гидрохлорид 3-метоксикарбонил-4-(2-пиперидиноэтил)-2-этилпиразоло[1,5-а] бензимидазола, обладающий местноанестезирующим действием
Классы МПК: | C07D487/04 орто-конденсированные системы |
Автор(ы): | Галенко-Ярошевский Александр Павлович (RU), Кузьменко Татьяна Андреевна (RU), Кузьменко Татьяна Валерьевна (RU), Анисимова Вера Алексеевна (RU), Минкин Владимир Исаакович (RU), Сергеев Владимир Витальевич (RU), Варлашкина Инесса Александровна (RU), Набатова Оксана Сергеевна (RU), Футорянская Тамара Николаевна (RU), Луговая Ирина Анатольевна (RU) |
Патентообладатель(и): | Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Южный федеральный университет" (RU), Негосударственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Кубанский медицинский институт" (RU), Федеральное государственное учреждение "Межотраслевой научно-технический комплекс "Микрохирургия глаза" имени академика С.Н. Федорова" Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию (RU) |
Приоритеты: |
подача заявки:
2006-11-16 публикация патента:
10.01.2008 |
Изобретение относится к новому производному в ряду пиразоло[1,5-а]бензимидазола, обладающему местно-анестезирующим действием при поверхностной (терминальной), инфильтрационной и проводниковой анестезии. Описывается гидрохлорид 3-метоксикарбонил-4-(2-пиперидиноэтил)-2-этилпиразоло[1,5-а]бензимидазола формулы I:
Технический результат - получено новое соединение, обладающее полезными биологическими свойствами. 6 табл.
Формула изобретения
Гидрохлорид 3 -метоксикарбонил-4-(2-пиперидиноэтил)-2-этилпиразоло [1,5-а]бензимидазола формулы I
Описание изобретения к патенту
Изобретение относится к новому производному в ряду пиразоло-[1,5-а]бензимидазола, а именно к гидрохлориду 3-метоксикарбонил-4-(2-пиперидиноэтил)-2-этилпиразоло[1,5-а]бензимидазола формулы I:
обладающему местно-анестезирующим действием при поверхностной (терминальной), инфильтрационной и проводниковой анестезии.
Эффективным лекарственным средством, широко применяемым в качестве местного анестетика при инфильтрационном, проводниковом и терминальном методах обезболивания, является лидокаин (А.И. Левшанков, А.Л. Костюченко, Е.Т. Ростомашвили и др. Каудальная эпидуральная анестезия при операциях на нижних конечностях в травматологии и ортопедии. Анестезиол. и реаниматол., 1992, №5-6, с.15-17; М.Д. Машковский, Лекарственные средства, 15-е изд., перераб. и дополн., М.: Медицина, 1998, ч.1, с.371-382).
Лидокаин обычно хорошо переносится, однако иногда может вызывать коллапс, анафилактическую реакцию, изменения в содержании цитоплазматических белков, поверхности и форме эритроцитов (Г.И. Карицкий, А.Н. Куйбида и др. Выведение из анафилактического шока с клинической смертью после введения лидокаина. Вестн. хир. им. И.И. Грекова, 1987, №4, с.131; Н.Х. Вахидов, И.А.Абдуллаева, Т.Р. Мурадов. Успешная реанимация больных после побочной токсической реакции на введение лидокаина. Журнал ушных, носовых и горловых болезней, 1989, №6, с.60-61; E.Nidhiguchi et al. Factors of the share change of human erythrocytes induced with lidocaine. Cell. struct. and Funct., 1989, Vol.14, №, p.569-577; М.Д. Машковский, 1998).
В ряду пиразоло[1,5-а]бензимидазола не известны соединения, обладающие местно-анестезирующим действием.
Наиболее близкими по структуре среди производных пиразоло[1,5-а]-бензимидазола являются 3-алкоксикарбонил-2,4-диметилпиразоло[1,5-а]-бензимидазолы (Кузьменко Т.А., Кузьменко В.В., Симонов A.M. 3- -Галогенкарбонильные производные пиразоло[1,5-а]бензимидазола и их превращения. ХГС, 1988, №1, с.43-48). Однако среди них не найдено соединений, проявляющих биологическую активность.
Техническим результатом изобретения является новое соединение в ряду пиразоло[1,5-а]бензимидазола, проявляющее неизвестное для данного класса веществ местно-анестезирующее действие, более эффективное, чем действие известного местно-анестезирующего средства.
Технический результат достигается соединением I, синтез которого заключается в омылении ацильной группы в 3-пропионил-2-этил-4-(2-пиперидиноэтил)пиразоло[1,5-а]бензимидазоле под действием конц. HCl, дальнейшем ацилировании полученного 2-этил-4-пиперидиноэтилпиразоло[1,5-а]бензимидазола хлорангидридом трихлоруксусной кислоты при нагревании в ксилоле до 3-трихлороацетилзамещенного и последующем галоформном расщеплении последнего под действием метилата натрия. Синтезированный 3-метоксикарбонил-2-этил-4-(2-пиперидиноэтил)пиразоло[1,5-а]-бензимидазол переводят в искомый водорастворимый гидрохлорид I обычными методами.
Ниже приведены методики синтеза предлагаемого соединения.
Пример. Гидрохлорид 3-метоксикарбонил-2-этил-4-(2-пиперидиноэтил)пиразоло[1,5-а]бензимидазола (I).
Стадия 1. 2-Этил-4-(2-пиперидиноэтил)пиразоло[1,5-а]бензимидазол (III). Раствор 7,8 г (0,02 моль) гидрохлорида 3-пропионил-2-этил-4-(2-пиперидиноэтил)пиразоло[1,5-а]бензимидазола (II) в 100 мл конц. HCl кипятят 6 ч. Охлаждают, подщелачивают 22%-ным раствором аммиака, выделившееся масло экстрагируют CHCl 3 (3×30 мл). Экстракт упаривают досуха и после высушивания в вакуум-эксикаторе над Р2O 5 основание III в виде густого масло используют на следующей стадии без дополнительной очистки. Выход 5,2 г (88%).
Стадия 2. Гидрохлорид 2-этил-3-трихлорацетил-4-(2-пиперидиноэтил)-пиразоло[1,5-а]бензимидазола (IV). В нагретый до 70-80°С раствор 2,96 г (0,01 моль) соединения III в 50 мл сухого ксилола вносят при перемешивании 1,1 мл (0,01 моль) свежеперегнанного хлорангидрида трихлоруксусной кислоты в течение 10 мин. Затем реакционную смесь нагревают до кипения и кипятят 2 ч. После охлаждения осадок соединения IV отфильтровывают, промывают ацетоном. Выход 4,2 г (87%). Бледно-желтые иглы с т.пл. 253-255°С (разл., из бутанола), нерастворимые в воде.
Найдено, %: С 50,0; Н 5,3; Cl 30,0; N 12,0.
С 20Н23Cl3N 4O·HCl.
Вычислено, %: С 50,2; Н 5,0; Cl 29,7; N 11,7.
ИК-спектр (вазел. масло), см-1 : 1640 (С=O), 2380-2600 (N+Н).
Стадия 3. Гидрохлорид 3-метоксикарбонил-2-этил-4-(2-пиперидиноэтил)пиразоло[1,5-а]бензимидазола (I). В раствор метилата натрия, полученный из 0,6 г натрия и 20 мл метилового спирта, вносят небольшими порциями 4,78 г (0,01 моль) гидрохлорида IV. После прекращения бурной реакции смесь кипятят 3-5 мин. Спирт испаряют досуха, остаток хроматографируют на колонке с Al2O3 , элюируя хлороформом. Элюат упаривают досуха, оставшееся густое масло после высушивания в вакуум-эксикаторе над P 2O5 растворяют в сухом ацетоне и подкисляют раствором HCl в эфире. Осадок гидрохлорида отделяют, промывают сухим эфиром. Выход 3,7 г (94%). Бесцветные кристаллы с т.пл. 222-223°С (из спирта).
Найдено, %: С 61,3; Н 6,7; Cl 8,8; N 14,0.
C20H 26N4O2·HCl.
Вычислено, %: С 61,5; Н 6,9; Cl 9,1; N 14,3.
ИК-спектр (вазел. масло), см-1: 1675 (С=O), 2380-2700 (N+H).
В основу скрининговых исследований положены Методические указания по изучению местно-анестезирующей активности фармакологических веществ (Игнатов Ю.Д., Червякова И.В., Васильев Ю.Н., Галенко-Ярошевский А.П., Жуков В.Н. Методические указания по изучению местно-анестезирующей активности фармакологических веществ // В кн.: Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / Под общей редакцией чл.-корр. РАМН, проф. Р.У. Хабриева. - 2 изд., перераб. и доп. - М.: ОАО "Издательство "Медицина", 2005. - С.364-392).
Эксперименты проведены в соответствии со статьей 11-й Хельсинкской декларации Всемирной медицинской ассоциации (1964), "Международными рекомендациями по проведению медико-биологических исследований с использованием животных" (1985) и Правилами лабораторной практики в Российской Федерации (приказ МЗ РФ №267 от 19.06.2003 г.).
Поверхностную (терминальную) анестезию исследовали в экспериментах на роговице глаз кроликов с использованием метода Ренье-Валета (Прянишникова Н.Т., Шаров Н.А. Тримекаин. Фармакология и клиническое применение. - Л.: Медицина, 1967. - 239 с.; Ю.Д. Игнатов и соавт., 2005), при этом параллельно изучали возможное раздражающее действие по Setnicar (Setnicar I. Tolerance indices of some phenoxyethylamino derivatives with local anaesthitic properties // Arzneim. - Forsch. - 1966. - Bd. 16, №5. - S.623).
Инфильтрационную анестезию исследовали в опытах на морских свинках (Bülbring E., Wajda J. Biological comparison of local anaesthetica // J. pharmacol. and exp.therap. - 1945. - Vol.85, №1. - P.78-84) и кроликах (Прянишникова Н.Т., Шаров Н.А. Тримекаин. Фармакология и клиническое применение. - Л.: Медицина, 1967. - 239 с.).
Проводниковую анестезию изучали в экспериментах на седалищном нерве кроликов (Н.Т. Прянишникова, Н.А. Шаров, 1967).
Острую токсичность исследовали [определяли среднюю летальную (смертельную) дозу - ЛД50] в опытах на мышах при подкожном введении (Прозоровский В.Б. Использование метода наименьших квадратов для пробит-анализа кривых летальности // Фармакол. и токсикол. - 1962. - Т.25, №1. - С.115-119).
Статистическую обработку данных, учитываемых в градированной форме, проводили по М.Л. Беленькому (Беленький М.Л. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта. - Л., 1963. - 152 с.) и с помощью таблиц Н.Н. Самойлова (Самойлов Н.Н. Таблицы значений средней ошибки и доверительного интервала средней арифметической величины вариационного ряда. - Томск. 1970. - 63 с.).
Учет результатов исследований, выраженных в альтернативной форме, определение ЛД50, ЭК50 , границ доверительного интервала и терапевтического индекса, или широты терапевтического действия (ЛД50 /ЭК50) осуществляли по методам, описанным В.Б. Прозоровским (1962) и М.Л. Беленьким (1963).
Установлено, что в условиях поверхностной анестезии в опытах на роговице глаз кроликов минимальной и максимальной анестезирующими концентрациями для соединения I являются 0,125 и 2,0%, а для лидокаина - 1,0 и 5,0% соответственно. Индексы Ренье, выражающие силу анестезирующего действия в испытуемых концентрациях, для I в 0,125, 0,25, 0,5, 1 и 2% растворах составляют 122,5, 369,4, 535,0, 690,0 и 848,6, для лидокаина в 1, 2 и 5% растворах - 297,9, 354,8 и 676,9 соответственно. Индексы Валета для соли I относительно лидокаина, взятого для сопоставления в 1 и 2% растворах, равны 2,5 и 2,8; эквивалентные анестетические концентрации составили 0,4 и 0,72% соответственно (табл.1).
Вещество I, как и лидокаин, в исследованных растворах не оказывает раздражающего действия на конъюнктиву глаза.
По местно-анестезирующей активности - при сопоставлении ЭК50, выраженных в мМ, и терапевтических индексов - соединение I соответственно в 8,38 раза более значимо, и в 6,08 раза имеет большую широту терапевтического действия, чем лидокаин (табл.2).
При инфильтрационной анестезии в экспериментах на морских свинках минимальной обезболивающей концентрацией для соли I является 0,0156%, для лидокаина - 0,0625%. Полный обезболивающий эффект (100%-ная анестезия в течение 30 мин) соединение I вызывает в 0,125% растворе, тогда как лидокаин - в 0,5% растворе (табл.3).
Сопоставление ЭК50, выраженных в мМ, показало (табл.4), что I в 3,94 раза более активно, чем лидокаин. При этом по широте терапевтического действия оно в 2,84 раза превосходит лидокаин.
В опытах на кроликах установлено (табл.5), что под влиянием 0,5% раствора I обезболивающий эффект наступает в 1,52 раза быстрее, чем при использовании лидокаина. По продолжительности полной анестезии и общей длительности обезболивания соль I в 3,38 и 3,04 раза соответственно превосходит лидокаин. По глубине анестезирующего действия I и лидокаин сопоставимы.
В условиях проводниковой анестезии в экспериментах на седалищном нерве кроликов выявлено (табл.6), что при применении 0,5% раствора гидрохлорида I обезболивающее действие наступает в 1,33 раза быстрее, чем при использовании лидокаина в аналогичной концентрации. По общей длительности анестезии I в 2,45 раза превосходит лидокаин. Важно отметить, что I индуцирует полный обезболивающий эффект в течение 262,0 мин, тогда как лидокаин не проявляет полной анестезии: глубина обезболивания в первом случае составляет 100,0%, а во втором - 64,0%.
Таким образом, соединение I по активности и широте терапевтического действия значительно превосходит лидокаин. На его основе возможно создание местно-обезболивающего лекарственного средства, предназначенного, подобно лидокаину, для поверхностной, инфильтрационной и проводниковой анестезии.
Класс C07D487/04 орто-конденсированные системы