способ выделения из крови больных сахарным диабетом гельминтов, личинок гельминтов в нативной форме
Классы МПК: | G01N33/48 биологических материалов, например крови, мочи; приборы для подсчета и измерения клеток крови (гемоцитометры) G01N1/28 подготовка образцов для исследования |
Автор(ы): | Балугян Ружена Шаликовна (RU), Сеид-Гусейнов Алексей Асадович (RU), Микулин Александр Евгеньевич (RU), Кочергина Елена Сергеевна (RU), Иванова Оксана Ивановна (RU), Логачев Михаил Федорович (RU) |
Патентообладатель(и): | Балугян Ружена Шаликовна (RU), Сеид-Гусейнов Алексей Асадович (RU), Микулин Александр Евгеньевич (RU), Кочергина Елена Сергеевна (RU), Иванова Оксана Ивановна (RU), Логачев Михаил Федорович (RU) |
Приоритеты: |
подача заявки:
2004-04-19 публикация патента:
20.11.2006 |
Изобретение относится к области медицины. Препараты для микроскопирования готовят из обогащенной глюкозой надосадочной жидкости в результате смешивания пробы крови с антикоагулянтом К3-ЭДТА, добавляют концентрированный раствор глюкозы не более 10% от объема пробы крови для создания в пробе крови концентрации глюкозы 50-100 ммоль/л, инкубируют пробы крови в термостате при 37°С в течение 15 минут, из верхнего слоя надосадочной жидкости отбирают 10-15 мкл и переносят на предметное стекло, покрывают покровным стеклом и проводят микроскопирование с объективами 10 и 40. Изобретение позволяет выявить паразитов в 100% случаях. 2 ил.
Формула изобретения
Способ выделения из крови больных сахарным диабетом гельминтов, личинок гельминтов в нативной форме, включающий получение микроскопических препаратов из обогащенной глюкозой надосадочной жидкости в результате смешивания пробы крови с антикоагулянтом К3-ЭДТА, добавление концентрированного раствора глюкозы не более 10% от объема пробы крови для создания в пробе крови концентрации глюкозы 50-100 м моль/л, инкубирование пробы крови в термостате при 37°С в течение 15 мин, забор из верхнего слоя надосадочной жидкости 10-15 мкл жидкости и перенесение ее на предметное стекло, покрытие капли покровным стеклом и микроскопию полученного препарата с объективами 10 и 40.
Описание изобретения к патенту
Изобретение относится к области медицины и может быть использовано для выделения из крови больных, например больных сахарным диабетом I и II типов, гельминтов, личинок гельминтов и других паразитов. Предложенный способ является новым, ранее в научной и медицинской литературе не описан.
Целью изобретения является разработка способа выделения из крови больных сахарным диабетом гельминтов, личинок гельминтов и других паразитов.
Поставленная цель достигается способом получения препарата крови на предметном стекле путем предварительного забора крови у больного с антикоагулянтом К3-ЭДТА (калиевая соль этилендиаминтетрауксусной кислоты); добавлением концентрированного раствора глюкозы (не более 10% от объема пробы крови) для создания в пробе крови концентрации глюкозы 30-100 ммоль/л; инкубированием пробы крови в термостате при 37°С в течение 15 минут; забором из верхнего слоя надосадочной жидкости 10-15 мкл жидкости и перенесением ее на предметное стекло; полученная капля покрывается покровным стеклом и далее производится микроскопия полученного препарата с объективами 10 и 40, что позволяет обнаружить в крови больных сахарным диабетом I и II типов гельминтов, личинок гельминтов и других паразитов в нативной форме (в живом виде).
Новым в предложенном способе является то, что в результате последовательного применения описанных этапов удалось выявить в 100% случаев в крови больных сахарным диабетом 1 и 2 типов имевшихся там гельминтов, личинок гельминтов и других паразитов.
Новый способ обнаружения гельминтов, личинок гельминтов и других паразитов в нативной форме в крови больных сахарным диабетом необходим для разработки новых методов фармакотерапии и улучшения диагностики при лечении этих больных.
При отрабатывании отдельных этапов способа проверены и обоснованы параметрические значения концентраций, времени, температуры и так далее, что отражено в приведенных примерах.
ПРИМЕР 1 (фиг.1а, б).
1. У больного сахарным диабетом берется 0.5 мл венозной крови с антикоагулянтом К3-ЭДТА.
2. К ней добавляется 50 мкл раствора глюкозы (раствор глюкозы готовится на физиологическом растворе с концентрацией глюкозы 500 ммоль/л), и проба перемешивается.
3. Проба инкубируется при 37°С в течение 15 минут.
4. С поверхности надосадочной жидкости берут 15 мкл и переносят на предметное стекло в виде капли. Капля накрывается покровным стеклом.
5. Микроскопия препарата с объективами 10 и 40 позволила обнаружить в крови паразитов в нативной форме.
ПРИМЕР 2 (фиг.2).
1. У больного сахарным диабетом взято 100 мкл капиллярной крови.
2. К ней добавлено 10 мкл раствора глюкозы с концентрацией 500 ммоль/л.
3. Проба инкубируется при 37°С в течение 15 минут.
4. С поверхности надосадочной жидкости берут 15 мкл и переносят на предметное стекло в виде капли. Капля накрывается покровным стеклом.
5. Микроскопия препарата с объективами 10 и 40 позволила обнаружить в крови паразитов.
Всего венозная и капиллярная кровь была исследована более чем у 60 больных сахарным диабетом, и во всех препаратах, приготовленных по данной методике, были обнаружены гельминты, личинки гельминтов и другие паразиты.
Предлагаемый способ позволяет в обычных лабораторных условиях с помощью недорогих реактивов получать препараты крови больных сахарным диабетом и определять в них гельминтов, личинок гельминтов и других паразитов.
Класс G01N33/48 биологических материалов, например крови, мочи; приборы для подсчета и измерения клеток крови (гемоцитометры)
Класс G01N1/28 подготовка образцов для исследования