способ ранней стимуляции половой цикличности у коров после родов

Формула изобретения

Способ ранней стимуляции половой цикличности у коров после родов путем введения бионормализатора, отличающийся тем, что перед родами или сразу после родов коровам вводят иммуномодулятор ПДС (плацента денатурированная суспендированная) подкожно в дозе 20 мл/гол/сут (200 мг) не более 10 сут.

Описание изобретения к патенту

Предлагаемое изобретение относится к области животноводства, в частности к ветеринарному акушерству, и может быть применено при профилактике бесплодия у коров после родов.

Известно, что первый раз после родов коровы могут приходить в состояние охоты уже на 30-е сут и оплодотворяться к 65-77 дню (Dowlen Н., Richardson D. Reproductive management at the dairy experiment station. - Jersey J., 1977, v. 24, №6. - p.46; Kupferschmiedt Н. Untersuchungen über die postpartale Rastzeit beim Rind. Schweizer Archiv für Tierheilkunde, 1975, Bd.117, Н.5. - S.243-254). За счет уменьшения сервис-периода количество оплодотворенных коров за год можно увеличить примерно на 5% (Kräusslich Н. et. al. Der Einfluss der Rastreit auf verschiedene Fruchtbarkeitsparameter. - Berl. mid Munch. Tierarztl., Wschr., 1977, Bd.90, Н.3. - S.55-57).

Известны способы ранней стимуляции половой цикличности для уменьшения сервис-периода путем применения гормональных препаратов как отдельно, так и в сочетании с биогенными стимуляторами до и после родов (Семенов Б.Я. Использование различных средств и методов половой возбудимости коров / Б.Я.Семенов // В кн. Вопросы ветеринарной фармации и фармакотерапии. - Рига. - 1982. - 284 с.; Акатов В.А. Влияние синестрола, эстрадиола-дипропионата и окситоцина на моторику матки / В.А.Акатов, В.Д.Мисайлов // Ветеринария, 1970. - №2. - С.89-93; Губаревич Я.Г. Влияние некоторых медикаментозных средств на сократительную деятельность матки коров / Я.Г.Губаревич, В.М.Воскобойников // Вопр. теории и практики ветеринарии и зоотехники: Ученые зап. Витебского вет. ин-та. // Минск, Уроджай, 1970. - т.22. - С.85-91).

Применение данных способов без предварительного исследования гормонального статуса у животных может привести к негативным последствиям. Кроме того, эти препараты обладают недостаточной иммуностимулирующей активностью повышения неспецифической резистентности организма коров в послеродовой период (Осетров А.А. Система показаний и противопоказаний для восстановления, стимуляции и синхронизации воспроизводительной функции коров и телок / А.А.Осетров // Республиканская науч. - производ. конф. По профилактике бесплодия и болезней молочной железы сельскохозяйственных животных // Казань, 1984. - С.62-63).

Известен также способ гормональной стимуляции половой цикличности у коров (Мингазов Т.А. Оплодотворяемость коров при использовании гормональных препаратов / Т.А.Мингазов, Л.В.Бабышева // Зоотехния, 1994. - №5. - С.29-30), который позволяет сократить сервис-период при анэструсе на 20 дней. Данный способ не обеспечивает повышения уровня неспецифического иммунитета у животных.

Задача изобретения - повышение качества стимуляции половой цикличности у коров в ранний послеродовой период.

Это достигается тем, что в качестве стимулирующего средства применяют иммуномодулятор (RU 2036651, 5 А61К 31/00, 1995) - плацента денатурированная суспендированная (ПДС). ПДС - средство, нормализующее метаболические процессы в организме, оказывающие иммуномодулирующее и адаптогенное влияние за счет наличия в его составе полипептидов, аминокислот и нуклеиновых кислот.

В связи с тем, что на организм коров комплексно влияет ряд факторов, в том числе: функциональное состояние половой системы, кормление, содержание, особенности технологии использования, которые вызывают прежде всего расстройство нейроэндокринной регуляции половой цикличности (Ильинский Е.В. Профилактика бесплодия коров в условиях интенсификации молочного скотоводства / Е.В.Ильинский // Краснодар. - 1983. - С.37-50; Сорра V., Bertoni J. Jnsufficiente fertilita bovina ja cause di natura alimentare / V.Coppa, J.Bertoni // Zootecnia e veterinaria, 1980. - v.36, №11. - p.9639-9646; Vallat Andre. Jnfecondite collective des bovines Aspects nutrionnels / A.Vallat // Science veterinary. - Medicine comparative. - 1982. - v.84. - №1. - p.37-49), то введение животным препарата ПДС будет способствовать становлению адаптационно-метаболического гомеостаза, повышению естественной резистентности и активации нейроэндокринной регуляции половой цикличности у коров.

Предложен способ ранней стимуляции половой цикличности у коров путем введения бионормализатора перед родами или сразу после родов, при котором животным вводят иммуномодулятор ПДС подкожно в дозе 20 мл/гол/сут (200 мг) не более 10 сут.

Пример. Первой группе коров (35 гол) ПДС вводили в течение 10 сут перед родами. Животным второй группы (38 гол) ПДС вводили в течение 10 сут после родов. Третья группа (41 гол) - контрольные животные после родов, которые не подвергались обработке.

Эффективность применения препарата учитывали по показателям воспроизводительной функции у коров.

В результате отмечено (табл.1), что в 1-й группе при 10-дневной обработке коров ПДС за 10 сут до предполагаемых родов приход в охоту в среднем составил 19,5 сут. При этом 27 гол оплодотворилось после первого, 4 гол после второго, 2 гол после третьего и 2 гол после четвертого осеменения. Оплодотворяемость за период наблюдения - 64 сут после обработки составила 100% (35 гол).

Во второй группе при обработке ПДС в течение 10 сут сразу после родов приход в охоту в среднем по группе составил 15,0 сут. При этом 34 гол оплодотворились после первого, 3 гол после второго и 1 гол после третьего осеменения. За период наблюдения 49 сут после обработки ПДС оплодотворяемость составила 100% (38 гол).

В третьей группе (контроль) приход в охоту составил 63 сут. Оплодотворяемость за период наблюдения 71 сут равнялась 100% (41 гол). Таким образом, наилучший эффект по стимуляции половой цикличности в ранний послеродовой период отмечен во 2-й группе, так как время прихода коров в охоту было наименьшим при высокой оплодотворяемости и наименьшем индексе осеменения.

Таблица 1 Эффективность различных вариантов применения ПДС
№ группы	Количество животных	Время введения ПДС	Появление половой цикличности, сут (в среднем)	Количество осеменений, гол				Плодотворное осеменение, через сут	Индекс осеменения	Оплодотворилось, гол %
				1	2	3	4
1	35	До родов	19,5	27	4	2	2	64,1	1,4	35 (100)
2	38	После родов	15,0	34	3	1	-	49,5	1,1	38 (100)
3	41		63,0	21	11	5	4	71,3	1,5	41 (100)

1) Кровь на определение содержания в сыворотке эстрадиола, прогестерона, кортизола, характеризующих степень активности нейроэндокринной регуляции половой цикличности, а также показателей альбумина, -, -, -глобулинов и иммуноглобулинов, -липопротеидов, холестерола, активности амилазы, аланинаминотрансферазы (АлАТ), аспартатаминотрансферазы (АсАТ), щелочной фосфатазы (ЩФ), отражающих уровень адаптационно-метаболических изменений, брали из яремной вены у коров до и после обработки ПДС за 10 сут перед родами (1-я группа) и аналогично при обработке ПДС в течение 10 сут сразу после родов (2-я группа). В качестве контроля использовали интактных животных, у которых в это же время проводили отбор и определение показателей крови.

Полученные данные содержания гормонов (табл.2, 3) при применении ПДС в течение 10 сут до родов показали, что концентрация прогестерона сразу после родов снижается в 3 раза больше, чем в контроле. Снижение концентрации эстрадиола при этом также было более выраженным после обработки ПДС по сравнению с контрольными животными, что указывает на активность фетоплаценгарной системы и представляет собой один из доминирующих факторов начала родов (Митрофанов И.А. Изменение показателей иммунитета в течение нормального менструального цикла / И.А.Митрофанов // Акушерство и гинекология, 1984. - №3. - С.8-9).

Обработка коров ПДС сразу после родов в аналогичной дозе показала, что после окончания курса стимуляции наметилась тенденция повышения эстрадиола против его неизменного состояния в контроле. Это указывает на активизацию процессов фолликулогенеза и маточного кровотока, так как снижение уровня эстрадиола характерно при его нарушениях (Бурлев В.А. // Вестник академии вет. наук СССР, 1990. - №5. - С.10-14).

Таким образом, лютеоингибирующие процессы, способствующие снижению прогестерона и повышению эстрадиола в крови, происходят, очевидно, за счет наличия в составе испытуемых препаратов низкомолекулярных полипептидов, которые обладают определенной активностью по отношению к индукции мембраной клетки арахидоната (арахидоновая кислота), которая путем целого ряда биохимических реакций превращается в простагландины (Руководство по иммунофармакологии: Пер. с англ. / Под ред. М.М.Дейла и Дж.К.Формена. - М.: Медицина, 1998. - 332 с.).

Снижение уровня прогестерона связывается в данном случае с индукцией ПДС простагландинов, активно вызывающих лизис желтого тела полового цикла.

Повышение уровня эстрадиола - 17 (при обработке после родов), свидетельствует, очевидно, о нарастании процессов ингибирования перекисного окисления липидов мембран и митохондрий клетки, что приводит к усилению их транспортных функций, активности ферментных систем, а также субстратной специфичности.

Таблица 2 Гормональные показатели крови коров при обработке ПДС в течение 10 сут до родов
Время взятия крови (n-4)	Эстрадиол, нмоль/л		Прогестерон, нмоль/л		Кортизол, нмоль/л
	опыт	контроль	опыт	контроль	опыт	контроль
1. 3а 10 сут до родов (до обрабоки)	4,73±0,40	3,80±0,83	20,25±5,08	16,85±2,69	32,18±11,48	20,20±2,78
2. После родов, на 2-е сут	2,64±1,44	4,12±1,02	0,84±0,20	2,20±0,96	37,33±11,70	28,88±4,44
3. Через 24 сут после родов	4,89±0,25	4,95±0,16	0,68±0,08	1,83±1,03	27,50±2,47	22,75±3,31

Таблица 3 Гормональные показатели крови коров при обработке ПДС в течение 10 сут после родов
Время Взятия крови (n=4)	Эстрадиол, нмоль/л		Прогестерон, нмоль/л		Кортизол, нмоль/л
	опыт	контроль	опыт	контроль	опыт	контроль
1. После родов (до обработки)	2,99±1,07	2,90±1,29	1,31±0,66	0,71±0,13	41,50±11,11	21,93±2,91
2. Через 10 сут после начала обработки ПДС	3,91±0,71	4,57±0,70	1,00±0,47	0,64±0,04	36,33±12,82	21,43±4,60
3. Через 24 сут после начала обработки ПДС	4,82±0,32	4,89±0,25	0,63±0,07	1,48±0,56	46,53±3,43	36,63±9,53

Учитывая то, что эстрадиол-17 способен в организме превращаться в эстриол, следует полагать, что увеличение его при обработке коров ПДС после родов способствует появлению наиболее выраженного стимулирующего влияния на пролиферативную активность шейки матки, влагалища и вульвы.

Тенденция увеличения уровня кортизола у животных, обработанных ПДС в течение 10 сут до родов, свидетельствует об активизации гипофизарно-надпочечниковой системы матери и плода через активизацию секреции адренокортикотропного гормона (АКТГ) и рилизинг-гормона гипоталамуса (Макаров И.А. О функциональном состоянии гипофизарно-надпочечниковой системы при нормально протекающей беременности / И.А.Макаров // Акушерство и гинекология, 1981. - №5. - С.30-31).

В связи с вышеизложенным, механизм бионормализующего влияния ПДС на стимуляцию половой цикличности в ранний послеродовой период происходит за счет снятия тормозящего воздействия прогестерона, вследствие чего активизируются гипоталамо-гипофизарные связи, развивается фолликулогенез и одновременно нарастает в крови уровень эстрогенов.

2) Одновременно проведенные биохимические исследования гуморальных показателей уровня обменных процессов и естественной резистентности у коров показывают, что после введения ПДС за 10 сут до родов наиболее выраженные изменения отмечены в отношении -глобулинов, -глобулинов и общих иммуноглобулинов (табл.4), где повышение концентрации исследуемых фракций было более интенсивным по отношению к контролю. Изменения белковых фракций при обработке коров в течение 10 сут после родов (табл.5), характеризуются, в основном, одинаковой тенденцией изменений между собой, а также схожестью общего направления изменений с контрольными животными.

Активность индикаторных ферментов сыворотки крови характеризует адаптивный механизм коров-матерей и их способность в дальнейшем к проявлению половой цикличности (табл.6, 7).

Таблица 4 Изменения белковых показателей в крови коров при обработке ПДС в течение 10 сут до родов

Содержание белковых фракций (n=4)

Альбумины, %

-глобулины, %

-глобулины, %

-глобулины, %

А/Г

Иммуноглобулины, ед

опыт

контроль

опыт

контроль

опыт

контроль

опыт

контроль

опыт

контроль

опыт

контроль

1. За 10 сут до родов (до обработки)

42,79±1,15

43,44±2,34

14,54±1,50

13,95±1,53

16,54±1,19

13,31±0,61

26,13±1,37

29,30±1,90

0,74

0,77

25,28±0,76

21,91±1,62

2. После родов, на 2-е сут

41,05±1,96

42,39±2,34

15,86±1,09

13,80±1,15

15,44±1,95

13,24±0,94

27,65±1,78

30,57±2,32

0,70

0,74

24,78±0,89

22,03±1,66

3. Через 24 сут после родов

35,98±1,94

41,17±0,68

14,72±1,15

13,04±1,28

13,34±1,45

13,32±1,15

35,96±2,03

32,47±1,45

0,57

0,70

30,64 ±2,22

23,56±1,22

- р<0,05 (здесь и далее)

Таблица 5 Изменения белковых показателей в крови коров при обработке ПДС в течение 10 сут после родов

Содержание белковых фракций (n=4)

Альбумины, %

-глобулины, %

-глобулины, %

-глобулины, %

А/Г

Иммуноглобулины, ед

опыт

контроль

опыт

контроль

опыт

контроль

опыт

контроль

опыт

контроль

опыт

контроль

1. На 2-е сут после родов

46,01±1,14

43,38±1,40

14,15±0,02

15,08±1,03

13,63±3,37

16,18±0,96

26,21±1,50

25,36±1,23

0,85

0,77

21,47±1,45

20,99±3,57

2. Через10 сут после начала обработки ПДС

42,24±1,86

41,80±2,87

15,84±1,19

15,67±0,59

14,72±1,23

13,83±1,64

27,20±2,30

28,70±1,65

0,73

0,72

22,23±0,25

25,17±2,79

3. Содержание в крови через24 сут после родов

41,05±0,95

38,25±1,17

15,46±1,03

14,58±1,18

12,94±0,54

14,02±0,87

30,55±1,96

34,15±1,60

0,70

0,61

27,73±2,01

26,86±4,07

Таблица 6 Ферментативная активность крови коров при обработке ПДС в течение 10 сут до родов
Активность ферментов (n=4)	Амилаза, мг/ч×л		Щелочная фосфатаза, нмоль/с×л		Аланинаминотрансфераза, мкмоль/л		Аспартатаминотрансфераза, мкмоль/л
	опыт	контроль	опыт	контроль	опыт	контроль	опыт	контроль
1. За 10 сут до родов (до обработки)	11,38±1,07	13,60±1,55	512,08±132,95	648,65±30,11	0,40±0,01	0,42±0,08	0,84±0,08	1,01±0,09
2. После родов, на 2-е сут	21,25±4,29	17,20±2,58	500,8±78,78	593,58±70,13	0,28±0,07	0,35±0,05	0,70±0,03	0,68±0,16
3. Через 24 сут после родов	12,25±2,35	15,43±3,06	545,00±98,67	327,65±78,43	0,44±0,19	0,48±0,16	0,97±0,12	0,94±0,10

Таблица 7 Ферментативная активность крови коров при обработке ПДС в течение 10 сут после родов
Активность ферментов (n-4)	Амилаза, мг/ч×л		Щелочная фосфатаза, нмоль/с×л		Аланинаминотрасфераза, мкмоль/л		Аспартатаминотрансфераза, мкмоль/л
	опыт	контроль	опыт	контроль	опыт	контроль	опыт	контроль
1.На 2-е сут после родов	18,73±5,73	17,93±5,20	626,48±143,47	328,58±93,85	0,62±0,07	0,48±0,03	1,24±0,24	0,94±0,11
2. Через 10 сут после начала обработки ПДС	12,60±1,35	19,58±1,84	330,98±14,01	319,93±29,58	0,26±0,07	0,26±0,06	0,96±0,13	0,80±0,07
3. Через 24 сут после начала обработки ПДС	28,03±1,91	13,78±1,81	572,60±126,27	412,38±96,99	0,32±0,07	0,39±0,06	0,86±0,08	0,79±0,06

Известно (Голиков П.П. Активность индикаторных ферментов сыворотки крови как показатель нарушений кислородного гомеостаза у больных при неотложных состояниях. / П.П.Голиков // Пат. физиология и экспериментальная терапия, 1986. - №6. - С.60-64), что стрессовая ситуация для организма, возникающая в процессе родов, сопровождается переключением углеводного обмена на липидный за счет глюкокортикоидов, а изменение гормонального фона организма увеличивает проницаемость мембран. Уровень глюкозы в свою очередь зависит также от активности АлАТ и АсАТ, а глюкозоаланиновый переход активизируется посредством дефосфорилирования ЩФ. В опытах изменения ферментативной активности при использовании ПДС до родов характеризуются тенденцией увеличения ЩФ, амилазы и АсАТ. Повышение активности ЩФ очевидно связано с выходом глюкозы из тканей после дефосфорилирования. В свою очередь, повышение активности АсАТ может объясняться более значительной интенсивностью и взаимосвязью белкового, углеводного и липидного обменов. На фоне относительной гипопротеинемии повышение активности АлАТ также можно рассматривать как усиление аланинглюкозного пути с выбросом из клеток глюкозы за счет ее дефосфорилирования повышенной активностью ЩФ, то есть как синдром метаболического блока по отношению к глюкозе и активацию путей компенсаторного синтеза по отношению к белкам. В целом, активность индикаторных ферментов крови отражает активное состояние гомеостаза организма при начальных этапах его нарушения.

3) Гистоструктурные изменения в яичниках коров после обработки ПДС показывают, что в корковом слое находятся целые генерации фолликулов на разных стадиях развития (фиг.1). Наблюдается интенсивное рассасывание белого тела 1, отмечают вторичные фолликулы 2. Наибольшим было количество созревающих с большой полостью фолликулов и яйцеклеток. Такая картина характерна для органа, подвергнутого стимулирующей нагрузке, когда выявляется определенная положительная зависимость между величиной фолликула и концентрацией стероидных гормонов в фолликулярной жидкости (Торганова И.Т. Об относительной автономности стероидо- и оогенеза в фолликуле яичника женщины / И.Т.Торганова // Акушерство и гинекология, 1983. - №2. - С.15-17). О бионормализующем влиянии ПДС свидетельствуют отмеченные нами явления гиперплазии в лимфоузлах (фиг.2), где четко выражена ретикулярная ткань 3 и мякотные шнуры 4; увеличение количества фолликулов 5 и центров размножения 6 селезенки (фиг.3); полнокровие синусов и вен, а также вакуолизация гепатоцитов в печени (фиг.4), при котором наблюдаются печеночные трабекулы (балки) 7, триады печени 8, состоящие из междольковой артерии 9, междолькового (желчного) клубочка 10 и междольковой вены 11, а также гепатоциты 12.

Технико-экономическая эффективность

Экономическая эффективность применения ПДС при обработке в дозе 20 мл/гол/сут в течение 10 сут до предполагаемых родов составила 78,0 руб., а при обработке в той же дозе в течение 10 сут после родов составила 91,7 руб. на 1 рубль затрат соответственно (в ценах 2005 года).

Источники информации

1. Dowlen H., Richardson D. Reproductive management at the dairy experiment station. - Jersey J., 1977, v.24, №6. - p.46.

2. Kupferschmiedt H. Untersuchungen über die postpartale Rastzeit beim Rind. Schweizer Archiv für Tierheilkunde, 1975, Bd.117, H.5. - S.243-254.

3. Krüusslich H. et. al. Der Einfluss der Rastreit auf verschiedene Fruchtbarkeitsparameter. - Berl. und Munch. Tierarztl., Wschr., 1977, Bd.90, H.3. - S.55-57.

4. Семенов Б.Я. Использование различных средств и методов половой возбудимости коров / Б.Я.Семенов // В кн. Вопросы ветеринарной фармации и фармакотерапии. - Рига. - 1982. - 284 с.

5. Акатов В.А. Влияние синестрола, эстрадиола-дипропионата и окситоцина на моторику матки / В.А.Акатов, В.Д.Мисайлов // Ветеринария, 1970. - №2. - С.89-93.

6. Губаревич Я.Г. Влияние некоторых медикаментозных средств на сократительную деятельность матки коров/ Я.Г.Губаревич, В.М.Воскобойников // Вопр. теории и практики ветеринарии и зоотехники: Ученые зап. Витебского вет. ин-та. // Минск, Уроджай, 1970. - т.22. - С.85-91.

7. Осетров А.А. Система показаний и противопоказаний для восстановления, стимуляции и синхронизации воспроизводительной функции коров и телок / А.А.Осетров // Республиканская науч. - производ. конф. По профилактике бесплодия и болезней молочной железы сельскохозяйственных животных // Казань, 1984. - С.62-63.

8. Мингазов ТА. Оплодотворяемость коров при использовании гормональных препаратов / Т.А.Мингазов, Л.В.Бабышева // Зоотехния, 1994. - №5. - С.29-30.

9. RU 2036651, 5 A61K 31/00, 1995.

10. Ильинский Е.В. Профилактика бесплодия коров в условиях интенсификации молочного скотоводства / Е.В.Ильинский // Краснодар. - 1983. - С.37-50.

11. Сорра V., Bertoni J. Jnsufficiente fertilita bovina ja cause di natura alimentare / V.Сорра, J.Bertoni // Zootecnia e veterinaria, 1980. - v.36, №11. - p.9639-9646.

12. Vallat Atldre. Jnfecondite collective des bovines Aspects nutrioimels / A.Vallat // Science veterinary. - Medicine comparative. - 1982. - v.84. - №1. - p.37-49.

13. Митрофанов И.А. Изменение показателей иммунитета в течение нормального менструального цикла / И.А.Митрофанов // Акушерство и гинекология, 1984. - №3. - С.8-9.

14. Бурлев В.А. // Вестник академии вет. наук СССР, 1990. - №5. - С.10-14.

15. Руководство по иммунофармакологии: Пер. с англ. / Под ред. М.М.Дейла и Дж.К.Формена. - М.: Медицина, 1998. - 332 с.

16. Макаров И.А. О функциональном состоянии гипофизарно-надпочечниковой системы при нормально протекающей беременности / И.А.Макаров // Акушерство и гинекология, 1981. - №5. - С.30-31.

17. Голиков П.П. Активность индикаторных ферментов сыворотки крови как показатель нарушений кислородного гомеостаза у больных при неотложных состояниях. / П.П.Голиков // Пат. физиология и экспериментальная терапия, 1986. - №6. - С.60-64.

18. Торганова И.Т. Об относительной автономности стероидо- и оогенеза в фолликуле яичника женщины / И.Т.Торганова // Акушерство и гинекология, 1983. - №2. - С.15-17.