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -циклодекстрина, фармацевтически приемлемый консервант, который представляет собой мета-крезол, который проявляет антимикробную консервирующую активность, и фармацевтически приемлемый носитель.
4. Фармацевтическая композиция по п.3, в которой соль представляет собой цитрат моногидрат.
5. Фармацевтическая композиция по любому из предшествующих пунктов, в которой консервант имеет величину связывания с циклодекстрином, меньшую, чем величина связывания активного фармацевтического ингредиента с циклодекстрином.
6. Фармацевтическая композиция по п.5, в которой от примерно 1 до примерно 5 мг/мл консерванта не связано с циклодекстрином.
7. Фармацевтическая композиция по п.6, в которой величина связывания активного фармацевтического ингредиента композиции с циклодекстрином находится между 500 и 10000 М -1.
8. Применение фармацевтической композиции по любому из предшествующих пунктов для производства лекарства для лечения заболевания, состояния или нарушения, для которого требуется применение антагониста нейрокининового рецептора.
9. Способ лечения заболевания, состояния или нарушения, для которого требуется применение антагониста нейрокининового рецептора, у млекопитающих, предусматривающий введение указанному млекопитающему, нуждающемуся в таком лечении, терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции по любому из пп.1-7.
10. Способ по п.9, где композиция имеет повышенную толерантность в месте инъекции.
11. Способ по п.9, где заболевание, состояние или нарушение представляет собой рвоту.
Описание изобретения к патенту
Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение направлено на фармацевтические композиции, содержащие терапевтически эффективное количество активного фармацевтического агента («API»), фармацевтически приемлемый циклодекстрин и фармацевтически приемлемый консервант. Изобретение также направлено на фармацевтические композиции соединений формулы I, в которой R2 выбирают из группы, состоящей из метила, этила, изопропила, втор-бутила и трет-бутила и фармацевтически приемлемого циклодекстрина и консерванта.
-циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-4.gif" height=100 BORDER="0"> В частности, изобретение направлено на фармацевтические композиции соединения формулы Ia и фармацевтически приемлемый циклодекстрин и консервант.
-циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-6.gif" height=100 BORDER="0"> Кроме того, изобретение направлено на улучшение толерантности в месте инъекции к инъектируемым водным растворам, содержащим соединение формулы I или его фармацевтически приемлемые соли, -циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-8.gif" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -циклодекстрин и консервант.
Изобретение также направлено на способ получения консервированной композиции API.
Уровень техники
Введение антагониста нейрокининового рецептора, включая соединения формулы I и Ia, создает различные проблемы в отношении толерантности в месте инъекции (например, чувствительность субъекта, раздражение, воспаление, опухание и/или покраснение места). Хотя были проведены многочисленные исследования в отношении улучшения толерантности в месте инъекции путем использования различных веществ, ни одно из этих исследований, однако, не фокусировалось на введении антагониста нейрокининового рецептора.
Соединения формулы I или Ia являются объектом патентов США 5807867, 6222038 и 6255320. В них описано получение соединений формулы I и Ia. Соединение Ia может быть также получено, как описано в находящейся на рассмотрении предварительной заявке США № 60/541323, соответственно принадлежащей и разработанной Pfizer, Inc. Патент США 5393762 также описывает фармацевтические композиции и лечение рвоты с использованием антагониста рецептора NK-1. Находящаяся на рассмотрении предварительная заявка США № 60/540697, соответственно принадлежащая и разработанная Pfizer, Inc., описывает метод улучшения восстановления пациентов после анестезии путем введения соединений формулы I или Ia. Текст вышеупомянутых заявок, патентов и всех других ссылок, цитируемых в данном подробном описании, введен в данное описание посредством ссылки во всей полноте документов.
Соединение формулы Ia является основным лекарственным средством с двумя функциональными аминогруппами, вторичным амином с pKa 4,43 и третичным амином с pKa 9,31. Цитратная соль соединения формулы Ia имеет растворимость 2,7 мг/мл при рН 4,2 в 0,02 М фосфатном/0,02 М ацетатном буферном растворе. Желаемая растворимость 10 мгА/мл может быть получена при добавлении солей (например, NaCl, CaCl2 или ацетата натрия), при использовании частично водных, масляных или мицеллярных разбавителей или при добавлении модифицированного парентерально приемлемого циклодекстрина. Вообще, однако, наблюдали, что рецептуры, содержащие циклодекстрины, обеспечивали улучшенную толерантность в месте инъекции, чем другие приемы для увеличения растворимости.
Обеспечение адекватной растворимости фармацевтического лекарственного средства в парентеральных рецептурах является решающим фактором, особенно когда лекарственное средство имеет низкую водную растворимость. Изменение рН раствора, выбор солевой формы лекарственного средства и использование сорастворителей представляют собой обычные приемы, используемые для достижения адекватной растворимости. Нетипичные приемы включают применение эксципиентов, таких как комплексообразующие агенты.
Циклодекстрин может увеличивать растворимость, образуя соединение включения с молекулой лекарственного средства, посредством чего нерастворимое/гидрофобное лекарственное средство погружается в гидрофобную полость циклодекстрина. Внешняя гидрофильная оболочка молекулы циклодекстрина затем увеличивает растворимость всего комплекса. Стандартная терминология для комплексообразования с циклодекстрином определяет циклодекстрин как молекулу «хозяин» и лекарственное средство как молекулу «гость». К сожалению, циклодекстрин, используемый для образования комплекса включения, может также связывать консерванты, инактивируя многие консерванты с плохой растворимостью в воде.
Было обнаружено, что сульфобутиловый эфир -циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-8.gif" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -циклодекстрина (здесь и далее «SBE-CD») является эффективным как для увеличения растворимости соединения формулы Ia, так и для улучшения реакции в месте инъекции. К сожалению, исследование установило, что SBE-CD образует комплексы как с антимикробным консервантом (например, метакрезолом), так и с соединением формулы Ia, приводя к конкурентно-связывающему взаимодействию и, вообще, к антимикробной неэффективности.
Следовательно, было необходимо достичь оптимального баланса между достаточной концентрацией циклодекстрина (например, SBE-CD) и антимикробного консерванта (например, метакрезола). В то время как более низкая концентрация SBE-CD могла бы увеличить антимикробную защитную эффективность, это преимущество будет компенсироваться понижением приемлемой толерантности в месте инъекции («IST»). Эти конкурирующие характеристики вынуждали сохранять равновесие между антимикробной эффективностью консерванта (критерий А) и приемлемой толерантностью в месте инъекции продукта.
Находящаяся на рассмотрении предварительная заявка США № 60/540644, поданная одновременно с настоящей заявкой, разработанная и принадлежащая Pfizer Inc., описывает метод улучшения толерантности в месте инъекции во время парентерального введения композиции, содержащей соединение формулы I и циклодекстрин. Был также установлен циклодекстринсовместимый консервант, обеспечивающий желаемые возможности дозирования при многоразовом использовании. Предпочтительно метакрезол используется в рецептуре для предотвращения бактериального и грибкового роста в рецептуре в течение предполагаемого длительного периода эксплуатации.
Сущность изобретения
В одном аспекте изобретение направлено на фармацевтическую композицию, содержащую терапевтически эффективное количество активного фармацевтического ингредиента (API), -циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-8.gif" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -циклодекстрин, фармацевтически приемлемый консервант, фармацевтически приемлемый носитель и необязательный фармацевтически приемлемый эксципиент, в которой консервант демонстрирует фармацевтически приемлемую антимикробную консервирующую эффективность.
В предпочтительном варианте осуществления -циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-8.gif" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -циклодекстрин является 2-гидроксипропил-
-циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-8.gif" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -циклодекстрином или сульфобутиловым эфиром
-циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-8.gif" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -циклодекстрина, предпочтительно сульфобутиловым эфиром
-циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-8.gif" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -циклодекстрина.
В другом варианте осуществления фармацевтически приемлемый консервант выбирают из тимерозала, пропиленгликоля, фенола или метакрезола или их комбинации. Предпочтительно консервантом является метакрезол. Предпочтительно концентрация консерванта равна от примерно 0,1 мг/мл до примерно 600 мг/мл. Предпочтительно консервантом является метакрезол, и он находится в концентрации от примерно 0,1 мг/мл до примерно 20 мг/мл.
В предпочтительном варианте осуществления фармацевтическая композиция имеет рН в интервале от примерно 3 до примерно 6.
В предпочтительном варианте осуществления консервант имеет величину связывания с циклодекстрином, меньшую, чем величина связывания API с циклодекстрином. Предпочтительно величина связывания API с циклодекстрином находится между 500 М-1 и 10000 М-1. Предпочтительно величина связывания API с циклодекстрином находится между 800 М -1 и 3000 М-1.
В другом варианте осуществления активный фармацевтический ингредиент имеет константу связывания с циклодекстрином, которая более чем или равна удвоенной константе связывания для консерванта. В предпочтительном варианте осуществления константа связывания более чем или равна пятикратной константе. В наиболее предпочтительном варианте осуществления константа связывания более чем или равна десятикратной константе.
В предпочтительном варианте осуществления от примерно 1 мг/мл до примерно 5 мг/мл консерванта, предпочтительно метакрезола, не связано с циклодекстрином. Предпочтительно примерно 2,5 мг/мл консерванта, предпочтительно метакрезола, не связано с циклодекстрином.
В предпочтительном варианте осуществления фармацевтическая композиция имеет антимикробную эффективность против бактерий, такую, что концентрация бактерий уменьшается на 2 или более порядков после 6 часов, на 3 или более порядков после 24 часов и отсутствие роста бактерий после 28 дней. Предпочтительно бактерии выбирают из Escherichia coli (грамотрицательная бактерия) (АТСС8739), Pseudomonas aeruginosa (грамотрицательная бактерия) (АТСС9027) или Staphylococcus aureus (грамположительная бактерия) (АТСС6538).
В предпочтительном варианте осуществления фармацевтическая композиция имеет антимикробную эффективность против грибка и плесени, такую, что концентрация грибка или плесени уменьшается на 2 или более порядков после 7 дней, на 1 порядок после 14 дней и отсутствие увеличения грибка или плесени после от 14 дней до примерно 28 дней. Предпочтительно грибком является Candida albicans (грибок) (АТСС10231) и плесенью является Aspergillus niger (плесень) (АТСС16404).
В предпочтительном варианте осуществления фармацевтическая композиция имеет антимикробную эффективность, которая удовлетворяет критериям А и В Pharmaceopia Europa и критериям USP AET.
В другом аспекте изобретение направлено на фармацевтическую композицию, содержащую соединение формулы I в качестве активного фармацевтического ингредиента,
-циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-19.gif" height=100 BORDER="0"> или его фармацевтически приемлемые соли, в которой R2 выбирают из группы, состоящей из метила, этила, изопропила, втор-бутила и трет-бутила, предпочтительно трет-бутила, фармацевтически приемлемый -циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-8.gif" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -циклодекстрин, фармацевтически приемлемый консервант, фармацевтически приемлемый носитель и необязательного фармацевтически приемлемый эксципиент.
Предпочтительно -циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-8.gif" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -циклодекстрин является 2-гидроксипропил-
-циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-8.gif" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -циклодекстрином или сульфобутиловым эфиром
-циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-8.gif" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -циклодекстрина, предпочтительно сульфобутиловым эфиром
-циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-8.gif" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -циклодекстрина.
Предпочтительно фармацевтически приемлемый консервант выбирают из тимерозала, пропиленгликоля, фенола или метакрезола или их комбинации. Предпочтительно консервантом является метакрезол.
Предпочтительно фармацевтическая композиция имеет рН в интервале от примерно 4 до примерно 5.
В предпочтительном варианте осуществления от примерно 1 мг/мл до примерно 5 мг/мл консерванта, то есть метакрезола, не связано с циклодекстрином.
В предпочтительном варианте осуществления соединение формулы I или его фармацевтически приемлемая соль находятся в количестве от примерно 0,1 мг/мл до примерно 100 мг/мл и -циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-8.gif" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -циклодекстрин находится в количестве от примерно 20 мг/мл до примерно 200 мг/мл и консервантом является метакрезол.
Предпочтительно -циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-8.gif" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -циклодекстрин находится в количестве от примерно 55 мг/мл до 100 мг/мл и метакрезол в количестве от примерно 2,5 мг/мл до 3,5 мг/мл.
В предпочтительном варианте осуществления соединением формулы I является соединение формулы Ia
-циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-19.gif" height=100 BORDER="0"> или его фармацевтически приемлемые соли.
Предпочтительно соединение формулы Ia или его фармацевтически приемлемая соль находится в количестве от примерно 0,1 мг/мл до примерно 100 мг/мл и -циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-8.gif" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -циклодекстрин в количестве от примерно 20 мг/мл до примерно 200 мг/мл и консервантом является метакрезол, и он находится в количестве от примерно 1 мг/мл до примерно 5 мг/мл. Предпочтительно
-циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-8.gif" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> - циклодекстрин находится в количестве от примерно 55 мг/мл до примерно 100 мг/мл и консервантом является метакрезол, и он находится в количестве от примерно 2,5 мг/мл до примерно 3,5 мг/мл. Предпочтительно
-циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-8.gif" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -циклодекстрин является сульфобутиловым эфиром
-циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-8.gif" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -циклодекстрина.
В третьем аспекте изобретение направлено на фармацевтическую композицию, содержащую соединение формулы Ia
-циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-19.gif" height=100 BORDER="0"> или его фармацевтически приемлемые соли, в которой соединение формулы Ia находится в количестве 10 мгА/мл, сульфобутиловый эфир -циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-8.gif" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -циклодекстрина в количестве примерно 63 мг/мл и метакрезол в количестве примерно 3,3 мг/мл, фармацевтически приемлемый носитель и необязательный фармацевтически приемлемый эксципиент. Предпочтительно фармацевтически приемлемая соль соединения формулы Ia является цитратом.
В четвертом аспекте изобретение направлено на метод лечения рвоты или улучшения восстановления после анестезии у млекопитающих, предусматривающий парентеральную инъекцию млекопитающему водной фармацевтической композиции, содержащей вышеописанные фармацевтические композиции соединений формулы I или Ia, -циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-8.gif" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -циклодекстрин, присутствующий в количестве, которое достаточно для улучшенной толерантности к инъекции в месте инъекции. Предпочтительно фармацевтически приемлемой солью является цитрат. Предпочтительно композиция вводится подкожно.
В пятом аспекте изобретение направлено на метод улучшения толерантности в месте инъекции во время лечения рвоты или улучшения восстановления после анестезии у млекопитающих, предусматривающий парентеральную инъекцию млекопитающему фармацевтически приемлемого раствора вышеописанных фармацевтических композиций соединений формулы I или Ia. Предпочтительно фармацевтически приемлемой солью является цитрат. Предпочтительно композиция вводится подкожно.
В шестом аспекте изобретение направлено на метод разработки консервированной API композиции, содержащей терапевтически эффективное количество API, -циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-8.gif" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -циклодекстрин и фармацевтически приемлемый консервант.
В предпочтительном варианте осуществления консервант имеет величину связывания с циклодекстрином, меньшую, чем величина связывания API с циклодекстрином. Предпочтительно консервант выбирают из тимерозала, пропиленгликоля, фенола или метакрезола или их комбинации.
В предпочтительном варианте осуществления величина связывания API с циклодекстрином более 50 М -1. Предпочтительно величина связывания API с циклодекстрином находится между 500 М-1 и 10000 М -1. Предпочтительно величина связывания API с циклодекстрином находится между 800 М-1 и 3000 М -1.
В предпочтительном варианте осуществления требования к тесту на антимикробную эффективность (AET) удовлетворяют критериям А и В Pharmaceopia Europa и критериям USP AET.
В дальнейшем аспекте изобретение направлено на фармацевтическую композицию, как определено здесь, для использования в качестве лекарства, особенно когда композиция содержит соединение формулы I или Ia, при лечении заболевания, для которого требуется применение антагониста нейрокининового рецептора, такого как антагонист рецептора NK-1.
В дальнейшем аспекте изобретение направлено на использование фармацевтической композиции, как определено здесь, содержащей соединение формулы I или Ia, для производства лекарства для лечения заболевания, для которого требуется применение антагониста нейрокининового рецептора, такого как антагонист рецептора NK-1.
В дальнейшем аспекте изобретение направлено на способ лечения заболевания, для которого требуется применение антагониста нейрокининового рецептора, такого как антагонист рецептора NK-1 у млекопитающих, предусматривающий введение указанному млекопитающему терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции, как определено здесь, содержащей соединение формулы I или Ia.
Определения
Термин(ы) «соединение(я) формулы I» и «соединение(я) формулы Ia», как использовано здесь, означают соединение или соединения формулы I или Ia, их пролекарства и фармацевтически приемлемые соли соединений или пролекарств. Соединения, используемые в настоящем изобретении, могут быть выделены и использованы сами по себе или в форме их фармацевтически приемлемой соли, сольвата и/или гидрата.
Термин «фармацевтически приемлемая соль» относится к неорганическим или органическим солям соединения настоящего изобретения. Эти соли могут быть получены in situ во время конечного выделения и очистки соединения или отдельным реагированием соединения или пролекарства с подходящей органической или неорганической кислотой и выделением образующейся таким образом соли. Репрезентативные соли включают гидробромид, гидрохлорид, гидройодид, сульфат, бисульфат, нитрат, ацетат, трифторацетат, оксалат, бесилат, пальмитат, памоат, малонат, стеарат, лаурат, малат, малеат, борат, бензоат, лактат, фосфат, гексафторфосфат, бензолсульфонат, тозилат, формат, цитрат, малеат, фумарат, сукцинат, тартрат, нафтилат, мезилат, глюкогептонат, лактобионат и лаурилсульфонат и тому подобное. См., например, Berge et al. J. Pharm. Sci., 66, 1-19 (1977).
Предпочтительно фармацевтически приемлемой солью является цитрат. Термин «цитратная соль», как использовано здесь, относится к моногидрату соли лимонной кислоты соединения формулы Ia, имеющего молекулярную массу 660,82 и теоретическую эффективность, основанную на активном ингредиенте, равную 709 мг/г.
Термин «активный фармацевтический ингредиент», или «API», как использовано здесь, относится к фармацевтическому лекарственному веществу, имеющему терапевтические свойства и обладающему способностью связываться или быть «изолированным» в циклодекстрине. Предпочтительно API имеет величину связывания с циклодекстрином более 50 М-1. Более предпочтительно API имеет величину связывания с циклодекстрином между примерно 800 М-1 и примерно 3000 М -1. Даже более предпочтительно API имеет величину связывания с циклодекстрином между примерно 500 М-1 и примерно 10000 М-1. Более того, предпочтительно API имеет более чем удвоенную константу связывания с циклодекстрином, чем консервант. Более предпочтительно API имеет более чем пятикратную константу связывания с циклодекстрином. Даже более предпочтительно API имеет более чем десятикратную константу связывания с циклодекстрином.
Термин «активный ингредиент» или «мгА/мл», как использовано здесь, относится к свободному основанию соединения формулы Ia, имеющему молекулярную массу 468,69.
Термин «циклодекстрин» относится к соединению, содержащему циклическую альфа(1 -циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-19.gif" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> 4) связанную D-глюкопиранозную часть.
-циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-19.gif" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -циклодекстрин относится к циклодекстрину с 6 циклическими связанными D-глюкопиранозными частями,
-циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-8.gif" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -циклодекстрин имеет 7 циклических связанных D-глюкопиранозных частей и
-циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-19.gif" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -циклодекстрин имеет 8 циклических связанных D-глюкопиранозных частей. Эти циклические связанные D-глюкопиранозные части определяют гидрофобную полость и циклодекстрины, как известно, образуют соединения включения с другими органическими молекулами, с солями и с галогенами как в твердом состоянии, так и в водных растворах.
Циклодекстрины различаются по структуре и свойствам. Например, размер (то есть диаметр и глубина) и функциональность (то есть гидрофобность, заряд, реактивность и способность к водородным связям) гидрофобной полости различаются среди замещенных и незамещенных -циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-19.gif" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -,
-циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-8.gif" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> - и
-циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-19.gif" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -циклодекстринов. Обычно циклодекстрин, выбираемый для рецептуры, имеет размер и функциональность, который связывает с целевым компонентом другие компоненты рецептуры. Для настоящих рецептур и методов полагают, что замещенные циклодекстрины, такие как гидроксиалкилциклодекстрины и сульфоалкиловые эфиры циклодекстринов имеют размер и функциональность, которые совместимы с другими компонентами рецептуры. Предпочтительные циклодекстрины включают гидроксипропил-
-циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-8.gif" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -циклодекстрин и сульфобутиловый эфир
-циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-8.gif" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -циклодекстрина. Более предпочтительно циклодекстрином является сульфобутиловый эфир
-циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-8.gif" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -циклодекстрина («SBE-CD»).
Фраза «терапевтически эффективное количество» означает количество соединения настоящего изобретения, которое (i) лечит или предотвращает отдельную болезнь, состояние или нарушение, (ii) ослабляет, улучшает или устраняет один или несколько симптомов отдельной болезни, состояния или нарушения или (iii) предотвращает или замедляет приступ одного или нескольких симптомов отдельной болезни, состояния или нарушения, описываемых здесь.
Термин «млекопитающие» или «животные», как использовано здесь, относится к человеку, домашним животным, таким как, но без ограничения, собаки, кошки и лошади, животным как источнику пищи (то есть коровы, свиньи и овцы), животным в зоопарке и другим аналогичным видам животных.
Термин «фармацевтически приемлемый» означает, что вещество или композиция должны быть совместимы химически и/или токсикологически с другими ингредиентами, содержащимися в рецептуре, и/или с животным, которое этим лечат.
Термины «проводить курс лечения», «лечить» или «лечение» охватывают как превентивное, то есть профилактическое, так и паллиативное лечение.
Термин «улучшенная толерантность в месте инъекции», как использовано здесь, означает величину два или меньше, как определено здесь в таблице IV.
Термин «фармацевтически приемлемый консервант», как использовано здесь, означает консервант. В частности, рецептура, содержащая консервант, сохраняет эффективность, согласно стандартам, изложенным в Ph. Eur. 4th Ed. 2003 (5.1.3) для парентеральных рецептур и в USP26NF21S2, <51> для категории 1 фармацевтических продуктов. Предпочтительно консервант имеет пониженную величину связывания с циклодекстрином по сравнению с API, такую, что достаточное количество консерванта не изолировано в циклодекстрине, обеспечивая действенную антимикробную эффективность.
Краткое описание рисунков
Фиг.1 изображает насыщенные метакрезоловые растворы SBE-CD и соединение формулы Ia. Концентрация метакрезола показывает линейный рост, когда увеличивается SBE-CD. Концентрация лекарственного средства существенно не изменяет растворимости м-крезола в SBE-CD.
Фиг.2 изображает концентрацию соединения формулы Ia от времени при 1, 0,5 и 0,25 мМ соединения формулы Ia, построенную по уравнению 11.
Фиг.3 изображает сравнение между бактериальной эффективностью как функцией общего количества метакрезола и как функцией расчетного связанного метакрезола для S.aureus в 6-часовой и 24-часовой временных точках.
Фиг.4 изображает окно рецептур, гарантирующее эффективность консерванта в соответствии с Ph. Eur. критерий A, при отсутствии боли при инъекции, с менее чем 3,5 мг/мл метакрезола и менее чем 80 мг/мл SBE-CD.
Описание изобретения
Разработка парентеральных рецептур, использующих циклодекстрин для солюбилизации или для других целей, требует понимания взаимодействия между лекарственным средством и циклодекстрином. Фармацевтические лекарственные средства, которые солюбилизируются циклодекстрином, связываются в стехиометрическом соотношении, связанном с присущей им константой связывания. Это соотношение изменяется на основе некоторых факторов, таких как структура лекарственного средства, циклодекстрина и свойства раствора (например, рН, ионная сила, сорастворимость).
Рецептуры, имеющие многочисленные эксципиенты, дополнительно осложняют взаимодействие. Например, в парентеральных рецептурах многократного применения, содержащих консервант, консервант может конкурировать с лекарственным средством за связывание с циклодекстрином. Ранее сообщалось, что 2-гидроксипропил- -циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-8.gif" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -циклодекстрин взаимодействует не только с молекулами лекарственного средства, но может также образовывать комплексы с антимикробными консервантами. Loftsson, T. et al., Drug Development and Industrial Pharmacy 1992, 18(13), 1477-1484.
Связывание консерванта с циклодекстрином, однако, понижает антимикробную эффективность консерванта, так как консерванту требуется быть несвязанным в растворе. Минимальнное требование к эффективности консервации парентеральных продуктов описано в European Pharmacopoeia в применении к критерию А и в U.S. Pharmacopoeia. Антимикробные консерванты для предложенных рецептур были признаны соответствующими критериям тестирования антимикробной эффективности («AET»).
Мультидозовая рецептура соединения формулы Ia, содержащая 10 мгА/мл соединения формулы Ia и 10% (мас./об.) циклодекстрина при рН 4,4 была использована для установления эффективного антимикробного консерванта, который существенно не взаимодействует с циклодекстрином. По предварительным экспериментам растворимость соединения формулы Ia в присутствии 2-гидроксипропил- -циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-8.gif" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -циклодекстрина была аналогична растворимости в присутствии SBE-CD. Более того, оба давали рецептуры с приемлемой толерантностью в месте инъекции («IST»). В дополнение к совместимости с циклодекстрином, например SBE-CD, существуют дополнительные критерии, которые ограничивают антимикробные консерванты, приемлемые для рецептуры. Этими критериями являются физическая и химическая совместимость с соединением формулы Ia, эффективность защиты от бактерий, плесени и дрожжей при рН примерно 4,4 и приемлемая толерантность в месте инъекции.
Как обсуждается более полно в экспериментальном разделе, предварительный скрининг антимикробных консервантов для мультидозовой рецептуры соединения формулы Ia проводили с хлоркрезолом, фенилэтанолом, бензиловым спиртом, этанолом, бронополом, сахарозой, циклодекстринглюконатом, тимерозалом, бензетониумхлоридом, бензалкониумхлоридом, хлорбутанолом, бензойной кислотой, метакрезолом, фенолом и 25% пропиленгликолем. Первоначальные результаты показали, что тимерозал, хлорбутанол/фенилэтанол, этанол и пропиленгликоль (50%) удовлетворяют требованиям USP/Ph. Eur. (таблица VII).
При рассмотрении результатов толерантности в месте инъекции хлорбутанол/фенилэтанол, этанол и пропиленгликоль демонстрировали плохую толерантность в месте инъекции (таблица VIII). Наоборот, тимерозал и метакрезол обеспечивали хорошую толерантность в месте инъекции.
Бензетониумхлорид и бензойная кислота, оба, были неэффективными в сокращении микроорганизмов после 7 дней. Пропиленгликоль (25%) был активен против бактерий только в присутствии SBE-CD, но неэффективен против грибков. С другой стороны, фенольные соединения, фенол и мета-крезол, были эффективными в сокращении микроорганизмов, но их активность против бактерий сильно снижалась, когда в рецептуре присутствовал SBE-CD.
Изобретателями было предположено и определено, что трудности, с которыми сталкиваются при консервировании желаемых рецептур были обусловлены взаимодействием между антимикробным консервантом (например, метакрезолом) и SBE-CD. В частности, консервант, например, метакрезол, был, вероятно, изолирован SBE-CD, что делало метакрезол неактивным против бактерий и грибков. Для того чтобы продемонстрировать эту теорию, были определены константы связывания соединения формулы Ia с SBE-CD и метакрезола с SBE-CD (КР). Эти константы были использованы для вычисления концентрации несвязанного метакрезола в рецептуре, тестируемой на антимикробную эффективность. Используемые в вычислениях средние величины констант связывания составили для лекарственного средства (КD = 1000) и для консерванта (КР = 28).
В случаях, когда желательно предпочтительное связывание одного из компонентов, желательно определить количество связанной доли каждого компонента в равновесии. Связывание одного компонента в сравнении с другим в растворе может быть измерено с использованием методик, таких как спектроскопия или калориметрия. Garde, A., and Connors, K.A. "Binding of Substituted Acetic Acids to -циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-19.gif" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -cyclodextrin in Aqueous Solution" J. Pharm. Sci. 1997 86(11): 1210-1214. Для того чтобы различить связывание включения от других возможных эффектов солюбилизации агентов трехкомпонентных рецептур, таких как наложение или гидротропия, требуются методы для определения константы связывания одного из связанных с циклодекстрином компонентов в присутствии других конкурирующих связывающихся агентов. Способность находить различия между связыванием и другими формами взаимодействия существенна для понимания и создания оптимальных рецептур.
В настоящем изобретении метод определения констант связывания использует равновесный диализ при разработке парентеральных рецептур многократного применения, содержащих SBE-CD и консервант. В частности, метод был применен в разработке парентеральных рецептур, содержащих соединение формулы Ia, циклодекстрин (SBE-CD) и консервант (метакрезол). Этот подход применим к соединениям, иным, чем соединение формулы Ia в разработке парентеральных рецептур, и находится в границах настоящего изобретения. Разработка рецептур с использованием этого подхода привела к оптимизации связывания циклодекстрина с лекарственным средством и не связывания с консервантом. Значимость этой методики заключается в ее способности измерять константу связывания многочисленных соединений, конкурирующих за связывание с циклодекстрином. Экспериментальные данные по диализу также обеспечивают легко интерпретируемое представление связывания в рецептуре путем визуализации степени взаимодействия по равновесию, устанавливающемуся после диализа.
Равновесный диализ позволяет рассчитывать константы связывания путем моделирования результирующей скорости диффузии через полупроницаемую мембрану с равновесной конечной точкой. Равновесный диализ выполняется путем предоставления возможности субстрату в растворе, содержащем связанный субстрат и лиганд, в донорном отсеке прибора для равновесного диализа (в ячейке), прийти со временем в равновесие с акцепторным отсеком. Ono, N., Hirayama, F., Arima, H., Uekama, K. "Determination oh Stability Constant of -циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-8.gif" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -Cyclodextrin Complexes Using the Membrane Premeation Technique and the Permeation Behavior of Drug Competing Agent-
-циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-8.gif" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -Cyclodextrin Ternary Systems" Eur. J. Pharm. Sci. 1999 9: 133-139. Акцепторная ячейка не содержит лиганд. Мембрана является полупроницаемой, обычно позволяя веществам с низкой молекулярной массой свободно диффундировать, в то время как циклодекстрин (MW = 2163) остается в донорном отсеке. Отбор проб из обоих отсеков с течением времени дает профиль время-концентрация субстрата как в донорном, так и в акцепторном отсеках диализной ячейки.
Математическая модель, описывающая скорость диффузии лекарственного средства через мембрану, может быть выведена для систем, содержащих два или более компонентов в растворе. Скорость диализа и константа связывания для субстратов получены путем решения уравнения, используя программу нелинейной аппроксимации кривой. В зависимости от взаимодействий между компонентами возможно описать конкурирующее связывание, которое имеет место в растворе. Равновесная константа связывания является мерой относительной концентрации метакрезола, связанного с SBE-CD в соответствии с уравнением химического равновесия ниже: S = мета-крезол, L = SBE-CD. S:L означает комплекс, сформировавшийся между метакрезолом и SBE-CD.
Анализ растворимости
Цитратная соль соединения формулы Ia имеет растворимость 2,7 мг/мл при рН 4,2 в 0,02 М фосфатном/0,02 М ацетатном буферном растворе. Обычные методы растворимости выполняли первоначально, чтобы определить растворимость и константу связывания соединения формулы Ia и консерванта с SBE-CD. Эти исследования делают возможным определение стехиометрии связывания между SBE-CD и соединением формулы Ia, как видно из линейного наклона соотношения молярной растворимости соединения формулы Ia и SBE-CD (фиг.1).
Связывание с метакрезолом вычисляли с использованием анализа растворимости. Эксперимент выполняли при различных концентрациях соединения формулы Ia для определения, существует ли какое-либо влияние присутствия в растворе лекарственного средства на константу связывания метакрезола. Растворимость метакрезола измеряли в избытке (насыщении) метакрезола, и равновесная константа связывания была вычислена с использованием следующего уравнения:
-циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="" height=100 BORDER="0" TI="CF" HE="12" WI="32">
Где St представляет собой общую растворимость метакрезола, s0 является истинной растворимостью метакрезола, Lt представляет собой концентрацию SBE-CD (лиганда) и K 11 является равновесной константой связывания метакрезола в предположении стехиометрии связывания 1:1.
Полученная с использованием метода растворимости равновесная константа связывания метакрезола в среднем по исследованию равнялась 27,6 М -1. Влияние на связывание присутствия соединения формулы Ia было минимальным, как показано в таблице 1. Эти данные были использованы для сравнения результатов с исследуемым в настоящее время методом равновесного диализа. Соединение формулы Ia имело константу связывания 1040 М-1 при рН 4,4.
| Таблица I | ||||
| Соединение формулы Ia [мМ] | Наклон | y-пересечение [мМ] | R2 | K11 (равновесие) |
| 0,00 | 0,46 | 34,06 | 0,88 | 24,53 |
| 10,67 | 0,46 | 33,15 | 0,95 | 25,78 |
| 21,34 | 0,53 | 32,15 | 0,92 | 35,46 |
| 42,67 | 0,43 | 31,15 | 0,97 | 24,59 |
| Средняя константа связывания, М -1 | 27,59 | |||
| Таблица I: Вычисленные константы связывания для метакрезола в экспериментах по насыщенной растворимости при варьировании SBE-CD и лекарственного средства (соединения формулы Ia). Наклон растворимости метакрезола от концентрации SBE-CD был использован для оценки связывания. Добавление соединения формулы Ia не изменяет существенно концентрацию метакрезола. | ||||
Метод равновесного диализа
В первоначальных экспериментах была установлена скорость потока равновесного диализа для соединения формулы Ia и для метакрезола через 500 MWCO диализную мембрану. Три различные концентрации соединения формулы Ia были первоначально загружены в донорную сторону диализного отсека. Образцы отбирали в различные интервалы времени и концентрацию свободных компонентов измеряли с использованием ВЭЖХ. Равновесия достигали для каждой тестированной системы примерно за 4 дня. Гладкая линия являлась построением данных с использованием модели для единой системы, представленной в обсуждении. Точка равновесия для всех этих контрольных экспериментов достигалась после того, как 50% общего количества лекарственного средства равномерно распределялось в донорной и акцепторной сторонах отсека. Это асимптотическое приближение к равновесию было смоделировано, и была вычислена скорость диализа, таблица II.
| Таблица II | |||||
| Аппроксимированное соотношение | Соединение формулы Ia | Метакрезол [мМ] | SBE-CD [мМ] | k (час -1) | Keq [М-1] |
| 1:1 | 1,0 | 1,0 | 0,015 | 740 | |
| 1:2 | 0,5 | 1,0 | 0,013 | 1092 | |
| 1:4 | 0,25 | 1,0 | 0,012 | 1444 | |
| 1:1 | 1,1 | 1,0 | 1,984 | 88 | |
| 1:2 | 0,6 | 1,0 | 2,182 | 75 | |
| 1:4 | 0,3 | 1,0 | 2,761 | 85 | |
| 1:1 | 1,0 | 1,0 | 1,0 | 0,018 | 690 |
| 1:2 | 0,5 | 0,5 | 1,0 | 0,013 | 720 |
| 1:4 | 0,25 | 0,25 | 1,0 | 0,011 | 520 |
| Таблица II. Вычисленные по методу равновесного диализа константы связывания. Асимптотическая скорость диффузии была построена по уравнению 11 с использованием программы численной линейной аппроксимации для получения констант связывания. | |||||
Первичный метод анализа данных был проведен для выполнения вычислений из данных равновесного диализа, как описано ниже. В частности, скорость диффузии через мембрану была рассчитана с использованием следующих уравнений:
Скорость диффузии из донорной фазы определяли по следующему соотношению:
| [D]t-[D] eq=([D]0-[D]eq )e(-2kt) | (1) |
Скорость диффузии в акцепторную фазу:
| [D]eq-[D] t=[D]eqe(-2kt) | (2) |
где
k = константа скорости проницания, мин-1
[D]0 = концентрация в донорной или акцепторной фазе в нулевой момент времени 0
[D]t = концентрация в донорной или акцепторной фазе в момент времени t
[D]eq = концентрация в донорной или акцепторной фазе в равновесии
t = время (мин)
Основанием для расчета в присутствии SBE-CD явилось предположение, что комплексообразование происходит только в донорной фазе в соответствии со стандартной реакцией комплексообразования:
Дифференциальное уравнение, определяющее диффузию лекарственного средства в акцепторную фазу, дано ниже:
| (3) |
Материальный баланс по лекарственному средству в системе описан ниже:
| [D]tot=[D] F+[D]A+[D:CyD] | (4) |
где [D]F и [D]A представляют собой свободную лекарственную форму в донорном отсеке и свободную лекарственную форму в акцепторном отсеке, соответственно. Материальный баланс по циклодекстрину в системе, удерживаемому в пределах донорной фазы, описан ниже:
| [CyD]tot=[CyD] F+[D:CyD] | (5) |
Подстановка концентрации лекарственного средства в комплексе из уравнения материального баланса (eq) в равновесное соотношение дает
| (6) |
Решение относительно свободного лекарственного средства и подстановка в уравнение 3 приводит к
| (7) |
Упрощение приводит к
| (8) |
Использование материального баланса по циклодекстрину и решение для свободного циклодекстрина в рамках известных величин дает
| (9) |
Замена свободной лекарственной формы DF его равновесным соотношением приводит к
| (10) |
Решение квадратного трехчлена относительно CyDF дает
 -циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="" height=100 BORDER="0"> | (11) |
Величина CyDF может быть подставлена в уравнение 8. Полное решение с использованием уравнений 8 и 11 делает возможным определение как равновесной константы связывания К, так и скорости диффузии k в акцепторную фазу, используя время, данные по концентрации и начальные условия.
Пробоотбор удаляет более высокие концентрации лекарственного средства (например, соединения формулы Ia) с донорной стороны диализной камеры, что приводит к тому, что необработанные данные изображают концентрации, пришедшие в равновесие с асимметричной центральной точкой ниже 50%. Это смещение из-за пробоотбора было исправлено и графики были нормированы, чтобы изображать 50% центральную точку. Это нормирование использовали до аппроксимации кривых по модели.
Используемый метод дал измеренную константу связывания лекарственного средства и SBE-CD. Величина, полученная методом равновесного диализа, была равна 1092 М-1 (±352 М-1, n=3) в сравнении с 1040 М -1 (n=1) для метода растворимости. Константа связывания для консерванта и SBE-CD, по методу растворимости, была равна 28 М-1 (n=1) в сравнении с 83 М -1 (±7 М-1) по методу равновесного диализа. Данные демонстрируют, что в двухкомпонентных системах как лекарственное средство (например, соединение формулы Ia), так и консервант связываются с полостью в SBE-CD, хотя в случае лекарственного средства константа связывания была в 13 раз больше, чем с консервантом. Данные показывали, что в трехкомпонентных системах, содержащих SBE-CD, лекарственное средство (например, соединение формулы Ia) и консервант в тестированных соотношениях, равновесный профиль подтвердил, что консервант не был связан с циклодекстрином благодаря конкурентному связыванию с лекарственным средством.
Основываясь на вышеописанных вычислениях для получения количества изолированного метакрезола и соединения формулы Ia, были разработаны предложенные рецептуры и оценена антимикробная эффективность. Фиг.3 демонстрирует отсутствие ясной взаимосвязи между общей концентрацией метакрезола, содержащейся в рецептуре, и логарифмом уменьшения популяции бактерий после 6 и 24 часов после введения известного количества Staphilococcus Aureus (то есть рецептуры, содержащие примерно 3 мг/мл мета-крезола, казалось, в равной степени имели логарифм уменьшения такой низкий как 0 и такой высокий как 4,6). Когда, однако, те же данные строят относительно вычисленной концентрации несвязанного метакрезола в рецептуре (фиг.4), взаимосвязь очевидна. Этот набор данных был получен для рецептур, содержащих от 9,0 до 11,0 мгА/мл соединения формулы Ia, от 2,5 до 4,75 мг/мл метакрезола и от 60 до 100 мг/мл SBE-CD. Появление плато при более высоких концентрациях обусловлено только благодаря ограничениям метода измерения бактериальной эффективности. Поскольку метод состоит в оценке популяции, не убитой консервантом, после того как вся популяция гибнет (то есть, ничего больше не определяется ˜100%), приведенная фигура принимает вид: логарифм уменьшения больше, чем величина, обычно находящаяся между 3 и 5.
Другим фактором является концентрация несвязанного соединения формулы Ia, поскольку более высокие концентрации, как было продемонстрировано, создают боль при инъекции. Более того, возникал риск преципитации, если концентрация достигала предела водной растворимости соединения формулы Ia при желаемом рН рецептуры примерно 4,4. Соответственно, уровень несвязанного соединения формулы Ia был минимизирован в попытке сохранить концентрацию ниже 2 мг/мл.
Два дополнительных параметра: (1) уровень общей концентрации метакрезола и (2) уровень циклодекстрина (например, SBE-CD) должны поддерживаться настолько низкими, насколько это возможно, в частности, ниже 80 мг/мл для предотвращения связывания и инактивации метакрезола. (См. фиг.4). Соответственно, рецептуры, содержащие от 9,0 до 11,0 мгА/мл соединения формулы I, от 2,5 до 4,75 мг/мл метакрезола и от 60 до 100 мг/мл SBE-CD были созданы для того, чтобы они содержали известное количество вычисленного несвязанного соединения формулы I и известное количество вычисленного несвязанного метакрезола. Рецептуры были проанализированы в отношении эффективности консерванта. Эти результаты представлены на фиг.4. Из этих результатов доверительный интервал надежной эффективности консерванта был определен и представлен на фиг.4.
Основываясь на этих результатах, предпочтительные рецептуры, содержащие вычисленные концентрации несвязанного метакрезола (2,8 мг/мл) и соединения формулы I (1,4 мг/мл), соответствующие черным ромбам на фиг.4, были выбраны. Эти рецептуры соответствовали фактической общей концентрации 10 мгА/мл соединения формулы I, 63 мг/мл SBE-CD и 3,3 мг/мл метакрезола при рН 4,4.
Принципы, описанные выше для разработки фармацевтической рецептуры для цитратной соли соединения формулы Ia, применимы для разработки других парентеральных рецептур, содержащих фармацевтические лекарственные средства, циклодекстрин и консервант. В частности, концентрации лекарственного средства, циклодекстрина и консерванта должны быть отрегулированы так, чтобы иметь минимальную концентрацию несвязанного циклодекстрина (2,1 мг/мл при использовании метакрезола).
Рецептура. Вообще, рецептуры получают, растворяя терапевтически эффективное количество соединения формулы Ia в водном фармацевтически приемлемом растворителе. Фармацевтически приемлемая соль соединения формулы I также может быть использована, например, такая как цитратная или малатная соли. Циклодекстрин добавляют к раствору в диапазоне концентраций от примерно 2% до примерно 40%. Предпочтительно циклодекстрин составляет от примерно 5% до примерно 20% фармацевтической композиции и более предпочтительно от примерно 5% до примерно 10%. Предпочтительно циклодекстрин является -циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-8.gif" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -циклодекстрином: 2-гидроксипропил
-циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-8.gif" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -циклодекстрином, сульфобутиловым эфиром
-циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-8.gif" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -циклодекстрина или другим фармацевтически приемлемым замещенным
-циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-8.gif" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -циклодекстрином. Консервант добавляют к рецептуре на основе веса.
Как использовано здесь, «терапевтически эффективное количество» единицы дозировки может обычно представлять собой от примерно 0,5 мг до примерно 500 мг активного ингредиента. Доза может варьироваться, однако, в зависимости от вида, разновидности и т.д. лечимого животного, серьезности болезни и массы тела животного. Соответственно, основываясь на массе тела, обычный диапазон доз активного ингредиента может быть от примерно 0,01 до примерно 100 мг на кг массы тела животного. Предпочтительно диапазон представляет собой от примерно 0,10 мг до примерно 10 мг на кг массы тела, более предпочтительно от примерно 0,2 до примерно 2 мг на кг массы тела.
Например, рецептура с 10 мгА/мл соединения формулы Ia делает возможным предпочтительным инъекционным объемом от 0,5 до 3,0 мл при дозе 1 мг/кг лечить животных весом от 5 до 30 кг, который охватывает большинство пациентов. Использование продукта для более крупных млекопитающих может быть обеспечено путем использования больших шприцев или многократных инъекций. Использование продукта для маленьких собак и кошек потребует меньших инъекционных объемов.
Ветеринарный практик или специалист в данной области будет способен определить дозировку, подходящую для отдельного индивидуального пациента, которая может варьироваться от вида, возраста, веса и ответа отдельного пациента. Вышеописанные дозировки являются примерными для среднего случая. Соответственно более высокие или более низкие диапазоны дозировок могут быть гарантированы в зависимости от вышеуказанных факторов и находятся в рамках данного изобретения.
Фармацевтические композиции соединения формулы Ia были разработаны таким образом, чтобы терапевтически эффективное количество соединения формулы Ia могло быть введено пациенту с приемлемой толерантностью в месте инъекции. Толерантность в месте инъекции была измерена путем обследования пациента на признаки реакции, включающие эритему (размер), припухлость кожи (размер), боль при пальпации и отек. В таблице IV представлено детальное разъяснение системы подсчета: балл от 0 (отсутствие реакции) до 4 (тяжелая реакция) давали каждой характеристике и каждому месту инъекции ежедневно.
Рецептура с цитратной солью соединения формулы Ia самозабуферивается при помощи цитратного противоиона (21,3 мМ) при исходном рН примерно 4,4. Если, однако, используются другие фармацевтически приемлемые соли, может потребоваться фармацевтически приемлемый буфер. Предпочтительная рецептура представляет собой 10 мгА/мл соединения формулы Ia в качестве цитратной моногидратной соли, примерно 63 мг/мл SBE-CD и примерно 3,3 мг/мл метакрезола при рН 4,4.
ОБЩИЕ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ МЕТОДИКИ
А. Метод равновесного диализа для определения констант связывания
Материалы. Мета-крезол (MW=108,14) был получен от Aldrich, St. Louis, MO. Был использован 20-ячеечный диализатор, снабженный тефлоновыми ячейками на 2 мл и асимметричными мембранами из эфира целлюлозы 500 MWCO (Spectrum, Rancho Dominguez, CA). Соединение Ia (свободное основание = 468,69) может быть получено, как изложено в секции В экспериментальных методик.
Получение рецептур. Три различные тестовые рецептуры были приготовлены из отдельных однокомпонентных контролей; двухкомпонентные системы, содержащие либо лекарственное средство, либо метакрезол и SBE-CD, или трехкомпонентные системы, содержащие лекарственное средство, метакрезол и SBE-CD. Рецептуры были получены при комнатной температуре при различных соотношениях и концентрациях за 24 часа до тестирования для обеспечения равновесного связывания. Рецептуры были получены путем растворения сначала SBE-CD в соответствующей концентрации и затем добавления лекарственного средства и метакрезола, давая им возможность раствориться в растворе циклодекстрина.
Метод диализа. 1 мл комплексированной или контрольной рецептуры загружали с донорной стороны мембраны. С акцепторной стороны загружали 1 мл цитрата натрия (рН 4,4) для поддержания ионного равновесия по другую сторону камеры. В различные моменты времени отбирали 50 мкл аликвоты как с донорной, так и с акцепторной сторон равновесной диализной камеры и анализировали с использованием ВЭЖХ. Профиль концентрации лиганда от времени (мМ) с каждой стороны строили для каждого соотношения.
Метод ВЭЖХ. Неразбавленные образцы загружали в ВЭЖ хроматограф HP 1100, оснащенный колонкой XDB-C8 Aglient Eclipce. Общее время эксперимента 10 мин. Подвижная фаза состояла из 25% 25 мМ ацетата аммония и 75% метанола. Регистрацию проводили, используя поглощение при 271 нм или флуоресцентную детекцию. Пики интегрировали, используя программу Turbochrome [Perkin ElmerSan Jose, CA].
Контрольные эксперименты. Скорости диализа соединения формулы Ia и метакрезола измеряли в одиночку через мембрану 500 MWCO. Различные концентрации метакрезола и соединения формулы Ia помещали с донорной стороны равновесного диализатора. Концентрации соответствующих экспериментов с комплексообразованием выбирали, чтобы они соответствовали концентрациям лекарственного средства и консерванта в однокомпонентных системах.
Двухкомпонентные системы. Эти эксперименты были выполнены для количественного определения связывания либо лекарственного средства, либо метакрезола с SBE-CD. Были тестированы три отдельные смеси, которые состояли из соединения формулы Ia с SBE-CD, метакрезола с SBE-CD и лекарственного средства с метакрезолом. Молярные соотношения SBE-CD с лекарственным средством или консервантом были 1:1, 2:1 и 4:1.
Трехкомпонентные системы. Несколько экспериментов были проведены для того, чтобы тестировать влияние всех трех компонентов рецептуры на скорость диализа лекарственного средства и консерванта. В них концентрация SBE-CD была фиксированной, в то время как количества/соотношения соединения формулы Ia и метакрезола варьировали.
Обработка данных . Первичные данные нормализовали для того, чтобы исправить изменение концентрации с донорной и акцепторной сторон отсека. Исправленные общие проценты преобразовывали в теоретические мМ концентраций. Эти данные были затем одновременно построены в соответствии с уравнениями, представленными в разделе обсуждения результатов, используя программу Micromath Scientist.
В. Получение соединений формул I и Ia
Вообще, соединения формул I и Ia могут быть получены способами, которые включают процессы, известные в химии, особенно в свете описания, содержащегося здесь и раскрытого в патентах США 6222038 и 6255320. Соединения формул I и Ia могут быть получены при помощи различных других синтетических путей. В частности, соединение формулы Ia может также быть получено, как описано в находящейся на рассмотрении предварительной заявке США № 60/541323, разработанной и принадлежащей Pfizer, Inc. Определенные процессы для синтеза соединения формулы Ia, как более полно описано в вышеупомянутой находящейся на рассмотрении предварительной заявке, проиллюстрированы следующей реакционной схемой.
Следующая реакционная схема иллюстрирует одно возможное получение цитратной моногидратной соли соединения формулы Ia, соединения формулы Ic.
Схема I
На стадии А схемы I смесь соединения формулы VIa в спиртовом растворителе, таком как метанол, этанол или н-пропанол, но предпочтительно пропан-2-ол, необязательно также в присутствии воды, гидрируют над катализатором палладий на углероде при повышенной температуре (обычно 75-80°С) и давлении (обычно 50 фунтов на квадратный дюйм водорода). Специалист в данной области поймет, что другие катализаторы могут быть пригодны, такие как палладий на углероде, гидроксид палладия на углероде, платина на углероде, палладий на карбонате кальция или палладий на окиси алюминия (Al2O 3).
Сразу же, как образование промежуточного соединения (соединения VII) завершено, обычно через 1 час, соединение формулы VIII, обычно в виде раствора в соответствующем спиртовом растворителе, предпочтительно пропан-2-оле (изопропаноле, «IPA») добавляют к реакции без выделения соединения формулы VII и смесь необязательно перемешивают при повышенной температуре (30-120°С) в атмосфере азота. Сразу же, как достаточное количество промежуточного соединения IXa образовалось, атмосферу азота заменяют водородом. Реакцию затем необязательно перемешивают при повышенной температуре (примерно 30-120°С) и при повышенном давлении (обычно 50 фунтов на квадратный дюйм) до тех пор, пока не будет найдено, что образование соединения Ib завершено (обычно 18 часов). Реакционную смесь затем охлаждают (до примерно 20-25°С) и выпускают водород. Катализатор палладий на углероде удаляют фильтрованием и получающийся в результате раствор соединения Ib сразу используют для стадии В.
На стадии В реакционной схемы I раствор соединения Ib, обычно в смеси пропан-2-ола и воды, концентрируют дистилляцией, за которой следует добавление толуола. Смесь затем опять концентрируют дистилляцией, добавляя дополнительные толуол и воду по мере необходимости во время дистилляции, до тех пор пока достаточное количество изопропанола не будет удалено из смеси и соответствующий объем раствора не получают (обычно 2-4 объема на кг соединения Ib). Воду и толуол добавляют по мере необходимости (примерно 3,5 объема воды и примерно 5 объемов толуола). Специалист в данной области поймет, что другие растворители, иные чем толуол, такие как метиленхлорид, этилацетат, изопропилацетат или трет-бутилметиловый эфир могут быть использованы. рН регулируют до определенной точки (примерно от 11,5 до 13,5) добавлением водного гидроксида натрия и, если необходимо, соляной кислоты при перемешивании.
Сразу же, как соответствующий рН был достигнут, водную фазу удаляют разделением. Содержащую продукт органическую фазу затем концентрируют дистилляцией. Смесь пропан-2-ола и воды затем добавляют и смесь опять концентрируют дистилляцией. Добавление воды и пропан-2-ола и последующее концентрирование дистилляцией повторяют по мере необходимости, пока достаточное количество толуола (обычно менее чем 3% масс./масс. толуола по газохроматографическому анализу) не будет удалено из смеси и соответствующий объем раствора не будет достигнут (примерно 4 объема по отношению к соединению Ib), приводя к составу растворителя в конечной гранулированной суспензии, обычно более чем 80% мас./масс. пропан-2-ола, менее чем 20% мас./мас. воды и менее чем 3% мас./мас. толуола.
Сразу же, как был удален толуол, смесь охлаждают до тех пор, пока не происходит кристаллизация (обычно до 70-75°С). Получающуюся в результате суспензию затем охлаждают дальше (обычно до 20-25°С) и затем гранулируют в течение некоторого времени перед тем, как необязательно охлаждать далее до 0-5°С и перемешивать в течение некоторого времени. Твердое вещество затем собирают фильтрацией и осадок на фильтре промывают пропан-2-олом и сушат в вакууме при повышенной температуре (обычно 45-55°С) для получения соединения формулы Ia в виде кристаллического твердого вещества. Специалист в данной области поймет, что другие растворители, иные, чем пропан-2-ол, такие как метанол, этанол, н-пропанол, ацетонитрил, изопропилацетат, третичный амиловый спирт и 4-метил-2-пентанон могут быть использованы.
Как было обрисовано в общих чертах в необязательной стадии ВХ реакционной схемы, которая обычно не требуется, соединение Ib может быть далее очищено. Соединение Ib суспендируют в пропан-2-оле и смесь нагревают с обратным холодильником до получения раствора. Смесь затем нагревают до повышенной температуры, которая ниже температуры кипячения с обратным холодильником (примерно до 70-75°С) в течение примерно 1 часа, во время которого обычно происходит кристаллизация. Полученную в результате суспензию выдерживают при этой температуре в течение 1-2 часов и затем охлаждают (до примерно 20-25°С). После перемешивания при температуре окружающей среды в течение некоторого времени (обычно от 1 до 18 часов), твердое вещество собирают фильтрованием. Осадок на фильтре промывают пропан-2-олом и затем сушат в вакууме при повышенной температуре (примерно 45-55°С) для получения очищенного соединения формулы Ib в виде кристаллического твердого вещества. Специалист в данной области поймет, что другие растворители, иные, чем пропан-2-ол, такие как метанол, этанол, н-пропанол, ацетонитрил, изопропилацетат, третичный амиловый спирт и 4-метил-2-пентанон могут быть использованы.
На стадии С реакционной схемы, соединение Ib (1 молярный эквивалент) и безводная лимонная кислота (обычно 1,1 молярного эквивалента) соединяют в смеси ацетона (обычно 8-10 объемов) и воды (обычно 0,4 объема) и получающийся в результате раствор фильтруют. Большее количество ацетона (обычно 2 объема) затем добавляют для промывки оборудования по переносу соединения. К фильтрату добавляют фильтрованный эфирный растворитель, такой как метил трет-бутиловый эфир (трет-бутилметиловый эфир, «МТВЕ») или изопропиловый эфир («IPE») (обычно примерно 10 объемов) необязательно при повышенной температуре (30-45°С). Сразу же после того, как произошла кристаллизация, которую необязательно можно инициировать добавлением нескольких затравочных кристаллов, смесь гранулируют в течение некоторого времени (обычно 18 часов), обычно при 20-25°С, но необязательно при повышенной температуре (30-45°С) часть этого времени. Твердое вещество затем собирают фильтрованием. Осадок на фильтре промывают соответствующим фильтрованным эфирным растворителем и затем сушат при температуре ниже, чем 60°С (при комнатной температуре, если используют изопропиловый эфир) в вакууме необязательно при отсутствии воздуха или продувки азотом для получения соединения Ic, цитрата моногидрата, в виде кристаллического твердого вещества. Продукт может быть затем перемолот или просеян.
На необязательной стадии СХ чистота соединения Ic может быть улучшена путем растворения Ic в смеси ацетона (обычно 7 объемов) и воды (обычно 0,3 объема) при повышенной температуре (примерно 35-50°С). Смесь затем охлаждают и необязательно фильтруют. К получающейся в результате смеси затем добавляют фильтрованный эфирный растворитель, такой как метил трет-бутиловый эфир или изопропиловый эфир необязательно при повышенной температуре (30-45°С). Сразу же после того, как происходит кристаллизация, которую необязательно могли инициировать добавлением нескольких затравочных кристаллов, смесь гранулируют в течение некоторого времени (обычно 18 часов), обычно при 20-25°С, но необязательно при повышенной температуре (30-45°С) часть этого времени. Твердое вещество затем собирают фильтрованием. Осадок на фильтре промывают соответствующим фильтрованным эфирным растворителем и затем сушат при температуре ниже, чем 60°С (при комнатной температуре, если используют изопропиловый эфир) в вакууме необязательно при отсутствии воздуха или продувки азотом для получения соединения Ic, цитрата моногидрата, в виде кристаллического твердого вещества. Продукт может быть затем перемолот или просеян.
Другие фармацевтически приемлемые соли, иные, чем цитрат, могут быть использованы. Например, малат, малеат, мезилат, лактат и гидрохлорид или эквиваленты на их месте могут быть получены добавлением эквимолярного количества соответствующей кислоты к соединению формулы Ia, в виде раствора свободного основания.
С. Антимикробные консерванты, оцененные для фармацевтических композиций
Таблица III суммирует антимикробные консерванты, оцененные для использования в рецептурах. Каждый антимикробный консервант тестировали в наибольшей концентрации, используемой в настоящее время в готовых продуктах. Антимикробные консерванты были куплены в обычных источниках химических реактивов.
| Таблица III | ||
| Проверенные антимикробные консерванты | ||
| Антимикробный консервант | Процент (масс./об) | рН |
| Фенол | 0,5% | 4,4 |
| Мета-крезол | 0,3% | 4,4 |
| Мета-крезол + ЭДТА | 0,5% мета-крезола + 0,15% ЭДТА | 4,4 |
| Хлоркрезол | 0,1% | 4,4 |
| Хлоркрезол + ЭДТА | 0,1% + 0,15% ЭДТА | 4,4 |
| Хлорбутанол | 0,5% | 3,5 |
| Хлорбутанол и фенилэтанол | 0,5% каждого | 3,5 |
| Хлорбутанол и фенилэтанол | 0,5% хлорбутанола по весу/титрование фенилэтанола** | 3,5 |
| Фенилетанол | 0,5% | 3,5 |
| Тимерозал | 0,01% | 4,4 |
| Бензойная кислота | 0,2% | 3,5 |
| Бензетониумхлорид | 0,02% | 4,4 |
| Бензалкониумхлорид | 0,01% | 4,4 |
| Бензиловый спирт | 2,0% | 4,4 |
| Пропиленгликоль | 25% | 4,4 |
| Этанол | 15% | 4,4 |
| Бронопол | 0,1% | 5,0 |
| Сахароза | 50% | 4,4 |
| Хлоргексидина глюконат | 0,5% | 5,0 |
| **Титрование фенилэтанола из 0,5-0,1% с 0,1% инкрементами. | ||
Получение консервированных рецептур. Рецептуры получали, где позволяла растворимость с 5% и 10% (мас./об) SBE-CD. Антимикробные консерванты с оптимальной активностью при рН вне номинальной величины рецептуры (рН 4,4) титровали или до 3,5 или до 5,0, используя 1 N HCl или 1 N NaOH. Был приготовлен маточный раствор или 10% или 5% (мас./об) SBE-CD, содержащий 10 мгА/мл соединения формулы Ia цитрата. Консервант добавляли в соответствующую рецептуру по весу.
Тестирование антимикробной эффективности . Гибридный USP <24>/Ph. Eur. 2000 тест антимикробной эффективности (АЕТ) выполняли следующим образом: 20 мл лекарственного продукта по отдельности заражали 0,1-0,2 мл культуры бактерий или грибков согласно краткому сборнику требований USP/Ph.Eur. Конечная концентрация организмов в тестовом образце находилась между 1×10 5 и 1×106 колониеобразующих единиц/мл. В начальный момент времени, через 6-часовой, 24-часовой, 7-дневный, 14-дневный и 28-дневный временные интервалы 1 мл зараженного продукта переносили к 9 мл регенерирующего разбавителя, который, как было проверено, подтверждал нейтрализацию антимикробного консерванта. 1 мл разбавленного образца переносили затем в стерильную чашку Петри и соединяли с 15-20 мл агарового бульона для культивирования организмов. Чашки затем инкубировали от 3 до 5 дней, после чего подсчитывали колонии. Первоначальное заражение организмами затем вычисляли на основе разбавления первоначального образца. Величины описывали как «логарифм уменьшения». Организмы, используемые в АЕТ тестировании, перечислены в таблице IV.
| Таблица IV | ||
| Организмы, тестированные гибридным (USP/Ph.Eur.) тестом на антимикробную эффективность | ||
| Тестовый организм | Требования USP | Требования Ph. Eur. |
| Escherichia coli (грамотрицательная бактерия) (АТСС8739) | Да | Только для орально принимаемых жидкостей |
| Pseudomonas aeruginosa (грамотрицательная бактерия) (АТСС9027) | Да | Да |
| Staphylococcus aureus (грамположительная бактерия) (АТСС6538) | Да | Да |
| Candida albicans (грибок) (АТСС10231) | Да | Да |
| Aspergillus niger (плесень) (АТСС16404) | Да | Да |
Вообще, требования теста USP являются менее строгими, чем требования Ph. Eur., которые обычно содержат требование на немедленную бактериологическую активность. Требования Ph. Eur. показанные в таблице III, содержат спецификацию либо «Критерия А», либо «Критерия В», в зависимости от скорости уменьшения числа микроорганизмов, причем критерий А требует повышенной бактерицидной скорости. Для того, чтобы удовлетворять объединенному гибридному тесту, первоначальный счет микроорганизмов при заражении следует понизить до количеств, перечисленных в таблице V.
| Таблица V | ||||
| Требования USP/Ph. Eur. для АЕТ (водных парентеральных) (Individual USP 24 и Ph. Eur. 2000) | ||||
| Требуемый логарифм уменьшения числа организмов | ||||
| Бактерии | Грибки (дрожжи/плесень) | |||
| USP | Ph. Eur. | USP | Ph. Eur. | |
| 6 часов | -- | 2 (крит. А) | -- | -- |
| 24 часа | 3 (крит. А) 1 (крит. В) | |||
| 7 день | 1,0 | -- (крит. А) 3 (крит. В) | Отсутствие роста по отношению к первоначальному | 2 (крит. А) |
| 14 день | 3,0 | -- | Отсутствие роста по отношению к первоначальному | 1 (крит. В) |
| 28 день | Отсутствие роста с 14 дня | Ничего не восстанавливается (крит. А) Отсутствие роста (крит. В) | Отсутствие роста по отношению к первоначальному | Отсутствие роста |
| Объединенные требования USP/Ph. Eur. | ||||
| Требуемый логарифм уменьшения числа организмов | ||||
| Бактерии | Грибки (дрожжи/плесень) | |||
| 6 часов | 2 | -- | ||
| 24 часа | 3 (принят 1, Ph. Eur. В) | -- | ||
| 7 день | 3 | 2 | ||
| 14 день | 3,0 | 1 | ||
| 28 день | Ничего не восстанавливается | Отсутствие роста | ||
Измерение стабильности . Потенциальные примерные рецептуры оценивали при различных условиях ускоренной стабильности для того, чтобы определить эффективность и чистоту соединения формулы Ia, содержание консерванта и SBE-CD. Например, в одном исследовании ускоренной стабильности потенциальные примерные рецептуры помещали в печи для определения стабильности для измерения краткосрочной температурной стабильности. Пузырьки с образцами (20 мл) помещали в 70°С, 50°С, 30°С, 5°С температурные камеры и анализировали эффективность и чистоту соединения формулы Ia, содержание антимикробного консерванта и SBE-CD в 1-, 3-, 6- и 12-недельные временные интервалы. Анализы чистоты и эффективности для измерения соединения формулы Ia, а также содержания антимикробного консерванта и SBE-CD, выполняли с использованием ВЭЖХ методологии. SBE-CD анализировали, используя GTP 5984.
D. Толерантность в месте инъекции
Рецептуры с соединением формулы Ia оценивали на толерантность в месте инъекции (здесь и далее «IST»). Вообще, рецептуры, не содержащие SBE-CD, являлись плохо переносимыми. Рецептуры, содержащие 10 мгА/мл соединения формулы Ia, 10% избыток мета-крезола (0,33% масс./об) и примерно от 6,8% до 7,6% SBE-CD оценивали по IST. В частности, рецептуры, содержащие 10 мгА/мл соединения формулы Ia, от 61 до 72 мг/мл SBE-CD и от 3,2 до 4,2 мг/мл метакрезола тестировали на толерантность в месте инъекции, и все они были хорошо переносимыми.
Рецептуры тестировали на группах из 4 собак, содержащих биглей и дворняжек. В каждый из четырех последовательных дней собаки ежедневно получали две подкожные инъекции только разбавителя в качестве контроля под левую лопатку в дозе 0,1 мл/кг и активную рецептуру (10 мгА/мл соединения формулы Ia в дозе 1 мг/кг) под правую лопатку. Собак наблюдали ежедневно в отношении признаков реакции в месте инъекции и балльную оценку от 0 до 4 (см. таблицу VI) приписывали каждому из следующих параметров: боль при инъекции, эритема, припухлость ткани, боль при пальпации и отек. Собак наблюдали ежедневно до 5 дня (24 часа после последней дозы).
| Таблица VI | ||||
| Балльная оценка толерантности в месте инъекции | ||||
| Боль при инъекции | Эритема | Припухлость ткани | Боль при пальпации | Отек |
| 0 = отсутствие реакции | 0 = отсутствие эритемы | 0 = отсутствие припухлости | 0 = отсутствие боли | 0 = отсутствие отека |
| 1 = очень слабый ответ съеживание, взгляд на место укола | 1 = очень слабая эритема, едва заметная | 1 = очень слабая реакция, едва заметная | 1 = мягкая боль при глубокой пальпации | 1 = очень мягкий отек, едва заметный |
| 2 = мягкий ответ, легко озвученный, облизывание/ царапанье места укола | 2 = средняя эритема, хорошо определенная | 2 = едва заметная реакция, | 2 = мягкая боль при пальпации | 2 = мягкий пальпируемый отек |
| 3 = умеренный ответ, значительно озвученный, укус в место укола, двигательная активность | 3 = умеренная эритема, реакция 1-2 см | 3 = умеренная, прощупываемая при пальпации | 3 = умеренная боль | 3 = умеренно пальпируемый очаговый отек |
| 4 = тяжелый ответ, аналогичный 3, >5-минутное проявление | 4 = тяжелая эритема свекольное покраснение образование струпа | 4 = тяжелая реакция >2 см | 4 = тяжелая боль при пальпации | 4 = тяжелый распростра-ненный отек |
Эксперименты
Эксперимент 1: Выбор антимикробного консерванта
для инъецируемого соединения формулы Ia
Исследование А (широкий скрининг антимикробных консервантов)
Эффективность нескольких различных антимикробных консервантов в комбинации с соединением формулы Ia и SBE-CD была исследована. Литература указывала, что антимикробными консервантами, удовлетворяющими как требованиям USP, так и требованиям Ph. Eur. по критериям А и В, являлись этанол, пропиленгликоль, бензойная кислота, тимерозал, метакрезол (Lucchini, J.J.; Corre, J.; and Cremieux, A. "Antibacterial activity oh phenolic compounds and aromatic alcohols" Res. Microbiol. 141, 499-510 (1990) и комбинация хлорбутанол/фенилэтанол.
В таблице VII представлены результаты скрининга различных антимикробных консервантов или их комбинаций.
-циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="" height=100 BORDER="0"> Рецептуры, содержащие эти антимикробные консерванты, были далее оценены в отношении физической и химической стабильности и толерантности в месте инъекции. (См. таблицу VIII). Приемы с использованием антимикробных консервантов, таких как сорастворители, этанол и пропиленгликоль, не соответствовали приемлемой IST. Более того, рецептуры с бензойной кислотой также демонстрировали плохие результаты IST.
Исследование В (скрининг антимикробных консервантов, удовлетворяющих Ph. Eur. критерию В)
Все антимикробные консерванты, удовлетворяющие Ph. Eur. критерию В, были далее проверены на толерантность в месте инъекции и стабильность. Образцами, обозначенными в таблицах VII и IX, которые удовлетворяли критерию В, являлись тимерозал, мета-крезол и бензойная кислота. Эти рецептуры оценивали по стабильности и по IST (таблица VII).
Результаты исследований показали, что стабильность тимерозала, с коммерческой точки зрения, оставалась нежелательной для рецептуры. Только 30% тимерозала оставалось в рецептуре после 1 недели хранения при 70°С и полную потерю наблюдали после 6 недель. (Tan, M., Parkin, L.E. "Route of decomposition of thimerosal" Int. J. Pharm. 195 No.1-2, 23-34, 2000.).
Бензойная кислота демонстрировала отсутствие детектируемой потери через 12 недель хранения при 70°С, что является достаточно стабильным для рецептуры. Хотя стабильность бензойной кислоты была приемлемой, боль при инъекции от умеренной до тяжелой исключила ее из дальнейшего рассмотрения.
С другой стороны, рецептуры, содержащие метакрезол, показывали прекрасную стабильность и толерантность в месте инъекции. Соответственно, метакрезол был определен в качестве предпочтительного антимикробного консерванта благодаря прекрасной толерантности в месте инъекции, а также как надежно удовлетворяющий Ph. Eur. критерию А эффективности консерванта. Благодаря этим подходящим техническим характеристикам, рецептура была оптимизирована по отношению к концентрации SBE-CD, приводя к рецептуре с большими границами растворимости, надежной антимикробной эффективностью консерванта и приемлемой толерантностью в месте инъекции.
Стабильность метакрезола и соединения формулы Ia в рецептурах, содержащих 3 мг/мл метакрезола, 100 мг/мл SBE-CD и 10 мгА/мл соединения формулы Ia показана в таблице IX. Надежная стабильность как соединения формулы Ia, так и метакрезола была продемонстрирована. Соединение формулы Ia испытало 3% потерю (относительно 1 недели при 5°С) после 12 недель при 70°С, в то время как эффективность мета-крезола понизилась на 2%.
| Таблица IX | |||||
| Стабильность метакрезола и соединения формулы Ia | |||||
| Соединение формулы Ia СОДЕРЖАНИЕ (% от исходного) | Метакрезол содержание (% от исходного) | ||||
| Условия хранения | Временная точка | Обработанный смолой | Не обработанный смолой | Обработанный смолой | Не обработанный смолой |
| 70°C | 1 неделя | 94 | 94 | 100 | 100 |
| 2 недели | 94 | 94 | 103 | 103 | |
| 3 недели | 92 | 94 | 100 | 102 | |
| 6 недель | 92 | 93 | 101 | 101 | |
| 12 недель | 93 | 93 | 100 | 100 | |
| 50°C | 1 неделя | 95 | 96 | 99 | 100 |
| 3 недели | 95 | 93 | 103 | 101 | |
| 6 недель | 96 | 94 | 104 | 102 | |
| 12 недель | 95 | Не тестировали | 100 | Не тестировали | |
| 5°C | 1 неделя | 97 | 96 | 102 | 102 |
| 3 недели | 96 | 95 | 104 | 103 | |
| 6 недель | 95 | 94 | 104 | 102 | |
| 12 недель | 94 | 94 | 98 | 98 | |
| ICH фотостабильность | 1X ICH UV/FI | 92 | 93 | 102 | 102 |
Предпочтительные варианты осуществления
A. Фармацевтическая композиция, содержащая терапевтически эффективное количество активного фармацевтического ингредиента, -циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-8.gif" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -циклодекстрин, фармацевтически приемлемый консервант, фармацевтически приемлемый разбавитель и необязательный фармацевтически приемлемый носитель, в которой консервант демонстрирует фармацевтически приемлемую антимикробную консервирующую эффективность.
B. Фармацевтическая композиция в соответствии с предпочтительным вариантом осуществления А, в которой -циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-8.gif" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -циклодекстрин является 2-гидроксипропил-
-циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-8.gif" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -циклодекстрином или сульфобутиловым эфиром
-циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-8.gif" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -циклодекстрина.
C. Фармацевтическая композиция в соответствии с предпочтительным вариантом осуществления В, в которой консервант выбирают из тимерозала, пропиленгликоля, фенола или мета-крезола или их комбинации.
D. Фармацевтическая композиция в соответствии с предпочтительными вариантами осуществления В или С, в которой консервант имеет величину связывания с циклодекстрином, меньшую, чем величина связывания активного фармацевтического ингредиента с циклодекстрином.
E. Фармацевтическая композиция в соответствии с предпочтительным вариантом осуществления D, в которой концентрация консерванта равна от примерно 0,1 мг/мл до примерно 600 мг/мл.
F. Фармацевтическая композиция в соответствии с предпочтительным вариантом осуществления Е, в которой консервантом является мета-крезол и концентрация консерванта равна от примерно 0,1 мг/мл до примерно 20 мг/мл.
G. Фармацевтическая композиция в соответствии с предпочтительным вариантом осуществления F, в которой от примерно 1 мг/мл до примерно 5 мг/мл мета-крезола не связано с циклодекстрином.
H. Фармацевтическая композиция в соответствии с предпочтительным вариантом осуществления G, в которой примерно 2,5 мг/мл консерванта не связано с циклодекстрином.
I. Фармацевтическая композиция в соответствии с предпочтительным вариантом осуществления D, в которой величина связывания активного фармацевтического ингредиента с циклодекстрином находится между 500 М-1 и 10000 М-1 .
J. Фармацевтическая композиция в соответствии с предпочтительным вариантом осуществления I, в которой величина связывания активного фармацевтического ингредиента с циклодекстрином находится между 800 М-1 и 3000 М-1 .
K. Фармацевтическая композиция в соответствии с предпочтительным вариантом осуществления D, в которой активный фармацевтический ингредиент имеет константу связывания с циклодекстрином, которая больше или равна удвоенной константе связывания для консерванта.
L. Фармацевтическая композиция в соответствии с предпочтительным вариантом осуществления К, в которой константа связывания больше или равна пятикратной константе.
M. Фармацевтическая композиция в соответствии с предпочтительным вариантом осуществления L, в которой константа связывания больше или равна десятикратной константе.
N. Фармацевтическая композиция в соответствии с предпочтительным вариантом осуществления D, имеющая антимикробную эффективность против бактерий, такую что концентрация бактерий уменьшается на 2 или более порядков после 6 часов, на 3 или более порядков после 24 часов и обеспечивающую нулевой рост бактерий после 28 дней.
O. Фармацевтическая композиция в соответствии с предпочтительным вариантом осуществления N, в которой бактериями являются Escherichia coli (грамотрицательная бактерия) (АТСС8739), Pseudomonas aeruginosa (грамотрицательная бактерия) (АТСС9027), Staphylococcus aureus (грамположительная бактерия) (АТСС6538).
P. Фармацевтическая композиция в соответствии с предпочтительным вариантом осуществления О, имеющая антимикробную эффективность против грибка и плесени, такую что концентрация грибка или плесени уменьшается на 2 или более порядков после 7 дней, на 1 порядок после 14 дней и обеспечивает отсутствие увеличения грибка или плесени после от 14 до примерно 28 дней.
Q. Фармацевтическая композиция в соответствии с предпочтительным вариантом осуществления Р, в которой грибком является Candida albicans (грибок) (АТСС10231)
R. Фармацевтическая композиция в соответствии с предпочтительным вариантом осуществления Р, в которой плесенью является Aspergillus niger (плесень) (АТСС16404).
S. Фармацевтическая композиция в соответствии с предпочтительным вариантом осуществления D, в которой антимикробная эффективность удовлетворяет критериям А и В по Ph. Eur. и критериям AET по USP.
T. Фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы I
в которой R2 выбирают из группы, состоящей из метила, этила, изопропила, втор-бутила и трет-бутила, фармацевтически приемлемого -циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-8.gif" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -циклодекстрина, фармацевтически приемлемого консерванта, фармацевтически приемлемого разбавителя и необязательного фармацевтически приемлемого эксципиента.
U. Фармацевтическая композиция в соответствии с предпочтительным вариантом осуществления Т, в которой -циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-8.gif" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -циклодекстрин является 2-гидроксипропил-
-циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-8.gif" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -циклодекстрином или сульфобутиловым эфиром
-циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-8.gif" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -циклодекстрина.
V. Фармацевтическая композиция в соответствии с предпочтительным вариантом осуществления U, в которой фармацевтически приемлемый консервант выбирают из тимерозала, пропиленгликоля, фенола или мета-крезола или их комбинации.
W. Фармацевтическая композиция в соответствии с предпочтительным вариантом осуществления V, в которой консервантом является метакрезол.
X. Фармацевтическая композиция в соответствии с предпочтительным вариантом осуществления W, имеющая рН в интервале от примерно 4 до примерно 5.
Y. Фармацевтическая композиция в соответствии с предпочтительными вариантами осуществления W или Х, в которой от примерно 1 мг/мл до примерно 5 мг/мл консерванта, то есть мета-крезола, не связано с циклодекстрином.
Z. Фармацевтическая композиция в соответствии с предпочтительным вариантом осуществления Y, в которой соединение формулы I или его фармацевтически приемлемая соль находится в количестве от примерно 0,1 мг/мл до примерно 100 мг/мл и -циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-8.gif" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -циклодекстрин в количестве от примерно 20 мг/мл до примерно 200 мг/мл и консервантом является метакрезол.
A1. Фармацевтическая композиция в соответствии с предпочтительным вариантом осуществления Z, в которой -циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-8.gif" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -циклодекстрин находится в количестве от примерно 55 мг/мл до примерно 100 мг/мл и метакрезол в количестве от примерно 2,5 мг/мл до примерно 3,5 мг/мл.
B1. Фармацевтическая композиция в соответствии с предпочтительными вариантами осуществления Т, U, W или Х, в которой соединением формулы I является соединение формулы Ia
или его фармацевтически приемлемые соли.
С1. Фармацевтическая композиция в соответствии с предпочтительным вариантом осуществления В1, в которой соединение формулы Ia или его фармацевтически приемлемая соль находятся в количестве от примерно 0,1 мг/мл до примерно 100 мг/мл и -циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-8.gif" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -циклодекстрин в количестве от примерно 20 мг/мл до примерно 200 мг/мл и консервантом является мета-крезол, и он находится в количестве от примерно 1 мг/мл до примерно 5 мг/мл.
D1. Фармацевтическая композиция в соответствии с предпочтительным вариантом осуществления C1, в которой -циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-8.gif" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -циклодекстрин находится в количестве от примерно 55 мг/мл до примерно 100 мг/мл и консервантом является мета-крезол, и он находится в количестве от примерно 2,5 мг/мл до примерно 3,5 мг/мл.
E1. Фармацевтическая композиция в соответствии с предпочтительным вариантом осуществления D1, в которой -циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-8.gif" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -циклодекстрин является сульфобутиловым эфиром
-циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-8.gif" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -циклодекстрина.
F1. Фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы Ia
или его фармацевтически приемлемые соли, в которой соединение формулы Ia находится в количестве 10 мгА/мл, сульфобутиловый эфир -циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-8.gif" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -циклодекстрина в количестве примерно 63 мг/мл и метакрезол в количестве примерно 3,3 мг/мл, фармацевтически приемлемый носитель и необязательный фармацевтически приемлемый эксципиент.
G1. Фармацевтическая композиция в соответствии с предпочтительным вариантом осуществления F1, в которой фармацевтически приемлемая соль соединения формулы Ia является цитратом.
H1. Способ лечения рвоты или улучшения восстановления после анестезии у млекопитающих, включающий парентеральную инъекцию млекопитающему водной фармацевтической композиции, содержащей фармацевтическую композицию предпочтительных вариантов осуществления T, U, V, W, Х, F1 или G1, где -циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-8.gif" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -циклодекстрин присутствует в количестве, достаточном для улучшенной толерантности к инъекции в месте инъекции.
I1. Способ лечения рвоты или улучшения восстановления после анестезии у млекопитающих, включающий парентеральную инъекцию млекопитающему водной фармацевтической композиции, содержащей фармацевтическую композицию предпочтительного варианта осуществления F1.
J1. Способ в соответствии с предпочтительным вариантом осуществления I1, в котором фармацевтически приемлемая соль является цитратом.
K1. Способ в соответствии с предпочтительными вариантами осуществления I1 или J1, в котором введение является подкожным.
L1. Способ улучшения толерантности в месте инъекции при лечении рвоты или улучшении восстановления после анестезии у млекопитающих, включающий парентеральную инъекцию млекопитающему фармацевтически приемлемого раствора фармацевтической композиции, в соответствии с предпочтительными вариантами осуществления T, U, V, W, Х, F1 или G1.
M1. Способ улучшения толерантности в месте инъекции во время лечения рвоты или улучшения восстановления после анестезии у млекопитающих, включающий парентеральную инъекцию млекопитающему фармацевтически приемлемого раствора фармацевтической композиции, в соответствии с предпочтительным вариантом осуществления F1.
N1. Способ предпочтительного варианта осуществления М1, в котором фармацевтически приемлемая соль является цитратом.
O1. Способ получения консервированной API композиции, содержащей терапевтически эффективное количество API, -циклодекстринов для жидких лекарственных форм, патент № 2332997" SRC="/images/patents/133/2332997/2332997-8.gif" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -циклодекстрин и фармацевтически приемлемый консервант.
P1. Способ в соответствии с предпочтительным вариантом осуществления О1, в котором консервант имеет величину связывания с циклодекстрином, которая меньше величины связывания API с циклодекстрином.
Q1. Способ в соответствии с предпочтительным вариантом осуществления Р1, в котором консервант выбирают из тимерозала, пропиленгликоля, фенола или мета-крезола или их комбинации.
R1. Способ по предпочтительным вариантам осуществления Р1 или Q1, в котором величина связывания API с циклодекстрином больше, чем 50 М -1.
S1. Способ по предпочтительному варианту осуществления R1, в котором величина связывания API с циклодекстрином находится между 500 М-1 и 10000 М -1.
T1. Способ по предпочтительному варианту осуществления S1, в котором величина связывания API с циклодекстрином находится между 800 М-1 и 3000 М-1 .
U1. Способ по предпочтительному варианту осуществления Т1, в котором тест на антимикробную эффективность удовлетворяет критериям А и В Pharmaceopia Europa и критериям USP AET.
Класс A61K31/46 8-азабицикло [321] октан; его производные, например атропин, кокаин
Класс A61K47/10 спирты; фенолы; их соли
Класс A61K47/32 получаемые реакциями с участием только ненасыщенных углерод-углеродных связей
