средство профилактики и коррекции иммунодефицитных состояний
Классы МПК: | A61K38/08 пептиды, содержащие 5-11 аминокислот A61P37/00 Лекарственные средства против иммунологических или аллергических заболеваний C07K7/06 содержащие от 5 до 11 аминокислот |
Автор(ы): | Андреева Людмила Александровна (RU), Ершов Феликс Иванович (RU), Зозуля Андрей Александрович (RU), Мезенцева Марина Владимировна (RU), Мясоедов Николай Федорович (RU), Середенин Сергей Борисович (RU), Учакина Ольга Николаевна (RU), Учакин Петр Николаевич (RU) |
Патентообладатель(и): | Институт молекулярной генетики Российской академии наук (ИМГ РАН) (RU) |
Приоритеты: |
подача заявки:
2006-07-27 публикация патента:
10.03.2008 |
Изобретение относится к медицине и может быть использовано в качестве средства профилактики и коррекции иммунодефицитных состояний. Данное средство представляет собой гептапептид Селанк общей формулы (I): Thr-Lys-Pro-Arg-Pro-Gly-Pro. Данное изобретение обеспечивает расширение ассортимента иммуномодулирующих лекарственных средств, повышение эффективности профилактики и лечения иммунодефицитных состояний. 2 н. ф-лы, 5 ил.
Формула изобретения
1. Применение гептапептида Селанк общей формулы (I)
Thr-Lys-Pro-Arg-Pro-Gly-Pro
в качестве средства профилактики и коррекции иммунодефицитных состояний.
2. Способ профилактики и коррекции иммунодефицитных состояний, предусматривающий применение лекарственного средства, отличающийся тем, что в качестве лекарственного средства используют гептапептид Селанк формулы (I)
Thr-Lys-Pro-Arg-Pro-Gly-Pro
путем интраназального введения его 0,12-0,18%-ного раствора в суточной дозе 550-650 мкг в течение 10-18 дней.
Описание изобретения к патенту
Изобретение относится к области медицины, к средствам профилактики и коррекции иммунодефицитных состояний и способу профилактики и коррекции иммунодефицитных состояний.
Изобретение расширяет арсенал иммуномодулирующих и интерферон-индуцирующих средств.
Известен эндогенный пептид Thr-Lys-Pro-Arg - тафтсин, обладающий иммунотропными свойствами [Tuftsin-endogenous immunomodulator. Postepy Biochem. 2000; 46 (4): 327-35]. Недостаток его в организме приводит к тяжелым иммунодефицитным состояниям. Однако данный пептид неустойчив и быстро подвергается энзиматической деградации. Несмотря на многочисленные исследования создать лекарственный препарат на его основе не удалось.
Кроме того, задача расширения ассортимента новых иммуномодулирующих средств остается актуальной. Актуальна и задача поиска новых средств профилактики и лечения иммунодефицитных состояний без побочных эффектов.
Известен гептапептид Селанк формулы (I) Thr-Lys-Pro-Arg-Pro-Gly-Pro в качестве анксиолитического средства [Патент РФ №2155065]. Однако возможность его использования в качестве средства профилактики и коррекции иммунодефицитных состояний не описано.
Известен способ профилактики и коррекции иммунодефицитных состояний, включающий применение лекарственного средства [Ридостин, Циклоферон, Даларгин. Большая Российская Энциклопедия лекарственных средств. Из-во Ремедиум, г.Москва, 2001 г., т.2, стр.186, 560, 748; www.rlsnet.ru. Регистр лекарственных средств; immunology.ru, Энциклопедия модуляторов]. Однако данный известный способ не во всех случаях эффективен.
Техническим результатом, достигаемым при реализации настоящего изобретения, является расширение ассортимента иммуномодулирующих лекарственных средств, повышение эффективности профилактики и лечения иммунодефицитных состояний.
Указанный технический результат достигается тем, что гептапептид Селанк общей формулы (I):
, применяют в качестве средства профилактики и коррекции иммунодефицитных состояний. Достигается указанный технический результат также за счет того, что в способе профилактики и коррекции иммунодефицитных состояний, предусматривающем применение лекарственного средства, где в качестве лекарственного средства используют гептапептид Селанк формулы (I):
Thr-Lys-Pro-Arg-Pro-Gly-Pro
путем интраназального введения его 0,12-0,18% раствора в суточной дозе 550-650 мкг в течение 10-18 дней.
Собственными исследованиями было установлено, что известное анксиолитическое средство Селанк, положительно влияющее на мнестические и когнитивные функции мозга, обладающее положительным вегетотропным и анксиолитическим действием, способно индуцировать выработку интерферона и избирательно модулировать Тип-1/Тип-2 цитокиновый баланс и может быть применено для профилактики и лечения иммунодефицитных состояний, не оказывая при этом неблагоприятного побочного действия.
На фиг.1 представлена диаграмма, демонстрирующая влияние гептапептида формулы (I) в дозе 10-7 М на секрецию цитокинов клетками линии мононуклеарной лейкемии человека (J-96).
На фиг.2 представлена диаграмма, демонстрирующая влияние внутрибрюшинного введения гептапептида формулы (I) в дозе 100 мкг/кг и 200 мкг/кг на продукцию интерферона иммуноцитами периферической крови мышей.
На фиг.3 представлена диаграмма, демонстрирующая влияние гептапептида формулы (I) в дозе 10 -7 М на экспрессию генов и секрецию цитокинов клетками периферической крови людей с депрессивными расстройствами и здоровых доноров (контроль).
На фиг.4 представлена диаграмма, демонстрирующая влияние гептапептида формулы (I) в суточной дозе 600 мкг на уровень секреции цитокинов в сыворотке крови больных тревожными расстройствами и неврастенией.
На фиг.5 представлена диаграмма, демонстрирующая интерферон-индуцирующие свойства гептапептида формулы (I) в дозе 100 мкг/кг на клеточной линии фибробластов легкого эмбриона человека (ФЛЭЧ) и клеточной линии моноцитарной лейкемии человека (J-96) в сравнении с ридостином, циклофероном и даларгином.
Ниже приведены примеры, иллюстрирующие изобретение.
Исследования проведены на клеточных линиях, экспериментальных животных и иммуноцитах периферической крови людей.
Пример 1. Клетки линии J-96 культивировались в присутствии гептапептида формулы (I) в концентрации 10-7 М в течение 24 часов при 37°С в атмосфере, содержащей 5% CO2. Концентрацию цитокинов в кондиционной среде определяли методом иммуноферментного анализа (ИФА) после окончания культивирования. Показано, что гептапептид формулы (I) индуцирует секрецию интерферона ИФН- , но подавляет фактор некроза опухоли (ФНО)- , интерлейкин (ИЛ)-6 и почти в два раза - ИЛ-4. При этом, не изменяя уровень секреции ИЛ-2, гептапептид формулы (I) более чем в два раза уменьшает продукцию растворимых рецепторов этого цитокина. Таким образом, из полученных результатов видно разнонаправленное воздействие гептапептида формулы (I) на Тип-1/Тип-2 цитокиновый баланс.
Результаты приведены на фиг.1. Как видно из фиг.1, гептапептид формулы (I) оказывает разнонаправленное воздействие на цитокины Тип-1 и Тип-2, что важно для коррекции и профилактики иммунодефицитных состояний.
Пример 2. Гептапептид формулы (I) вводили внутрибрюшинно 15 здоровым белым беспородным мышам в концентрации 100 мкг/кг и 200 мкг/кг массы тела. Продукцию интерферона оценивали биологическим методом через 2, 24, 48, 72 и 96 часов после введения экспериментальным животным гептапептида формулы (I). Обнаружено, что внутрибрюшинное введение гептапептида формулы (I) увеличивает продукцию интерферона иммуноцитами периферической крови мышей через 2 и 24 часа после инъекции, что важно для реализации противовирусного потенциала организма.
Полученные результаты приведены на фиг.2.
Пример 3. Клетки периферической крови 8 здоровых доноров и 8 человек, страдающих депрессивными расстройствами, культивировали в присутствии гептапептида формулы (I) в концентрации 10-7 М в течение 24 часов при 37°С в атмосфере, содержащей 5% CO2. После культивирования определяли экспрессию генов цитокинов методом ОТ-ПЦР и секрецию цитокинов методом иммуноферментного анализа (ИФА). Обнаружено, что введение гептапептида формулы (I) в культуральную среду полностью подавило экспрессию гена ИЛ-6 в культуре иммуноцитов периферической крови пациентов с депрессивными расстройствами и не повлияло на экспрессию гена ИЛ-6 клетками крови здоровых доноров. По результатам ИФА кондиционной среды наблюдалось достоверное увеличение (р<0.05) концентрации ИЛ-6 в пробах крови, культивируемой с гептапептидом формулы (I), по сравнению с контрольными образцами.
Полученные результаты приведены на фиг.3.
Как видно из полученных данных, приведенных на фиг.3, гептапептид активирует гены ИФН- и понижает экспрессию ИЛ-6 и в то же время увеличивает секрецию цитокинов клетками периферической крови людей с депрессивными расстройствами по сравнению со здоровыми донорами. Оба этих обстоятельства крайне важны для профилактики и лечения иммунодефицитных состояний.
Пример 4. Мониторинг цитокинового профиля проводился у 27 человек в возрасте 36.7±9.5 лет с генерализованными тревожно-фобическими расстройствами (ГТР n=13) и неврастенией (n=14) на фоне интраназального приема гептапептида формулы (I) в концентрации 0.15% в течение 14 дней. Суточная доза составляла 600 мкг. Влияние гептапептида формулы (I) на Тип-1/Тип-2 цитокиновый баланс оценивалось по соотношению концентраций ИФН- /ИЛ-4 (Т-клеточный ответ) и ИЛ-12/ИЛ-10 (моноцитарно-макрофагальный ответ), определяемой до и после 14 дней приема гептапептида формулы (I). Были обнаружены достоверные изменения в Тип-1/Тип-2 цитокиновом балансе в группах, обследованных после 14 дней приема гептапептида формулы (I). Т-лимфоцитарный Т-1/Т-2 индекс (ИФН- /ИЛ-4) достоверно снизился на второй точке обследования. Динамика моноцитарного Тип-1/Тип-2 индекса (ИЛ-12/ИЛ-10) была противоположно направлена и также статистически достоверна. Полученные данные сопоставимы с результатами позитивных клинических эффектов гептапептида формулы (I). У больных с ГТР и неврастенией гептапептид формулы (I) оказывал выраженный терапевтический эффект, сравнимый с действием бензодиазепинового транквилизатора Медазепама. При этом гептапептид формулы (I) не вызывал побочных эффектов, свойственных бензодиазепинам (седация, дневная сонливость, расстройство просыпания и т.д.). По результатам теста Гамильтона у больных наблюдалось достоверное (р<0.05) снижение выраженности тревожной симптоматики в процессе лечения гептапептидом формулы (I).
Полученные результаты приведены на фиг.4.
Пример 5. Исследованы интерферон-индуцирующие свойства гептапептида формулы (I) в дозе 100 мкг/кг на клеточной линии фибробластов легкого эмбриона человека (ФЛЭЧ) и клеточной линии моноцитарной лейкемии человека (J-96) в сравнении с ридостином, циклофероном и даларгином. Таким образом, интерферон-индуцирующее свойство гептапептида формулы (I) сравнимо с действием известных иммуномодуляторов.
Полученные результаты приведены на фиг.5.
Таким образом, изобретение позволит расширить показания к применению гептапептида формулы (I), ассортимент иммуномодулирующих средств и проводить эффективную профилактику и коррекцию иммунодефицитных состояний.
Класс A61K38/08 пептиды, содержащие 5-11 аминокислот
Класс A61P37/00 Лекарственные средства против иммунологических или аллергических заболеваний
Класс C07K7/06 содержащие от 5 до 11 аминокислот