биологически активный стимулятор и способ коррекции вторичных иммунодефицитов у телят с его применением

Формула изобретения

1. Биологически активный стимулятор, содержащий спиртовой экстракт растительного сырья, отличающийся тем, что в качестве растительного сырья используют смесь равных количеств травы и соцветий эхинацеи пурпурной, мать-и-мачехи, травы тимьяна ползучего и корней солодки

2. Способ коррекции вторичных иммунодефицитов, включающий внутримышечную инъекцию зоолана в виде 0,3% водного раствора, отличающийся тем, что дополнительно назначают для применения внутрь спиртовой экстракт равных количеств травы и соцветий эхинацеи пурпурной, мать-и-мачехи, травы тимьяна ползучего и корней солодки в виде водного раствора 7-8% концентрации в дозе 2,0-2,5 мл/кг массы животного в течение 10-15 дней с интервалом в 24 ч.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к ветеринарии, касается средства растительного происхождения, обладающего иммуностимулирующим действием, и может быть использовано как основной или дополнительный компонент стимуляции иммунной системы молодняка сельскохозяйственных животных, преимущественно телят, для повышения общей резистентности и иммунологической реактивности к действию различных повреждающих агентов.

Применение иммуномодулирующих препаратов направлено преимущественно на коррекцию вторичных иммунодефицитов, которые проявляются в частых, рецидивирующих, трудно поддающихся лечению инфекционно-воспалительных заболеваниях различной локализации. Для молодняка крупного рогатого скота первые дни жизни и начало выпойки сборного молока (в 20-дневном возрасте) являются критическими иммунологическими периодами, что связано с физиологическими особенностями организма телят, в частности иммунодефицитным состоянием организма телят до первой выпойки молозива, а в 20-дневном возрасте - с расходыванием молозивных защитных белков при недостаточности собственного иммунопоэза, а также стрессами из-за смены кормления и перехода от индивидуального к групповому содержанию. Так, наши исследования, проведенные в хозяйствах Нижегородской области, длительно неблагополучных по желудочно-кишечным и респираторным инфекциям, выявили иммунодефицитные состояния у клинически здоровых телят как 3-5-, так и 20-дневного возраста (таблицы 1 и 2).

Таблица 1
Иммунный статус телят 3-5-дневного возраста в условиях стационарного неблагополучия 1
Показатели		Клинически здоровые телята		Здоровые телята из благополучного хозяйства
Лейкоциты, 109л		6,2±0,1		7,1±0,1
Эритроциты, 1012/л		5,7±0,2		6,6±0,2
Функциональная активность нейтрофилов крови, %:
- спонтанный тест
- индуцированный тест		3,2±0,2		4,8±0,4
		6,7±0,4		10,4±0,7
Бактерицидная активность сыворотки крови, %		39,4±3,0		52,1±2,4
Лизоцимная активность сыворотки крови, %		1,5±0,2		2,5±0,2
Общий белок, г %		5,0±0,2		6,12±0,1
Таблица 2
Иммунный статус телят 20-дневного возраста в условиях стационарного неблагополучия
Показатели	Клинически здоровые телята 20-дневного возраста		Здоровые телята 20-дневного возраста из благополучного хозяйства
Лейкоциты, 109 /л	7,1±0,1		7,5±0,1
Эритроциты, 10 12/л	7,6±0,1		8,0±0,1
Функциональная активность нейтрофилов крови, %:
- спонтанный тест	3,8±0,2		4,8±0,1
- индуцированный тест	12,8±1,0		25,6±1,2
Бактерицидная активность сыворотки крови, %	51,4±1,3		76,0±1,6
Лизоцимная активность сыворотки крови, %	1,5±0,2		3,8±0,1
Общий белок, г %	5,86±0,12		8,36±0,04

Известен ряд неспецифических стимуляторов иммунитета (синтетического, бактериального, растительного происхождения), различающихся по структуре и механизмам действия.

Из известных препаратов растительного происхождения иммуностимулирующие свойства наиболее изучены у препаратов элеутерококка, пустырника, препаратов из семян тыквы, травы эхинацеи пурпурной, левзеи сафлоровидной. Однако данные об иммунотропном действии этих препаратов отличаются противоречивостью /1, 2, 3, 4, 5, 6/.

Известен также препарат растительного происхождения тетраиммунофит-фитоэкстракционный препарат из травы зверобоя, листа сены, плодов шиповника и корнеплодов свеклы, обладающий иммуностимулирующим действием на гуморальный иммунный ответ /7/.

Наиболее близким к заявленному является средство, обладающее иммуностимулирующим действием, представляющее собой водный экстракт из трав зверобоя продырявленного (Hypericum perforatum L), тимьяна ползучего (Thymus serpyllum), мяты перечной (Mentha piperita L.) и мать-и-мачехи (Tussilago farfara), взятых в равных количествах /8/.

С целью расширения арсенала средств, обладающих иммуностимулирующим действием, предлагается использовать экстракт из травы и соцветий эхинации пурпурной (Echinazea purpurea), мать-и-мачехи (Tussilago farfara), травы тимьяна ползучего (Thymus serpyllum) и корней солодки (Glycyrrhiza glabra), взятых в равных количествах.

Эхинацея пурпурная (Echinazea purpurea) - многолетнее травянистое растение с коротким корневищем, плод - серовато-бурая семянка. Разводится в южной и средней полосах европейской части России. Собирают цветочные корзинки в июле-августе, корневища с корнями - поздней осенью. Химический состав: эфирное масло (в цветочных корзинках 0,13-0,48%), в состав которого входит нециклический секвитерпен, гликозид, бетаин, смола, органические кислоты (пальмитиновая, линолевая, церотиновая), фитостерины (в корнях). В народной и научной медицине эхинацею пурпурную применяют в комплексной терапии рецидивирующих инфекционно-воспалительных заболеваний верхних и нижних дыхательных путей. Противопоказания к применению: гиперчувствительность, аутоиммунные заболевания, туберкулез, лейкоз, беременность, период лактации, детский возраст, хронические заболевания печени.

Мать-и-мачеха (Tussilago farfara) встречается повсеместно. Собирают листья в первую половину лета. Химический состав: слизь, при гидролизе которой образуются глюкоза, галактоза, уроновые кислоты, горькие гликозиды, эфирное масло, сапонины, фитостерин, каротиноиды, яблочная и винная кислоты и др. В народной и научной медицине мать-и-мачеху применяют как отхаркивающее, мягчительное, противовоспалительное, дезинфицирующее и потогонное средство.

Тимьян ползучий (Thymus serpyllum) естественно растет в лесной зоне. Собирают надземные части растений в период цветения. Химический состав: эфирное масло, дубильные вещества, горечи, флавоноиды, урсоловая и олеаноловая кислоты. В народной и научной медицине чабрец применяют как отхаркивающее, антисептическое, противосудорожное и болеутоляющее средство.

Солодка голая (Glycyrrhiza glabra L.) - многолетнее корнеотпрысковое травянистое растение семейства. В диком виде произрастает на юге Западной Европы, в Средиземноморье, Передней Азии, Иране, Турции, Афганистане, Китае, в России - на юге европейской части и в Западной Сибири. Собирают корневища с корнями весной или летом. Химический состав: тритерпеновый сапонин глицирризин - кальциевая и калиевая соли глицирризоновой кислоты (23%), флаваноиды, производные флаванона и халкона, полисахариды (крахмал, пектиновые вещества), аскорбиновая кислота. Препараты корня солодки применяют как отхаркивающее и слабительное (порошок, экстракты сухой и густой, сироп, эликсир грудной), как противовоспалительное, спазмолитическое и антисекреторное средство при язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки, антиаллергическое, противовоспалительное при бронхиальной астме, экземах, аллергических дерматитах.

Экстракт из травы и соцветий эхинации пурпурной, мать-и-мачехи, травы тимьяна ползучего и корней солодки готовится фармакопейным способом в соотношении сырья и извлекателя 1:10. В качестве экстрагента используют этиловый спирт концентрацией 70%. Лекарственное сырье измельчают до частиц размером 1-3 мм, смешивают в равных количествах, навеску сырья помещают в стеклянный сосуд, добавляют расчетное количество этилового спирта концентрацией 70%, выдерживают 7 суток в темном месте при температуре 15-20°С Затем спиртовую настойку процеживают через холст или два слоя марли, отжимая сырье, фильтруют.

Пример. В стеклянный сосуд поместили 500 г лекарственного сырья (равные количества из травы и соцветий эхинации пурпурной, мать-и-мачехи, травы тимьяна ползучего и корней солодки), добавили 5,0 л этилового спирта концентрацией 70%, поставили в темное место и выдерживали при температуре 15-20°С в течение 7 суток, после чего процедили через холст, отжимая сырье.

Для коррекции вторичных иммунодефицитов у телят на фоне внутримышечной инъекции зоолана применяют биологически активный стимулятор в виде раствора 7-8% концентрации, который готовят на охлажденной кипяченой воде и дают внутрь в течение 10-15 дней с интервалом в 24 часа в дозе 2,0-2,5 мл/кг массы животного.

Сущность способа поясняется примерами.

Пример 1. Стимулирующее влияние биологически активного стимулятора в соответствии с изобретением на иммунологический статус новорожденных телят изучали в хозяйстве, длительно неблагополучном по болезням молодняка телят (заболеваемость 50-70%, смертность - 20-40%). В условиях неполноценности (дефицит макро- и микроэлементов) кормления коров-матерей (зимний стойловый период) по принципу аналогов с учетом клинико-физиологического состояния, породы и массы тела по принципу аналогов формировали 2 группы новорожденных телят живой массой при рождении 28-30 кг для опыта и контроля. Телятам первой группы (опытной - 14 голов) применяли внутрь биологически активный стимулятор в виде водного раствора 7% концентрации в дозе 2,0 мл/кг массы животного в течение 10 дней с интервалом в 24 часа. Телята контрольной группы (16 голов) препарата не получали. Параметры иммунологического статуса телят изучали на 1, 6 и 12 сутки по общепринятым в биологии современным тестам. Результаты представлены в таблице 3.

Таблица 3
Иммунобиологические показатели крови телят.
Показатели	Возраст, сут
	1	6	12
Т-лимфоциты, %
В-лимфоциты, %
Бактерицидная активность, %
Лизоцимная активность, %
Бетализинная активность, %
Иммуноглобулины, мг/мл
G
М
Общий белок, г %
Примечание: в числителе - показатели подопытных животных, в знаменателе - контрольных

При анализе иммунобиологических показателей (таблица 3) подопытных и контрольных телят установили, что в возрасте 1 суток различия практически отсутствовали. У животных опытной группы к 6-дневному возрасту происходило повышение основных показателей клеточного и гуморального иммунитета, которое продолжилось до 12-дневного возраста. Важное практическое значение имело увеличение количества иммуноглобулинов в сыворотке крови подопытных телят, что свидетельствовало о лучшей усвояемости новорожденными молозивных и более раннем начале синтеза собственных иммуноглобулинов.

Пример 2. Эффективность способа коррекции вторичных иммунодефицитов с применением биологически активного стимулятора в соответствии с изобретением на фоне внутримышечной инъекции зоолана в виде 0,3% раствора в дозе 1,6 мл трехкратно с интервалом в 5 дней изучали в условиях хозяйства, стационарно неблагополучного по желудочно-кишечным болезням телят (заболеваемость 50-70%, летальность - 20-40%). По принципу аналогов подбирали клинически здоровых телят 1-3-дневного возраста, которых распределяли на три группы. Телята опытной группы дополнительно применяли внутрь биологически активный стимулятор в виде водного раствора 7% концентрации в дозе 2,0 мл/кг массы животного в течение 10 дней с интервалом в 24 часа. Эффективность оценивали по иммунобиологическим показателям (таблица 4).

Как видно из таблицы 4, во всех опытных группах проявилась тенденция к нормализации иммунобиологических показателей. Более выраженные изменения нормализующего характера установлены в первой группе.

Таблица 4
Эффективность способа коррекции вторичных иммунодефицитов с применением биологически активного стимулятора
Показатели	Группы телят
	Первая	Вторая	Третья
Способ воздействия	Зоолан + заявленное средство	Зоолан + фитоэкстракт (аналог)	Зоолан (базовый способ)
Т-лимфоциты, %
В-лимфоциты, %
Бактерицидная активность, %
Лизоцимная активность, %
Бетализинная активность, %
Иммуноглобулины, мг/мл
G
М
Общий белок, г %
Примечание: в числителе - показатели до начала опыта, в знаменателе - через 5 дней после окончания опыта

Пример 3. Эффективность способа коррекции вторичных иммунодефицитов с применением биологически активного стимулятора в соответствии с изобретением на фоне внутримышечной инъекции зоолана в виде 0,3% раствора в дозе 1,6 мл трехкратно с интервалом в 5 дней изучали в условиях хозяйства, стационарно неблагополучного по респираторным болезням телят вирусно-бактериальной этиологии с заболеваемостью до 60%. Этиологическую роль вирусов инфекционного ринотрахеита (ИРТ), парагриппа-3 (ПГ-3) и вирусной диареи - болезни слизистых (ВД-БС) подтвердили их выделением в сыворотках телят вируснейтрализующих антител к этим вирусам в 77,5, 87,5 и 85,7% случаев соответственно. Бактериальная микрофлора была представлена стрептококками, сальмонеллами и протеями. Иммунологический статус характеризовался снижением на 10-12% относительного содержания В-лимфоцитов, популяций и субпопуляций Т-лимфоцитов с нарушением их соотношений, функциональной активности нейтрофилов, снижением уровня иммуноглобулинов G и М, бактерицидной и лизоцимной активности сыворотки крови. По принципу аналогов подбирали клинически здоровых телят 10-15-дневного возраста, которых распределяли на три группы. Эффективность оценивали по иммунобиологическим показателям (таблица 5).

Таблица 5
Эффективность способа коррекции вторичных иммунодефицитов с применением биологически активного стимулятора
Показатели	Группы телят
	Первая	Вторая	Третья
Способ воздействия	Зоолан + заявленное средство	Зоолан + фитоэкстракт (аналог)	Зоолан (базовый способ)
Т-лимфоциты, %
В-лимфоциты, %
Бактерицидная активность, %
Лизоцимная активность, %
Бетализинная активность, %
Фагоцитарная активность нейтрофилов крови (НТС-тест), %
- спонтанный
- индуцированный
Иммуноглобулины, мг/мл
G
М
Примечание: в числителе - показатели до начала опыта, в знаменателе - показатели после окончания опыта

Пример 4. Эффективность способа коррекции вторичных иммунодефицитов с применением биологически активного стимулятора в соответствии с изобретением на фоне внутримышечной инъекции зоолана в виде 0,3% раствора в дозе 1,6 мл трехкратно с интервалом в 5 дней изучали в условиях хозяйства, стационарно неблагополучного по вирусным респираторным болезням телят с заболеваемостью 70-80%. Этиологическую роль вирусов инфекционного ринотрахеита (ИРТ), парагриппа-3 (ПГ-3) и вирусной диареи - болезни слизистых (ВД-БС) подтвердили их выделением в сыворотках телят вируснейтрализующих антител к этим вирусам в 77,5, 87,5 и 85,7% случаев соответственно. Иммунологический статус характеризовался снижением на 10-12% относительного содержания В-лимфоцитов, популяций и субпопуляций Т-лимфоцитов с нарушением их соотношений, функциональной активности нейтрофилов, снижением уровня иммуноглобулинов G и М, бактерицидной и лизоцимной активности сыворотки крови. По принципу аналогов подбирали клинически здоровых телят 20-30-дневного возраста, которых распределяли на три группы. Эффективность оценивали по иммунобиологическим показателям (таблица 6).

Как видно из таблицы 6, после применения биологически активного стимулятора повышались все показатели естественной резистентности, в частности бактерицидная активность сыворотки крови на 31,2 и 32,6%, лизоцимная активность сыворотки крови на 31,8 и 36,4%, -лизинная активность сыворотки крови на 35,6 и 36,6%, функциональная активность нейтрофилов крови в спонтанном НСТ-тесте на 5,1% и в индуцированном тесте на 21,5 и 22,7% соответственно. Клинические наблюдения за животными вели до 2-месячного возраста. После курса обработки заявленным средством телята не заболевали. Заболеваемость телят во второй группе составила 90%, заболевший теленок переболел в легкой форме. В контроле из 3 заболевших телят один пал, еще один был вынужденно убит.

Проведенные нами исследования показали, что экстракт смеси равных количеств травы и соцветий эхинацеи пурпурной, мать-и-мачехи, травы тимьяна ползучего и корней солодки обладает иммуностимулирующей активностью, которая может быть использована для коррекции вторичных иммунодефицитов и стимуляции естественной резистентности при инфекционных заболеваниях, патогенетически связанных с недостаточностью иммунной системы. Эффективность заявленного биологически активного стимулятора обеспечивается наличием в его составе веществ, повышающих функциональную активность антиоксидантной и иммунной систем, в частности макрофагальных клеток. Средство является нетоксичным, содержит биодоступные полезные биологически активные вещества, включающие, например, эфирное масло, флавоноиды, картиноиды, фитостерин, сапонины, обладает экологической чистотой.

Источники информации

1. А.Д.Алтунин и др. // Здоровье, разведение и защита мелких домашних животных: Материалы 1 Междунар. конф. - Уфа, 2000.

2. И.Ф.Горлов и др. // Ветеринария, 1996, №7.

3. А.А.Ивановский // Ветеринарный врач, 2000, №2.

4. А.В.Коробко // Ветеринария, 2000, №5.

5. В.П.Николаенко // Ветеринария, 1990, №4.

6. Ш.Б.Садыков // Ветеринария, 1990, №4.

7. Л.А.Макарадзе // Ветеринария, 1999, №3.

8. RU 22501101 С1, 2005.