способ определения гестационного возраста плодов и новорожденных

Формула изобретения

Способ определения гестационного возраста плодов и новорожденных путем морфометрического исследования фрагментов фетальных органов, отличающийся тем, что для исследования забирают фрагменты печени и селезенки, определяют линейные коэффициенты усадки исследуемых тканей по относительному уменьшению линейных размеров стандартных фрагментов органов до их фиксации и после изготовления гистологических препаратов и по гистологическим срезам толщиной 4-5 мкм определяют в печени - показатель кроветворной активности паренхимы путем подсчета среднего количества профилей ядерных фрагментов миелоидных клеток, инфильтрирующих паренхиму долек в тестовом поле зрения гистологического среза площадью 2,95·10^-2 мм², в селезенке - средний диаметр лимфоидных узелков в мкм и среднюю плотность расположения лимфоидных узелков, путем подсчета среднего количества профилей лимфоидных узелков в тестовом поле зрения гистологического среза площадью 1,76 мм ², затем определяют истинные с учетом усадки значения этих параметров по формулам х₁=n _ка/k³ _L, x ₂=d·k_L, x₃ =n_лу/k² _L где х₁, х₂ , х₃ - значения показателей кроветворной активности печени, диаметра и плотности расположения лимфоидных узелков селезенки с учетом усадки, n_KA, b, n_лу - значения показателей кроветворной активности печени, диаметра и плотности расположения лимфоидных узелков селезенки с учетом усадки соответственно, k _L - величина соответствующего линейного коэффициента усадки равная для ткани печени 1,203, для ткани селезенки 1,161 и определяют точечную оценку гестационного возраста в неделях по формуле: где 38,118; -0,427; 4,374·10^-3 ; -1,5·10^-5; 2,43·10 ^-2; -4,290 - регрессионные коэффициенты, а интервальные оценки гестационного возраста плодов и новорожденных определяют с помощью номограммы по вычисленной точечной оценке.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к медицине, а именно к таким ее областям, как патологическая анатомия и судебная медицина, и предназначено для определения гестационного возраста плодов и новорожденных.

Известен способ определения гестационного возраста путем антропометрического исследования плодов. Сущность данного способа состоит в измерении массы и длины плода или новорожденного ребенка с последующим определением гестационного возраста по оценочным таблицам зависимости массы и длины тела плодов при рождении от срока гестации [1].

Недостатком данного способа является невозможность его использования при исследовании фрагментированного трупного материала, доставляемого после проведения плодоразрушающих операций, низкая точность при исследовании трупов плодов и новорожденных с тяжелыми врожденными пороками и синдромом задержки развития, а также плодов от многоплодных родов.

Известен способ определения гестационного возраста плода путем измерения скорости прохождения ультразвука через фрагменты теменных костей черепа [2].

Недостатками данного способа являются высокая трудоемкость, низкая точность и возможность его использования на ограниченном промежутке перинатального периода (только для доношенных и переношенных плодов).

Известен способ определения гестационного возраста плодов в судебной медицине путем антропометрического исследования костных останков плодов [3].

Недостатками данного способа являются невозможность его использования при вскрытиях трупов плодов и новорожденных с тяжелыми врожденными пороками развития костно-мышечной системы, низкая точность при исследовании плодов с синдромом задержки развития, а также плодов от многоплодных родов.

Целью изобретения является достижение возможности определения гестационного возраста при исследовании сильно фрагментированных трупов плодов, повышение точности определения гестационного возраста при исследовании плодов с тяжелыми врожденными пороками и синдромом задержки развития, плодов от многоплодных родов.

Эта цель достигается тем, что проводят забор фрагментов печени и селезенки, по гистологическим срезам толщиной 4-5 мкм определяют в печени - степень кроветворной активности паренхимы, в селезенке - средний диаметр лимфоидных узелков и среднюю плотность расположения лимфоидных узелков с учетом усадки и по формуле

где - точечная оценка прогноза в неделях; х ₁ - среднее количество профилей ядерных фрагментов миелоидных клеток в 2,95·10^-2 мм ²; х₂ - средний диаметр лимфоидных узелков, мкм; x₃ - среднее количество профилей лимфоидных узелков в 1,76 мм²; 38,118; -0,427; 4,374·10^-3; -1,5·10 ^-5; 2,43·10^-2; -4,290 - регрессионные коэффициенты, полученные путем математико-статистической обработки экспериментальных данных, определяют точечную оценку, а по номограмме доверительных границ - интервальную оценку гестационного возраста.

Изобретение поясняется чертежом, на котором изображена номограмма определения интервальных границ гестационного возраста.

Сущность способа состоит из выполнения ряда этапов:

1. Забирают несколько фрагментов из любых анатомических отделов печени и селезенки плодов, изготовляют гистологические срезы по любой общепринятой гистотехнической методике. Толщина срезов должна находиться в пределах 4-5 мкм.

2. Определяют линейные коэффициенты усадки по относительному уменьшению линейных размеров изъятых фрагментов фетальных органов после завершения всех процессов изготовления гистологических срезов.

3. Оценивают кроветворную активность паренхимы фетальной печени, средние величины диаметра и плотности расположения лимфоидных узелков фетальной селезенки без учета усадки тканей.

Показатель кроветворной активности определяют путем подсчета среднего количества профилей ядерных фрагментов миелоидных клеток, инфильтрирующих паренхиму долек в тестовом поле зрения гистологического среза площадью 2,95·10 ^-2 мм² (площадь поля зрения микроскопа Микмед-2 при увеличении 1000^х). Диаметр лимфоидных узелков оценивают в мкм с помощью винтового окулярного микрометра MOB-1-15^х. Показатель плотности расположения лимфоидных узелков определяют путем подсчета среднего количества профилей лимфоидных узелков в тестовом поле зрения гистологического среза площадью 1,76 мм² (площадь поля зрения светооптической системы микроскопа Биолам при увеличении 84^х).

Количество гистоструктур и полей зрения, подлежащих изучению для определения точечной оценки генерального среднего, в каждом случае определяют отдельно исходя из дисперсии значений изучаемых морфометрических параметров и требуемой степени погрешности.

4. Определяют истинные значения исследованных гистометрических показателей по формулам - где х₁, х₂ , х₃ - значения показателей кроветворной активности, диаметра и плотности расположения лимфоидных узелков с учетом усадки; n_KA, d, n _ЛУ - значения этих же показателей без учета влияния усадки; k_L - величина соответствующего линейного коэффициента усадки.

5. Рассчитывают точечную прогнозную оценку гестационного возраста по формуле:

где - точечная оценка прогноза в неделях; х ₁ - среднее количество профилей ядерных фрагментов миелоидных клеток в 2,95·10^-2 мм ²; х₂ - средний диаметр лимфоидных узелков, мкм; х₃ - среднее количество профилей лимфоидных узелков в 1,76 мм²; 38,118; -0,427; 4,374·10^-3; -1,5·10 ^-5; 2,43·10^-2; -4,290 - регрессионные коэффициенты.

6. Определяют интервальные прогнозные оценки гестационного возраста по прилагаемой номограмме определения доверительных интервалов для значений гестационного возраста (чертеж 1).

Пример

На патологоанатомическое исследование доставлен труп плода женского пола длиной 31 см и массой 890 г с наличием тяжелого врожденного порока развития - анэнцефалии. Поскольку анэнцефалия всегда сопровождается симметричной формой синдрома задержки развития плода, в данном случае использование росто-весовых показателей даст заведомо значительно заниженную оценку гестационного возраста. Поэтому необходимым является применение изобретенного способа определения гестационного возраста.

Для этого иссекали фрагменты печени и селезенки, забранный материал фиксировали в нейтральном растворе формалина и заливали в парафин. Изготовленные срезы толщиной 4-5 мкм окрашивали гематоксилином и эозином. Линейные коэффициенты усадки определяли по относительному уменьшению линейных размеров стандартных фрагментов органов до их фиксации и после изготовления окрашенных и залитых в полистирол гистологических препаратов. В данном случае линейные коэффициенты усадки ткани печени и селезенки равнялись соответственно 1,203 и 1,161. Значения показателей кроветворной активности фетальной печени, диаметра и плотности расположения лимфоидных узелков фетальной селезенки без учета усадки равнялись 93,1; 154,5; 4,0. После пересчета получены истинные (с учетом усадки) значения этих параметров:

N_KA=93,1/1,203 ³=53,5;

D=154,5·1,161=179,4;

N _ЛУ=4,0/1,161²=3,0,

где N _KA, D, N_ЛУ - значения показателей кроветворной активности, диаметра и плотности расположения лимфоидных узелков с учетом усадки. Отсюда точечная оценка гестационного возраста определяется как

Прилагаемая номограмма позволяет по вычисленной точечной оценке гестационного возраста определять его интервальные оценки. Например, с 50% вероятностью можно утверждать, что гестационный возраст плодов с истинными значениями показателей кроветворной активности печени, диаметра и плотности расположения лимфоидных узелков селезенки, равными соответственно 53,5; 179,4; 3,0, находится в интервале 26-30 недель и с 95% вероятностью - в интервале 22-34 недель.

Предлагаемый способ определения гестационного возраста применим при исследовании фрагментов фетальных органов как у плодов от физиологически протекающей беременности, так и у плодов с разнообразной перинатальной патологией. Точность определения гестационного возраста с помощью данного способа составляет соответственно 93% и 94% от диагностической значимости таких показателей развития плода, как его масса и длина.

Предлагаемый способ целесообразно использовать в прозекторской и судебно-медицинской экспертной практике при исследовании фрагментированного трупного материала, а также при вскрытиях плодов и новорожденных от многоплодных родов, плодов с тяжелыми врожденными пороками и синдромом задержки развития.

Источники информации

1. Серов В.Н., Стрижаков А.Н., Маркин С.А. Практическое акушерство: Руководство для врачей. - М.: Медицина, 1989. - С.498-503.

2. Авторское свидетельство СССР №1325739, А61В 5/10, 1985 г.

3. Пашкова В.И., Резников Б.Д. Судебно-медицинское отождествление личности по костным останкам. - Саратов: Изд. Саратовского университета, 1978. - С.44-53, 112-171.