улучшенная схема применения противоопухолевого соединения в терапии рака

Формула изобретения

1. Способ лечения рака у людей, включающий внутривенную инфузию композиции, содержащей эктеинасцидин-743 (Et-743), человеку, страдающему от рака, в виде непрерывной внутривенной инфузии в течение периода вплоть до 4 часов, которую повторяют еженедельно в дозе Et-743 менее 650 мкг/м /неделю, при этом такие еженедельные инфузии составляют фазу инфузии цикла, и следующая за ней в указанном цикле фаза является фазой отдыха, которая не более продолжительна, чем фаза инфузии.

2. Способ по п.1, где каждый цикл составляет 4 недели.

3. Способ по п.2, где фаза отдыха составляет одну неделю в каждом цикле.

4. Способ по п.1, где время инфузии составляет от 1 до 3 ч.

5. Способ по п.4, где время инфузии составляет от 2 до 3 ч.

6. Способ по п.3, где время инфузии составляет около 3 ч.

7. Способ по п.1, где доза составляет от 300 до 600 мкг/м²/неделю.

8. Способ по п.6, где доза составляет от 300 до 600 мкг/м ²/неделю.

9. Способ по п.7, где доза составляет от 400 до 600 мкг/м²/неделю.

10. Способ по п.7, где доза составляет от 525 до 600 мкг/м ²/неделю.

11. Способ по п.7, где доза составляет около 580 мкг/м²/неделю.

12. Способ по п.1, включающий внутривенную инфузию композиции, содержащей эктеинасцидин-743 (Et-743), непрерывной внутривенной инфузией в течение периода около 3 часов, где инфузию повторяют еженедельно циклами, где цикл включает 3 недели фазы инфузии и одну неделю фазы отдыха, и доза Et-743 составляет около 580 мкг/м ²/неделю.

13. Способ по п.1, для лечения саркомы, остеосаркомы, рака яичников, рака молочной железы, меланомы, колоректального рака, мезотелиомы, рака почки, рака эндометрия или рака легких.

14. Способ по п.1, где другое лекарственное средство вводят для обеспечения комбинированной терапии.

15. Способ по п.14, где другое лекарственное средство выбирают из:

a) лекарственных средств с антимитотическими эффектами, особенно тех, которые действуют на элементы цитоскелета, включая модуляторы микротрубочек, такие как таксан;

b) антиметаболита;

c) алкилирующих агентов или азота;

d) нацеленных лекарственных средств;

e) лекарственных средств, нацеленных на топоизомеразы;

f) гормонов и агонистов или антагонистов гормонов;

g) лекарственных средств, нацеленных на трансдукцию сигнала в опухоли;

h) алкилирующих лекарственных средств;

i) лекарственных средств, потенциально влияющих на метастазирование опухоли;

j) агентов генной терапии и антисмысловых агентов;

k) терапевтических антител;

l) других биоактивных соединений морского происхождения;

m) аналогов стероидов;

n) противовоспалительных лекарственных средств; и

о) противорвотных лекарственных средств.

16. Способ по п.15, где другое лекарственное средство выбирают из доксорубицина, цисплатина, паклитаксела и дексаметазона.

17. Применение эктеинасцидина 743 (Et-743) для получения фармацевтической композиции для способа по любому из предшествующих пунктов.

18. Медицинский набор для введения эктеинасцидина-743 (Et-743), включающий печатные инструкции для введения Et-743, согласно способу по любому из пп.1-16, и Et-743 в виде дозированных единиц для, по меньшей мере, одного цикла, где каждая дозированная единица содержит соответствующее количество Et-743 для способа по любому из пп.1-16 и фармацевтически приемлемый носитель.

Описание изобретения к патенту

Область изобретения

Настоящее изобретение относится к применению эктеинасцидина 743 и продуктов, содержащих данное соединение, в терапии рака, в частности к усовершенствованию применения эктеинасцидина 743 в лечении рака.

Предпосылки изобретения

Рак включает группу злокачественных новообразований, которые могут быть разделены на две категории: карциномы, включающие большинство случаев, наблюдающихся в клинике, и другие менее частые формы рака, которые включают лейкоз, лимфому, опухоли центральной нервной системы и саркому. Карциномы происходят из эпителиальных тканей, тогда как саркомы развиваются из соединительных тканей и тех структур, которые происходят из мезодермальных тканей. Саркомы могут поражать, например, мышечную или костную ткань и имеют место в костях, мочевом пузыре, почках, печени, легких, околоушной слюнной железе, селезенке и др.

Рак является инвазивным и имеет тенденцию к метастазированию в новые места. Он распространяется непосредственно в окружающие ткани, а также может диссеминировать через лимфатическую и кровеносную системы.

Различные виды лечения являются возможными при раке, включая хирургическое и лучевое лечения для локализованного заболевания, и лекарственные средства. Однако эффективность доступных методов лечения при многих видах рака ограничена, и необходимы новые, улучшенные формы лечения, имеющие клинический эффект. Это является особенно верным для тех пациентов, у которых имеются поздние стадии заболевания или метастазы. Также это является верным для пациентов с рецидивами прогрессирующего заболевания после проведенного ранее лечения общепринятыми методами, для которых последующее лечение теми же методами является по сути неэффективным из-за развития резистентности или ограничений проведения лечения из-за связанной с ним токсичности.

Химиотерапия играет важную роль в лечении рака, так как она необходима для лечения поздних стадий рака с отдаленными метастазами и часто является полезной для уменьшения опухоли перед хирургическим вмешательством, и было разработано множество противораковых лекарственных средств, основанных на различных типах действия.

Эктеинасцидины (здесь и далее сокращенные как Et) являются чрезвычайно эффективными противоопухолевыми агентами, выделенными из морских оболочников Ecteinascidia turbinata. О некоторых эктеинасцидинах сообщали ранее в патентной и научной литературе. Смотри, например, патент США №5256663, который описывает фармацевтические композиции, включающие вещество, выделенное из тропического морского беспозвоночного, Ecteinascidia turbinata, и обозначенное там как эктеинасцидины, и применение таких композиций в качестве антибактериальных, противовирусных и/или противоопухолевых агентов для млекопитающих; патент США №5089273, который описывает новые вещества, выделенные из тропического морского беспозвоночного, Ecteinascidia turbinata, и обозначенные как эктеинасцидины 729, 743, 745, 759А, 759 В и 770. Данные соединения являются полезными в качестве антибактериальных и/или противоопухолевых агентов у млекопитающих; патент США №5478932, который описывает эктеинасцидины, выделенные из Карибского беспозвоночного Ecteinascidia turbinata, которые обеспечивают защиту in vivo от лимфомы Р399, меланомы В16, саркомы яичников М5076, карциномы легких Льюиса и карциномы ксенотрансплантатов человеческого легкого LX-1 и человеческой молочной железы МХ-1.

Один из них, эктеинасцидин-743 (Et-743), представляет собой новый тетрагидроизохинолиновый алкалоид, выделенный из морской асцидии Ecteinascidia turbinata, который обладает значительной противоопухолевой активностью в мышиных и человеческих опухолях in vitro.

При исследовании клеточных линий человеческих раковых клеток Et-743 проявлял особенно высокую активность в отношении клеточных линий некоторых сарком мягких тканей с IC_50s менее 1 пМ. Смотри, например, Li W., Jhanwar S., Elisseyeff Y., Bertino JR. "Potent antitumor activity of ET-743 against human soft tissue sarcoma cell lines", Clin Cancer Res 1999; 5: 305 и Izbicka E., Lawrence R., Raymond E., et al.: "In vitro antitumor activity of the novel marine agent, Ecteinascidin-743 against human tumors explanted from patients", Ann. Oncol. 1998; 9:981-7.

Значительная противоопухолевая активность была продемонстрирована на большом количестве опухолевых моделей in vivo, включая человеческие опухолевые ксенотрансплантаты у "голых" мышей. Это было проиллюстрировано в Valoti G., Nicoletti MI., Faircloth G, et al.: "Antitumor effect of ecteinascidin-743 (ET-743) on human ovarian carcinoma xenografts", Proc. Am. Assoc. Cancer Res. 1997; 38: 1477; Faircloth G., Hendriks HR, Giavazzi R, et al.: "In vivo antitumor activity of Ecteinascidin 743 (ET 743), a novel marine derived cytotoxic against human xenografts tumor models", Ann Oncol 1996; 7: 125; Hendriks HR, Fiebig HH, Giavazzi R, et al.: "High antitumor activity of ET 743 against human tumour xenografts from melanoma, non-small-cell lung and ovarian cancer" Ann. Oncol. 1999; 10: 1233-40.

Et-743 обладает новым комплексным механизмом действия на уровне транскрипции генов. Et-743 связывается с богатыми гуанинцитозином последовательностями в малой бороздке ДНК и алкилирует гуаниновые остатки в положении N2, смотри Pommier Y., Kohlhagen G., Bailly C, et al.: "DNA sequence and structure-selective alkylation of guanine N2 in DNA minor groove by Ecteinascidin 743, a potent antitumor compound from the Caribbean tunicate Ecteinascidia turbinata", Biochemistry 1996; 35:13303-9. В исследованиях клеточного цикла было продемонстрировано, что Et-743 снижает скорость прогрессирования опухолевых клеток через S-фазу и вызывает пролонгированную р-53-независимую блокаду в G₂/M, способствуя выраженному апоптическому ответу, Erba W., Bergamaschi D., Ronzoni S., et al.: "Mode of action of Ecteinascidin 743, a natural marine compound with antitumor activity" Ann. Oncol. 1998; 9: 535. Клетки в G ₁ являются более чувствительными к цитотоксическим эффектам Et-743, чем клетки в S-фазе или G₂/M. Видимо, данные эффекты опосредованы множественными механизмами. Et-743 значительно ингибирует активацию транскрипции определенных генов, включая р21, c-fos, c-jun и mdr1, не влияя на их базальные уровни транскрипции. Дополнительные предпосылки, подтверждающие данную точку зрения, обнаруживаются у Mantovani R., La Valle E., Bonfanti M, et al.: "Effect of ET-743 on the interaction between transcription factors and DNA", Ann. Oncol. 1998; 9: 534; Minuzzo M., Marchini S., Broggini M., et al.: "Interference of transcriptional activation by the antineoplastic drug ecteinascidin-743", Proc. Natl. Acad. Sci. USA 2000; 97: 6780-4; Jin S., Gorfajn B., Faircloth G., Scotto KW.: "Ecteinascidin 743, a transcriptiontargeted chemotherapeutic that inhibits MDR1 activation", Proc. Natl. Acad. Sci. USA 2000; 97: 6775-9; Synold T.W., Dussault I., Forman BM.: "The orphan nuclear receptor SXR coordinately regulates drug metabolism and efflux", Nat. Med. 2001; 7: 584-90.

Токсикологические исследования Et-743 в виде однократной или дробной дозы внутривенно у мышей, крыс и собак последовательно показали способность Et-743 индуцировать обратимую гематологическую токсичность и гепатотоксичность. Токсичность для печени проявлялась во временном повышении уровня ферментов печени, билирубина и желчных кислот в плазме и в гистопатологических изменениях в печени. Другие виды токсичности включали раны в месте инъекции, селезенке и повреждения тимуса, гиперплазию желчного протока, портальный фиброз, повреждения желчного пузыря, характеризующиеся холециститом с отеком и лимфоцитарной инфильтрацией, атрофию и апоптоз панкреатических ацинарных клеток и снижение массы семенников и яичников. Исследования на собаках показали наличие рвоты и диареи после введения Et-743. Исследование обезьян cynomolgus подтвердило способность однократных доз Et-743 вызывать гепатотоксичность и гематологическую токсичность, рвоту и диарею. Однако дробное дозирование у обезьян индуцировало только незначительную токсичность. Смотри Jimeno J., Faircloth G., Cameron L., et al.: "Progress in the acquisition of new marine derived anticancer compounds: development of ecteinascidin-743 (ET-743)", Drugs Future 1996; 21: 1155-65.

Анализ костного мозга in vitro с использованием человеческих, мышиных и собачьих клеток-предшественников показал одинаковую чувствительность эритроидных и миелоидных клеток к Et-743. Продолжительное или повторяющееся воздействие лекарственного средства оказывает более токсичное действие на гематопоэтические предшественники, чем однократное воздействие в течение 1 часа, смотри, например, Ghielmini M., Colli E., Erba E., et al.: "In vitro schedule-dependency of myelotoxicity and cytotoxity of Ecteinascidin 743 (ET-743)", Ann. Oncol. 1998; 9: 989-93. Терапевтические показатели Et-743 были лучше при продолжительном воздействии.

Программу клинического применения Et-743 у пациентов, больных раком, начали с исследований I фазы, изучающих режимы внутривенной инфузии в течение 1 часа, 3 часов, 24 часов и 72 часов и режима - 1 час ежедневно х 5 (дх5). О данных исследованиях сообщают в Taamma A., Misset JL., Riofro M., et al.: "Phase I and pharmacokinetic study of ecteinascidin-743, a new marine compound, administered as a 24-hour continuous infusion in patients with solid tumors", J. Clin. Oncol. 2001; 19: 1256-65; Van Kesteren C., Cvitkovic E., Taamma A, et al.: "Pharmacokinetics and pharmacodynamics of the novel marine-derived anticancer agent ecteinascidin 743 in a phase I dose-finding study", Clin. Cancer Res. 2000; 6: 4725-32; Ryan DP., Supko JG., Eder JP., et al.: "Phase I and pharmacokinetic study of ecteinascidin 743 administered as a 72-hour continuous intravenous infusion in patients with solid malignancies" Clin. Cancer Res. 2001; 7: 231-42; Villalona-Calero MA, Eckhardt SG, Weiss G, et al.: "A phase I and pharmacokinetic study of ecteinascidin-743 on a daily x 5 schedule in patients with solid malignancies", Clin. Cancer Res. 2002; 8:75-85. Дополнительные детали использования Et-743 для лечения человека от рака даны в WO 0069441.

Краткие результаты каждого исследования фазы I представлены ниже.

Инфузия в течение 24 часов каждые 3 недели. Все 52 пациента получали лечение девятью различными дозами и получили суммарно 158 циклов. МПД (максимальная переносимая доза) и РД (рекомендуемая доза) были определены как 1800 мкг/м² и 1500 мкг/м². ТЛД (токсичность, лимитирующая дозу) представляет собой гематотоксичность (т.е. нейтропения и тромбоцитопения). При РД у большинства пациентов наблюдали преходящее и обратимое повышение трансаминаз. Степень повышения трансаминаз 3 или 4 развивалась у 68% пациентов и в 38% циклов. Степень 2 или более выраженная гипербилирубинемия наблюдалась в 30% курсов лечения при РД. Другие виды токсичности включали тошноту/рвоту и слабость.

Инфузия в течение 72 часов каждые 3 недели. В данном исследовании оценивали 21 взрослого пациента при четырех уровнях дозы Et-743. Негематологическая токсичность, лимитирующая дозу, при 1200 мкг/м² (МПД) представляла собой обратимое повышение до 4 степени трансаминаз (у 2 из 9 пациентов), которое было расценено как ТЛД в данном исследовании. У третьего пациента при этом уровне дозы развился рабдомиолиз 4 степени, фебрильная нейтропения 4 степени и тромбоцитопения 4 степени. При РД (1050 мкг/м²) не наблюдалось появления гипертрансаминаземии 4 степени, 3 степень наблюдалась у 50% пациентов. Повышения билирубина и щелочной фосфатазы развивались менее часто и были ниже 2 степени. Также сообщали о тошноте/рвоте и утомляемости. Продолжительная инфузия Et-743 более 72 часов не позволяла вводить более высокую общую дозу на цикл, чем в течение 24 часов.

Инфузия в течение 1 часа на 1-5 день каждые 3 недели. 42 пациентам проводили лечение при 10 уровнях доз, колеблющихся от 6 до 380 мкг/м²/день. При уровне дозы 380 мкг/м²/день (МПД) у троих пациентов развилась ТЛД (продолжительная нейтропения), и один из них умер из-за токсичности. При уровне дозы 325 мкг/м ²/день (РД) 59% циклов были отложены, большинство из них из-за токсичности, связанной с лечением. Более того, средний день выздоровления до 1 степени (при котором лечение может быть рекомендовано) для нейтропении составил 28 дней. Следовательно, у некоторых пациентов может быть необходимым введение РД 325 мкг/м²/день Et-743 с 4 недельным режимом. Не было отмечено никакой токсичности 4 степени даже при МПД. Обратимое повышение трансаминаз 3 степени развивалось в 14% циклов и у 31% пациентов при рекомендуемой дозе. Случай гипербилирубинемии 3 степени наблюдался при РД.

Инфузия в течение 1 и 3 часов каждые 3 недели. В первой части исследования 40 пациентов лечили Et-743, вводимым в виде 1-часовой внутривенной инфузии каждые 3 недели. Была определена максимальная переносимая доза (МПД) 1100 мкг/м². Токсичностью, лимитирующей дозу (ТЛД), оказались: усталость 4 степени, нейтропения 4 степени, продолжающаяся более чем 5 дней, и тромбоцитопения 4 степени. При уровне МПД наблюдали повышение рвоты, трансаминаз 3-4 степени, которое не восстанавливалось к 21 дню в тех же циклах. Было обнаружено, что МПД и рекомендуемая доза (РД) в данном исследовании были гораздо ниже, чем в подобном исследовании с введением Et-743 в виде продолжительной инфузии в течение 24 часов. Так как последний режим требует лечения пациента в стационаре, считают, что более короткое время инфузии является предпочтительным, если может быть достигнута та же доза. Следовательно, протокол был изменен для оценки применимости Et-743, вводимого в виде 3-часовой инфузии. Пролонгирование инфузии от 1 до 3 часов приводило к более высокой МПД и РД в исследованиях II фазы (1800 и 1650 мкг/м ²) со сходным профилем токсичности. 32 пациента получали лечение во второй части исследования. ТЛД снова включала тромбоцитопению 4 ст. и утомляемость 3 ст. Другие токсические эффекты включали повышение трансаминаз и повышение билирубина 2 ст. или более в 9% курсов лечения при РД. Также наблюдали снижение количества лейкоцитов и нейтрофилов, астению, тошноту/рвоту и флебит. Токсичность для печени определялась у многих пациентов по заметному увеличению уровня АлТ и АсТ в плазме и признакам холестаза, что подтверждалось повышением щелочной фосфатазы и билирубина, хотя это появлялось менее часто и было выражено в меньшей степени, чем повышение трансаминаз.

Два режима (24 часа каждые 3 недели и 3 часа каждые 3 недели) достигли программы II фазы. Программа II фазы подтвердила активность в отношении саркомы мягких тканей и рака яичников. Однако рекомендуемая начальная доза для 3-часового режима была уменьшена из-за выраженной токсичности. Рекомендуемая доза для 24-часового режима составила 1500 мкг/м ², и рекомендуемая доза для 3-часового режима в настоящее время составила 1300 мкг/м².

Серьезные повышения трансаминаз (степень 3-4) были более частыми при 3-часовом режиме, чем при 24-часовом режиме. Повышение трансаминаз наблюдали у 83,4% пациентов в 58,3% циклов. Данная токсичность уменьшалась при коррекции таким образом, чтобы уменьшить начальную дозу до 1300 (степень 3 и 4 АлТ у 38% и 8,5% пациентов), хотя было желательно ее дальнейшее снижение. Холестаз был менее выраженным, и менее часто наблюдались степени 1, 2 и 3 повышения щелочной фосфатазы у 50,4%, 6,5% и 1,7% (что приводило к общему 58,6% по сравнению со сходными 57,7% в течение 24 часов) пациентов. Повышение билирубина 1-3 степени наблюдали у 45% пациентов (против 23,8% пациентов, получающих лекарственное средство через 24 часа). Редкой, но значительной токсичностью была почечная токсичность, представленная отклонениями креатинина, который также был выше, чем при 24-часовом режиме.

Режим 3-часового введения каждые 3 недели имеет значительное преимущество, так как является более удобным для пациентов, так как он уменьшает время пребывания в клинике для инфузии и мониторинга, в частности, избегая ночного пребывания. Однако данный режим имел большую токсичность, как упомянуто выше и как проиллюстрировано следующими таблицами (1-5)

Таблица 1
Гематологическая токсичность. Наихудшая степень на пациента. Инфузия в течение 24 часов
	Число	НИР-ОКТ степень-число пациентов (%)
		0-1	2	3	4
Нейтрофилы	319	103 (32,3)	54 (16,9)	92 (28,8)	70 (21,9)
Тромбоциты	319	260 (81,5)	17 (5,3)	35 (11,0)	7 (2,2)
Гемоглобин	320	165 (51,6)	111 (34,7)	33 (10,3)	11 (3,4)

Таблица 2
Токсичность для печени. Наихудшая степень на пациента. Инфузия в течение 24 часов
	Число	НИР-ОКТ степень-число пациентов (%)
		1	2	3	4
Билирубин	320	49 (15,3)	23 (6,9)	4 (1,3)
Щелочная фосфатаза	319	149(46,7)	29 (9,1)	6 (1,9)
Гамма ГТ	109	25 (22,9)	29 (26,6)	32 (29,4)	2 (1,8)
ГОТП/АсТ	319	74 (23,2)	88 (27,6)	120 (37,6)	16 (5,0)
ГПТП/АлТ	320	62 (19,4)	83 (25,9)	127 (39,7)	30 (9,4)

Таблица 3
Гематологическая токсичность. Наихудшая степень на пациента. Инфузия в течение 3 часов
	Число	НИР-ОКТ степень-число пациентов (%)
		0-1	2	3	4
Нейтрофилы	243	59 (24,5)	42 (17,4)	57 (23,6)	85 (35,2)
Тромбоциты	241	170 (69,1)	26 (10,6)	31 (12,6)	14 (5,6)
Гемоглобин	239	132 (55)	80 (33,4)	23 (9,6)	4 (1,6)

Таблица 4
Токсичность для печени. Наихудшая степень на пациента. Инфузия в течение 3 часов
	Число	НИР-ОКТ степень-число пациентов (%)
		1	2	3	4
Билирубин	228	59 (25,8)	38 (16,6)	6 (2,6)	0
Щелочная фосфатаза	228	115 (50,4)	15 (6,5)	4 (1,7)	2 (0,8)
ГОТП/АсТ	232	17 (7,2)	29 (12,3)	117 (49,7)	58 (24,6)
ГПТП/АлТ	233	13 (5,5)	19 (8,1)	107 (45,7)	87 (37,1)

Таблица 5
Отклонения креатинина. Инфузия в течение 3 часов
	Число	НИР-ОКТ степень
		1	2	3	4
На пациента (24 ч)	218	76 (23,9)	19 (6,0)	3 (0,9)	2 (0,6)
На пациента (3 ч)	218	44 (20,1)	10 (4,6)	5 (2,3)	0

Целью настоящего изобретения является обеспечение терапии рака с использованием Et-743, которая позволяет использовать короткое время инфузии, при этом минимизируя токсичность, индуцируемую введением Et-743, и без уменьшения желаемых антинеопластических эффектов.

Краткое описание изобретения

В настоящее время авторы неожиданно обнаружили, что различные типы режима и дозирования позволяют проводить эффективную терапию рака Et-743. Неожиданно наши результаты показали, что возможно вводить Et-743 с уменьшенным временем инфузии, при этом избегая токсичности и достигая желаемого антинеопластического эффекта. Существенным является то, что наиболее часто встречающиеся виды токсичности уменьшались более чем в 3 раза, трансаминазная токсичность уменьшалась вплоть до 8 раз меньше, чем при введении в режиме 3 часов каждые три недели, и не развивалась серьезная почечная токсичность.

Настоящее изобретение относится к способу лечения рака у людей, включающему внутривенную инфузию композиции, включающей Et-743, человеку, страдающему от рака, при непрерывном дозировании в течение периода вплоть до 4 часов, где стадия инфузии повторяется еженедельно на циклической основе.

Стадия инфузии, как правило, повторяется на циклической основе. Циклическая основа включает две фазы, фазу еженедельной инфузии и фазу отсутствия инфузии, называемую фазой отдыха. В фазу отдыха пациенты могут прийти в себя. Обычно цикл составляет недели, и, следовательно, цикл включает одну или более неделю фазы инфузии и одну или более неделю фазы отдыха. Предпочтительно период отдыха не длиннее фазы инфузии. Следовательно, предпочтительно, чтобы фаза отдыха составляла то же число недель, что и фаза инфузии, или меньшее число недель. Особенно предпочтительным является то, чтобы фаза инфузии составляла большее количество недель, чем фаза отдыха, даже если предусматривается цикл из одной недели и одной недели отдыха. Предпочтительно фаза отдыха составляет одну неделю в каждом цикле. Предпочтительная длительность каждого цикла составляет 2-4 недели; при необходимости проводят множественные циклы. Цикл 4 недели является наиболее предпочтительным.

В отдельном варианте воплощения изобретения время инфузии составляет от 1 до 3 часов, предпочтительно от 2 до 3 часов. Особенно предпочтительным является время около 3 часов.

В другом варианте воплощения изобретения доза Et-743 составляет менее 650 мкг/м ²/еженедельно, предпочтительно от 300 до 600 мкг/м ²/еженедельно, более предпочтительно от 400 до 600 мкг/м ²/еженедельно. Соответственно доза составляет от 525 до 600 мкг/м²/еженедельно, особенно предпочтительной является доза около 580 мкг/м²/еженедельно.

Вышеуказанные режимы и дозировки позволяют эффективно лечить рак у людей, при этом избегая токсичности. Это означает, что при данных дозировках и режимах терапевтический индекс улучшен. Авторы обнаружили, что Et-743 является эффективным в лечении некоторых типов рака, включая поздние стадии или наличие метастазов. Предпочтительно Et-743 применяют согласно вышеуказанным режимам и дозировкам для лечения саркомы, остеосаркомы, рака яичников, рака молочной железы, меланомы, колоректального рака, мезотелиомы, рака почки, рака эндометрия и рака легких.

Настоящее изобретение также относится к фармацевтической композиции, содержащей рекомендуемую дозу Et-743 для еженедельного введения и фармацевтически приемлемый носитель.

В следующем аспекте настоящее изобретение относится к медицинскому набору для введения Et-743, включающему печатную инструкцию для введения Et-743 в соответствии со схемами применения, установленными выше, и запас Et-743 в дозированных единицах на, по меньшей мере, один цикл, где каждая дозированная единица содержит соответствующее количество Et-743 для лечения, как определено выше, и фармацевтически приемлемый носитель.

Подробное описание изобретения

Et-743 представляет собой естественное соединение, представленное следующей формулой:

Et-743 поставляется и хранится в виде стерильного лиофилизированного продукта, состоящего из Et-743 и вспомогательного вещества в композиции, подходящей для терапевтического применения, в частности композиции, содержащей маннит и фосфатную соль, доведенной для подходящего рН.

Предпочтительная композиция, которая имеет улучшенную стабильность при высокой температуре хранения, представляет собой таковую, которая после разведения содержит на мл 0,05 мг Et-743, 50 мг маннита и 6,8 мг дигидрофосфата калия для доведения рН от 4,00 до 6,00 с предпочтительным уровнем рН 4,80. Продукт лиофилизирован и хранится в прохладном месте, от +4 до -20°С и защищен от света до применения.

Получение восстановленного раствора проводят в асептических условиях путем добавления дистиллированной воды в количестве 5 мл на каждые 0,25 мг Et-743 и встряхивания в течение короткого времени для растворения сухого вещества.

Получение раствора для инфузии также проводят в асептических условиях путем забора объема восстановленного раствора, соответствующего дозе, рассчитанной для каждого пациента, и медленного введения требуемого объема восстановленного раствора в инфузионный резервуар или бутылку, содержащую от 100 до 1000 мл 0,9% раствора хлорида натрия, после чего содержимое гомогенизируют путем медленного ручного встряхивания. Раствор Et-743 для инфузии должен вводиться внутривенно, так скоро, как только возможно, в течение 48 часов после приготовления. ПВХ и полиэтиленовые инфузионные системы так же, как и чистое стекло, являются предпочтительными материалами для контейнеров и трубок.

Введение проводят циклами, в заявленном способе по изобретению внутривенную инфузию Et-743 проводят пациенту каждую неделю при учете фазы отдыха в каждом цикле, во время которой пациент восстанавливается. Предпочтительно фаза отдыха составляет одну неделю в каждом цикле. Предпочтительная длительность каждого цикла составляет 2-4 недели; при необходимости можно проводить множественные циклы. Задержка дозы и/или уменьшение дозы и регулирование режима проводят при необходимости в зависимости от индивидуальной переносимости лечения пациентом, в частности снижение дозы рекомендовано для пациентов с более высокими, чем нормальные уровни в плазме печеночных трансаминаз, или щелочной фосфатазы, или билирубина.

В зависимости от типа опухоли и стадии развития заболевания лечение по данному изобретению является полезным для предотвращения риска развития опухолей, ускорения регрессии опухоли, остановки роста опухоли и/или предотвращения метастазирования.

Хотя руководство для выбора дозы дано выше, соответствующая дозировка соединения варьирует в соответствии с определенной композицией, способом введения и особенностями местоположения, организма-хозяина и опухоли, подвергающейся лечению. Принимаются во внимание другие факторы, такие как возраст, масса тела, пол, диета, время введения, скорость экскреции, состояние организма хозяина, комбинации лекарственных средств, реакции восприимчивости и тяжесть заболевания. Введение можно проводить непрерывно или периодически в пределах максимальной переносимой дозы.

Рекомендуемая доза (РД) представляет собой максимальную дозу, которая может безопасно вводиться пациенту, способствуя появлению переносимой, управляемой и обратимой токсичности в соответствии с Общими Критериями Токсичности (ОКТ), установленными, например, Национальным Институтом Рака, (США), как правило, с развитием не более чем у 2 пациентов из 6 любой токсичности, лимитирующей дозу (ТЛД). Руководства по лечению рака часто предусматривают введение химиотерапевтических агентов в максимальных безопасных дозах, при которых токсичность является управляемой, с целью достижения максимальной эффективности (DeVita, V.T.Jr., Hellman, S. and Rosenberg, S.A., Cancer: Principles and Practice of Oncology, 3^rd ed., 1989, Lipincott, Philadelphia). Для Et-743 рекомендуемые дозы представляют собой такие, как определено выше и установлено в примерах.

Соединение Et-743 и композиции по настоящему изобретению могут применяться с другими лекарственными средствами для обеспечения комбинированной терапии. Другие лекарственные препараты могут образовывать часть той же самой композиции или быть представлены в виде отдельной композиции для введения в то же самое время или в другое время. Природа других лекарственных средств особо не ограничена, и подходящие кандидаты включают:

а) лекарственные средства с антимитотическими эффектами, особенно таковые, которые действуют на элементы цитоскелета, включая модуляторы микротрубочек, такие как таксановые лекарственные средства (такие как таксол, паклитаксел, таксотер, доцетаксел), подофилотоксины или алкалоиды винка (винкристин, винбластин);

b) антиметаболические лекарственные средства (такие как 5-фторурацил, цитарабин, гемцитабин, пуриновые аналоги, такие как пентостатин, метотрексат);

с) алкилирующие агенты или азотистые иприты (такие как нитрозомочевины, циклофосфамид или ифосфамид);

d) лекарственные средства, которые действуют на ДНК, такие как антрациклиновые лекарственные средства адриамицин, доксорубицин, фарморубицин или эпирубицин;

е) лекарственные средства, которые действуют на топоизомеразы, такие как этопозид;

f) гормоны и агонисты или антагонисты гормонов, такие как эстрогены, антиэстрогены (тамоксифен и родственные соединения) и андрогены, флутамид, лейпропелин, госерелин, ципротерон или октреотид;

g) лекарственные средства, которые действуют на передачу сигнала в опухолевых клетках, включая производные антител, такие как герцептин;

h) алкилирующие лекарственные средства, такие как платиновые лекарственные препараты (цисплатин, карбонплатин, оксалиплатин, параплатин) или нитрозомочевины;

i) лекарственные средства, потенциально влияющие на метастазирование опухолей, такие как ингибиторы матриксных протеиназ;

j) агенты генной терапии и антисмысловые агенты;

k) терапевтические антитела;

l) другие биоактивные соединения морского происхождения, в особенности дидемнины, такие как аплидин;

m) аналоги стероидов, в частности дексаметазон;

n) противовоспалительные лекарственные средства, включая нестероидные агенты (такие как ацетаминофен или ибупрофен) или стероиды и их производные, в частности дексаметазон; и

о) противорвотные лекарственные средства, включая ингибиторы 5НТ-3 (такие как грамисетрон или ондасетрон), и стероиды и их производные, в частности дексаметазон.

Особенно предпочтительными для применения в комбинированной терапии являются дексаметазон, доксорубицин, цисплатин, паклитаксел и дексаметазон. Дальнейшее руководство по комбинированной терапии представлено в WO 0236135, включенной в данное описание полностью в качестве ссылки.

Примеры

Клинические исследования I фазы проводили по следующему протоколу.

Протокол.

Дозовый режим. Et-743 вводили каждую неделю в виде в/в инфузии в течение 3 часов в 3 последовательные недели каждые 4 недели.

Начальная доза и повышение дозы. Начальная доза составляла 300 мкг/м² еженедельно Et-743, вводимые в виде внутривенной инфузии в течение 3 часов 3 последовательные недели каждые 4 недели. Пациентов последовательно включали в следующие дозовые группы, начиная с дозы уровня 1. Минимальный размер группы, получавшей лечение на каждом уровне дозы, составлял 3 пациента (табл.6).

Таблица 6
Схема повышения дозы Et-743
Доза уровня -1	200 мкг/м2 еженедельно
Доза уровня 1	300 мкг/м2 еженедельно
Доза уровня 2	400 мкг/м2 еженедельно
Доза уровня 3	525 мкг/м2 еженедельно
Доза уровня 4	650 мкг/м2 еженедельно
Доза уровня 5	775 мкг/м2 еженедельно
Доза уровня 6	900 мкг/м2 еженедельно

Увеличение до следующего более высокого уровня дозы. По меньшей мере, один пациент на каждом уровне дозы должен завершить 1 цикл лечения, и двое пациентов должны завершить лечение за 15 дней до того, как новый пациент сможет получать лечение следующей наиболее высокой дозой.

Условия повторного лечения. Пациенты подходят для повторного лечения Et-743, до тех пор пока они не имеют признаков прогрессирования заболевания, непереносимой токсичности, пациент желает дальнейшего лечения и подходит по критериям включения.

Токсичность, лимитирующая дозу (ТЛД).

Токсичность, лимитирующая дозу (ТЛД), определяли как:

- АЧН<500/мкл в течение более чем 5 дней.

- АЧН<500/мкл, сопровождающаяся лихорадкой (по меньшей мере, 100,5°F).

- Тромбоциты<25000/мкл.

- Любая негематологическая токсичность 3-4 степени, кроме тошноты/рвоты (обеспечиваемая тем, что пациент получает оптимальное противорвотное лечение, состоящее из дексаметазона и антагонистов серотонина в оптимальном дозовом режиме для профилактики и лечения), алопеции. 3 или 4 степень повышения трансаминаз, что приводит к пропускам 2 предписанных введений в течение цикла или задержке начала последующего курса более, чем на 2 недели.

- Пропуск, по меньшей мере, двух предписанных введений во время одного курса из-за токсичности, индуцированной лекарственным препаратом (пропущенные дозы не должны вводиться).

- Задержка начала последующего курса лечения более чем на 2 недели.

Определение максимальной переносимой дозы (МПД).

Группу из 3 пациентов лечили на каждом уровне доз. Если не наблюдалось ТЛД во время первого цикла в группе пациентов при любом уровне вводимой дозы, новые пациенты могли получать лечение на следующем более высоком уровне.

Если у любого пациента встречалась ТЛД, индуцированная лекарственным препаратом во время цикла 1 или 2, максимум 6 пациентов могли получать лечение на этом уровне. Если ТЛД не наблюдали у дополнительных пациентов, новые пациенты могли получать лечение на следующем более высоком уровне доз.

Если, по меньшей мере, у 2 пациентов развивалась ТЛД при любом получаемом уровне доз, этот уровень доз рассматривали как Максимальную Переносимую Дозу (МПД). Однако допустимо, что дополнительные пациенты могли иметь ТЛД из-за времени включения пациентов в этот уровень доз.

Рекомендуемая доза для исследований фазы II (РД)

После того, как устанавливали МПД, следующие пациенты должны были получать лечение на следующем более низком уровне доз. В некоторых случаях могли применяться промежуточные дозы, и такая гибкость является существенной частью протокола. Если у двоих или более пациентов развивалась ТЛД при более низком уровне дозы, тогда вновь устанавливали МПД, и дополнительные пациенты получали лечение следующей более низкой дозой (кроме тех случаев, когда достаточное количество пациентов уже получало лечение на этом уровне дозы).

РД определяют как наивысший уровень дозы, при котором менее чем у 2 из 6 пациентов развивается ТЛД во время циклов 1 и 2. На уровне РД должно быть накоплено достаточное количество пациентов так, чтобы, по меньшей мере, 6 пациентов получили, по меньшей мере, 2 цикла лечения, и, по меньшей мере, 4 пациента получили, по меньшей мере, 4 курса лечения.

Результаты.

Данное исследование начали в мае 2000, и последний пациент был включен в марте 2002. Лечение получал 31 пациент (табл.7).

Опухоли включали: саркомы (19), UOT (1), легкое (1), яичник (4), молочная железа (2), матка (1), меланома (2), колоректальный (1)

Таблица 7
Уровень дозы	Пациенты
300	3
400	3
525	4
650	6
580	15

2 ТЛД определили МПД в данном исследовании: продолжительная нейтропения 3 степени и билирубиновая токсичность 3 ст. Обе ТЛД были обнаружены на 4-м уровне. Таким образом, МПД в данном исследовании составила 650 мкг/см еженедельно х 3/4 недели. Рекомендуемая доза составила 580 мкг/см х 3 каждые 4 недели.

Токсичность

После обследования 29 пациентов, нейтропения 3-4 степени составила 10,3% на пациента и 3 ст. повышения трансаминаз - 10%.

Следующие таблицы показывают главные показатели токсичности, наблюдаемые при данном режиме (табл.8-9).

Таблица 8
Гематологическая токсичность на пациента. Инфузия 3 часа еженедельно х 3/4 недели
	Число пациентов	Ст. 2 (%)	Ст. 3 (%)	Ст. 4 (%)
Гемоглобин	29	9 (31)	1 (3,4)	0
Тромбоциты	29	1 (3,4)	0	0
Нейтрофилы	29	1 (3,4)	2 (6,9)	1 (3,4)

Таблица 9
Негематологическая токсичность на пациента. Инфузия 3 часа еженедельно х 3/4 недели
	Число пациентов	Ст. 2 (%)	Ст. 3 (%)	Ст. 4 (%)
Креатинин	29	1 (3,4)	0	0
Креатинкиназа	29	1 (3,4)	0	1 (3,4)
Билирубин	29	0	1 (3,4)	0
АлТ	29	9 (31)	3 (10,3)	0
Щел. Фосф.	29	1 (3,4)	2 (6,9)	0

В соответствии с ранее описанной токсичностью, данный режим показал прекрасный профиль токсичности, улучшая предыдущий (полученный при режиме 24 и 3 часа каждые три недели). Может быть видно из таблицы, что нейтропения, тромбопения, повышение трансаминаз и креатинина (наиболее частые побочные эффекты) в настоящее время имеют гораздо меньшую частоту.

Видно, что уровень билирубина и креатинкиназы был выше, чем в предыдущих исследованиях. 3,4% в недельных исследованиях означает, что 1 пациент имел такую токсичность и мог быть нехарактерным. Необходимо подвергнуть лечению большее количество пациентов для подтверждения того, что это является достоверным процентом (табл.10).

Таблица 10
Степень 3-4	24 ч	3 ч	еженедельно
Гемоглобин	13,7	11,3	3,4
Тромбоциты	13,2	18,7	0
Нейтрофилы	50,7	58,3	10,3
Креатинин	0,7	2,3	0
Креатинкиназа	2,2	1,5	3,4
Билирубин	1,3	2,6	3,4
АлТ	49,1	82,8	10,3

Активность

Наблюдали некоторые указания на активность:

2 незначительных ответа у пациентов с саркомой и продолжительная стабилизация при саркоме (2) и раке яичников (2).

Заключение

С клинической точки зрения, еженедельный режим введения является действительно привлекательным в отношении токсичности. Наиболее частые виды токсичности снижаются более чем в 3 раза. И, например, трансаминазная токсичность составляет в 8 раз меньше, чем при 3 часовом режиме.

При данном режиме не наблюдалась серьезная почечная токсичность (ст. 3-4).

Данный режим хорошо переносится, и токсичность минимизирована подходящим образом. Хотя исследования фазы I не предназначены для оценки эффективности, наблюдались некоторые указания на активность.