способ дифференциальной диагностики обострения и ремиссии гастродуоденальных заболеваний у детей

Формула изобретения

Способ дифференциальной диагностики обострения и ремиссии гастродуоденальных заболеваний у детей, включающий биохимическое исследование слюны, отличающийся тем, что в слюне определяют содержание мочевой кислоты и при его значении 118,8 мкмоль/л и выше диагностируют обострение, а при 117,5 мкмоль/л и ниже - ремиссию гастродуоденальных заболеваний.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к области медицины, а именно к гастроэнтерологии, и может быть использовано в широкой медицинской практике для диагностики фазы обострения или ремиссии гастродуоденальных заболеваний у детей.

Наиболее информативным считается способ эндоскопического исследования с прицельной биопсией, который дает возможность оценить функцию и структуру органов гастродуоденальной зоны (А.И.Волков и др. Современные инструментальные методы в комплексном обследовании гастродуоденальной слизистой у детей. Методические рекомендации. Горький. 1981 г.).

Однако этот способ диагностики достаточно сложен с точки зрения необходимости наличия специального дорогостоящего оборудования, специалиста-эндоскописта и морфолога. Кроме того, данный способ сопряжен с опасностью возникновения осложнений и травматичен.

Известны способы лабораторной диагностики фазы гастродуоденального заболевания: по повышению концентрации гистамина в базальной порции желудочного сока (Способ диагностики обострения язвенной болезни двенадцатиперстной кишки. Авт. свид. №1264410 от 23.10.86. Комарова Л.Г. и др.). Однако этот способ требует процедуры зондирования, что является травматичным для ребенка. И, кроме того, методика исследования гистамина в любой биологической жидкости трудоемка.

За прототип предлагаемого изобретения выбран лабораторный способ дифференциальной диагностики обострения и ремиссии гастродуоденальных заболеваний, включающий биохимическое исследование слюны (Л.Г.Комарова, И.А.Переслегина, Л.В.Коркоташвили «Способ дифференциальной диагностики обострения и ремиссии гастродуоденальных заболеваний». Свидетельство №1262380, зарегистрировано в Государственном реестре 16.10.85 г.).

Данный способ заключается в том, что о наличии обострения или ремиссии гастродуоденального заболевания судят по соотношению содержания в слюне аденозинтрифосфорной и пировиноградной кислот, взятых в процентах от нормы, и при этом показателе ниже 0,5 диагностируют обострение, а выше 0,5 - ремиссию заболевания. Способ атравматичен, позволяет с высокой степенью точности осуществлять диагностику.

Однако использование известного способа требует проведения двух методик, что сопряжено с большим расходом реактивов, наличием специального оборудования и большой затратой времени (5-6 часов).

Целью предлагаемого изобретения является упрощение способа за счет определения одного показателя в той же биологической среде - слюне.

Поставленная цель достигается тем, что в предлагаемом способе, включающем биохимическое исследование слюны, определяют содержание мочевой кислоты в слюне и при ее значении 118 мкмоль/л и выше диагностируют обострение гастродуоденальных заболеваний, а ниже - ремиссию.

Новым в способе является исследование мочевой кислоты в слюне, так как раньше ее определяли в других биологических средах и по другому назначению.

Так, известно участие мочевой кислоты в генезе артериальной гипертонии, патологии почек и др. Пурины в организме являются полифункциональными соединениями, обладающими способностью регулировать соотношение между активностью симпатической и парасимпатической нервной системы, а нарушение равновесия этих систем может приводить к ряду заболеваний, в том числе желудочно-кишечного тракта (Ю.И.Ровда, И.В.Павлов, В.И.Хиченко и др. Педиатрия 1995 г., №3, с.82-84).

Определение мочевой кислоты в слюне необходимо и достаточно для постановки диагноза обострения или ремиссии гастродуоденальных заболеваний у детей.

Работоспособность способа доказана следующими фактами:

Проведено обследование 58 детей с гастродуоденальными заболеваниями. Из них 31 - с обострением и 27 - ремиссией патологического процесса. В слюне определяли содержание мочевой кислоты, величина которой менялась в фазу обострения в диапазоне 118,8-635,3 мкмоль/л, а в фазу ремиссии 15,8-117,5 мкмоль/л.

Таблица 1 Концентрация мочевой кислоты в слюне (мкмоль/л)
Группы обследуемых детей				Концентрация мочевой кислоты
Гастродуоденальные заболевания		Обострение Пределы колебаний		232,5+18,8 (n=31) р<0,001 118,8-635,3
		Ремиссия Пределы колебаний		60,2+5,65 (n=27) 15,8-117,5
Таблица 2 Диапазон колебаний содержания мочевой кислоты в слюне при гастродуоденальном заболевании у детей
№	Фаза обострения				№	Фаза ремиссии
	Фамилия		Мочевая кислота, мкмоль/л			Фамилия	Мочевая кислота, мкмоль/л
1	Больной Б.		145,6		1	Больной А.	21,2
2	В.		225,0		2	Б.	32,9
3	В.		566,1		3	В.	47,7
4	Е.		176,5		4	В.	117,5
5	3.		271,4		5	Г.	108,0
6	И.		206,0		6	Д.	39,0
7	И.		165,0		7	Е.	40,0
8	К.		180,3		8	К.	31,6
9	К.		142,1		9	К.	53,7
10	К.		405,0		10	К.	80,1
11	К.		190,8		11	Л.	78,1
12	Л.		316,4		12	Л.	75,0
13	Л.		118,8		13	М.	80,0
14	Л.		273,3		14	М.	15,8
15	Л.		220,0		15	М.	65,9
16	Л.		184,4		16	М.	47,4
17	М.		210,0		17	Н.	37,5
18	М.		281,3		18	Н.	49,0
19	М.		255,8		19	Н.	40,8
20	Н.		305,0		20	О.	31,3
21	Н.		247,0		21	Р.	28,0
22	О.		139,2		22	Р.	88,0
23	П.		164,0		23	С.	63,2
24	Р.		188,0		24	С.	50,0
25	С.		252,6		25	С.	24,0
26	С.		635,3		26	Ф.	40,0
27	С.		158,3		27	Ш.	112,0
28	С.		169,0
29	С.		375,0
30	С.		187,5
31	С.		252,6

Диагноз верифицирован данными гастрофиброскопии и РН-метрии желудочного сока.

Установлено, что все дети с содержанием в слюне мочевой кислоты выше 118,8 имели обострение заболевания, тогда как у детей с уровнем определяемого вещества ниже этого значения диагностировалась ремиссия.

Способ осуществляют следующим образом: утром натощак собирают слюну путем сплевывания в центрифужную пробирку. Затем слюну центрифугируют 10 минут при 3000 об/мин.

Принцип метода.

Мочевая кислота восстанавливает фосфорнофольфрамовый реактив с образованием голубого цвета, оптическая плотность которого при 640 нм пропорциональна концентрации мочевой кислоты в сыворотке крови.

Состав набора.

1. Натрий вольфрамовокислый, двухводный, 5 г - 1 флакон;

2. Натрий карбонат, 20,6 г - 1 упаковка;

3. Фосфорновольфрамовый реактив, 100 мл - 1 флакон;

4. Основной калибровочный растров мочевой кислоты, 6 ммоль/л, 3 мл - 1 флакон.

Вспомогательные реактивы.

Кислота серная, концентрированная (96%), хч - 1 мл.

В состав набора не входит.

Оборудование.

Спектрофотометр или фотоэлектроколориметр, центрифуга.

Образец.

Слюна, разведенная дистиллированной водой в 10 раз.

Приготовление рабочих растворов.

1. Раствор серной кислоты, 0,35 моль/л. В мерную колбу вместимостью 50 мл наливают 20 мл дистиллированной воды, 1,0 мл концентрированной серной кислоты и доводят объем водой до метки. Раствор стабилен.

2. Раствор натрия вольфрамовокислого. Содержимое флакона с натрием вольфрамовокислым количественно переносят в мерную колбу вместимостью 50 мл и доливают дистиллированной водой до метки. Раствор стабилен.

3. Раствор натрия карбоната. Содержимое упаковки с натрием карбонатом количественно переносят в мерную колбу вместимостью 200 мл, растворяют в дистиллированной воде, и доводят объем водой до метки. Раствор стабилен.

4. Рабочий калибровочный раствор мочевой кислоты. Отмеряют точно 1,0 мл основного калибровочного раствора мочевой кислоты, переносят в мерную колбу вместимостью 200 мл и доводят объем дистиллированной водой до метки. Раствор стабилен в течение 2 недель при хранении при температуре 4-8°С. Полученный раствор содержит 30 мкмоль/л мочевой кислоты.

Ход определения.

В центрифужную пробирку вносят:

	Холостая проба, мл	Калибровочная проба, мл		Опытная проба, мл
Вода дистиллированная	-	-		4,0
Биологическая жидкость	-	-		0,50
Перемешивают
Раствор серной кислоты 0,35 моль/л	-	-		0,25
Раствор натрия вольфрамовокислого	-	-		0,25
Тщательно перемешивают, переворачивая пробирку и через 5 минут центрифугируют 10 минут при 3000 об/мин.
Надосадочная жидкость	-		-	2,00
Рабочий калибровочный раствор мочевой кислоты	-		2,00	-
Вода дистиллированная	2,00		-	-
Растров натрия карбоната	1,00		1,00	1,00
Фосфорнофольфрамовый реактив	0,50		0,50	0,50
Тщательно перемешивают, переворачивая пробирку и через 5 минут центрифугируют 10 минут при 3000 об/мин.

Через 30 минут определяют экстинцию при 640 (580-700) нм при красном светофильтре ФЭКа. Расчет содержания проводят по формуле

С(мкмоль/л)=Еоп/Ест×Сст×10, где

Еоп - экстинция опытной пробы против холостой пробы;

Ест - экстинция калибровочной пробы против холостой пробы;

Сст - концентрация рабочего калибровочного раствора, 30 мкмоль/л;

10 - пересчет на разбавленную слюну.

Определяют содержание мочевой кислоты в слюне у больного и при содержании ее 118,8 и выше диагностируют обострение гастродуоденальных заболеваний, а при значении показателя ниже этой цифры - ремиссию.

Клинические примеры исполнения способа.

Пример 1.

Больная Лебедева Оля, 10 лет. История болезни №1136/1995 г. Находилась на стационарном лечении в НИИ детской гастроэнтерологии с диагнозом: язвенная болезнь 12-перстной кишки в фазе обострения, хронический гастродуоденит в фазе обострения. При поступлении проведено обследование мочевой кислоты в слюне. В результате содержание мочевой кислоты составило 118,8 мкмоль/л. При повторных исследованиях уровень мочевой кислоты варьировал до 211,6; 316,4; 331,6 мкмоль/л. Все это свидетельствовало об обострении патологического процесса. Последующее гастрофиброскопическое обследование подтвердило диагноз, выявив выраженные признаки обострения. В процессе лечения была достигнута ремиссия. Концентрация мочевой кислоты снизилась до 110,0 мкмоль/л, сопровождаемая улучшением общепринятых лабораторных показателей, включая гастрофиброскопию.

Пример 2.

Воропаев Сергей, 12 лет. История болезни №674/1995 г. Поступил в Нижегородский НИИ детской гастроэнтерологии с диагнозом: язвенная болезнь 12-перстной кишки, хронический гастродуоденит в фазе ремиссии. При поступлении проведено определение мочевой кислоты в слюне. Величина показателя соответствовала 117,5 мкмоль/л, что указывало на фазу ремиссии. Данные гастрофиброскопии (слизистая желудка бледно розового цвета, гиперплазирована, привратник сомкнут, луковица 12-перстной кишки не деформирована, рисунок слизистой сохранен) подтвердили диагноз.

Использование предлагаемого способа дифференциальной диагностики обострения и ремиссии гастродуоденальных заболеваний в сравнении с известными позволяет получить положительный эффект, который выражается в упрощении и сокращении времени проведения, атравматичности и доступности объекта исследования. Способ дополнительно может использоваться для динамического наблюдения за эффективностью лечения.

Предлагаемый способ особенно ценен в педиатрической практике, так как абсолютно безвреден, прост и доступен в применении в любых условиях.