раствор моксифлоксацина для инъекций и способ его получения

Формула изобретения

1. Состав моксифлоксацина для инъекций, содержащий полисахарид и вспомогательное вещество, отличающийся тем, что состав содержит дополнительно поливиниловый спирт, а в качестве вспомогательного вещества гомополимер молочной кислоты или сополимер молочной и гликолевой кислот низкомолекулярный, в качестве полисахарида маннит при следующем соотношении компонентов, мас.%:

Моксифлоксацин	2-3
Гомополимер молочной кислоты
или сополимер молочной и гликолевой кислот	23-26
Маннит	4,0-5,5
Поливиниловый спирт	1,2-1,3
Вода для инъекции	остальное до 100%

2. Способ получения состава моксифлоксацина по п.1, заключающийся в растворении в воде моксифлоксацина с последующим добавлением раствора гомополимера молочной кислоты или сополимера молочной и гликолевой кислот в хлористом метилене, в который добавляют водную фазу моксифлоксацина, в полученную эмульсию добавляют поливиниловый спирт до получения концентрации 0,8-1,2%, удаляют хлористый метилен и добавляют маннит до получения концентрации 4,0-5,5%.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к медицине, а именно к препарату из группы фторированных хинолонов моксифлоксацину для инъекций и способу его получения.

Моксифлоксацин-1-циклопропил-7-(/S.S/-2,8-диазабицикло/4,3,0/нон-8-ил)-6-фтор-1,4-дигидро-8-метокси-4-оксо-3-хинолон карбоновая кислота.

Это высокоэффективное противоинфекционное средство, которое впервые описано в европейской заявке на патент ЕР-А-0350733. В указанном патенте описывается состав моксифлоксацина в виде таблетки, включающей кроме активного вещества, микрокристаллическую целлюлозу, кукурузный крахмал, поли-1-винил-2-пирролидон нерастворимый, диоксид кремния и стеарат магния.

Известна лекарственная форма моксифлоксацина в виде таблеток (пат. РФ №2230555), содержащая сухое связующее (микрокристаллическая целлюлоза), вспомогательное средство (натрия кроскармелоза), смазывающее средство (стеарат магния), до 25% лактозу. Данную лекарственную форму можно получать путем мокрой грануляции моксифлоксацина, его соли и/или гидрата, минимум одного сухого связующего и лактозы, затем полученный гранулят смешивают минимум с одним вспомогательным средством, способствующим распаду, и минимум с одним смазывающим средством, и при необходимости, таблетируют и лакируют. Грануляцию можно осуществлять с водой без добавления склеивающего средства.

Отмечено, что многие препараты из группы фторированных хинолонов обладают низкой растворимостью в обычных фармацевтических носителях или растворителях, поэтому предпринимаются попытки повысить их растворимость для введения в организм, например введением в их молекулы модифицирующих растворимость групп или улучшением свойств носителей и подбором растворителей.

Наиболее близким аналогом данного изобретения является раствор моксифлоксацина для инъекций, содержащий поваренную соль, полисахарид (пат. РФ №2260429). При необходимости растворы для разбавления могут содержать и другие вещества (полисахариды, карбонаты, лактаты, манлаты). Известный состав будет удовлетворять требованиям фармакопеи, если придерживаться определенных узких областей концентраций для активного вещества (0,04-0,4%) и хлорида натрия (0,4-0,9%). В этом же патенте описан способ приготовления состава моксифлоксацина для инъекций, заключающийся в растворении моксифлоксацина в воде и последующем добавлении к нему водного раствора вспомогательных веществ хлорида натрия (пат. РФ 2260429). При этом необходимо выдерживать строго температуру при приготовлении раствора моксифлоксацина. Приготовление растворов моксифлоксацина с хлоридом натрия требует значительного времени для доведения процесса до полного растворения. При этом требуется перемешивание в течение нескольких часов для того, чтобы раствор стал прозрачным для избежания впоследствии потерь активного вещества при отделении его на стадии фильтрации.

Известно, что добавление моксифлоксацина к 5% раствор глюкозы приводит к нестабильности растворов. Эта нестабильность проявляется в появлении в растворе субвизуальных частиц, число которых лежит выше пределов, допускаемых фармакопеей. При этом в процессе хранения образуются окрашенные коричневые аморфные частицы, которые часто появляются лишь после 4-8 недель хранения при 40°С, и далее в процессе хранения их количество увеличивается.

Объектом изобретения является состав моксифлоксацина для инъекций, а также способ его получения.

Задача данного изобретения - создание состава моксифлоксацина для инъекций, удобного в применении, обеспечивающего высокую терапевтическую эффективность, и способа его получения, позволяющего избежать кристаллизацию активного вещества в течение длительного времени.

Поставленная цель достигается за счет использования раствора моксифлоксацина для инъекций, содержащего полисахарид и вспомогательное вещество. При этом раствор содержит в качестве вспомогательного вещества гомополимер молочной кислоты или сополимер молочной и гликолевой кислот низкомолекулярный, и в качестве полисахарида маннит при следующем соотношении компонентов, вес.%

Моксифлоксацин	2-3
Гомополимер молочной кислоты	23-26
или сополимер молочной и гликолевой кислот
Маннит	4,0-5,5
Поливиниловый спирт	1,2-1,3
Вода для инъекции	остальное до 100%

Кроме того, для достижения поставленной цели используется способ получения раствора моксифлоксацина указанного выше состава, заключающийся в растворении в воде терапевтически разрешенных количеств моксифлоксацина с последующим добавлением раствора вспомогательных веществ. В качестве раствора вспомогательных веществ используют раствор гомополимера молочной кислоты или сополимера молочной и гликолевой кислот в хлористом метилене, в который добавляют водную фазу моксифлоксацина, в полученную эмульсию добавляют поливиниловый спирт до получения концентрации 0,8-1,2%, удаляют хлористый метилен и добавляют маннит до получения концентрации 4,0-5,5%.

Полученная форма водного состава моксифлоксацина обладает эффектом пролонгации и позволяет повысить терапевтический эффект. В процессе исследования было обнаружено, что сочетание моксифлоксацина с гомополимером молочной кислотой или сополимером молочной и гликолевой кислот в определенных соотношениях препятствует кристаллизации активного соединения и повышает растворимость моксифлоксацина в воде.

Гомополимер молочной кислоты (полилактид, PLA) и сополимер молочной и гликолевой кислот (poly[lactide-co-glycolide], PLGA) нетоксичны и биосовместимы. В организме PLA и PLGA подвергаются постепенной деградации путем гидролиза, в результате которого образуются молочная и гликолевая кислоты, которые затем вступают в цикл Кребса и выводятся из организма в виде двуокиси углерода и воды.

Используют сополимеры молочной и гликолевой кислот (PLGA) с содержанием гликолевой кислоты 0÷50%. Полимеры такой структуры растворимы в органических растворителях, применение которых допустимо в фармацевтической промышленности.

В таблице 1 приведены примеры испытаний инъекционных форм на основе гомополимера молочной кислоты (полилактид, PLA) или сополимера молочной и гликолевой кислот (poly[lactide-co-glycolide], PLGA) и моксифлоксацина.

Однократное введение водного состава моксифлоксацина обеспечивает поддержание терапевтического уровня активного ингредиента в крови в течение длительного времени до 72 часов, максимальная концентрация в крови достигается в течение 30-60 минут. Полученная форма обладает эффектом пролонгации.

Были проведены исследования эффективности применения состава "моксифлоксацин/PLA" и "моксифлоксацин/PLGA" в пилотных экспериментах на лабораторных животных (белые мыши),

Экспериментальные животные: линейные мыши BALB/c, самки, возраст 7-8 недель, вес 22-25 г. В каждой экспериментальной группе 8 животных. Одно значение КОЕ в таблице получено из 2-х животных.

Образцы: легкие (Л) и селезенка (С) мышей.

Заражение: в/в, дозой 5×10⁶-10 ⁷ КОЕ Mycobacterium tuberculosis H37Rv.

Лечение антибиотиками: 0,2 мл в/в по 200 мкг/мышь или 10 мг/кг.

Для изучения действия антибиотиков допускается 6 мышей в группе. Моксифлоксацин вводился в дозе 10 мг/кг. Доза для человека составляет обычно 400 мг исходя из среднего веса тела 70 кг. Это означает, что доза на килограмм веса равна приблизительно 6 мг. Учитывая различия в скорости метаболизма человека и мышей, можно рассчитать адекватную терапевтическую дозу для мышей. Для этого необходимо 6 мг умножить на коэффициент разницы метаболизмов, принятый в доклинической практике, т.е. на 11,8. Получаем дозу около 70 мг/кг. Таким образом, мы использовали моксифлоксацин в дозе, которая в 7 раз меньше эффективной терапевтической дозы. Из таблицы видно, что по совокупности наиболее эффективен "моксифлоксацин/ PLA" и "моксифлоксацин/PLGA", хотя существует парадоксальный эффект в селезенке, где значения КОЕ выше, чем у остальных препаративных форм моксифлоксацина. Возможно, это связано с меньшей доступностью антибиотика в селезенке, где МТ к началу терапии в основном имеют внутриклеточную локализацию.

Проведенные исследования дают основание для использования моксифлоксацина для инъекции с меньшей терапевтической дозой, чем у исходного моксифлоксацина, что дает снижение курсовой терапевтической дозы и уменьшение побочных эффектов Моксифлоксацина для инъекций по сравнению с моксифлоксацином в форме таблеток.

Изобретение иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1.

Навеску моксифлоксацина 50 мг внесли в 2 мл дистиллированной воды. Стеклянный стаканчик поместили на магнитную мешалку и перемешивали до полного растворения. Стаканчик необходимо закрыть для исключения улетучивания препарата.

Навеску полимера (гомополимер молочной кислоты или сополимер молочной и гликолевой кислот) 500 мг внесли в 3 мл органического растворителя хлористого метилена. Стеклянный стаканчик поместили на магнитную мешалку и перемешивали до полного растворения в течение 1 ч. Стаканчик также необходимо плотно закрыть для исключения улетучивания раствора.

Приготовили 25 мл 1% раствора поливинилового спирта, в течение 1 часа перемешивали на магнитной мешалке. Затем отфильтровали через стеклянный фильтр.

В органическую фазу полимера внесли водную фазу моксифлоксацина, перемешали на гомогенизаторе (20000 об/мин) в течение 2 мин.

Внесли полученную эмульсию моксифлоксацина и полимера в 25 мл 1% раствора поливинилового спирта. Перемешали на гомогенизаторе (20000 об/мин) в течение 2-6 мин.

После гомогенизации эмульсию перелили в открытый стаканчик (50 мл) и перемешали на магнитной мешалке в течение 3 часов до полного удаления растворителя.

Измерили объем полученного раствора и отфильтровали на стеклянном фильтре. Добавили в раствор маннит из расчета, чтобы получился 5% раствор маннита и перемешали до полного растворения. Разлили полученный раствор по пенициллиновым флаконам по 1...3 мл. Закрыли парафином.

Аналогично были проведены способы получения раствора моксифлоксацина во всех заявляемых в способе интервалах.

В таблице 2 приведены заявляемые составы моксифлоксацина, полученные заявляемым способом. Были приготовлены растворы с использованием гомополимера молочной кислоты и сополимера молочной и гликолевой кислот. Качество полученных растворов удовлетворяет всем требованиям в соответствии с поставленной целью.

Полученный инъекционный раствор моксифлоксацина быстро всасывается из желудочно-кишечного тракта (биодоступность свыше 97%). Максимальная концентрация в крови достигается в течение 30-60 минут. Период полувыведения 6-7 часов. Практически не метаболизируется. 75-90% выводится с мочой.

Были проведены клинические испытания препарата для инъекции моксифлоксацин в сравнении с препаратом Моксифлоксацин в форме таблеток, покрытых оболочкой по 200 мг фирмы "Хехст Мэрион Руссель Лтд", Индия, серия-020020, дата выпуска 11.00, срок годности до 10.03, регистрационный номер 008163.

Исследования проведены на 10 здоровых испытуемых: 6 мужчин и 4 женщин в возрасте 18-45 лет. Прием препаратов осуществлялся в 9 часов утра в дозе 200 мг (1 таблетка препарата сравнения либо 1 укол в вену заявляемого препарата). Забор крови осуществлялся из кубитальной вены в количестве 5 мл в стеклянные пробирки до приема препарата и спустя 0,5; 1; 1,5; 6; 12 и 24 часа после приема препарата.

К 1 мл плазмы добавляли 500 мкл фосфатного буфера и 5 мл хлороформа, встряхивали в течение 15 минут. Затем пробы центрифугировали 10 минут при 3000 об/мин. Органический слой количественно переносили в чистые пробирки и добавляли 200 мкл 0,1 М раствора гидроксида натрия. Пробы перемешивали на "vortex" 1 минуту, центрифугировали 5 минут при 3000 об/мин и 100 мкл водной фазы вводили в колонку хроматографа. Анализ проводили на высокоэффективном жидкостном хроматографе "Shimadzi" с флюориметрическим детектором "Krato8".

Полученные данные свидетельствуют о том, что после приема как препарата сравнения в форме таблеток, так и испытуемого препарата в виде инъекционного раствора моксифлоксацин быстро всасывался в системный кровоток, достигая максимального уровня к 1,5 часам (2,04 и 2,14 мкг/мл соответственно). Среднее значение максимальной степени всасывания препарата в виде таблетки по отношению к заявляемому препарату составляет 0,96.

Таблица 1
№ группы	№ образца	Содержание микобактерий в органе/высев	Средняя по органу
1. Контроль (физ. р-р)	Л1	1,33×10 4	1,39×10 4±0,46×104
	Л2	1,37×10 4
	Л3	2×104
	Л4	8,7×103
	С1	2,05×10 5	21,7×10 4±1,44×104
	С3	2,33×10 5
	С4	2,13×105
2. Моксифлоксацин	Л1	1,07×104	1,12×104±0,18×10 4
	Л2	9,3×103
	Л3	1,1×104
	Л4	1,36×10 4
	С1	1,03×105	9,55×104±3,28×10 4
	С2	7,8×104
	С3	6,3×104
	С4	1,38×10 5
3. "моксифлоксацин/PLA" и "моксифлоксацин/PLG"	Л1	6,95×103	0,94×104±0,21×10 4
	Л2	1,05×104
	Л4	1,08×104
	С1	7,7×10 4	8,8×10 4±2,55×104
	С2	1,2×10 5
	С3	6,27×104
	С4	9,3×104

Таблица 2
№№	Моксифлоксацин, вес.%	Полимер, вес.%	Поливиниловый спирт, вес.%	Маннит, вес.%	Характеристика раствора
1	2	23	1,2	4,0	Кристаллизация не наблюдается, раствор стабилен
2	2,5	24	1,25	4,5	-<<- -<<- -<<-
3	3,0	26	1,3	5,5	-<<- -<<- -<<-