способ прогнозирования риска развития осложнений при ожоговой травме глаза

Формула изобретения

Способ прогнозирования риска развития осложнений при ожоговой травме глаза, включающий исследование биологический жидкости методом иммуноферментного анализа, отличающийся тем, что в сыворотке крови пациента с ожоговой травмой глаза III степени после проведенного курса лечения на этапе выздоровления или устойчивой положительной динамики в проявлении клинических симптомов определяют антитела класса иммуноглобулинов G (IgG) и/или иммуноглобулинов М (IgM) к S-антигену сетчатки по величине разницы оптической плотности исследуемой и нормальной тест-сыворотки и при значении этого показателя, соответственно равного или более 0,2 и/или 0,15, определяют наличие антител соответствующего класса к S-антигену сетчатки и прогнозируют высокий риск развития осложнений, а при его значении соответственно менее 0,2 и/или 0,15 - отсутствие этих антител и прогнозируют невысокий риск развития осложнений.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии, и предназначено для прогнозирования риска развития осложнений после травмы глаза, полученной в результате термического или химического ожога.

Ожоговая травма глаза, на долю которой приходится 38% от общего числа офтальмологических травм, - тяжелое заболевание, нередко ведущее к потере трудоспособности из-за развития в перспективе тяжелых осложнений. Наиболее часто развиваются осложнения, характеризующиеся выраженным блефароспазмом, ишемией конъюктивы, распространенным через все слои помутнением роговицы, и рядом других проявлений, ведущих к снижению трудоспособности, качества жизни и требующих стационарного лечения.

Прогнозирование отдаленных последствий ожоговой травмы обычно основано на оценке клинического состояния травмированного глаза в процессе и после лечения и в значительной степени носит субъективный характер.

При этом в 3-5% случаев послеожоговые осложнения развиваются без видимых причин по истечении некоторого времени - от нескольких недель и более после завершения курса лечения, сопровождающегося купированием клинических проявлений травмы - излечением или устойчивой положительной динамикой.

Эти обстоятельства определяют важность и актуальность разработки новых способов раннего прогнозирования риска развития осложнений после ожоговой травмы глаза на основе объективных критериев.

Известен способ прогнозирования рецидивов эрозий и угрозы перфорации роговицы при ожогах роговицы (RU 2148261, кл. МПК: G01N 33/68; 33/53, 2000 г.) заключающийся в том, что в слезной жидкости травмированного глаза определяют содержание интерлейкина - I (ИЛ-i ) методом иммуноферментного анализа и иммуноглобулина A (IgM) методом радикальной иммунодиффузии по Манчини. При единовременном обнаружении уровня IgA, превышающего физиологическую норму, и ИЛ-I в концентрации, равной или более 900 пкг/мл, в сроки от 7-го до 14-го дня после ожога прогнозируют рецидивы эрозий и угрозу перфорации роговицы.

Недостатком известного способа является отсутствие объективных критериев - контрольных региональных и возрастных показателей нормального содержания IgA в слезной жидкости здоровых людей, которые могут сильно различаться и, таким образом, влиять на результаты прогноза.

Кроме того, забор слезной жидкости из травмированного глаза связан со значительными болезненными ощущениями у пациента.

Задачей изобретения является создание более точного и объективного способа прогнозирования риска развития осложнений при ожоговой травме глаза.

Сущность изобретения состоит в том, что в способе прогнозирования риска развития осложнений при ожоговой травме глаза, включающем исследование биологический жидкости методом иммуноферментного анализа, в сыворотке крови пациента с ожоговой травмой III степени после проведенного курса лечения на этапе выздоровления или устойчивой положительной динамики в проявлении клинических симптомов определяют антитела класса иммуноглобулинов G (IgG) и/или иммуноглобулинов М (IgM) к S-антигену сетчатки по величине разницы оптической плотности исследуемой и нормальной тест-сыворотки и при значении этого показателя, соответственно равном или более 0,2 и/или 0,15, определяют наличие антител соответствующего класса к S-антигену сетчатки и прогнозируют высокий риск развития осложнений, а при его значении соответственно менее 0,2 и/или 0,15 - отсутствие этих антител и прогнозируют невысокий риск развития осложнений.

Использование изобретения позволяет получить следующий технический результат.

Способ является высокоэффективным. Он обладает объективностью, точностью и информативностью. Основан на количественных критериях, отработанных авторами на большом количестве материала.

Отличается простотой и скоростью выполнения. Не связан с дополнительным травмированием тканей глаза.

Способ дает возможность использовать полученный прогноз для разработки алгоритма своевременной и адекватной лечебной тактики с целью предупреждения развития возможных осложнений, что способствует сохранению трудоспособности и влияет на качество жизни пациента.

Предлагаемый способ базируется на установленной авторами корреляции между обнаружением антител класса IgM и/или класса IgG к S-антигену сетчатки глаза, в сыворотке крови пациентов, поступивших в клинику с ожоговой травмой III степени и прошедших курс успешного лечения, и развитием у них в последующем послеожоговых осложнений.

Иммунологические исследования сыворотки крови пациентов с ожоговой травмой глаза показали, что при ожоговой травме III степени почти у всех пациентов обнаруживаются антитела класса IgM или класса IgG или обоих классов одновременно к S-антигену сетчатки глаза. В процессе лечения их уровень снижается и в большинстве случаев к моменту выписки из стационара не определяется. При этом у части пациентов на этом этапе антитела в крови обнаруживаются.

Установлено, что при наличии антител класса IgM и/или IgG к S-антигену сетчатки в сыворотке крови пациентов с ожоговой травмой глаза III степени, прошедших курс успешного лечения и находящихся в состоянии выздоровления или устойчивой положительной динамики в проявлении клинических симптомов (как правило на 7-й - 15-й день после травмы, перед выпиской из стационара), большинство из них в последующем обращается за медицинской помощью по поводу развития осложнений (гипопион, вторичная гипертензия и др.). И наоборот, пациенты с III степенью ожоговой травмы, в сыворотке крови которых на этапе практического излечения эти антитела не выявляют, повторно за помощью, как правило, не обращаются.

Таким образом, наличие антител классов IgM и/или IgG в сыворотке крови пациентов, находящихся в состоянии практического выздоровления, является скрытым индикатором сохранения условий для возобновления патологического процесса и прогностическим критерием принадлежности их к группе риска и предрасположенности к развитию послеожоговых осложнений.

Способ осуществляется следующим образом.

Предварительно у пациента с ожоговой травмой глаза определяют степень поражения. При установлении III степени ожоговой травмы после проведенного курса лечения (через 7-15 дней после травмы) на этапе, характеризующемся устойчивой положительной динамикой в проявлении клинических симптомов или выздоровлением с их исчезновением, определяют антитела класса иммуноглобулинов G (IgG) и/или класса иммуноглобулинов М (IgM) к S-антигену сетчатки глаза по величине разницы оптической плотности исследуемой и нормальной тест-сывороток.

Кровь из вены пациента в количестве 3 мл выдерживают в термостате при 37°С в течение 30-45 мин, затем охлаждают в холодильнике 15-20 мин до 0°С и центрифугируют в течение 15 мин при 1000 об/мин.

Полученную сыворотку крови без форменных элементов замораживают при температуре - 18°С.

Определяют иммуноглобулины IgG и/или IgM к S-антигену сетчатки глаза с помощью иммуноферментного анализа (ИФА), применяя твердофазный метод с использованием пероксидазы хрена в качестве индикаторного фермента. Исследуемые и контрольные образцы сыворотки вносят в лунку полистиролового планшета для ИФА, на котором предварительно иммобилизуют S-антиген сетчатки, выделенный из бычьих глаз, затем в лунки вносят козлиные моноклональные антитела против IgG или IgM человека, конъюгированные с ферментной меткой - пероксидазой хрена. После добавления фермент-специфичного субстратного раствора орто-фенилендиамина и «стоп-реагента» (1N H₂SO₄) реакцию регистрируют на спектрофотометре вертикального сканирования при длине волны 492 нм.

В качестве критерия, по которому определяют наличие или отсутствие в пробе иммуноглобулинов G или М, используют значение показателя ОП, представляющего собой разницу величин показателей оптической плотности референт-сыворотки (положительный контроль) и нормальной тест-сыворотки. В качестве референт-сыворотки (положительного контроля) используют лиофилизированную сыворотку, представляющую собой смешанный пул сывороток, полученных от пациентов с различными формами офтальмологических заболеваний, а в качестве нормальной тест-сыворотки - лиофилизированную сыворотку, представляющую собой смешанный пул сывороток, полученных от здоровых людей.

Наличие каждого из иммуноглобулинов - класса G (IgG) и/или М (IgM) к S-антигену сетчатки в исследуемых образцах определяют по значению показателя разницы ОП-величин оптической плотности исследуемой и нормальной тест-сывороток, усредненных по двум измерениям. При значении этого показателя, соответственного равного или более 0,2 и/или 0,15 ( ОП)_IgG 0,2, и ( ОП)_IgM 0,15, определяют наличие антител соответствующего класса к S-антигену сетчатки и прогнозируют высокий риск развития осложнений, а при значении этого показателя соответственно менее 0,2 и/или 0,15 определяют отсутствие этих антител и прогнозируют невысокий риск развития осложнений.

Способ прогнозирования риска развития осложнений при ожоговой травме глаза применен в Московской городской клинической больнице при обследовании 80 пациентов, поступивших в больницу с ожоговой травмой глаза. У 50 пациентов установлена II степень травмы, а у 30 - III степень.

У всех 30 пациентов с ожоговой травмой III степени на этапе поступления в стационар при иммунологическом исследовании сыворотки крови выявлены антитела класса G (IgG) и/или класса М (IgM) к S-антигену сетчатки. После проведенного курса лечения по традиционной схеме на этапе, характеризующемся устойчивой положительной динамикой в клинических проявлениях травмы или их исчезновением - через 7-15 дней после травмы, перед выпиской из стационара, антитела выявлены у 5 пациентов. Уровень антител и, соответственно, разницы ОП-величин оптической плотности исследуемой и нормальной тест-сыворотки - ( ОП)_igG и ( ОП)_IgM не снизился у них через 25 дней. На этом этапе у них отмечено развитие осложнений - токсический увеит с гипопионом и вторичная гипертензия.

Пример 1. Больной М, 49 лет, поступил с диагнозом ОИ: химический ожог конъюнктивы и роговицы III степени, производственная травма. Status oculorum: Vis OD=счет пальцев у лица. Vis OS=0,01 н.к., OU=блефароспазм, конъюнктива ишемизирована, помутнение роговицы распространено через все слои, зрачок круглой формы, детали передней камеры и рефлекс с глазного дна не определяются. Жалобы больного: на боль, слезотечение, снижение остроты зрения ОИ.

Лечение проведено по традиционной схеме. Состояние пациента при выписке через 15 дней после поступления в стационар - значительное улучшение. Отмечена устойчивая положительна динамика в проявлении клинических симптомов. Vis OD=0,09 н.к., OS=0,08 н.к., легкая инъекция эпителия роговицы в стадии эпителизации, помутнение в центре, передняя камера средней глубины, глубжележащие отделы просматриваются плохо. На 14 день после травмы в сыворотке крови больного иммуноферментным методом выявлено наличие антител класса иммуноглобулинов М (IgM) к S-антигену сетчатки по величине разницы оптической плотности исследуемой и нормальной тест-сыворотки, равной 0,17. Прогноз: высокий риск развития послеожоговых осложнений.

Через 3 недели пациент вновь обратился за медицинской помощью с жалобами на снижение зрения. При обследовании: Vis OD=счет пальцев у лица, OS=0,02. Status oculorum OU - динамика отрицательная, блефарофимоз, роговица фарфоровая, гипопион, глубжележащие среды просматриваются плохо.

Пример 2. Больной А., 44 лет, поступил с диагнозом OS: термический ожог роговицы и конъюнктивы III степени. Vis OS=счет пальцев у лица, OD=0,1, c/k sph-0,5=1,0.

Status oculorum: OS - блефароспазм, конъюнктива ишемизирована, помутнение распространено через все слои, зрачок круглой формы, рефлекс с глазного дна не определяется. После проведенного лечения по традиционной схеме отмечена устойчивая положительная динамика: умеренная инъекция эпителия, роговица в стадии эпителизации, передняя камера средней глубины, влага чистая, зрачок в состоянии медикаментозного мидриаза, хрусталик прозрачный, глазное дно - детали просматриваются плохо. На 14 день перед выпиской из стационара проведено исследование сыворотки крови. Выявлено наличие S-антител класса G. ОП_IgG=0,22. Прогноз - высокий риск развитии осложнений, подтвердился через 3 недели - больной снова обратился за медицинской помощью. Наблюдалось развитие осложнений: вторичная гипертензия. Лечение - амбулаторное.

Пример 3. Больной Л., 50 лет, химик-технолог, OS: химический ожог конъюнктивы III степени, OD: конъюнктивы и роговицы IV степени при попадании в глаза едкого натра. Поступил на 1-е сутки после травмы. Vis OS=счет пальцев у лица,

Status oculorum: OS - блефароспазм, конъюнктива ишемизирована, помутнение распространено через все слои, зрачок круглой формы, рефлекс с глазного дна не определяется.

Проведен курс консервативной терапии по традиционной схеме, применяемой при лечении ожогов глаз. На фоне лечения в течение недели при положительной динамике сохранялась ишемия конъюнктивы у лимба и эрозия роговицы диаметром до 5 мм. При исследовании сыворотки крови на 15 день перед выпиской выявлены антитела к S-антигену обоих классов ( ОП_IgG=0,22 и ОП_IgM=0,18), что явилось прогностическим признаком развития в последующем послеожоговых осложнений. Через 3 недели больной снова поступил с отеком и инфильтрацией стромы роговицы, тотальной эрозией роговицы, направлен в стационар для повторного лечения и обследования.

Пример 4. Больной К., 32 лет, перенес химический ожог конъюнктивы и роговицы OS III степени раствором цемента. Поступил на 1-е сутки после травмы. Vis OS=счет пальцев у лица. Status oculorum: OS - блефароспазм, конъюнктива ишемизирована, помутнение распространено через все слои, зрачок круглой формы, рефлекс с глазного дна не определяется.

Проведена консервативная терапия по общепринятой схеме. В процессе лечения ишемия конъюнктивы купирована, наступила полная эпителизация роговицы. Состояние больного характеризуется как выздоровление с исчезновением клинических симптомов.

При иммунологическом исследовании сыворотки крови на 14 день после травмы антитела класса иммуноглобулинов G (IgG) и иммуноглобулинов М (IgM) к S-антигену сетчатки не выявлены. Прогноз: невысокий риск возникновения и развития осложнений. В последующие периоды послеожоговые осложнения не возникли.

Приведенные примеры показывают, что факт наличия антител классов IgM и/или IgG к S-антигену сетчатки в крови больных, перенесших ожоговую травму глаза III степени и находящихся в состоянии устойчивой положительной динамики после проведенного курса лечения, является прогностическим критерием высокой вероятности возникновения у них рецидивов или осложнений в последующие периоды. И наоборот, отсутствие S-антител классов IgM и/или IgG в крови больных с ожоговой травмой на этапе устойчивой положительной динамики после проведенного курса лечения свидетельствует о том, что развитие послеожеговых осложнений маловероятно.

Осуществление предлагаемого способа не связано с болевыми ощущениями у пациентов и позволяет прогнозировать развитие послеожоговых осложнений на основе объективных показателей.