способ диагностики сформированности постнекротических кист поджелудочной железы
Классы МПК: | G01N33/68 с использованием протеинов, пептидов или аминокислот G01N33/52 использование соединений или составов для колориметрического, спектрофотометрического или флуорометрического анализа, например реактивной бумаги |
Автор(ы): | Долгих Владимир Терентьевич (RU), Полуэктов Владимир Леонидович (RU), Морозов Сергей Валентинович (RU), Тропина Ирина Викторовна (RU), Ершов Антон Валерьевич (RU) |
Патентообладатель(и): | ГОУ ВПО Омская государственная медицинская академия (RU) |
Приоритеты: |
подача заявки:
2006-05-05 публикация патента:
20.11.2007 |
Изобретение относится к медицине, в частности к малоинвазивным методам абдоминальной хирургии, и может быть использовано при диагностическом и лечебном вмешательстве при кистозных образованиях поджелудочной железы. Сущность способа заключается в том, что исследуют аспирируемую из кисты жидкость, определяя в ней содержание олигопептидов по методу Lowry. При содержании олигопептидов выше 14,1 мкг/л диагностируют несформированную кисту, а при содержании олигопептидов менее 14,0 мкг/л - сформированную. Использование способа позволяет улучшить диагностику степени сформированности постнекротических кист поджелудочной железы и, соответственно, выбрать оптимальную тактику лечения.
Формула изобретения
Способ диагностики сформированности постнекротических кист поджелудочной железы, отличающийся тем, что исследуют аспирируемую из кисты жидкость, определяя в ней содержание олигопептидов по методу Lowry, и при содержании олигопептидов выше 14,1 мкг/л - диагностируют несформированную кисту, а при содержании олигопептидов менее 14,0 мкг/л - сформированную.
Описание изобретения к патенту
Изобретение относится к медицине, в частности к малоинвазивным методам абдоминальной хирургии, и может быть использовано при диагностическом и лечебном вмешательстве при кистозных образованиях поджелудочной железы.
Известны методики исследования содержимого псевдокист на бактериальное обсеменение (Б.С.Брискин, Г.С.Рыбаков, М.А.Васильева и др. / Тактика лечения больных с кистами поджелудочной железы // Анналы хирургической гепатологии, 1999, том 4, № 2. с. 148-149); методика исследования содержимого псевдокист на уровень содержания амилазы с целью установления связи с Вирсунговым протоком (П.Г.Бронштейн, Н.А.Гореликов, Н.У.Садыкова / Результаты лечения нагноившихся кист поджелудочной железы // Анналы хирургической гепатологии, 1999, том 4, № 2. с. 149). Эти методики неинформативны для определения степени зрелости кисты.
Методика оценки толщины стенки кисты, характера содержимого при помощи УЗИ (Р.Т.Меджидов, А.И.Хамидов, М.А.Алиев и др. / Диагностика и лечение кист поджелудочной железы // Анналы хирургической гепатологии, 1999, том 4, № 2, с. 167) не всегда информативна, является в некоторой степени субъективной и зависит от опыта врача, проводящего исследование.
Известна методика определения содержания олигопептидов в биологических жидкостях - в плазме крови, на эритроцитах, в моче. К 1 мл разведенного в соотношении 1:9 супернатанта (надосадочной жидкости), полученного при осаждении белков исследуемой среды раствором трихлоруксусной кислоты (ТХУ), добавляют 2 мл щелочно-медного реактива и оставляют при комнатной температуре на 10 мин. Затем добавляют 0,2 мл реактива Фолина-Чокалтеу, перемешивают и через 30-40 мин измеряют величину оптической плотности при =750 нм на спектрофотометре. В качестве стандарта используется раствор альбумина с заведомо известной концентрацией. Содержание олигопептидов у практически здоровых людей в цельной крови 0,352-0,650 мкг/л (Lowry O.N., Rosenbrough N.J., Farr A.L., Randall R.J. Protein measurement with the Folin reagent // J. Boil. Chem, 1951, vol.193, № 1, p.265-275).
Задачей изобретения является улучшение диагностики сформированности постнекротической кисты.
Поставленная задача решается тем, что в способе диагностики постнекротических кист поджелудочной железы по содержанию олигопептидов в биологических жидкостях, определяемому по методу Lowry, исследуют аспирируемую из кисты жидкость. При содержании олигопептидов выше 14,1 мкг/л диагностируют несформированную псевдокисту, а при содержании олигопептидов менее 14,0 мкг/л - сформированную.
Способ осуществляют следующим образом: при диагностической или лечебной пункции кисты поджелудочной железы под контролем УЗИ аспирируемую жидкость исследуют на уровень олигопептидов по методу Lowry. Для определения необходимы следующие компоненты: реактив Фолина-Чокалтеу, щелочно-медный реактив, раствор альбумина, содержащий 0,25 мкг/л белка.
Порядок определения.
К 1 мл разведенного в соотношении 1:9 супернатанта, полученного при осаждении белков содержимого кисты поджелудочной железы раствором трихлоруксусной кислоты (ТХУ), добавляют 2 мл щелочно-медного реактива и оставляют при комнатной температуре на 10 мин. Затем добавляют 0,2 мл реактива Фолина-Чокалтеу, перемешивают и через 30-40 мин измеряют величину оптической плотности при =750 нм на спектрофотометре. В качестве стандарта используют раствор альбумина с заведомо известной концентрацией. Установлено, что содержание олигопептидов напрямую зависит от степени сформированности кисты.
По предложенной методике нами исследовано кистозное содержимое у 14 больных с несформированными кистами поджелудочной железы и у 10 - со сформированными кистами, при этом содержание олигопептидов при несформированных кистах было достоверно выше (р<0,01). Уровень содержания олигопептидов при несформированных кистах колебался в пределах от 14,1 до 71,1 мкг/л и в среднем составил 19,31±1,45 мкг/л; при сформированных кистах колебания были в пределах от 3,6 до 14,0 мкг/л, составляя в среднем 6,08±1,00 мкг/л.
Пример. Больной Р., 31 год, поступил в хирургическое отделение с диагнозом Хронический панкреатит. Постнекротическая киста поджелудочной железы. Из анамнеза известно, что около 4,5 мес. назад он перенес панкреонекроз. На момент поступления предъявлял жалобы на постоянную боль в эпигастрии давящего характера. При УЗИ в проекции хвостового отдела поджелудочной железы выявлено анэхогенное образование диаметром 105 мм с тонкостенной капсулой и солидным компонентом; при компьютерной томографии описана киста с нечетким контуром. Под контролем УЗИ киста пунктирована, полученное содержимое исследовано по методике Lowry, содержание олигопептидов составило 68,1 мкг/л. Интраоперационно выявлена несформированная киста поджелудочной железы с выраженным воспалительным перипроцессом, вследствие чего выполнено наружное дренирование кисты.
Существенность способа заключается в том, что при диагностировании по предложенному методу при уровне олигопептидов в содержимом кисты >14,1 мкг/л выполняют наружное дренирование кисты, а при содержании олигопептидов <14,0 мкг/л - внутреннее дренирование.
Класс G01N33/68 с использованием протеинов, пептидов или аминокислот
Класс G01N33/52 использование соединений или составов для колориметрического, спектрофотометрического или флуорометрического анализа, например реактивной бумаги