способ получения водных экстрактов из растений и сами эти экстракты

Формула изобретения

1. Способ получения водного экстракта из растений, который полезен при лечении иммуносупрессивных состояний или при лечении вирусных заболеваний, включающий следующие стадии: a) удаление загрязнений из растения; b) измельчение растения; c) обработка измельченного растения лазерным излучением; d) суспендирование смеси, полученной на стадии с, в воде; e) мацерация суспензии, полученной на стадии d; f) отделение образовавшейся жидкости.

2. Способ по п.1, в котором используется одно или несколько растений одного или разных видов, принадлежащих к следующим семействам: Asteraceae, Rosaceae, Crucifrae, Labiatac, Equisetaceae, Saxifraganccac, Compositae, Araliaceae и Umbeliferae.

3. Способ по любому из предыдущих пунктов, в котором используется какая-либо часть или части растения, такие как стебли, листья или цветки.

4. Способ по п.1 или 2, в котором удаление загрязнений осуществляется с помощью воды, предпочтительно, в тоннельной мойке.

5. Способ по п.1 или 2, в котором измельчение осуществляется вручную или с помощью измельчителя.

6. Способ по п.1 или 2, в котором обработка лазерным излучением осуществляется с помощью красного линейного диодного лазера, способного к генерации излучения в диапазоне длин волн 150 - 810 нм, мощностью 1 - 60 В и диаметром луча 1 - 6 мм.

7. Способ по п.6, в котором длина волны находится в пределах 200 - 400 нм, предпочтительно 250 нм, мощность составляет 20 В и диаметр луча равен 4 мм.

8. Способ по пп.1, 2 или 7, в котором каждый 1 кг измельченной массы подвергается облучению лазером в течение 3 - 10 мин, предпочтительно в течение 5 мин.

9. Способ по пп.1, 2 или 7, в котором суспендирование осуществляют так, что на 1 л воды приходится 50 - 300, предпочтительно 100 - 250 г обработанной лазером массы.

10. Способ по пп.1, 2 или 7, в котором суспензию выдерживают в течение 5 - 20 дней, предпочтительно 7 - 15 дней, при температуре 2 - 10°С, предпочтительно 4 - 8°С, при этом происходит мацерация смеси.

11. Способ по пп.1, 2 или 7, в котором отделение жидкой фазы от твердой фазы осуществляют путем декантации с последующим фильтрованием, состоящим из 3 последовательных пресс-фильтраций с помощью фильтров на 5 мкм, 1 мкм и 0,22 мкм.

12. Способ по пп.1, 2 или 7, в котором используют однодольные или двудольные растения.

13. Способ по пп.1, 2 или 7, в котором растение выбрано из следующих видов: Mentha saliva, Pimpiriella anisum, Eleutherococcus senticosus, Equinacea angustifolia, Symphytum officinalis, Equisetum arvense, Calendula officinalis, Agrimonia eupatoria, Lepidium latifolium и Lamium album.

14. Способ по пп.1, 2 или 7, в котором растение представляет собой Calendula officinalis.

15. Способ по п.14, который применяется к цветкам Calendula officinalis.

16. Способ по пп.1, 2 или 7, в котором используется смесь Agrimonia eupatoria, Lepidium latifolium и Lamium album.

17. Способ по п.16, в котором используются листья Agrimonia eupatoria, Lepidium latifolium и Lamium album.

18. Водный экстракт, обладающий иммуностимулирующей активностью и полезный при лечении гепатита С, получаемый любым из способов, определенных в пп.1-17.

19. Водный экстракт по п.18, отличающийся тем, что он находится в лиофилизированной форме.

20. Водный экстракт по п.18, отличающийся тем, что он получаем любым из способов, определенных в пп.15 и 16.

21. Водный экстракт по п.20, отличающийся тем, что он находится в лиофилизированной форме.

22. Водный экстракт по п.18, отличающийся тем, что он получаем любым из способов, определенных в пп.16 и 17.

23. Водный экстракт по п.22, отличающийся тем, что он находится в лиофилизированной форме.

24. Водный экстракт по любому из пп.18-23 для применения в качестве лекарственного средства, полезного при лечении иммуносупрессивных состояний или при лечении вирусных заболеваний.

25. Водный экстракт по любому из пп.20 и 21 для применения при лечении иммуносупрессивных состояний.

26. Водный экстракт по любому из пп.20 и 21 для применения при лечении рака, туберкулеза, гриппа, простуды, аллергии, красной волчанки, псориаза и СПИД.

27. Водный экстракт по любому из пп.20 и 21 для применения при лечении карциномы печени, рака легких, рака почек, рака толстой кишки, рака молочной железы, рака или аденокарциномы простаты, опухолей мозга, таких, как астроцитома и глиобластома, рака шейки матки и рака мочевого пузыря.

28. Водный экстракт по любому из пп.23 и 24 для применения при лечении вирусных заболеваний.

29. Водный экстракт по любому из пп.22 и 23 для применения в качестве стимуляторов регенерации гепатоцитов.

30. Водный экстракт по любому из пп.22 и 23 для применения при лечении патологий, связанных с высоким уровнем трансаминаз и билирубина.

31. Водный экстракт по любому из пп.22 и 23 для применения при лечении гепатита А,В, С, D и Е, цирроза печени и карциномы печени.

32. Применение водного экстракта по пп.18-23 в качестве иммуностимулятора.

33. Применение по п.32, отличающееся тем, что для изготовления медикамента, полезного при лечении иммуносупрессивных заболеваний, применяют водный экстракт по пп.20-23.

34. Применение по п.33 для изготовления медикамента, полезного при лечении рака, туберкулеза, гриппа, простуды, аллергии, красной волчанки, псориаза и СПИД.

35. Применение по п.34 для изготовления медикамента, полезного при лечении карциномы печени, рака легких, рака почек, рака толстой кишки, рака молочной железы, рака или аденокарциномы простаты, опухолей мозга, таких, как астроцитома и глиобластома, рака шейки матки и рака мочевого пузыря.

36. Применение по п.32, отличающееся тем, что для изготовления медикамента, полезного при лечения вирусных заболеваний, применяют водный экстракт по пп.22 и 23.

37. Применение по п.36 при лечении гепатита А, В, С, D и Е.

38. Применение по п.32, отличающееся тем, что для изготовления медикамента, полезного при лечении патологий, связанных с высоким уровнем трансаминаз и билирубина, применяют водный экстракт по пп.22 и 23.

39. Применение по п.38 при лечении цирроза печени и карциномы печени.

40. Применение по п.32, отличающееся тем, что для изготовления медикамента для применения в стимуляции регенерации гепатоцитов применяют водный экстракт по пп.22 и 23.

41. Фармацевтический препарат, полезный при лечении иммуносупрессивных состояний или при лечении вирусных заболеваний, включающий водный экстракт по пп.18-23.

42. Фармацевтический препарат по п.41, дополнительно включающий фармацевтически приемлемый носитель.

43. Фармацевтический препарат по пп.41 и 42, дополнительно включающий, по меньшей мере, еще одно фармацевтически активное соединение.

Описание изобретения к патенту

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение касается способа получения водных экстрактов из растений и самих водных экстрактов, полученных этим способом, причем некоторые из них находят применение в медицине, в частности при лечении иммуносупрессивных заболеваний или при лечении вирусных заболеваний.

Уровень техники

Растения и растительные организмы вообще все еще служат важным источником активных композиций и соединений, применяемых в медицине. Новые растения, новые соединения из растений или даже модификации соединений, находящихся в растениях, представляют возможный интерес для фитохимической промышленности.

Способы, применяемые при экстракции компонентов из растительных организмов и растений, имеют большое значение не только с точки зрения выхода получаемых соединений, но и химической природы тех соединений, которые реально могут быть получены.

Обычные способы, применяемые в фитохимической промышленности, основаны на экстракции из измельченных растений или растительных организмов водой или паром, органическим растворителем или смесью воды и органических растворителей, таких как вода и спирты. Включение стадии мацерации также хорошо известно в данной области. Наконец, отделение водного экстракта от твердой фазы осуществляется обычными способами, такими как декантация, центрифугирование или фильтрация. Также могут применяться дополнительные химические обработки для модификации структуры соединений, находящихся в растениях. Дополнительную информацию по этой теме можно найти в: Dr. Pio Font Quer, "Medicinal Plants. The updated Discorides" Ed. Labor, S.A., 12 ^th Edition, 1990.

Французский патент FR 2733419 описывает получение экстрактов из смеси, по меньшей мере, трех различных растений, выбранных из родов Geranium, Plantago и Calendula, путем вымачивания 300-400 г свежих листьев Geranium robertanium, 10-50 г сухих листьев Plantago lanceolata и 10-50 г сухих листьев Calendula officinalis в 3 л воды при 15-30°С в течение 3-15 дней. Согласно FR 2733419 полученная таким способом композиция находит применение при лечении раковых заболеваний. Однако активность этих экстрактов оказалась неудовлетворительной, как видно из приведенных ниже примеров.

Европейская патентная заявка ЕР 0 934 746 А раскрывает способ получения водного экстракта из растений родов Geranium и Plantago, а также из вида Calendula officinalis, в котором данные экстракты получают из следующих количеств указанных растений в воде: 10-60 г сухого Geranium sibiricum или 300-360 г свежего Geranium sibiricum, 10-60 г сухого Plantago lanceolata и 10-60 г сухого Calendula officinalis в 300 г воды. Способ получения данных водных экстрактов включает вымачивание измельченных растений в воде перед пресс-фильтрацией смеси и последующим центрифугированием. Согласно ЕР 0 934 746 А этот экстракт может применяться в онкологической практике как составная часть программы терапии рака. Однако активность этих экстрактов оказалась неудовлетворительной, как видно из приведенных ниже примеров.

Таким образом, в этой области существует потребность в способах получения альтернативных экстрактов из растений, которые могут применяться в качестве лекарственных средств и в конечном счете могут обеспечить доступ к новым соединениям.

Сущность изобретения

Настоящее изобретение предусматривает способ получения водных экстрактов из растительных организмов, в частности из растений, а также композиции, получаемые этим способом, причем некоторые из них находят применение в медицине, в частности при лечении иммуносупрессивных заболеваний, таких как рак, туберкулез, грипп, простуда, аллергия, красная волчанка, псориаз и СПИД, либо при лечении вирусных заболеваний, таких как гепатит.

Один из аспектов изобретения касается способа получения водных экстрактов из растительных организмов, в частности из растений, который состоит из следующих стадий:

a) удаление загрязнений из растения;

b) измельчение растения;

c) обработка измельченного растения лазерным излучением;

d) суспендирование смеси, полученной на стадии с, в воде;

e) мацерация суспензии, полученной на стадии d;

f) отделение образовавшейся жидкости.

Второй аспект изобретения касается композиций или водных экстрактов (гидролятов), полученных данным способом.

Следующий аспект изобретения касается применения данной композиции в качестве лекарственного средства при лечении иммуносупрессивных заболеваний, таких как рак, туберкулез, грипп, простуда, аллергия, красная волчанка, псориаз и СПИД, или при лечении вирусных заболеваний, таких как гепатит.

Следующий аспект изобретения касается фармацевтических композиций, включающих водные экстракты, полученные способом настоящего изобретения.

Способ по изобретению отличается от способов, описанных ранее в данной области, тем, что измельченные растения подвергают облучению лазером.

Как будет показано на нижеследующих примерах, обработка измельченных растений лазерным излучением приводит либо к появлению новых активностей, либо к неожиданно высокому увеличению активностей экстрактов. Следовательно, полученные при этом экстракты обязательно должны отличаться от экстрактов, получаемых способами, не предусматривающими лазерного облучения.

Подробное раскрытие изобретения

Как указано выше, первый аспект изобретения касается способа получения водных экстрактов из растительных организмов, в частности из растений, который включает стадии:

a) удаление загрязнений из растения;

b) измельчение растения;

c) обработка измельченного растения лазерньм излучением;

d) суспендирование смеси, полученной на стадии с, в воде;

e) мацерация суспензии, полученной на стадии d;

f) отделение образовавшейся жидкости.

Под термином "растение" подразумевается одно или несколько растений одного вида, или несколько растений разных видов, или какая-либо часть или части растения, такие как стебли, листья, цветки и т.д.

Удаление загрязнений (стадия а) осуществляется промыванием растений водой. Количество воды на этой стадии не имеет решающего значения: оно может варьировать в зависимости от степени загрязненности растений. Температура воды должна быть между 10 и 40°С, предпочтительно от 20 до 35°С, наиболее предпочтительно 28°С, хотя не исключаются и более высокие или более низкие температуры. Для ускорения этой стадии может применяться тоннельная мойка. И количество воды, и время нахождения растений в тоннельной мойке не имеют решающего значения, поэтому они могут варьировать в зависимости от степени загрязненности растений. Стадию мойки можно повторять несколько раз, просушивая растения перед очередной мойкой. Операция просушки предпочтительно осуществляется помещением растений на солнце.

После тщательной очистки растений их измельчают (стадия b) стандартными способами, например, с помощью измельчительной машины или даже вручную. Растения следует измельчать при температуре от 10 до 40°С, хотя не исключаются и более высокие или более низкие температуры.

Затем измельченные растения подвергают обработке лазерным излучением (стадия с). Источником лазерного излучения предпочтительно служит красный линейный диодный лазер, способный к генерации излучения в диапазоне длин волн от 150 до 810 нм. Более предпочтительно длина волны излучения лазера находится между 200 и 400 нм, наиболее предпочтительно 250 нм. Мощность лазерного излучения предпочтительно составляет от 1 до 60 ватт, более предпочтительно от 10 до 30 ватт и наиболее предпочтительно 20 ватт. Лазерный луч предпочтительно имеет диаметр от 1 до 6 мм, более предпочтительно от 2 до 5 мм и наиболее предпочтительно 4 мм. Измельченные растения подвергают облучению лазером так, чтобы облучить всю смесь или большую часть смеси. Это достигается либо перемещением лазерного излучателя по измельченным растениям, либо прохождением измельченной массы на конвейере через несколько лазерных излучателей. Предпочтительно каждый 1 кг измельченной массы подвергается облучению лазером в течение от 3 до 10 минут, более предпочтительно в течение 5 минут. Обработка измельченных растений лазерным излучением должна проводиться при температуре от 10 до 40°С, хотя не исключаются и более высокие или более низкие температуры.

Обработанную лазером массу затем суспендируют в воде (стадия d). На этой стадии можно использовать любую коммерческую минеральную воду. Суспендирование осуществляется таким образом, чтобы на 1 л воды приходилось от 50 до 300, предпочтительно от 100 до 250 г обработанной лазером массы. Суспендирование измельченных растений следует проводить при температуре от 10 до 40°С, хотя не исключаются и более высокие или более низкие температуры.

Затем суспензию выдерживают от 5 до 20 дней, предпочтительно от 7 до 15 дней при температуре от 2 до 10°С, предпочтительно от 4 до 8°С, при этом происходит мацерация смеси (стадия е).

Наконец, после стадии мацерации проводится отделение жидкой фазы от твердой фазы (стадия f). Твердую фазу можно отжимать для облегчения разделения. Разделение можно осуществлять при помощи одной декантации или предпочтительно декантации с последующей фильтрацией. Фильтрование предпочтительно проводится под давлением. Наиболее предпочтительно проводят три следующие друг за другом пресс-фильтрации с помощью фильтров на 5 мкм, 1 мкм и 0,22 мкм. Разделение следует проводить при температуре от 10 до 40°С, хотя не исключаются и более высокие или более низкие температуры.

Способ изобретения можно применять к любым видам растений как однодольным, так и двудольным. Он может применяться к смесям различных растений. Обработке способом изобретения может подвергаться целое растение, хотя предпочтительны листья и цветки.

Способ изобретения может применяться к следующим семействам растений (не ограничиваясь ими): Asteraceae, Rosaceae, Crucifrae, Labiatae, Equisetaceae, Saxifraganceae, Compositae, Araliaceae и Umbeliferae. Примеры видов растений, к которым может применяться способ изобретения, включают Mentha sativa, Pimpinella anisum, Eleutherococcus senticosus, Equinacea angustifolia, Symphytum officinalis и Equisetum arvense, но не ограничиваются ими. Предпочтительные виды, к которым может применяться способ изобретения, следующие: Calendula officinalis, Agrimonia eupatoria, Lepidium latifolium и Lamium album.

Следующий аспект изобретения составляют водные экстракты (гидроляты или композиции), полученные способом изобретения. Так, композиции, полученные при применении данного способа к таким представителям, как Mentha sativa, Pimpinella anisum, Eleutherococcus senticosus, Equinacea angustifolia, Symphytum officinalis и Equisetum arvense, подпадают под действие изобретения. Особый интерес представляют водные экстракты, полученные при применении способа изобретения к Calendula officinalis и к смеси Agrimonia eupatoria, Lepidium latifolium и Lamium album, также подпадающие под действие изобретения.

Как оказалось, некоторые из водных экстрактов, полученных способом изобретения, находят применение в медицине. Это составляет, как указано выше, третий аспект изобретения.

Водные экстракты, полученные способом изобретения из Calendula officinalis, в особенности при применении способа изобретения к цветкам этого растения обладают активностью иммуностимуляторов. Эта активность неожиданно оказалась чрезвычайно высокой, как видно из нижеследующих примеров. Предполагается, не ограничиваясь только этой теорией, что данные экстракты действуют, стимулируя трансформацию лимфоцитов при активации лимфоцитов Т, В и макрофагов. Таким образом, экстракты, полученные способом изобретения из Calendula officinalis, находят применение при лечении иммуносупрессивных заболеваний. Примеры таких заболеваний включают раковые заболевания, такие как карцинома печени, рак легких, рак почек, рак толстой кишки, рак молочной железы, рак или аденокарцинома простаты, опухоли мозга, такие как астроцитома и глиобластома, рак шейки матки и рак мочевого пузыря; туберкулез, грипп, простуда, аллергия, красная волчанка и СПИД, но не ограничиваются ими.

Более того, водные экстракты, полученные при применении способа изобретения к Agrimonia eupatoria, Lepidium latifolium и Lamium album, в особенности водные экстракты, полученные при применении способа изобретения к смеси листьев из Agrimonia eupatoria, Lepidium latifolium и Lamium album, неожиданно проявляли антивирусную активность. В частности, этот экстракт особенно активен против вирусных гепатитов А, В, С, D и Е.

Такая активность была особенно высокой, как видно из нижеследующих примеров. Кроме того, этот экстракт также обладает высокой регуляторной активностью на метаболизм трансаминаз и билирубина, а также действует как стимулятор регенерации гепатоцитов. Следовательно, экстракт, полученный при применении способа изобретения к Agrimonia eupatoria, Lepidium latifolium и Lamium album, находит применение при лечении вирусных заболеваний. Неограничивающие примеры таких заболеваний представлены гепатитами А, В, С, D и Е. Этот экстракт также может применяться при лечении патологий печени, связанных с высокими уровнями трансаминаз и билирубина. Примеры таких заболеваний включают гепатиты А, В, С, D и Е, цирроз печени и карциному печени, но не ограничиваются ими.

Согласно исследованиям и экспериментам, поставленньм автором изобретения, можно предположить, не ограничиваясь только этой теорией, что лазерная обработка катализирует реакции между определенньми соединениями растений и/или усиливает экстракцию определенных соединений из растений так, что присутствие этих соединений в экстрактах приводит к неожиданным активностям, описанным выше.

Следующий аспект изобретения касается фармацевтических композиций, включающих жидкие экстракты, полученные настоящим способом.

Водные экстракты по настоящему изобретению могут применяться как таковые или в лиофилизованном виде для получения фармацевтических композиций. Они могут вводиться либо раздельно в виде водных экстрактов или лиофилизатов, либо в виде фармацевтических препаратов. Готовые препараты представлены лекарственными формами, которые (1) содержат только экстракт по изобретению; (2) содержат одно или несколько из соответствующих связывающих веществ, носителей и/или других вспомогательных материалов; и (3) могут дополнительно содержать другие фармацевтически активные вещества.

Носители, связывающие вещества и/или вспомогательные материалы должны быть фармацевтически и фармакологически приемлемыми с тем, чтобы их можно было комбинировать с другими компонентами лекарственной формы или препарата и не вызывать неблагоприятных эффектов на организм.

Лекарственные формы включают такие, которые подходят для перорального или парентерального введения (включая подкожное, внутрикожное, внутримышечное или внутривенное), хотя наилучший способ введения зависит от состояния пациента.

Лекарственные формы могут быть в виде разовых доз. Готовые формы получают согласно способам, известным в области фармакологии. Соответствующие количества активных субстанций, подходящие для введения, могут варьировать в зависимости от конкретной области терапии. В общем, концентрация активной субстанции в препарате разовой дозы составляет от 5% до 95% от общего состава.

Изобретение, представленное данной заявкой, раскрывается на примерах, представленных ниже.

Пример 1

Получение водного экстракта из цветков Calendula officinalis стандартным способом (сравнительный пример)

500 г Цветков Calendula officinalis помещали в тоннельную мойку и тщательно промывали водой примерно при 28°С. Затем цветки измельчали в измельчителе. Далее полученные 500 г измельченного материала суспендировали в 2 л воды при температуре около 20°С. Затем суспензию выдерживали 12 дней при температуре 4°С. Наконец, проводили разделение жидкой и твердой фазы сначала путем декантации жидкости (твердую фазу отжимали для лучшего разделения), а затем при помощи трех последовательных пресс-фильтраций через фильтры на 5, 1 и 0,22 мкм при температуре около 20°С. В результате получали приблизительно 1,7 л раствора (водного экстракта) цвета охры.

Пример 2

Получение водного экстракта из цветков Calendula officinalis способом изобретения

500 г Цветков Calendula officinalis помещали в тоннельную мойку и тщательно промывали водой примерно при 28°С. Затем цветки измельчали в измельчителе. Полученные 500 г измельченного материала подвергали обработке красным линейным диодным лазером, способным к генерации излучения при длине волны 250 нм, мощностью в 20 ватт и диаметром луча 4 мм. Обработку проводили, перемещая лазерный излучатель вручную по измельченному материалу в течение 2,5 минут так, чтобы облучить всю смесь или большую часть смеси. Далее обработанный лазером материал суспендировали в 2 л воды при температуре около 20°С. Затем суспензию выдерживали 12 дней при температуре 4°С. Наконец, проводили разделение жидкой и твердой фазы сначала путем декантации жидкости (твердую фазу отжимали для лучшего разделения), а затем при помощи трех последовательных пресс-фильтраций через фильтры на 5, 1 и 0,22 мкм при температуре около 20°С. В результате получали приблизительно 1,7 л раствора (водного экстракта) цвета охры.

Примеры 3-14

Водные экстракты перечисленных ниже растений получали согласно методике примеров 1 и 2. Те части растений, которые подвергались указанным выше процессам, указаны в скобках: Equisetum arvense (стебли), Symphytum officinalis (листья), Equinacea angustifolia (листья и цветки), Eleutherococcus senticosus (листья), Pimpinella anisum (листья и цветки), Mentha sativa (листья).

Водные экстракты, полученные в примерах 1-14, тестировали на активность в качестве иммуностимуляторов по их действию на трансформацию лимфоцитов (LTA). Под трансформацией лимфоцитов понимается то, что лимфоциты переходят из состояния покоя в активное состояние, которое необходимо для борьбы с болезнями по иммунологическому механизму или для восстановления иммунной системы, ослабленной под воздействием различных факторов. Эти опыты проводились in vitro при добавлении экстрактов к лимфоцитам, выделенным из мышей согласно литературе: Мах W. et al., Journal of Natural Products, vol. 54, № 6, pp. 1531-1542 (1991). Измеряли включение тимидина, которое отражает репликацию ДНК. Включение тимидина отражает и возрастание числа лимфоцитов, и повышение активности лимфоцитов. Результаты представлены в табл. 1.

Таблица 1
Пример	Растение	Повышение LTA (%)
		стандартный метод	метод с лазерной обработкой
1/2	Calendula officinalis	+277	+1204
3/4	Equisetum arvense	+26	+123
5/6	Symphytum officinalis	+43	+211
7/8	Echinacea angustifolia	+98	+270
9/10	Eleutherococcus senticosus	+106	+280
11/12	Pimpinella anisum	+11	+26
13/14	Mentha sativa	+12	+28

Приведенные в табл. 1 результаты показывают, что водные экстракты, полученные способом изобретения, проявляют более сильное повышение активности в трансформации лимфоцитов, чем водные экстракты, полученные стандартным способом, то есть экстракции без лазерной обработки. Более того, очень неожиданным было такое сильное повышение активности в трансформации лимфоцитов, которое проявлял экстракт Calendula officinalis, полученный способом изобретения.

Пример 15

Получение водного экстракта из листьев растений Agrimonia eupatoria, Lepidium latifolium и Lamium album стандартным способом (сравнительный пример)

250 г Листьев Agrimonia eupatoria, 250 г листьев Lepidium latifolium и 250 г листьев Lamium album помещали в тоннельную мойку и тщательно промывали водой примерно при 28°С. Затем листья измельчали в измельчителе. Далее полученные 750 г измельченного материала суспендировали в 3 л воды при температуре около 20°С. Затем суспензию выдерживали 12 дней при температуре 4°С. Наконец, проводили разделение жидкой и твердой фазы сначала путем декантации жидкости (твердую фазу отжимали для лучшего разделения), а затем при помощи трех последовательных пресс-фильтраций через фильтры на 5, 1 и 0,22 мкм при температуре около 20°С. В результате получали приблизительно 2,7 л раствора (водного экстракта) темно-зеленого цвета.

Пример 16

Получение водного экстракта из листьев растений Agrimonia eupatoria, Lepidium latifolium и Lamium album способом изобретения

250 г Листьев Agrimonia eupatoria, 250 г листьев Lepidium latifolium и 250 г листьев Lamium album помещали в тоннельную мойку и тщательно промывали водой примерно при 28°С. Затем цветки измельчали в измельчителе. Полученные 500 г измельченного материала подвергали обработке красным линейным диодным лазером, способным к генерации излучения при длине волны 250 нм, мощностью в 20 ватт и диаметром луча 4 мм. Обработку проводили, перемещая лазерный излучатель вручную по измельченному материалу в течение 4 минут так, чтобы облучить всю смесь или большую часть смеси. Далее обработанный лазером материал суспендировали в 3 л воды при температуре около 20°С. Затем суспензию выдерживали 12 дней при температуре 4°С. Наконец, проводили разделение жидкой и твердой фазы сначала путем декантации жидкости (твердую фазу отжимали для лучшего разделения), а затем при помощи трех последовательных пресс-фильтраций через фильтры на 5, 1 и 0,22 мкм при температуре около 20°С. В результате получали приблизительно 2,7 л раствора (водного экстракта) темно-зеленого цвета.

Водные экстракты, полученные в примерах 15 и 16, использовали в клинических испытаниях на 28 пациентах, страдающих различными заболеваниями печени, вследствие чего они проявляли повышенные уровни трансаминаз (GOT, GPT, GGT), билирубина и высокие титры вирусов. Пациенты, получавшие экстракт, полученный в примере 15, после 3 месяцев лечения проявляли небольшое снижение трансаминаз без изменения титра вирусов. Однако пациенты, получавшие экстракт, полученный в примере 16, после 2 месяцев лечения неожиданно проявляли нормализацию симптомов, нормальные уровни трансаминаз и билирубина, а также заметное снижение титра вирусов даже в случае гепатита С штамма 1-В и мутантного вируса.