способ коррекции нарушений эритропоэза при экспериментальной гипоксии

Формула изобретения

Способ коррекции нарушений эритропоэза при гипоксии тяжелой степени, заключающийся в введении препарата, отличающийся тем, что в качестве препарата используют пропранолол, который вводят мышам однократно подкожно в дозе 5 мг/кг на 2-е сут после моделирования гипоксии.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к области медицины, конкретно к фармакологии, и касается способа коррекции нарушений эритропоэза, развивающихся при гипоксии.

Известен способ коррекции нарушений эритропоэза, развивающихся при гипоксии, с помощью оксибутирата натрия, вводимого сразу после воздействия в наркотической дозе 750 мг/кг [1].

Данный способ является наиболее близким к заявляемому по достигаемому результату и выбран в качестве прототипа.

Недостатком способа является его низкая эффективность в случае отсроченного применения данного препарата, когда развитие гипоксической энцефалопатии (а нарушения в системе крови связаны именно с энцефалопатией [1]) предотвратить уже невозможно, а в клинической практике далеко не всегда является возможным проведение лечебных мероприятий сразу после гипоксической травмы [2].

Задачей, решаемой данным изобретением, является повышение эффективности предлагаемого способа.

Поставленная задача достигается техническим решением, представляющим собой способ коррекции нарушений эритропоэза, заключающийся в однократном подкожном введении лабораторным животным (мыши) препарата пропранолола в дозе 5 мг/кг на 2-е сут после моделирования гипоксии.

Новым в предлагаемом изобретении является использование препарата пропранолола, вводимого однократно в дозе 5 мг/кг на 2-е сут после моделирования гипоксии.

Гипоксия как типовой патологический процесс сопровождает практически все известные заболевания. При этом в случае развития тяжелых нарушений окислительных процессов в тканях головного мозга происходит гибель нейральных клеточных элементов, сопровождаемая расстройствами функционирования органов и систем, подчиненных регуляторному влиянию тех структур центральной нервной системы, которые ответственны за их деятельность и которые существенно "пострадали" в результате воздействия. Таким образом, поражение структур ЦНС, ответственных за управление деятельностью внутренних органов и систем, зачастую способно приводить к развитию дизрегуляционной патологии висцеральных органов после воздействия [3, 4].

Система крови играет одну из ключевых ролей в поддержании гомеостаза и формировании адекватных компенсаторно-приспособительных реакций организма при кислородной недостаточности. В то же время известно, что гипоксия высокой степени тяжести, приводящая к развитию энцефалопатии, сопровождается отсроченной дизадаптацией гемопоэтической ткани, проявляющейся в повреждении кроветворных прекурсоров, снижении уровня гиперплазии эритроидного ростка кроветворения и продукции патологических форм эритроцитов, что существенно ухудшает окислительное обеспечение тканей организма, подвергшегося гипоксии [1, 5].

На сегодня считается доказанным важное значение гиперадренергии, развивающейся в постгипоксическом периоде, в нарушении функционирования ряда внутренних органов [3, 6]. В то же время согласно литературным данным активация симпатоадреналовой и гипофизарно-надпочечниковой систем при экстремальных воздействиях, в том числе при гипоксии, оказывает стимулирующее (положительное) влияние на процессы кроветворения [1, 7]. Вместе с тем известна "отрицательная" роль избытка катехоламинов, реализуемая через бета-адренорецепторы, на эритропоэз при миелосупрессии, вызванной введением антиметаболита. При этом указанное "извращенное" влияние активации симпатоадреналовой системы на регенерацию гемопоэза в постцитостатическом периоде связано с усилением прямого мутагенного эффекта цитостатика на кроветворные прекурсоры [7]. В случае же гипоксических воздействий участие описанного негативного механизма действия адреналина и норадреналина на эритропоэз, безусловно, исключено.

Заявляемые существенные признаки проявили в совокупности новые свойства, не являющиеся очевидными для специалиста и не вытекающие явным образом из уровня техники в данной области. Новые признаки позволяют эффективно коррегировать нарушение эритропоэза при гипоксии, и предлагаемое изобретение может быть использовано в медицине. Идентичной совокупности признаков не обнаружено при исследовании уровня техники по патентной и научно-медицинской литературе.

Исходя из вышеизложенного, следует считать заявляемое техническое решение соответствующим критериям: "Новизна", "Изобретательский уровень", "Промышленная применимость".

Способ осуществляют следующим образом.

Лабораторному животному (мыши) на 2-е сут после моделирования гипоксии однократно подкожно вводили пропранолол в дозе 5 мг/кг. В проведенных ранее экспериментах указанная доза была определена как максимально эффективная.

Предлагаемый способ был изучен в экспериментах на мышах линии CBA/CaLac в количестве 256 шт., массой 18-20 г. Мыши 1 категории (конвенциональные линейные мыши) получены из питомника отдела экспериментального биомедицинского моделирования НИИ фармакологии ТНЦ СО РАМН (сертификат имеется).

На 3-10-е сут определяли показатели периферической крови с помощью автоматического гематологического анализатора ABACUS (Diatron, Австрия) в ветеринарном режиме, костномозгового кроветворения стандартными гематологическими методами, содержание эритроидных клеток-предшественников (КОЕ-Э) в костном мозге, их пролиферативную активность и интенсивнось дифференцировки [8]. Обработку результатов проводили методом вариационной статистики с использованием t-критерия Стьюдента и непараметрического U-критерия Вилкоксона-Манна-Уитни.

Пример 1.

Гипоксическое воздействие моделировалось с помощью гермокамеры объемом 500 мл. Мыши помещались в гермокамеру, крышка закрывалась, и мыши оставались там до агонального судорожного припадка или остановки дыхания, определяемой визуально, в течение 10-15 секунд. После извлечения из гермокамеры и восстановления самостоятельного дыхания, через 5-10 минут, мыши вновь помещались в гермокамеру также до наступления агонального состояния (генерализованного судорожного припадка или остановки дыхания). Контрольной группе животных по схеме способа-прототипа однократно внутрибрюшинно на 2-е сут после воздействия вводили оксибутират натрия в дозе 750 мг/кг. Опытным животным на 2-е сут после моделирования гипоксии подкожно однократно вводили пропранолол ("Arzneimittelwerk", Германия) в дозе 5 мг/кг.

В ходе эксперимента введение оксибутирата натрия на 2-е сут после воздействия практически не оказывало статистически значимого влияния на формирование гематологических сдвигов, за исключением увеличения количества эритрокариоцитов в костном мозге на 5-е сут опыта.

Исследование роли адренергических систем в регуляции гемопоэза в случае развития энцефалопатии показало, что блокада бета-адренорецепторов на 2-е сут после гипоксической гипоксии приводила к увеличению в периферической крови числа эритроцитов (4, 7, 9-е сут), содержания гемоглобина (5-е сут) и отмене развития гипохромной анемии при снижении степени макроцитоза (4-е сут). Указанные изменения со стороны периферической крови явились закономерным отражением динамики костномозгового эритропоэза. Отмечалось увеличение количества эритрокариоцитов в костном мозге на 5-е сут опыта, связанное с повышением содержания эритроидных прекурсоров (4-е сут) в гемопоэтической ткани и ускорение темпа их деления на 3-е сут исследования (табл.1).

Пример 2.

Кислородная недостаточность моделировалась на мышах линии CBA/CaLac, массой 18-20 г путем однократного внутрибрюшинного введения раствора солянокислого фенилгидразина в дозе 150 мг/кг. Контрольной группе животных по схеме способа-прототипа однократно внутрибрюшинно на 2-е сут после воздействия вводили оксибутират натрия в дозе 750 мг/кг. Опытным животным на 2-е сут после моделирования гипоксии подкожно однократно вводили пропранолол ("Arzneimittelwerk", Германия) в дозе 5 мг/кг.

Проведенные исследования показали, что отсроченное, на 2-е сут после воздействия, внутрибрюшинное введение оксибутирата натрия не приводило к выраженным изменениям со стороны системы эритрона.

В то же время однократное введение пропранолола существенно улучшало динамику восстановления клеточности красной крови после моделирования гемолитической анемии. Отмечалось повышение количества эритроцитов на 6-9-е сут и гематокрита на 6-8-е сут наблюдения. При этом качественный анализ форменных элементов показал значительное снижение размеров эритроцитов у мышей, леченных препаратом, по сравнению с аналогичными показателями у контрольных животных (7-10-е сут). Со стороны костномозгового кроветворения имело место повышение уровня гиперплазии эритроидного ростка на 6, 9-е сут опыта в результате повышения содержания колониеобразующих единиц эритропоэза (4-е сут) в костном мозге (табл.2).

Пример 3.

Гипоксию моделировали у мышей линии CBA/CaLac, массой 18-20 г, путем пункции ретроорбитального синуса и выпускания через промытую раствором гепарина пастеровскую пипетку в течение 3-х часов дробно, за 3 раза, 70% объема циркулирующей крови. Расчет необходимого для забора количества крови производят из предположения, что у грызунов объем циркулирующей крови составляет 1/13 часть от массы тела животного. Контрольной группе животных по схеме способа-прототипа однократно внутрибрюшинно на 2-е сут после воздействия вводили оксибутират натрия в дозе 750 мг/кг. Опытным животным на 2-е сут после моделирования гипоксии подкожно однократно вводили пропранолол ("Arzneimittelwerk", Германия) в дозе 5 мг/кг.

Введение оксибутирата натрия после потери 70% объема циркулирующей крови приводило к достоверному увеличению количества эритроцитов и гематокрита на 9-е сут опыта, связанному с возрастанием содержания эритрокариоцитов в костном мозге на 3-е сут исследования.

Введение пропранолола значительно более существенно коррегировало гематологические сдвиги в постгеморрагическом периоде. Отмечалось повышение количества эритроцитов на 5, 6, 9-е сут и гематокрита на 4-е сут наблюдения. При этом качественный анализ форменных элементов показал значительное снижение размеров эритроцитов на 5-10-е сут после кровопотери. Указанные изменения со стороны периферической крови явились следствием увеличения количества эритрокариоцитов в костном мозге на 6, 7-е сут опыта, по сравнению с животными, которым активность адренергических механизмов не коррегировалась. Культуральные методы исследования механизмов развития описанных феноменов выявили возрастание числа КОЕ-Э в костном мозге на 3,4-е сут наблюдения (табл.3).

Таким образом, введение пропранолола после моделирования тяжелой окислительной недостаточности различного генеза приводило к повышению содержания прекурсоров эритропоэза в гемопоэтической ткани, возрастанию уровня гиперплазии эритроидного ростка кроветворения и увеличению количества эритроцитов в периферической крови при снижении продукции их патологических форм. По всем показателям "положительный" эффект пропранолола превосходил эффект коррекции нарушений эритропоэза по способу-прототипу. При этом механизмом действия бета-адреноблокатора являлось предотвращение повреждения коммитированных клеток-предшественников эритропоэза.

Предлагаемый способ позволяет проводить коррекцию нарушений эритропоэза, развивающихся при гипоксии.

Литература

1. Зюзьков Г.Н. Механизмы регуляции гемопоэза в постгипоксическом периоде: Дисс... канд. мед. наук. - Томск, 2003. - 158 с.

2. Гипоксия. Адаптация, патогенез, клиника. Сб. / Под ред. Ю.Л.Шевченко. - Санкт-Петербург, OOO "ЭЛБИ-Сб", 2000. - 384 с.

3. Алексеева Г.В., Гурвич А.М., Семченко В.В. Постреанимационная энцефалопатия (патогенез, клиника, профилактика и лечение). - Омск: Омская областная типография, 2003. - 152 с.

4. Дизрегуляционная патология. / Под ред. Г.Н.Крыжановского. - М.: Медицина, 2002. - 652 с.

5. Патент РФ на изобретение №2240604 "Способ моделирования постгипоксической энцефалопатии и связанных с ней нарушений в системе крови".

6. Проблемы гипоксии: молекулярные, физиологические и медицинские аспекты. / Под ред. Л.Д.Лукьяновой, И.Б.Ушакова. - Воронеж: Изд-во "Истоки", 2004. - 585 с.

7. Гольдберг Е.Д., Дыгай А.М., Хлусов И.А. Роль вегетативной нервной системы в регуляции гемопоэза. - Томск: Изд-во ТГУ, 1997. - 218 с.

8. Гольдберг Е.Д., Дыгай A.M., Шахов В.П. Методы культуры ткани в гематологии. - Томск: Изд-во ТГУ, 1992. - 264 с.

Таблица 1 Динамика показателей системы эритрона у мышей линии CBACaLac после гипоксической гипоксии (1), при введении оксибутирата натрия (2) и пропранолола (3) на 2-е сут после гипоксического воздействия, (Х±m)
Сроки исследования, сутки		Эритроциты, Т/л	Гематокрит, %	Средний объем эритроцита, фл	Эритро-кариопиты, ×106/бедро	КОЕ-Э, на 105/нуклеаров	КОЕ-Э в S-фазе, %	Интенсивность диф-ки, в усл. ед.
интакт		11,42±0,14	47,72±0,48	41,5±0,22	1,31±0,06	4,5±0,56	23,19±8,42	13,51±0,49
3-е	1	11,78±0,32	51,12±1,2*	43,4±0,24*	6,22±0,59*	7,67±0,49*	17,84±6,34*	24,65±1,75*
	2	11,64±0,22	50,64±0,85*	43,0±0,32*	5,03±0,21*	8,01±0,65*	29,76±7,54	21,38±1,12*
	3	11,41±0,12	48,78±0,91	42,35±0,12*	5,87±0,43*	10,5±0,98*#	71,09±3,42*#	10,98±0,57
4-е	1	11,45±0,26	50,3±1,2	43,83±0,17*	3,19±0,31*	8,14±0,74*	29,81±8,47	22,25±1,87*
	2	11,82±0,16	51,32±0,78*	43,83±0,4	3,01±0,12*	8,2±0,91*	39,57±2,27*	18,62±2,29*
	3	12,26±0,06*#	52,25±0,94*	42,56±0,08*#	3,12±0,2*	11,53±0,31*#	39,22±1,58*	24,69±2,97*
5-е	1	11,6±0,24	51,4±0,74*	44,29±0,64*	3,9±0,61*	5,5±0,50	21,73±4,75	29,12±3,34*
	2	11,3±0,17*	52,1±0,68*	43,43±0,3	5,09±0,16*#	6,7±1,02	35,75±5,93	21,15±1,31*
	3	11,98±0,06*	49,94±0,35*	42,88±0,11*#	5,3±0,7*#	5,8±0,43*	28,6±3,78	10,98±0,57
6-е	1	11,97±0,21	51,4±0,95	41,33±0,21	3,35±0,27*	7,16±0,60*	55,77±3,74*	24,14±3,29*
	2	12,98±0,21*#	48,65±0,73	41,33±0,21	3,27±0,23*	8,04±0,97*	58,33±8,54*	25,11±1,16*
	3	11,51±0,2	49,17±0,26	42,08±0,28	4,1±0,78*	7,43±0,49*	43,36±3,54*	23,7±1,34*
7-е	1	11,2±0,12	46,22±0,54	41,0±0,26	4,11±0,21*	4,03±0,80	20,03±10,05	25,47±0,38*
	2	11,27±0,11	46,93±0,45	41,33±0,21	4,08±0,16*	3,98±0,72	24,38±7,68	22,51±1,16*
	3	12,56±0,15*#	47,02±0,34	41,55±0,1	5,08±0,24*	5,02±0,89	34,04±5,03	18,56±3,74
8-е	1	11,3±0,24	46,75±0,9	41,17±0,17	4,57±0,63*	3,08±0,30	65,88±3,49*	23,2±1,26*
	2	11,52±0,31	45,35±1,15	41,33±0,21	4,87±0,14*	3,9±0,65	67,47±5,59*	25,41±2,81*
	3	11,48±0,15	44,84±1,78	42,61±0,09	4,32±0,27*	4,2±0,69	52,71±4,88*	26,28±1,24*
9-е	1	10,96±0,27	45,22±0,99	41,2±0,2	2,59±0,26*	4,17±0,60	38,68±9,51	21,88±2,71*
	2	11,0±0,14	45,7±0,34	41,2±0,2	3,01±0,18*	4,78±0,32	47,31±6,93*	22,03±0,57*
	3	11,48±0,05#	45,5±0,15*	41,82±0,33	3,0±0,37*	4,2±0,41	40,56±5,34*	27,61±4,52*
10-е	1	11,9±0,21	49,85±1,02	41,75±0,25	4,79±0,39*	5,5±0,73	19,41±6,71	27,05±3,79*
	2	11,9±0,18	48,88±0,96	41,8±0,2	4,69±0,14*	5,06±0,26	34,05±5,79	26,43±0,61*
	3	11,67±0,11	47,22±0,75	41,04±0,24	4,37±0,71*	4,9±0,61	29,6±5,98	25,2±2,73
* - отмечена достоверность различий с интактным контролем при р<0,05; # - отмечена достоверность различий с показателями в группе животных без препарата (1) при р<0,05

Таблица 2 Динамика показателей системы эритрона у мышей линии CBACaLac после введения 150 мг/кг солянокислого фенилгидразина (1), при введении оксибутирата натрия (2) и пропранолола (3) на 2-е сут после гипоксического воздействия, (Х±m)
Сроки исследования, сутки		Эршроциты, Т/л	Гематокрит, %	Средний объем эритроцита, фл	Эритрокариоциты, ×10 6/бедро	КОЕ-Э, на 10 5/нуклеаров	КОЕ-Э в S-фазе, %	Интенсивность диф-ки, в усл. ед.
интакт		11,22±0,16	45,88±0,76	41,33±0,63	3,02±0,25	3,83±0,48	37,33±6,17	15,56±2,89
3-е	1	5,57±0,17*	20,47±0,82*	36,67±0,49*	3,39±0,17	6,67±0,49*	53,79±3,62	34,79±1,77*
	2	6,14±0,52*	22,65±2,08*	36,75±0,25*	3,77±0,63	7,33±0,76*	53,84±5,04	42,43±4,16*
	3	6,07±0,14*	27,15±4,28*	40,55±0,41#	3,2±0,58	5,83±0,48	53,28±5,05	41,04±4,38*
4-е	1	5,59±0,65*	21,9±2,36*	40,17±0,6	5,01±0,51*	4,33±0,61*	70,0±3,35'г	37,99±2,79*
	2	5,95±0,18*	23,8±1,96*	39,8±1,96	6,13±0,5*	5,5±0,43	68,77±4,35*	42,26±5,17*
	3	6,2±0,1*	29,32±4,53*	43,13±0,89	6,2±0,29*	7,0±0,58*#	62,93±6,2	39,49±6,45*
5-е	1	4,4±0,55*	18,5±2,84*	43,0±0,82	4,91±0,27*	5,17±0,4*	56,0±2,0*	19,95±0,77
	2	4,03±0,64*	24,14±2,84*	41,4±0,4	5,26±0,22*	4,0±0,82	42,33±10,23	28,15±3,99*
	3	5,63±0,19*	24,2±3,38*	43,5±1,17*	5,82±0,21*	5,4±0,43*	61,67±9,12	23,53±2,87*
6-е	1	3,94±0,57*	21,32±3,11*	54,17±0,91*	5,34±0,46*	8,67±0,88*	57,55±3,51*	25,96±1,65*
	2	3,76±0,74*	23,9±2,53*	52,25±0,63*	5,76±0,52*	8,33±1,17*	48,57±4,86	30,86±4,04*
	3	5,59±0,11*#	30,48±1,91*#	54,79±0,72*	6,5±0,26*#	12,03±1,1*#	42,47±6,75	26,24±5,82
7-е	1	4,54±0,82*	28,85±4,52*	65,17±1,82*	5,11±0,51*	10,17±0,95*	59,88±2,63*	13,65±1,42
	2	46,9±0,33*	26,18±0,49*	68,75±1,7*	6,58±0,42*	9,5±0,96*	53,77±6,54	18,14±2,86
	3	7,12±0,18*#	40,45±0,91*#	51,18±1,44*#	6,01±0,48*	11,67±0,99*	54,9±4,55*	22,37±4,03
8-е	1	5,8±0,47*	З6,05±2,17*	65,5±0,62*	5,21±0,62*	9,67±0,88*	60,45±3,41*	12,87±1,04
	2	5,58±0,15*	38,6±0,64*	62,0±1,76*	6,54±0,61*	8,33±1,17*	59,6±2,65*	16,72±1,15
	3	7,47±0,05*#	40,32±0,86*#	51,9±0,42*#	5,98±0,94*	10,03±1,1*	56,98±3,75*	17,75±2,1
9-е	1	6,9±0,53*	40,0±2,31*	58,67±1,69*	3,92±0,87	9,17±0,95*	38,55±6,42	17,15±2,0
	2	6,84±0,2*	42,53±0,83*	56,25±0,75*	5,61±0,95*	9,5±0,96*	30,0±4,47	23,04±3,82
	3	8,09±0,08*#	43,22±0,46*	50,41±0,63*#	6,61±0,68*#	11,67±0,99*	35,7±5,45	20,33±3,18
10-е	1	7,82±0,18*	42,7±0,49*	54,67±0,67*&	6,08±0,15*	5,0±0,45	38,33±6,01	25,05±1,91*
	2	7,86±0,14*	43,08±0,63	53,75±0,48*	6,25±0,94*	3,83±0,48	26,38±4,11	24,78±3,28*
	3	8,2±0,65*	44,44±2,21	49,64±0,63*й	5,66±0,5*	4,17±0,48	28,55±8,74	22,15±2,44*
* - отмечена достоверность различий с интактным контролем при р<0,05; # - отмечена достоверность различий с показателями в группе животных без препарата (1) при р<0,05

Таблица 3 Динамика показателей системы эритрона у мышей линии CBACaLac после потери 70% объема циркулирующей крови (1) при введении оксибутирата натрия (2) и пропранолола (3) на 2-е сут постгеморрагического периода. (Х±m)
Сроки исследования, сутки		Эритроциты, Т/л	Гематокрит, %	Средний объем эритроцита, фл	Эритрокариоциты, ×106/бедро	КОЕ-Э, на 105 / нуклеаров	КОЕ-Э в S-фазе, %	Интенсивность диф-ки, в усл.ед.
интакт		11,42±0,28	48,45±1,05	42,0±0,63	2,44±0,3	7,67±1,12	19,95±5,43	6,64±0,56
3-е	1	6,2210,09*	27,98±0,31*	45,2±0,49*	5,45±0,64*	13,33±1,91*	57,02±6,9*	18,08±1,6*
	2	6,44±0,12*	28,12±0,68*	45,2±0,66*	6,0±0,3*	10,0±0,63	55,31±4,09*	20,03±1,7*
	3	6,33±0,07*	29,91±0,54*	46,34±0,68*	5,7±0,41*	14,5±0,43*#	41,09±6,62*	17,29±1,16*
4-е	1	6,49±0,12*	29,73±0,53*	46,0±0,63*	4,88±0,23*	10,5±0,72*	46,79±4,44*	16,26±0,4*
	2	6,47±0,29*	30,63±1,31*	45,25±0,85*	6,78±0,39*#	11,5±0,89*	37,87±3,53*	18,3±1,02*
	3	7,15±0,41*	36,34±0,89* #	46,23±0,92*	5,0±0,31*	13,8±0,86*#	38,79±3,41*	16,22±1,53*
5-е	1	6,59±0,14*	30,08±0,71*	45,83±0,27*	6,33±0,68*	13,5±1,2*	44,67±2,96*	12,0±1,59*
	2	6,52±0,16*	30,68±1,11*	44,5±0,29*	7,21±0,78*	10,83±1,19	46,05±4,16*	13,91±1,62*
	3	7,27±0,27*#	33,78±2,7*	45,0±0,25*#	7,1±0,95*	11,67±1,09	44,38±4,18*	15,68±1,38*
6-е	1	9,08±0,39*	39,5±1,18*	44,0±0,52*	6,01±0,24*	17,33±0,8*	29,17±3,11	7,16±0,65
	2	8,41±0,1*	34,43±2,09*	42,5±1,2	6,98±0,78*	16,0±0,45*	37,8±3,48*	8,86±0,82*
	3	8,87±0,21*#	40,45±1,27*	42,56±0,38#	7,2±0,21*#	15,33±1,84*	37,06±2,9*	7,66±0,74
7-е	1	9,49±0,27*	41,7±1,64*	44,17±0,6*	3,4±0,25*	11,17±0,54*	43,64±3,94*	8,25±0,83
	2	8,99±0,14*	37,58±1,13*	42,5±0,65	4,1±0,9*	10,5±1,73	46,79±4,44*	9,77±1,99
	3	9,38±0,26*	43,69±1,81	42,05±0,27#	4,7±0,11*#	10,33±1,28	44,88±4,36	7,98±1,33
8-е	1	9,85±0,1*&	42,95±0,81*&	43,17±0,6&	4,11±0,3*	9,0±0,93	55,14±5,03*	14,69±1,34
	2	9,97±0,22*	41,36±0,54*	41,4±0,74	5,42±1,2*	7,67±1,15	39,63±6,04	15,71±1,96*
	3	9,9±0,22*	42,65±1,37*	41,01±0,27#	5,7±0,71*	7,0±1,03	38,99±5,7	12,53±1,81*
9-е	1	10,12±0,25*	43,53±1,25*	42,0±0,26	4,86±0,51*	8,17±0,48	56,51±3,16*	15,28±1,6*
	2	11,77±0,36*#	45,8±0,27*#	41,75±0,48	5,0±1,1*	8,5±0,43	50,91±2,11*	16,31±2,35*
	3	10,16±0,1*	42,82±1,21*	41,29±0,54	5,11±0,97*	7,17±0,48	51,08±2,08*	13,35±1,2*
10-е	1	9,94±0,46*	45,5±2,63	44,17±0,48*	5,06±0,4*	8,83±0,87	30,87±4,45	9,08±0,75*
	2	10,27±0,18	46,2±1,15	43,0±0,71	6,39±0,8*	7,67±0,88	33,86±8,42	10,76±0,87*
	3	11,46±0,25#	50,88±2,27	41,29±0,71#	5,76±0,71*	7,5±1,06	40,93±6,91	11,66±0,92*
* - отмечена достоверность различий с интактным контролем при р<0,05; # - отмечена достоверность различий с показателями в группе животных без препарата (1) при р<0,05