производные n-замещенного индол-3-глиоксиламида - противоопухолевое лекарственное средство и средство, подавляющее ангиогенез (варианты), и противоопухолевое лекарственное средство (варианты)

Формула изобретения

1. Применение N-замещенных индол-3-глиоксиламидов общей формулы 1

где R означает водород, (С₁-С ₆)алкил, причем алкильная группа может содержать в качестве заместителя по меньшей мере одно фенильное кольцо, которое, в свою очередь, может иметь по меньшей мере один заместитель, выбранный из группы, содержащей галоген, (С₁-С₆)алкил и (С₃-С₇)циклоалкил, карбоксильные группы, сложные эфиры карбоксильных групп с (С₁-С₆ )алканолами, трифторметильные, гидроксильные группы, метоксигруппы, этоксигруппы, бензилоксигруппы, а также бензильные группы, содержащие по меньшей мере один заместитель в фенильном остатке, выбранный из (С₁-С₆)алкила, галогена или трифторметила;

кроме того, R означает бензилоксикарбонильную группу (Z-группа) и трет-бутоксикарбонильный остаток (Вос-группа), а также ацетильную группу;

R₁ может означать фенильное кольцо, содержащее по меньшей мере один заместитель, выбранный из группы, содержащей (С₁-С₆)алкил, (С₁ -С₆)алкокси, циано, галоген, трифторметил, гидроксил, бензилокси, нитро, амино, (С₁-С₆)алкиламино, (С₁-С₆)алкоксикарбониламино и карбоксильную группу, а также сложные эфиры карбоксильной группы с (С₁ -С₆)алканолами, или остаток пиридина формулы 2 и его N-оксид

или его N-оксид, в котором остаток пиридина по выбору связан с циклическими атомами углерода 2, 3 и 4 и может содержать заместители R₅ и R₆; остатки R₅ и R₆ могут быть одинаковыми или различными и означают (С₁-С₆)алкил, а также (С ₃-С₇)циклоалкил, (С₁-С₆ )алкокси, нитро, амино, гидрокси, галоген и трифторметил, а также этоксикарбониламиногруппу и карбоксиалкилоксигруппу, в которой алкильная группа может содержать 1-4 атома углерода;

кроме того, R₁ может означать 2- или 4-пиримидинильный гетероцикл, причем 2-пиримидинильное кольцо может быть замещено по меньшей мере одной метильной группой, а также означать остаток 2-, 3-, 4- и 8-хинолила, содержащий в качестве заместителей (С₁ -С₆)алкил, галоген, нитро, амино, (С₁-С ₆)алкиламино, причем R₁ может означать 2-, 3- и 4-хинолилметильную группу, причем циклические атомы углерода в пиримидилметильном остатке хинолилгруппы и хинолилметильные группы могут иметь такие заместители, как (С₁-С ₆)алкил, (С₁-С₆)алкокси, нитро, амино и (С₁-С₆)алкоксикарбониламино;

кроме того, в случае если R представляет собой водород, метил или бензил, а также бензилоксикарбонил (Z-группу), трет-бутоксикарбонил (Вос-группу) и ацетильную группу, то R₁ означает следующие остатки:

-CH₂COOH, -СН(СН₃)СООН, -(СН₃ )₂-СН-(СН₂)₂-СН-СОО-, Н ₃С-H₂С-CH(СН₃)-СН(СООН)-, НО-Н ₂С-СН(СООН)-, фенил-СН₂-СН(СООН)-, (4-имидазолил)-СН ₂-СН(СООН)-, HN=C(NH₂)-NH-(CH₂) ₃-CH(COOH)-, H₂N-(CH₂)₄ -CH(СООН)-, Н₂N-СО-СН₂-СН-(СООН)-, НООС-(СН ₂)₂-СН(СООН)-;

кроме того, в случае если R представляет собой водород, Z-группу, ВОС-группу и ацетильную или бензильную группу, то R₁ может означать кислотный остаток природной или неприродной аминокислоты, например, такой, как -глицил, -саркозил, -аланил, -лейцил, -изолейцил, -серил, -фенилаланил, -гистидил, -пролил, -аргинил, -лизил, -аспарагил и -глутамил, причем аминогруппы соответствующих аминокислот могут быть защищенными или незащищенными, а в качестве защитной группы аминогрупп используют бензилоксикарбонильную (Z-группу), трет-бутоксикарбонильную группу (ВОС-группу) и ацетильную группу, причем в случае использования в качестве R₁ остатков аспарагиновой и глутаминовой кислот вторая, не связанная карбоксильная группа присутствует в виде свободной карбоксильной группы или в виде сложного эфира с С₁-С₆ралканолами, такого, например, как метиловый, этиловый или трет-бутиловый эфир;

кроме того, R₁ может означать аллиламинокарбонил-2-метилпроп-1-ил;

кроме того, R и R₁ могут быть объединены с атомом азота, к которому они присоединены, с образованием пиперазинового кольца формулы 3 или гомопиперазинового кольца, если R₁ означает аминоалкиленовую группу,

в которой R₇ означает алкильную группу, фенильное кольцо, которое может содержать по меньшей мере один заместитель, выбранный из группы, содержащей (С₁-С ₆)алкил, (С₁-С₆)алкокси, галоген, нитро, амино или (С₁-С₆)алкиламино; кроме того, R₇ означает бензгидрильную группу и бис-п-фторбензилгидрильную группу;

R₂ может означать водород или (С ₁-С₆)алкил, причем алкильная группа может содержать по меньшей мере один заместитель, выбранный из галогена и фенила, в котором, в свою очередь, может присутствовать по меньшей мере один заместитель, выбранный из группы, содержащей галоген, (С ₁-С₆)алкил, (С₃-С₇)циклоалкил, карбоксильные группы, сложные эфиры карбоксильных групп с С ₁-С₆алканолами, трифторметил, гидроксил, метокси, этокси или бензилокси; кроме того, используемая в качестве R ₂ (С₁-С₆)алкильная группа может содержать заместители, такие, как 2-хинолилгруппа и остаток 2-, 3- и 4-пиридила, причем обе эти группы могут содержать по меньшей мере один заместитель, выбранный из галогена, (С₁-С₄)алкила или (С₁-С₄)алкокси; кроме того, R₂ означает ароильный остаток, причем составляющий его арильный фрагмент представляет собой фенильное кольцо, которое может содержать по меньшей мере один заместитель, выбранный из группы, содержащей галоген, (С₁-С₆)алкил, (С₃-С ₇)циклоалкил, карбоксильные группы и сложные эфиры карбоксильных групп с (С₁-С₆)алканолами, трифторметил, гидроксил, метокси, этокси или бензилоксигруппы;

R ₃ и R₄ могут быть одинаковыми или различными и означать водород, (С₁-С₆)алкил, (С ₃-С₇)циклоалкил, (С₁-С₆ )алканоил, (С₁-С₆)алкокси, галоген и бензилоксигруппу; кроме того, R₃ и R₄ могут означать нитро, амино, аминогруппу, содержащую моно- или ди-(С₁-С ₄)алкильные заместители, (С₁-С₆)алкоксикарбониламино или (С₁-С₆)алкоксикарбониламино-(С ₁-С₆)алкильную группу, a Z означает О или S,

в качестве противоопухолевого лекарственного средства для лечения опухолей, и/или в качестве средства, подавляющего ангиогенез.

2. Применение по п.1 в условиях возникновения лекарственной устойчивости или при метастазирующей карциноме.

3. Применение N-замещенных индол-3-глиоксиламидов общей формулы 1а

где R означает водород,

R₁ означает 4-пиридил, 4-фторфенил,

R₂ означает бензил, 4-хлорбензил, 4-фторбензил, 3-пиридилметил, 4-бромбензил,

R₃ и R₄ означают водород и

Z означает кислород,

для лечения опухолей и/или в качестве средства, подавляющего ангиогенез.

4. Применение по п.3 в условиях возникновения лекарственной устойчивости или при метастазирующей карциноме.

5. Применение N-замещенных индол-3-глиоксиламидов общей формулы 1 или 1а и их физиологически приемлемых кислотно-аддитивных солей, выбранных из группы следующих соединений или их солей с физиологически приемлемыми кислотами или их N-оксидов:

D-24241 N-(пиридин-4-ил)[1-(4-фторбензил)индол-3-ил]глиоксиламид,

D-24843 N-(пиридин-4-ил)(1-бензилиндол-3-ил)глиоксиламид,

D-24850 N-(4-фторфенил)[1-(3-пиридилметил)индол-3-ил]глиоксиламид,

D-24851 N-(пиридин-4-ил)[1-(4-хлорбензил)индол-3-ил]глиоксиламид,

D-25505 N-(пиридин-4-ил)[1-(4-фторбензил)индол-3-ил]глиоксиламид HCl,

в качестве противоопухолевых лекарственных средств, а также в качестве средства, подавляющего ангиогенез.

6. Применение по п.5 в условиях возникновения лекарственной устойчивости и при метастазирующих карциномах.

7. Противоопухолевое лекарственное средство для лечения опухолей, отличающееся тем, что оно содержит в качестве активного агента D 24241

N-(пиридин-4-ил)[1-(4-фторбензил)индол-3-ил]глиоксиламид или его гидрохлорид.

8. Противоопухолевое лекарственное средство для лечения опухолей, отличающееся тем, что оно содержит в качестве активного агента D 24843

N-(пиридин-4-ил)(1-бензилиндол-3-ил)глиоксиламид.

9. Противоопухолевое лекарственное средство для лечения опухолей, отличающееся тем, что оно содержит в качестве активного агента D 24850

N-(4-фторфенил)[1-(3-пиридилметил)индол-3-ил]глиоксиламид.

10. Противоопухолевое лекарственное средство для лечения опухолей, отличающееся тем, что оно содержит в качестве активного агента D 24851

N-(пиридин-4-ил)[1-(4-хлорбензил)индол-3-ил]глиоксиламид.

11. Применение N-замещенных индол-3-глиоксиламидов общей формулы 1 или 1а и их физиологически приемлемых кислотно-аддитивных солей, выбранных из группы следующих соединений или их солей с физиологически переносимыми кислотами и их N-оксидов:

D-24241 N-(пиридин-4-ил)[1-(4-фторбензил)индол-3-ил]глиоксиламид,

D-24843 N-(пиридин-4-ил)(1-бензилиндол-3-ил)глиоксиламид,

D-24850 N-(4-фторфенил)[1-(3-пиридилметил)индол-3-ил]глиоксиламид,

D-24851 N-(пиридин-4-ил)[1-(4-хлорбензил)индол-3-ил]глиоксиламид,

D-25505 N-(пиридин-4-ил)[1-(4-фторбензил)индол-3-ил]глиоксиламид HCl,

в качестве средства, подавляющего ангиогенез.

12. Применение N-замещенных индол-3-глиоксиламидов общей формулы 1 или 1а и их физиологически приемлемых кислотно-аддитивных солей, выбранных из группы следующих соединений:

D-24241 N-(пиридин-4-ил)[1-(4-фторбензил)индол-3-ил]глиоксиламид,

D-24843 N-(пиридин-4-ил)(1-бензилиндол-3-ил)глиоксиламид,

D-24850 N-(4-фторфенил)[1-(3-пиридилметил)индол-3-ил]глиоксиламид,

D-24851 N-(пиридин-4-ил)[1-(4-хлорбензил)индол-3-ил]глиоксиламид,

D-25505 N-(пиридин-4-ил)[1-(4-фторбензил)индол-3-ил]глиоксиламид HCl,

в качестве противоопухолевого средства при лекарственной устойчивости.

13. Применение по п.12, отличающееся тем, что осуществляется для замены уже не обладающего активностью противоопухолевого средства по причине возникновения лекарственной устойчивости.

Описание изобретения к патенту

Область техники, к которой относится изобретение

Изобретение относится к фармацевтической химии, в частности к дальнейшей разработке противоопухолевых лекарственных средств на основе N-замещенных индол-3-глиоксиламидов.

Уровень техники

При химиотерапии онкологических заболеваний возникают большие проблемы, во-первых, из-за появления устойчивости к лекарственному средству и, во-вторых, из-за тяжелых побочных действий этого лекарственного средства.

Известно, что многие первичные опухоли при достижении определенных размеров рано проявляют склонность к метастазированию по кровеносным и лимфатическим сосудам. Непрерывный процесс инвазии опухоли и образование метастаз является наиболее частой причиной смерти онкологических больных.

Для объяснения этого распространения существуют различные факторы, в том числе усиленный ангиогенез, повышенное разрушение межклеточного матрикса, миграция опухолевых клеток и модуляция клеточной адгезии. Эти факторы могут действовать совместно, но до настоящего времени объяснены лишь частично.

Метастазирование опухоли в большинстве случаев сопровождается неблагоприятными прогнозами лечения. Предпосылкой метастазирования является отделение клеток от первичной опухоли, перемещение клеток по направлению к кровеносным сосудам, инвазия в кровеносные сосуды и инвазия клеток из кровеносных сосудов в другие ткани.

Для определенных противоопухолевых средств, таких как тамоксоифен, известно подавляющее действие в отношении миграции и инвазии опухолевых клеток (см. в статье J. Clin. Endocrinol. Metab., (1995), янв. 80(1):308-313).

Описано подавление инвазии опухолевых клеток верапамилом (см. статью Pigment Cell Res., (1991), дек. 4(5-6):225-233).

Описано влияние мелантонина на инвазивные и метастатические свойства клеток рака груди человека MCF-7 (см. статью Cancer res., (1998), 1 окт. 58(19):4383-4390).

В опубликованной заявке РСТ WO 96/23506 сообщается о возможности преодоления лекарственной устойчивости к определенным противоопухолевым лекарственным средствам вследствие вызванной этими препаратами амплификации генов множественной лекарственной устойчивости (ген MDR). Кроме того, противоопухолевые средства, такие как винкристин и таксол, проявляют значительную нейротоксичность, что является недостатком при химиотерапии.

Целью настоящего изобретения является расширение области применения N-замещенных индол-3-глиоксиламидов с одновременным увеличением их терапевтической ценности.

В связи с этим, должна быть описана возможность использования меньшей дозы, более длительного действия и лучшей переносимости лекарственного средства для класса веществ противоопухолевого действия, описанного в заявке на выдачу патента Германии 19814838.0. Прежде всего, должен быть устранен такой недостаток, как развитие лекарственной устойчивости, который известен для многих противоопухолевых средств.

Кроме того, должно быть предотвращено распространение опухолей через метастазы.

Поскольку, согласно новейшим исследованиям, опухолевый рост и развитие метастаз очевидно связаны с ангиогенезом, то свойство подавлять ангиогенез представляет дополнительное преимущество, благоприятное при действии лекарственных средств, например, при терапии рака.

Вызванное N-замещенными индол-3-глиоксиламидами усиление действия должно приводить к более эффективному использованию лекарственных средств в терапии опухолей. Более того, следует сократить время лечения и расширить область применения лекарственного средства для лечения заболеваний, устойчивых к медикаментозному воздействию. Кроме того, следует сократить или исключить возникновение рецидивов и метастаз, а также повысить продолжительность жизни пациентов.

Цель изобретения заключается в разработке лекарственных средств, способных активно влиять на процесс метастазирования.

Неожиданно было обнаружено, что N-замещенные индол-3-глиоксиламиды, описанные в заявке на выдачу патента Германии 19814838.0, соответствующие нижеприведенной общей формуле 1 и предназначенные для лечения опухолевых заболеваний, обладают дополнительными полезными свойствами, которые могут расширить область их применения.

Сущность изобретения

Объектом изобретения является применение N-замещенных индол-3-глиоксиламидов общей формулы 1 (или 1а) для лечения опухолей, в особенности в случае возникновения лекарственной устойчивости и метастазирования карцином, и для подавления образования метастаз, а также в качестве средства, подавляющего ангиогенез

где R, R₁, R₂, R₃ , R₄ и Z имеют следующие значения:

R означает водород, (С₁-С₆)алкил, причем алкильная группа может содержать в качестве заместителя по меньшей мере одно фенильное кольцо, которое, в свою очередь, может иметь по меньшей мере один заместитель, выбранный из группы, содержащей галоген, (C₁-C₆)алкил и (С₃-С ₇)циклоалкил, карбоксильные группы, сложные эфиры карбоксильных групп с (С₁-С₆)алканолами, трифторметильные и гидроксильные группы, метоксигруппы, этоксигруппы, бензилоксигруппы, а также бензильные группы, содержащие по меньшей мере один заместитель в фенильном кольце, выбранный из (С₁-С₆ )алкила, галогена или трифторметила.

Кроме того, R означает бензилоксикарбонильную группу (Z-группу) и трет-бутоксикарбонильный остаток (Вос-группу), а также ацетильную группу.

R ₁ может означать фенильное кольцо, содержащее по меньшей мере один заместитель, выбранный из группы, содержащей (С ₁-С₆)алкил, (С₁-С₆)алкоксил, циано, галоген, трифторметил, гидрокси, бензилокси, нитро, амино, (С₁-С₆)алкиламино, (С₁-С ₆)алкоксикарбониламино и карбоксильную группу, а также сложные эфиры карбоксильной группы с (С₁-С₆ )алканолами, или остаток пиридина формулы 2 и его N-оксид

а также его N-оксид, в котором остаток пиридина по выбору связан с циклическими атомами углерода 2, 3, и 4 и содержит заместители R₅ и R₆. Остатки R ₅ и R₆ могут быть одинаковыми или различными и означают (С₁-С₆)алкил, а также (С ₃-С₇)циклоалкил, (С₁-С₆ )алкокси, нитро, амино, гидрокси, галоген и трифторметил, а также этоксикарбониламиногруппу и карбоксиалкилоксигруппу, в которой алкильная группа может содержать 1-4 атома углерода.

Кроме того, R₁ может означать 2- или 4-пиримидинильный гетероцикл, причем 2-пиримидинильное кольцо может содержать одну или много метильных групп в качестве заместителей, а также означать остаток 2-, 3-, 4-и 8-хинолила, содержащий в качестве заместителей (С ₁-С₆)алкил, галоген, нитро, амино, (С₁ -С₆)алкиламино, причем R₁ может означать 2-, 3- и 4-хинолилметильную группу, причем циклические атомы углерода в пиримидилметильном остатке хинолильной группы и хинолилметильные группы могут иметь следующие заместители: (С₁-С ₆)алкил, (С₁-С₆)алкокси, нитро, амино и (С₁-С₆)алкоксикарбониламино.

Кроме того, в случае, если R представляет собой водород, метил или бензил, а также бензилоксикарбонил (Z-группу), трет-бутоксикарбонил (Вос-группу) и ацетильную группу, то R₁ означает следующие остатки: -СН₂СООН, -СН(СН₃)СООН, -(CH ₃)₂-CH-(CH₂)₂-CH-COO-, Н₃С-Н₂С-СН(СН₃)-, СН(СООН)-, НО-Н₂С-СН(СООН)-, фенил-СН₂-СН(СООН)-, (4-имидазолил)-СН₂-СН(СООН)-, HN=C(NH₂)-NH-(CH ₂)₃-CH(COOH)-,

H₂N-(CH ₂)₄-CH(COOH)-, Н₂N-СО-СН₂ -СН-(СООН)-, НООС-(СН₂)₂-СН(СООН)-.

Кроме того, в случае, если R представляет собой водород, Z-группу, ВОС-группу и ацетильную или бензильную группу, то R₁ может означать кислотный остаток природной или неприродной аминокислоты, например такой как -глицил, -саркозил, -аланил, -лейцил, -изолейцил, -серил, -фенилаланил, -гистидил, -пролил, -аргинил, -лизил, -аспарагил и -глутамил, причем аминогруппы соответствующих аминокислот могут быть защищенными или незащищенными. В качестве защитной группы аминогрупп используют бензилоксикарбонильную группу (Z-группу) и трет-бутоксикарбонильную группу (ВОС-группу), а также упомянутую ацетильную группу. В случае использования в качестве R₁ остатков аспарагиновой и глутаминовой кислот, вторая, не связанная карбоксильная группа присутствует в форме свободной карбоксильной группы или в форме сложного эфира с С₁-С₆ алканолами, такого, например, как метиловый, этиловый или трет-бутиловый эфир.

Кроме того, R₁ может означать аллиламинокарбонил-2-метил-проп-1-ил-группу.

Кроме того, R и R₁ могут быть объединены с атомом азота, к которому они присоединены, с образованием пиперазинового кольца формулы 3 или гомопиперазинового кольца, если R₁ означает аминоалкиленовую группу, в которой

R₇ означает алкильную группу, фенильное кольцо, которое может содержать по меньшей мере один заместитель, выбранный из группы, содержащей (С₁-С₆)алкил, (С₁-С₆)алкокси, галоген, нитро, амино и (С₁-С₆)алкиламино. Кроме того, R₇ означает бензгидрильную группу и бис-п-фторбензилгидрильную группу.

R₂ может означать водород и (С₁ -С₆)алкил, причем алкильная группа может содержать по меньшей мере один заместитель, выбранный из галогена и фенила, в котором, в свою очередь, может присутствовать по меньшей мере один заместитель, выбранный из группы, содержащей галоген, (С ₁-С₆)алкил, (С₃-С₇)циклоалкил, карбоксильные группы, сложные эфиры карбоксильных групп с С ₁-С₆ алканолами, трифторметил, гидроксил, метокси, этокси или бензилокси. Кроме того, используемая в качестве R ₂ (С₁-С₆)алкильная группа может содержать заместители, такие как 2-хинолилгруппа и остаток 2-, 3- и 4-пиридила, причем обе эти группы могут содержать по меньшей мере один заместитель, выбранный из галогена, (С₁-С₄)алкила или (С₁-С₄)алкокси. Кроме того, R₂ означает ароильный остаток, причем арильный фрагмент представляет собой фенильное кольцо, которое может содержать по меньшей мере один заместитель, выбранный из группы, содержащей галоген, (С ₁-С₆)алкил, (С₃-С₇)иклоалкил, карбоксильные группы и сложные эфиры карбоксильных групп с (С ₁-С₆)алканолами, трифторметил, гидроксил, метокси, этокси или бензилоксигруппы.

R₃ и R₄ могут быть одинаковыми или различными и означать водород, (С ₁-С₆)алкил, (С₃-С₇)циклоалкил, (С₁-С₆)алканоил, (С₁-С₆ )алкокси, галоген и бензилоксигруппу. Кроме того, R₃ и R₄ могут означать нитро, амино, аминогруппу, содержащую моно- или ди-(С₁-С₄)алкил, (С₁ -С₆)алкоксикарбониламино или (С₁-С ₆)алкоксикарбониламино-(С₁-С₆)алкильную группу;

Z означает О и S.

Термины "алкил, алканол, алкокси или алкиламиногруппа" для остатков R, R₁ , R₂, R₃, R₄, R₅, R₆, R₇ означают линейные и разветвленные алкильные группы, причем термин "линейные алкильные группы" может означать, например, остатки, такие как метил, этил, н-пропил, н-бутил, н-пентил, н-гексил, а термин "разветвленные алкильные группы" - остатки, такие как, например, изопропил или трет-бутил. Термин "циклоалкил" означает остатки, такие как, например, циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил или циклогептил.

Термин "галоген" означает фтор, хлор, бром или йод. Термин "алкоксигруппа" означает остатки, такие как метокси, этокси, пропокси, бутокси, изопропокси, изобутокси или пентокси.

Соединения могут быть также введены в виде кислотно-аддитивных солей, например солей с неорганическими кислотами, такими как, например, соляная кислота, серная кислота, фосфорная кислота, солей с органическими кислотами, например такими как уксусная кислота, молочная кислота, малоновая кислота, малеиновая кислота, фумаровая кислота, глюконовая кислота, глюкуроновая кислота, лимонная кислота, эмбоновая кислота, метансульфоновая кислота, трифторуксусная кислота, янтарная кислота и 2-гидроксиэтансульфоновая кислота.

Соединения формулы 1, а также их соли обладают биологической активностью. Соединения формулы 1 можно вводить в свободной форме или в виде солей с физиологически приемлемыми кислотами.

Соединения могут быть введены пероральным, парентеральным, внутрибрюшинным, внутривенным, чрескожным способами или в виде ингаляций.

Кроме того, изобретение относится к фармацевтическим композициям, содержащим по крайней мере одно соединение формулы 1 или его соль с физиологически приемлемыми неорганическими или органическими кислотами и соответствующими фармацевтически приемлемыми носителями и/или разбавителями или вспомогательными веществами.

Соединения могут быть введены в форме, например, таблеток, драже, капсул, растворов для вливания или ампул, суппозиториев, пластырей, порошков для ингаляции, суспензий, кремов и мазей.

В качестве способов синтеза соединений могут быть использованы способы, описанные в патенте Германии DE 19636150 А1.

Перечень чертежей и иных материалов

Фиг.1 представляет цитотоксическое действие соединения D-24851 по отношению к клеточной сублинии лейкемии мыши L 1210/VCR с множественной лекарственной устойчивостью MDR. Соединение D-24851, в отличие от таксола, доксорубицина, винкристина или эпотолона В, проявляет постоянную цитотоксическую активность в отношении клеточной сублинии L 1210/VCR лейкоза мыши с множественной лекарственной устойчивостью, как в отношении нормальной линии L 1210.

Фиг.2 представляет действие соединения D-24851 на опухоль с множественной лекарственной устойчивостью.

Фиг.3 представляет действие соединения D-24851 на клеточную линию лейкоза мышей L 1210 с MDR.

Фиг.4 представляет цитотоксическую активность D-24851, таксола, доксорубицина, винкристина в отношении клеточных линий лейкоза человека.

Фиг.5 представляет доза-зависимое подавление соединением D-24851 миграции клеток МO4, из которого следует антиинвазивное и антиметастатическое действие соединения D-24851.

Фиг.6 иллюстрирует нейротоксичность соединения D-24851, которое, в отличие от таксола и винкристина, не проявляет нейротоксичность при максимальных противоопухолевых дозах.

Фиг.7 представляет влияние соединения D-24851 на скорость проведения нервного импульса (NCV) у крысы.

Фиг.8 и 9 иллюстрируют ангиогенез в культуре эндотелиальных клеток человека.

Сведения, подтверждающие возможность осуществления изобретения

Показано, что полезные терапевтически свойства относятся к следующим преимуществам:

- Не наблюдается развития лекарственной устойчивости.

- Определены параметры, характерные для подавления образования метастаз (миграции).

- Определены параметры, подтверждающие подавление неоваскуляризации (образования новых сосудов, ангиогенез).

- В различных моделях показано, что N-замещенные индол-3-глиоксиламиды общей формулы 1а, в отличие от большинства противоопухолевых лекарственных средств, характеризуются отсутствием нейротоксичности.

Для подтверждения отсутствия развития лекарственной устойчивости используют следующие фармакологические модели или клеточные культуры:

1. Наблюдается устойчивая цитотоксическая активность соединения D-24851 по отношению к клеточным линиям лейкемии мыши L 1210/VCR с множественной лекарственной устойчивостью MDR в опытах in vivo и in vitro. См. Фиг.1, 2 и 3.

Соединение D-24851 в отличие от таксола, доксирубицина, винкристина или эпотолона В, проявляет постоянную цитотоксическую активность в отношении клеточной сублинии L 1210/VCR лейкоза мыши с множественной лекарственной устойчивостью.

Методика проведения исследований:

Клеточные линии лейкоза мыши L 1210/VCR адаптируют к винкристину. Неадаптированные (L 1210) и адаптированные (L 1210/VCR) клетки подвергают действию цитостатиков и измеряют рост клеток, определяемый по метаболической активности (анализ ХТТ). Кривые, построенные по данным анализа ХТТ, рассчитывают с помощью программы нелинейной регрессии. Данные исследований подтверждены также in vitro с использованием устойчивой клеточной линии человека LT12/MDR, см. Фиг.4.

2. Доказательство отсутствия метастазирования получают в виде данных по подавлению миграции клеток МO4, см. Фиг.5.

Соединение D-24851 характеризуется дозозависимым подавлением миграции клеток МO4, что позволяет сделать вывод о том, что соединение D-24851 обладает антиинвазивным и антиметастатическим действием.

Способность к миграции клеток М04 можно определить in vitro, при этом клетки высевают в центр чашки Петри и через различное количество дней измеряют радиус перемещения или площадь, покрытую клетками, в присутствии и в отсутствие соединения D-24851. На Фиг.4 показано, что при повышении концентрации соединения D-24851 снижается миграция клеток.

Для определения антиинвазивной активности соединения D-24851 исследуют инвазию клеток фибросаркомы МO4 в сердечной ткани цыплят. В этом случае также показано, что инвазия полностью прекращается при концентрации соединения, равной 260 и 1000 нМ, в то время как при более низких концентрациях способность к инвазии клеток МO4 возрастает. На основании этих данных становится очевидным, что соединение D-24851 подавляет как миграцию, так и инвазию опухолевых клеток, и вследствие этого обладает чрезвычайно высоким антиметастазирующим действием.

3. На основании сравнительных экспериментов с использованием соединения D-24851 по изобретению на крысах, у которых оценивают атаксию, мышечную тягу, реакцию на сигнал (см. Фиг.6), показано, что указанное соединение, в отличие от таксола и винкристина, не обладает нейротоксическим действием.

Кроме того, соединение D-24851, в отличие от таксола и винкристина, не оказывает отрицательного воздействия на скорость проведения нервного импульса, см. Фиг.7.

Эти данные подтверждают вывод о том, что по причине отсутствия нейротоксичности соединение D-24851 обладает значительно меньшим побочным действием по сравнению с другими химиотерапевтическими препаратами.

4. На основании других исследований, согласно Фиг.8 и 9, показано, что соединение D-24851 обладает свойствами ингибитора ангиогенеза.

Соединения, подавляющие ангиогенез из-за физиологической взаимосвязи с ростом опухоли, одновременно являются средствами, подавляющими рост опухоли, так как при этом подавляется образование кровеносных сосудов, питающих опухоль.

Как показано в модели ангиогенеза на эндотелиальных клетках in vitro, соединение D-24851 вызывает полное подавление сосудообразования, не связанное с цитотоксическим действием.

На Фиг.8 показано, что соединение D-24851 при концентрации 0,1 мкмоль/л почти полностью разрушает межклеточные контакты (см. окрашивание живых клеток). В норме клетки находятся по крайней мере в частичном контакте. Миграция клеток заметно снижена, многие клетки принимают округлую форму.

Окрашивание погибших клеток в монослое перед индукцией ангиогенеза в присутствии соединения D-24851 не свидетельствует о повышении гибели клеток. В первые 22 часа после индукции по сравнению с контролем также не наблюдается заметного увеличения гибели клеток (см. Окрашивание погибших клеток на Фиг.9, белые точки).

Клетки выделяют из пупочной вены человека (артериальная функция). Для исследования их проводят через третий и четвертый пассаж. Ангиогенез вызывают природным стимулятором. Первичным стимулятором эндотелиальной миграции является белок, экспрессия которого значительно возрастает в васкуализирующейся ткани. Соединение добавляют в культуральную среду непосредственно перед индукцией ангиогенеза.

Концентрация соединения D-24851, вызывающая подавление ангиогенеза, значительно ниже, чем концентрация, необходимая для проявления цитотоксической активности. В связи с этим, можно разделить эти типы активности (цитотоксическое действие и способность подавлять ангиогенез).

Следует отметить, без ограничения объема притязаний настоящего изобретения, что можно использовать пероральные дозировки от приблизительно 20 до 500 мг в день.

При внутривенном введении в виде инъекций или в виде вливаний можно вводить до 250 мг в день или более в зависимости от веса тела и индивидуальной переносимости пациента.

В результате отсутствия развития лекарственной устойчивости и подавления метастазирования следует ожидать высокой эффективности и широкой области применения лекарственного средства для лечения пациентов с рефракторными (не поддающимися лечению) опухолями.

Эффект подавления ангиогенеза может быть использован для дополнительного ограничения распространения опухолей.

Кроме того, изобретение относится также к использованию N-замещенных индол-3-глиоксиламидов общей формулы 1а для лечения других заболеваний, для которых требуется функциональное подавление ангиогенеза (например, при ранозаживлении).

Кроме того, объектом изобретения является также фиксированная или произвольная комбинация N-замещенных индол-3-глиоксиламидов общей формулы 1а с известными противоопухолевыми средствами, а также замена протовоопухолевых средств, являющихся неэффективными вследствие развития лекарственной устойчивости, на N-замещенные индол-3-глиоксиламиды общей формулы 1а.