способ диагностики цирроза печени

Классы МПК:G01N33/68 с использованием протеинов, пептидов или аминокислот
Автор(ы):, , , , , , , , , , , , , ,
Патентообладатель(и):Белобородова Эльвира Ивановна (RU),
Абдрашитов Радиф Фаридович (RU),
Белобородова Екатерина Витальевна (RU),
Рачковский Максим Игоревич (RU),
Пурлик Игорь Леонидович (RU),
Акбашева Ольга Евгеньевна (RU),
Алексеева Анна Степановна (RU),
Бурковская Вера Антоновна (RU),
Варлакова Наталья Николаевна (RU),
Суходолин Дмитрий Александрович (RU),
Петрова Лариса Анатольевна (RU),
Кнутарева Елена Николаевна (RU),
Филиппова Людмила Павловна (RU),
Ламбарова Евгения Георгиевна (RU),
Перельмутер Леонид Владимирович (RU)
Приоритеты:
подача заявки:
2005-09-12
публикация патента:

Изобретение относится к области медицины, гепатологии. Способ осуществляют следующим образом: в сыворотке крови определяют активность коллагеназы, ингибитора коллагеназы и протеазы, и при увеличении активности коллагеназы до 4 мкмоль/(л·ч) и выше, снижении активности ингибитора коллагеназы до 1,9 ИЕ/мл и ниже и снижении активности ингибитора протеазы до 9 ИЕ/мл и ниже диагностируют цирроз печени. Изобретение обеспечивает повышение точности и информативности способа.

Формула изобретения

Способ диагностики цирроза печени, заключающийся в обследовании пациента и проведении биохимического исследования крови, отличающийся тем, что в сыворотке крови определяют активность коллагеназы, ингибитора коллагеназы и протеазы и при увеличении активности коллагеназы до 4 мкмоль/(л·ч) и выше, снижении активности ингибитора коллагеназы до 1,9 ИЕ/мл и ниже и снижении активности ингибитора протеазы до 9 ИЕ/мл и ниже диагностируют цирроз печени.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к области медицины, гепатологии и может быть использовано для диагностики цирроза печени.

Известен способ диагностики цирроза печени по данным пункционной биопсии печени, где V.Desmetit et al (1994) определяют стадию хронизации и оценивают степень выраженности фиброза в гистологических препаратах [6]. В.В.Серовым и Л.О.Северюгиной (1996) для оценки выраженности фиброза предложен гистологический индекс стадий хронизации процесса, где авторы на гистологических препаратах печени предлагают учитывать не только наличие признаков портального и септального фиброза, но и «синусоидального» (перегепатоцеллюлярного) фиброза. Использование известного способа диагностики стадий хронизации процесса дает хорошие результаты при исследовании достаточного объема печеночной ткани. Однако пункционная биопсия печени с нарастанием фиброза затруднительна особенно при уже развившемся циррозе печени. Надо учитывать инвазивность метода пункционной биопсии и невозможность его выполнения из-за опасности возможных осложнений (нарушений свертывания крови с последующим кровотечением при циррозе печени). Возникают сложности процедуры из-за отказа больного в виде инвазивности метода. Необходимо учитывать нередко возможные сложности в диагностике цирроза, так как печень не всегда увеличена, а наоборот, уменьшена в размерах, тем более что клинических признаков цирроза печени практически нет, особенно в стадии компенсации процесса.

Наиболее близким к предлагаемому является способ диагностики цирроза печени путем определения относительного содержания фракций лизофосфатидилхолина (ЛФХ), относительного содержания сфингомиелина (СМ), фосфатидилхолина фосфолипидного спектра крови и расчета коэффициента, определяемого по формуле ФХ2/CM×ЛФХ, где ФХ - относительное содержание фосфатидилхолина, CM - относительное содержание сфингомиелина, ЛФХ - относительное лизофосфатидилхолина, и при его значениях: 20-35 диагностируется хронический вирусный гепатит, в том числе и у носителей HBsAg, 36-45 - хронический вирусный гепатит у лиц, злоупотребляющих алкоголем, 50-96 диагностируют цирроз [5].

Однако данный способ неточен, так как исследования фосфолипидного спектра проводятся в крови, в то время как первичные и наиболее выраженные изменения липидного обмена происходят в гепатоцитах печени, а уровень перекисного окисления липидов зависит от состояния антиоксидантной системы [1]. Указанный метод сомнителен, так как не решает вопросы по существу проблемы, а проводится путем относительного определения фракций фосфолипидного спектра крови и не сопровождаются параллельным изучением морфологического состояния печени. Поэтому указанные диагнозы в данном способе выглядят мало достоверными. Наконец, данный способ далек от диагностики сывороточных маркеров фиброза, в качестве последних применяются компоненты внеклеточного матрикса, участвующие в процессе печеного фибриногенеза, в частности, дисбаланс коллагеназы и ее ингибиторов, а также тканевых ингибиторов протеаз.

Новая техническая задача - повышение точности и информативности способа, расширение области его применения.

Поставленную задачу решают новым способом диагностики цирроза печени, заключающимся в обследовании пациента с проведением биохимического исследования крови, причем в сыворотке крови определяют активность коллагеназы, активность ингибитора коллагеназы и протеазы, и при увеличении активности коллагеназы до 4 мкмоль/(л·ч) и выше, снижении активности ингибитора коллагеназы до 1,9 ИЕ/мл и ниже и снижении активности протеазного ингибитора до 9 ИЕ/мл и ниже диагностируют цирроз печени.

Способ осуществляют следующим образом

В сыворотке крови пациента определяют активности коллагеназы, ингибитора коллагеназы и протеазы и при увеличении активности коллагеназы до 4 мкмоль/(л·ч) и выше, снижении активности ингибитора коллагеназы до 1,9 ИЕ/мл и ниже и снижении активности протеазного ингибитора до 9 ИЕ/мл и ниже диагностируют цирроз печени.

Предлагаемые критерии подобраны на основании анализа данных обследования 60 больных хроническим гепатитов различных стадий хронизации и 20 больных циррозом печени. Этиология заболевания - вирусная (вирус С, В, В+С). Всем больным проводились общие клинические методы обследования и пункционная печени по Менгини с получением биоптата с последующим морфологическим исследованием и определением гистологического индекса активности и индекса стадии хронизации (индекса фиброза) и одновременно определяли активность в сыворотке крови коллагензы [2], активности ингибиторов коллагеназы и протеазного ингибитора [3].

В группе больных с отсутствием фиброза активность коллагеназы в сыворотке крови была не выше 1,87 мкмоль/л·ч, у больных циррозом печени - 4 мкмоль/л·ч и выше, что позволяло рассматривать нарастание активности коллагеназы как активацию системы коллагенолиза в ответ на усиление синтеза коллагена [4]; при циррозе печени активность ингибитора коллагеназы в сыворотке крови с отсутствием фиброза была не ниже 3,8 ИЕ/мл, а при наличии цирроза этот показатель снижался до 1,9 ИЕ/мл и ниже; активность протеазного ингибитора при отсутствии фиброза была не ниже 26,4 ИЕ/мл, а у больных циррозом печени она снижалась до 9,0 ИЕ/мл и ниже.

При циррозе печени нарастала активность коллагеназы в 3 и более раз (4 мкмоль/(л·ч) и выше), снижается активность ингибитора коллагеназы в 2 раза (1,9 ИЕ/мл и ниже) и снижается активность протеазного ингибитора, отражающая снижение белково-синтетической функции печени, в 3 раза (9 ИЕ/мл и ниже).

Пример 1. Больной П., 52 года, диагноз - цирроз печени, стадия А (по Чальз-Пью) в анамнезе в течение 10 лет определяется HBcorAgIgG, HBsAg, повышение трансаминаз умеренного характера в 1,5 раза, отмечается умеренная гепатомегалия, печень плотная с острым краем. Жалобы на общую слабость, утомляемость, при обследовании выявлено ПЦР к ДНК HBV, повышение активности трансаминаз в 2 раза. Проведено исследование согласно предлагаемому способу. В сыворотке крови - альбумин 38 г/л, протромбиновый индекс - 80, активность коллагеназы 4,4 мкмоль/л·ч, активность ингибитора коллагеназы 1,7 ИЕ/мл, активность протеазного ингибитора 8,5 ИЕ/мл. При гистологическом исследовании печени - цирроз печени в активной фазе.

Пример 2. Больная Г., 56 лет в анамнезе частое донорство и гемотрансфузия по поводу маточного кровотечения 10 лет назад. Периодически повышение уровня аланинами-нотрансферазы, ухудшение самочувствия в последние 3 года. При обследовании в условиях гепатологического отделения отмечается положительная ПЦР к РНК HCV, активность трансаминаз была повышена в 1,5 раза, на УЗИ гепато и спленомегалия/. Проведено исследование согласно предлагаемому способу. В сыворотке крови содержание альбумина 35 г/л, протромбиновый индекс 78, активность коллагеназы - 4,6 мкмоль/л·ч, активность ингибитора коллагеназы 1,6 ИЕ/мл, активность протеазного ингибитора 8,3 ИЕ/мл. При гистологическом исследовании печени диагностирован цирроз печени активная фаза.

Пример 3. Больной Ц., 41 год, в анамнезе в течение 10 лет применение внутривенного введения наркотиков (опийная наркомания). Периодически повышение трансаминаз не более чем в 2 раза в крови в течение этого времени положительная ПЦР к РНК HCV. Проведено исследование согласно предлагаемому способу. В сыворотке крови при поступлении отмечалось снижение альбуминов до 33 г/л, протромбиновый индекс 78, активность коллагеназы 4,8 мкмоль/л·ч, активность ингибитора коллагеназы 1,7 ИЕ/мл, активность протеазного ингибитора 8,1 ИЕ/мл. Проведение пункционной биопсии выявило цирроз печени умеренной степени активности.

Таким образом, предлагаемый способ позволяет провести неинвазивное обследование с определением биохимических показателей сыворотки крови на активность коллагеназ, активность ингибиторов коллагеназы и протеазы.

Применение предложенного неинвазивного метода исследования позволяет диагностировать цирроз печени, т.е. оценить структуру печени, а при динамическом наблюдении без пункционной биопсии печени оценить результаты лечения, выражающиеся в нарастании цирротических изменений, либо в стабилизации показателей.

Источники информации

1. Дунаевский О.А. Вирусные гепатиты и дифференциальная диагностика заболеваний печени. - Тверь, 1993. - 263 с.

2. Шараев И.Н., Пишков В.Н., Зворыгина Н.Г. Определение коллагеновой активности плазмы крови // Лабораторное дело. - 1987. - №1. - С.60-62.

3. Нарткова В.Ф., Пасхина Т.С. Унифицированный метод определения активности способ диагностики цирроза печени, патент № 2291441 2-макроглобулин в сыворотке (плазме) крови человека // Вопросы медицинской химии. - 1979. - Т.25, №4. - С.494-499.

4. Логинов А.С., Блок Ю.Е. Хронические гепатиты и циррозы печени. - Медицина, 1987.

5. Патент №2167424 Способ диагностики хронических заболеваний печени. Автор Макаров В.К.

6. Desmetit V., Gerber M., et al. Классификация хронического гепатита, диагностика, определение тяжести и тяжести течения // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии и колопрактологии. - 1995. - №2. - С.38-45.

Класс G01N33/68 с использованием протеинов, пептидов или аминокислот

способ прогнозирования инфекционного осложнения атопического дерматита у ребенка -  патент 2528908 (20.09.2014)
способ диагностики генетической предрасположенности к нарушениям сердечной проводимости -  патент 2528900 (20.09.2014)
способ прогнозирования неблагоприятного исхода гипертрофической кардиомиопатии -  патент 2527768 (10.09.2014)
способ прогнозирования риска развития рестеноза коронарных артерий после их стентирования у пациентов с ишемической болезнью сердца -  патент 2523391 (20.07.2014)
способ определения индивидуальной радиочувствительности больных злокачественными новообразованиями при проведении лучевой терапии -  патент 2522507 (20.07.2014)
способ прогнозирования прерывания беременности в первом триместре -  патент 2522244 (10.07.2014)
способ диагностики онкологических заболеваний и иммуноферментный набор для его осуществления -  патент 2522231 (10.07.2014)
способ прогнозирования риска развития сахарного диабета второго типа у больных гипертонической болезнью -  патент 2521202 (27.06.2014)
способы и применения, включающие гемсвязывающий белок 1 -  патент 2520748 (27.06.2014)
композиции и мультипараметричекие способы анализа для измерения биологических медиаторов физиологического здоровья -  патент 2520080 (20.06.2014)
Наверх