способ прогнозирования исходов хирургического лечения пролиферативной диабетической ретинопатии

Формула изобретения

Способ прогнозирования исходов хирургического лечения пролиферативной диабетической ретинопатии путем определения компонента ренинангиотензиновой системы, отличающийся тем, что до операции в слезной жидкости определяют активность ангиотензинпревращающего фермента спектрофотометрическим методом, и при его активности выше 54·10 мкмоль/мин·л прогнозируют благоприятный исход хирургического лечения, а при активности ангиотензинпревращающего фермента ниже 54·10 мкмоль/мин·л прогнозируют прогрессирование витреоретинальной пролиферации и снижение зрительных функций после хирургического лечения пролиферативной диабетической ретинопатии.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии, и предназначено для прогнозирования исходов хирургического лечения пролиферативной диабетической ретинопатии (ПДР).

Прогнозирование исходов хирургического лечения ПДР проводится путем изучения предоперационных клинико-функциональных, иммунологических или биохимических данных (Thompson Т., 1987; Hiraiwa Т., 2001).

Известен способ прогнозирования результатов хирургического лечения ПДР путем оценки функционального состояния сетчатки, зрительного нерва по данным электроретинографии и системы регистрации зрительных вызванных корковых потенциалов (Hiraiwa Т., Horio N. «Preoperative electroretinogram and postoperative visual outcome in patients with diabetic vitreous hemorrhage». Jpn. J.Ophthalmol. - 2003. - Vol. - 47. - №3: 307-11).

Недостатками данного способа являются его трудоемкость, так как предусматривает использование двух диагностических аппаратов, сложность интерпретации результатов исследования, а также влияние на них внешних факторов (диаметр зрачка, возраст обследуемого, рефракция).

Наиболее близким по технической сущности является способ прогнозирования исходов хирургического лечения ПДР путем определения содержания в стекловидном теле компонента ренин-ангиотензиновой системы - ангиотензина II (АГП) и пролиферативного фактора - васкулоэндотелиального фактора роста (VEGF) методом иммуноферментного анализа.

При пролиферативной диабетической ретинопатии VEGF отвечает за неоваскуляризацию и проницаемость сосудов сетчатки, а его синтез регулируется компонентами РАС (АГП, АПФ).

При этом авторы установили, что наиболее высокое содержание в стекловидном теле VEGF и АГП наблюдается при прогрессировании пролиферации после хирургического лечения ПДР.

Однако для осуществления данного способа необходимо стекловидное тело, забор которого проводится во время операции. Поэтому прогнозирование исходов хирургического вмешательства возможно только после операции, что ограничивает проведение известных профилактических мероприятии. Кроме того, для осуществления указанного способа в клинических условиях необходимо специальное лабораторное оборудование и дорогостоящие тест-системы.

Технический результат изобретения - высокоинформативный, доступный способ прогнозирования исходов хирургического лечения ПДР в предооперационном периоде на основе определения активности ангиотензинпревращающего фермента (АПФ) в слезной жидкости спектрофотометрическим методом.

Технический результат достигается способом прогнозирования исходов хирургического лечения ПДР путем определения компонента ренин-ангиотензиновой системы, отличающийся тем, что до операции в слезной жидкости определяют активность АПФ спектрофотометрическим методом и при активности АПФ выше 54×10 мкмоль/мин·л прогнозируют благоприятный исход хирургического лечения, а при активности АПФ ниже 54×10 мкмоль/мин·л прогнозируют прогрессирование витреоретинальной пролиферации и снижение зрительных функции после хирургического лечения ПДР.

Ангиотензинпревращающий фермент - это компонент ренин-ангиотензиновой системы, посредством которого регулируется синтез АГ II и различных пролиферативных факторов (VEGF, TGF) играющие ведущую роль в патогенезе и исходах хирургического лечения ПДР.

Преимуществом предлагаемого способа прогнозирования исходов хирургического лечения ПДР является простота, так как проводят только однократное исследование одного показателя в слезной жидкости - активности АПФ, а для осуществления исследования применяют стандартное клиническое лабораторное оборудование. Способ прогноза обладает высокой диагностической чувствительностью (83,3%) и специфичностью (76,9%). Кроме того, применение способа прогнозирования до операции позволяет проводить известные профилактические мероприятия.

Способ осуществляют следующим образом.

Слезную жидкость забирают из конъюнктивального мешка меланжером в количестве 200 мкл. Определение активности АПФ в слезной жидкости проводят спектрофотометрическим методом с применением специфического синтетического субстрата фурилакрилоилфенилаланингпицилглицина (ФАПГТ).

Полученную слезную жидкость для снижения концентрации эндогенных ингибиторов АПФ разводят 10-кратным объемом 50 мМ трис-HCl буфера (рН 8,3) и центрифугируют при 3000g в течение 10 мин при 4°С.

Для проведения ферментативной реакции в 2,3 мл 50 мМ трис-HCl буфера (рН 8,3) вносят по 0,05 мл надосадочной жидкости изучаемых образцов и инкубируют в термостате в течении 30 мин. Реакцию начинают, внося при тщательном перемешиваний в спектрофотометрическую кювету с реакционной средой 0,1 мл 1 мМ раствора ФАГОТ. Оптическую плотность (ОП) проб определяют при 307 нм против дистиллированной воды. Изменение экстинкции растворов регистрируют в течении 15 мин с интервалом в 5 мин, рассчитывают изменение ОП за 1 мин.

Вычисление активности АПФ (X) в слезной жидкости проводят по формуле

где ОП - изменение оптической плотности за 1 мин, Ед. оптической плотности,

2,45 - общий объем реакционной среды, мл,

0,05 - объем исследуемого образца, мл,

100 - концентрация ФАГОТ в пробирке, мкмоль,

0,2 - коэффициент экстинкции ФАГОТ при 307 нм,

10 - разведение образца.

Средняя активность АПФ в слезной жидкости у здоровых лиц составляет 65±8,5×10 мкмоль/мин·л.

Предлагаемым способом до операции изучена активность АПФ в слезной жидкости у 20 больных с ПДР. У 11 (55,0%) из 20 больных активность АПФ в слезной жидкости до операции была ниже 54×10 мкмоль/мин·л. При этом у 10 (90,9%) из них исход хирургического лечения характеризовался как неблагоприятный, так как в послеоперационном периоде наблюдалось прогрессирование пролиферации и ухудшение зрительных функции. У 1 больного (9,1%) отмечался благоприятный исход операции, стабилизация пролиферации и остроты зрения.

У 9 (45%) из 20 больных с ПДР активность АПФ до операции была более 54×10 мкмоль/мин·л. При этом у 6 (66,7%) из них отмечался благоприятный исход операции, у 3 (33,3%) отмечали неблагоприятное течение послеоперационного периода с прогрессированием пролиферативного процесса.

Таким образом, предлагаемый способ прогнозирования исходов хирургического лечения пролиферативной диабетической ретинопатии являлся правильным у 16 из 20 больных (80%). Диагностическая чувствительность способа составила 83,3%, а специфичность 76,9%.

Пример 1. Больная М., 37 лет находилась на стационарном лечении в 3 хирургическом отделений Уфимского НИИ ГБ с диагнозом: OU Пролиферативная диабетическая ретинопатия, прогрессирующее течение. Страдает инсулинзависимым сахарным диабетом 12 лет. До операции проводилось определение активности АПФ в слезной жидкости по предлагаемому способу. Активность АПФ в слезной жидкости составила 21×10 мкмоль/мин·л. Прогнозировался неблагоприятный исход хирургического лечения. Действительно, несмотря на успешное комплексное хирургическое лечение (субтотальная витрэктомия, введение перфторорганического соединения, эндолазеркоагуляция и инфузия силиконового масла) - у больного наблюдалось дальнейшее прогрессирование пролиферации на глазном дне с развитием тракционной отслойки сетчатки и снижение остроты зрения. Таким образом, прогнозируемый неблагоприятный исход хирургического лечения ПДР на основании низкой (менее 54×10 мкмоль/мин·л) активности АПФ в слезной жидкости до операции подтвердился.

Пример 2. Больная Я., 25 лет находилась на стационарном лечении с диагнозом: OU Пролиферативная диабетическая ретинопатия. OS Тракционная отслойка сетчатки. Страдает инсулинзависимым сахарным диабетом 15 лет. До операции проводилось определение активности АПФ в слезной жидкости по предлагаемому способу. Активность АПФ в слезной жидкости составила 65,4×10 мкмоль/мин·л. Прогнозировался благоприятный исход хирургического лечения. После комплексного хирургического лечения (субтотальная витрэктомия, введение перфторорганического соединения, эндолазеркоагуляция и инфузия силиконового масла) - сетчатка прилегла, больная выписана с остротой зрения 0,2 с коррекцией. На протяжении 12 месяцев наблюдения ухудшения остроты зрения, рецидивы пролиферации и отслойки сетчатки не отмечались. Прогнозируемый до операции благоприятный исход хирургического лечения ПДР на основании высокой (более 54×10 мкмоль/мин·л) активности АПФ в слезной жидкости подтвердился.