дигидрохлорид 1-(3-пирролидинопропил)-2-(4-фторофенил)имидазо[1,2-a]-бензимидазола, обладающий местноанестезирующим действием
Классы МПК: | C07D487/04 орто-конденсированные системы |
Автор(ы): | Анисимова Вера Алексеевна (RU), Галенко-Ярошевский Александр Павлович (RU), Минкин Владимир Исаакович (RU), Толпыгин Иван Евгеньевич (RU), Порханова Анна Владимировна (RU), Сергеев Владимир Владимирович (RU), Варлашкина Инесса Александровна (RU), Футорянская Тамара Николаевна (RU), Тлишева Зарема Шумафовна (RU), Пеливанова Мария Харлампиевна (RU) |
Патентообладатель(и): | Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Южный Федеральный Университет" (RU), Негосударственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Кубанский медицинский институт" (КМИ) (RU), Федеральное государственное учреждение "Межотраслевой научно-технический комплекс "Микрохирургия глаза" имени академика С.Н. Федорова" Федерального Агентства по здравоохранению и социальному развитию (ФГУ МНТК "Микрохирургия глаза" им. акад. С.Н. Федорова Росздрава) (RU) |
Приоритеты: |
подача заявки:
2006-11-16 публикация патента:
10.12.2007 |
Изобретение относится к новому 1,2-дизамещенному имидазо[1,2-а]бензимидазола. Описывается дигидрохлорид 1-(3-пирро-лидинопропил)-2-(4-фторофенил)имидазо[1,2-а]бензимидазола формулы I:
Соединение обладает местноанестезирующим действием при поверхностной (терминальной) анестезии. Технический результат - получено новое соединение, обладающее полезными биологическими свойствами. 3 табл.
Формула изобретения
Дигидрохлорид 1 -(3-пирролидинопропил)-2-(4-фторофенил)имидазо [1,2-а]бензимидазола формулы I
Описание изобретения к патенту
Изобретение относится к новому 1,2-дизамещенному имидазо[1,2-а]-бензимидазола, а именно к водорастворимому дигидрохлориду 1-(3-пирролидинопропил)-2-(4-фторофенил)имидазо[1,2-а]бензимидазола формулы I:
обладающему местноанестезирующим действием при поверхностной (терминальной) анестезии.
Широкое применение в клинике для терминальной (поверхностной) анестезии получил анестетик дикаин (тетракаин), который по обезболивающей активности в 2-3 раза превосходит кокаин и в 10-12 раз - новокаин, однако подобно кокаину обладает высокой токсичностью (М.Д.Машковский. Лекарственные средства, 15-е изд., перераб. и дополн. - М.: Медицина, 1998, ч.1, с.371-382). Кроме того, побочные явления, (тахикардии, судороги, потеря сознания, паралич дыхательного центра), вызываемые им (Б.М.Бобров. Наш опыт применения раствора тримекаина для поверхностной анестезии в ЛОР-хирургии. Мед. сестра, 1990, №9, с.14-17), затрудняют его широкое применение (О.Ф.Конобевцев, Н.П.Полевая. Действие водных растворов дикаина и пиромекаина на эпителий слизистой оболочки полости рта. Стоматология, 1990, т.69, №3, с.39-41).
В ряду 1,2-дизамещенных имидазо[1,2-а]бензимидазола известны соединения, обладающие местноанестезирующим действием.
Наиболее близким по структуре веществом среди 1,2-дизамещенных имидазо[1,2-а]бензимидазола является дигидрохлорид 1-(3-пирролидинопропил)-2-фенилимидазо[1,2-а]бензимидазола (II), обладающий местноанестезирующим действием [Анисимова В.А., Галенко-Ярошевский А.П., Попков В.А., Каде Е.А., Осипова М.М., Спасов А.А. Дигидрохлорид 1-(3-пирролидинопропил)-2-фенилимидазо[1,2-а]бензимидазола, обладающий местноанестезирующим действием. Патент РФ №2160265(2000), С07D 487/04, А61К 31/4188, А61Р 23/02].
Техническим результатом изобретения является новое соединение в ряду 2-замещенных 1-(3-пирролидинопропил)имидазо[1,2-а]бензимидазола, проявляющее местноанестезирующее действие, более эффективное, чем известный в этом ряду дигидрохлорид 1-(3-пирролидинопропил)-2-фенилимидазо[1,2-а]бензимидазола [Патент РФ №2160265 (2000)], а также более эффективное, чем известный, широко применяемый обезболивающий препарат дикаин.
Технический результат изобретения достигается соединением I, синтез которого заключается во взаимодействии 2-(3-гидроксипропиламино)бенз-имидазола (III) с 4-фторофенацилбромидом, дальнейшей циклизации образующегося гидробромида 1-(4-фторофенацил)-2-(3-гидроксипропиламино)бензимидазола (IV) с одновременным замещением гидроксигруппы на атом брома при кипячении в конц. НВг. Последующее замещение атома брома в гидробромиде 1-(3-бромопропил)-2-(4-фторофенил)имидазо[1,2-а]-бензимидазола (V) на пирролидин и перевод полученного 1-(3-пирролидинопропил)замещенного (VI) в дигидрохлорид обычными методами приводит к соединению I:
Ниже приведены методики синтеза предлагаемого соединения.
Пример. Дигидрохлорид 1-(3-пирролидинопропил)-2-(4-фторофенил)-имидазо[1,2-а]бензимидазола (I).
Стадия 1. Гидробромид 2-(3-гидроксипропиламино)-1-(4-фторофенацил)бензимидазола (IV). В нагретый почти до кипения раствор 1,9 г (10 ммоль) 2-(3-гидроксипропиламино)бензимидазола (III) в 15 мл 2-пропанола вносят 2,75 г (10,5 ммоль) 4-фторофенацилбромида, синтезированного бромированием 4-фтороацетофенона эквимолярным количеством брома в этаноле, и смесь кипятят до полного протекания реакции (контроль - ТСХ, 4-5 ч). По окончании реакции массу охлаждают, выпавший осадок отфильтровывают и тщательно промывают ацетоном. Выход 3,8 г (93,13%). Белоснежные блестящие чешуйки с т.пл. 264-265°С (разложение, из этанола).
Найдено, %: С 52,8; Н 4,9; Br 19,4; F 4,5; N 10,5.
C18H 18FN3O2·HBr.
Вычислено, %: С 52,9; H 4,7; Br 19,6; F 4,7; N 10,3.
ИК-спектр (вазелин, масло), см-1: 1705 (С=O), 1675 (C=N<), 3070-3310 (ОН, NH).
Спектр 1Н ЯМР (DMSO-d6), , м.д.: 1,87 (2Н, кв, CHr), 3,6 (4Н, к, NCH 2, СН2О), 6,15 (2Н, с, CH 2СО), 7,1-8,2 (8Н, м, аромат. Н), 9,12 (1Н, т, NH).
Стадия 2. Гидробромид 1-(3-бромопропил)-2-(4-фторофенил)имидазо-[1,2-а]бензимидазола (V). Кипятят 3,05 г (7,5 ммоль) соединения IV в 30 мл конц. HBr до полного протекания реакции (6-8 ч, контроль - ТСХ: Al 2О3, CHCl3; Rf исходного 0,1, Rf конечного 0,85). Выпавший осадок после охлаждения реакционной массы отфильтровывают на стеклянном фильтре, хорошо отжимают и тщательно промывают от кислоты ацетоном. Получают 3,34 г (97,9%) практически чистого гидробромида V, которые можно вводить в дальнейшие реакции без дополнительной очистки. Т. пл. 237-238°С (из этанола).
Найдено, %: С 48,0; Н 3,5; Br 34,8; N 9,5.
C18H15BrFN 3·HBr.
Вычислено, %: С 47,9; Н3,6; Br 35,0; N 9,3.
ИК-спектр (вазелин, масло), см-1 : 1500, 1595,1605 (С=С), 1665 (C=N+<).
Спектр 1H ЯМР (DMSO-d 6 - CCl4), , м.д.: 2,05 (2Н, кв, СН2), 3,62 (2Н, т, СН2), 4,48 (2Н, т, CH 2), 7,41-8,28 (9Н, м, аромат. Н), 14,8-15,8 (1Н, широкая полоса, N+H).
Стадия 3. Дигидрохлорид 1-(3-пирролидинопропил)-2-(4-фторофе-нил)имидазо[1,2-а]бензимидазола (I). Смесь 0,91 г (2 ммоль) гидробромида V и 2,5 мл свежеперегнанного пирролидина кипятят 2-3 часов, следя за ходом реакции с помощью ТСХ. После окончания реакции массу охлаждают, выливают в 25 мл холодной воды и экстрагируют хлороформом. Хлороформный экстракт промывают водой, сушат безводным Na2SO 4 и после упаривания до небольшого объема пропускают через слой оксида алюминия, элюируя 1-(3-пирролидинопропил)-2-(4-фторофенил)имидазо[1,2-а]-бензимидазол хлороформом. Масло (0,67 г, 92,3%), оставшееся после упаривания элюата, растворяют в сухом эфире или ацетоне и раствор подкисляют эфирным раствором HCl или насыщенным раствором HCl в изопропиловом спирте. Осадок дигидрохлорида I отделяют, промывают ацетоном и высушивают при 105-110°С. Белоснежные кристаллы с т.пл. 227-229°С (разл., из ацетонитрила).
Найдено, %: С 60,5; Н 5,7; Cl 16,5; F 4,2; N 13,0.
C22 H23FN4·2HCl.
Вычислено, %: С 60,7; Н 5,8; С1 16,3; F 4,4; N 12,9.
ИК-спектр (вазелин, масло), см-1: 1660 (С=N+<), 2450-2720, 3150-3275 N +Н).
Спектр 1Н ЯМР (DMSO-d 6 - CCl4), , м.д.: 1.85-2.13 (4Н, т, (СН2) 2); 2.20-2.50 (2Н, м, СН2); 3.07-3.38 (6Н, м, N(CH2)3); 4.34 (2Н, т, NCH2); 7.20-8.10 (8Н, м, аром. Н); 8.30 (1Н, с, 3-Н); 11.72 (1Н, ушир. с, N+ Н), N+H в обмене.
В основу скрининговых исследований положены Методические указания по изучению местноанестезирующей активности фармакологических веществ (Игнатов Ю.Д., Червякова И.В., Васильев Ю.Н., Галенко-Ярошевский А.П., Жуков В.Н. Методические указания по изучению местноанестезирующей активности фармакологических веществ // В кн.: Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ /Под общей редакцией чл. - корр. РАМН, проф. Р.У.Хабриева. - 2-изд., перераб. и доп. - М.: ОАО "Издательство "Медицина", 2005. - С.364-392).
Эксперименты проведены в соответствии со статьей 11-й Хельсинкской декларации Всемирной медицинской ассоциации (1964), "Международными рекомендациями по проведению медико-биологических исследований с использованием животных" (1985) и Правилами лабораторной практики в Российской Федерации (приказ МЗ РФ №267 от 19.06.2003 г.).
Поверхностную (терминальную) анестезию исследовали в экспериментах на роговице глаз кроликов с использованием метода Ренье-Валета (Прянишникова Н.Т., Шаров Н.А. Тримекаин. Фармакология и клиническое применение. - Л.: Медицина, 1967. - 239 с.; Ю.Д.Игнатов и соавт., 2005), при этом параллельно изучали возможное раздражающее действие по Setnicar (Setnicar I. Tolerance indices of some phenoxyethylamino derivatives with local anaesthitic properties // Arzneim. - Forsch. - 1966. - Bd. 16, №5. - S.623).
Острую токсичность исследовали [определяли среднюю летальную (смертельную) дозу - ЛД 50] в опытах на мышах при подкожном введении (Прозоровский В.Б. Использование метода наименьших квадратов для пробит-анализа кривых летальности // Фармакол. и токсикол. - 1962. - Т. 25, №1. - С.115-119).
Статистическую обработку данных, учитываемых в градированной форме, проводили по М.Л.Беленькому (Беленький М.Л. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта. - Л., 1963. - 152 с.) и с помощью таблиц Н.Н.Самойлова (Самойлов Н.Н. Таблицы значений средней ошибки и доверительного интервала средней арифметической величины вариационного ряда. - Томск. 1970. - 63 с.).
Учет результатов исследований, выраженных в альтернативной форме, определение ЛД50 , ЭК50, границ доверительного интервала и терапевтического индекса, или широты терапевтического действия (ЛД50/ЭК50) осуществляли по методам, описанным В.Б.Прозоровским (1962) и М.Л.Беленьким (1963).
Установлено, что в условиях поверхностной анестезии в опытах на роговице глаз кроликов минимальной и максимальной анестезирующими концентрациями для соединения I являются 0,0039 и 0,25%, а для дикаина и соединения II - 0,0312 и 1%, 0,0156 и 0,5% соответственно. Индексы Ренье, выражающие силу анестезирующего действия вещества в испытуемой концентрации, для соли I в 0,0039, 0,0078, 0,0156, 0,0312, 0,0625, 0,125, 0,25, 0,5 и 1% растворах составляют 114,0, 218,0, 324,0, 788,5, 956,0, 1175,0 и 1300,0, для дикаина в 0,0312, 0,0625, 0,125, 0,25, 0,5 и 1% растворах - 116,8, 174,4, 346,4, 821,0, 1038,0 и 1300,0, для соли II в 0,0156, 0,0312, 0,0625, 0,125, 0,25 и 0,5% - 125,0, 561,8, 742,5, 852,3, 1250,0 и 1300,0, соответственно. Индексы Валета для соединения I составили: относительно дикаина (взятого для сопоставления в 0,0312, 0,0625, 0,125, 0,25 и 0,5% растворах) равны 7,8, 7,7, 6,8, 1,7 и 1,3 соответственно, при этом эквивалентные анестетические концентрации составили 0,0040, 0,0081, 0,0184, 0,1506 и 0,3904% соответственно; относительно соединения II (взятого для сопоставления в 0,0156, 0,0312, 0,0625, 0,125, 0,25 и 0,5% растворах) равны 3,5, 1,4, 1,3, 1,4, 1,04 и 1,0, при этом эквивалентные анестетические концентрации составили 0,0045, 0,0220, 0,0476, 0,0882, 0,2396 и 0,5% (табл.1). Важно отметить, что соединения I и II ни в одной из исследованных концентраций не оказывают раздражающего действия на ткани переднего отдела глаза, тогда как дикаин в 1% растворе индуцировал гиперемию конъюнктивы век в течение 30-300 мин.
Время наступления анестезии при инстилляции в конъюнктивальный мешок глаза равнозначных (одинаковых концентрациях) растворов соединений I и II было практически сопоставимо и колебалось в пределах 2-4 мин, а дикаина - 1-3 мин. Время наступления полной анестезии в случаях использования соединений I и II в одинаковых концентрациях также существенно не отличалось и было в пределах 3-4 мин, а дикаина - 2-3 мин. Время окончания полной анестезии под влиянием соединения I (в соответствующих растворах) в 3,85, 2,99 и 2,47 раза и в 2,06, 1,56, 1,45, 1,46 и 1,49 раза больше, чем при использовании дикаина (0,125, 0,25 и 0,5% растворы) и соединения II (0,0312, 0,0625, 0,125, 0,25 и 0,5% растворы), соответственно. Общая продолжительность анестезии при применении соли I (в соответствующих растворах) в 3,30, 2,83 и 2,52 раза и в 1,47, 1,45, 1,38, 2,63, 1,47 и 1,30 раза больше, чем под влиянием дикаина (0,125, 0,25 и 0,5% растворы) и соли II (0,0312, 0,0625, 0,125, 0,25 и 0,5% растворы), соответственно (табл.2).
По местноанестезирующей активности - при сопоставлении ЭК 50, выраженных в мМ, и терапевтических индексов - соединение I соответственно в 10,1 и 1,9 раза более значимо и в 10,5 и 2,7 раза имеет большую широту терапевтического действия, чем дикаин и соединение II (табл.3).
Таким образом, при поверхностном методе анестезии соединение I по активности и широте терапевтического действия значительно превосходит дикаин и соединение II. На его основе возможно создание местнообезболивающего лекарственного средства, предназначенного для поверхностной анестезии.
Таблица 1 | |||||
Сравнительная активность (по индексам Ренье и Валета) соединений I, II и дикаина при поверхностной анестезии в опытах на роговице глаз кроликов | |||||
Концентрация вещества, % | Индексы Ренье 1 | Индексы Валета | |||
соединение I | соединение II | дикаин | относительно II | относительно дикаина | |
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
0,0039 | 140,0±8,3 | - | - | - | - |
(92,6÷135,4) | |||||
0,0078 | 218,0±12,0 | - | - | - | - |
(187,1÷248,9) | |||||
0,0156 | 324,0±13,0 | 125,0±18,5 | - | 3,5 | - |
(290,4÷357,6) | (80,6÷169,4) | [0,0045] | |||
0,0312 | 788,5±23,3 | 561,8±52,3 | 116,8±23,0 | 1,4 | 7,8 |
(728,5÷848,5) | (436,4÷687,3) | (61,7÷171,9) | [0,0220] | [0,0040] | |
0,0625 | 956,2±18,7 | 742,5±17,4 | 174,4±22,9 | 1,3 | 7,7 |
(907,8÷1004,2) | (700,2÷784,2) | (119,6÷229,2) | [0,0476] | [0,0081] | |
0,125 | 1175,0±19,8 | 852,3±17,7 | 346,4±19,5 | 1,4 | 6,8 |
(1128,6÷1221,4) | (809,8÷894,8) | (299,7÷393,1) | [0,0882] | [0,0184] | |
Окончание таблицы 1 | |||||
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
0,25 | 1300,0±0,0 | 1250,0±44,3 | 821,0±40,5 | 1,04 | 1,7 |
(1143,7÷1356,3) | (723,8÷918,2) | [0,2396] | [0,1506] | ||
0,5 | 1300,0±0,0 | 1300,0±0,0 | 1038,0±47,9 | 1,0 | 1,3 |
(922,9-1153,1) | [0,5] | [0,3904] | |||
1,0 | НИ | НИ | 1300,0±0,0 | - | - |
1Представлены средние арифметические, вычисленные из 6 опытов, со стандартной ошибкой средней. Примечание. В скобках: круглых - доверительные границы при р=0,05, квадратных - эквивалентные анестетические концентрации для соли I |
Класс C07D487/04 орто-конденсированные системы