способ определения характеристик популяций эпифитной микрофлоры злаковых культур в лабораторных условиях

Формула изобретения

1. Способ определения характеристик популяций эпифитной микрофлоры злаковых культур в лабораторных условиях с использованием техники отсеченных листьев, при котором исследуемую популяцию наносят на поверхность газона живых отрезков листьев, отличающийся тем, что популяции микроорганизмов исследуют при нанесении их на срезанные и гербаризированные колосья злаковых культур, монтируемые на жестком основании с сохранением их естественной пространственной ориентации.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве жесткого основания для монтажа колосьев используют пенопластовые матрацы.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к области сельского хозяйства, в частности к сельскохозяйственной микробиологии, и может быть использовано в исследованиях по микробиологии и экологии для определения характеристик популяций микроорганизмов, населяющих колос (численность, динамика и др.), мониторинга популяций фитопатогенных, токсигенных микроорганизмов и их антагонистов, а также в целях совершенствования химического и биологического методов борьбы с болезнями колоса злаковых культур.

Известны способы изучения популяций микроорганизмов как естественно населяющих поверхность колоса зерновых культур, так и при искусственном заражении растений в полевых условиях.

Их недостатком является необходимость длительного выращивания растений до момента выхода колоса из влагалища флагового листа, что связано с большими затратами средств и времени. При этом изучение микрофлоры колоса возможно в течение сравнительно короткого периода в практически неконтролируемых условиях полевого эксперимента.

Известен способ изучения эпифитных микроорганизмов в лабораторной обстановке с использованием специальных пробирок Ру (Сэги Й. Методы почвенной микробиологии. - М.: Колос, 1983. - С.212-213). Очевидными недостатками способа являются невозможность получить в пробирках растения с колосом и существенное искажение естественных условий обитания эпифитной микрофлоры.

Более близким по техническому решению и достигаемому результату является способ определения характеристик микроорганизмов с использованием техники отсеченных листьев, которая предполагает размножение и выделение микроорганизмов с поверхности отрезков листьев растений, раскладываемых в виде газона по дну чашек Петри или кювет. При этом для длительного поддержания листьев в нормальном физиологическом состоянии концы отрезков прикрываются слоем ваты, смоченной раствором бензимидазола (Методы экспериментальной микологии. Справочник. - Киев: Наукова думка, 1982. - С.360-363).

Существенным недостатком техники отсеченных листьев является то, что ее невозможно использовать для анализа популяций эпифитных микроорганизмов, развивающихся на колосе. Помещение колоса (или его фрагментов) во влажную камеру с раствором бензимидазола будет коренным образом искажать естественные условия развития этих микроорганизмов.

Целью предлагаемого изобретения является имитация естественных условий обитания микрофлоры колоса в лабораторной обстановке, упрощение и ускорение процесса изучения характеристик эпифитных микроорганизмов путем использования простых и доступных методических приемов, обеспечивающих возможность проведения соответствующих анализов в любое время года.

Поставленная цель достигается тем, что поведение и характеристики отдельных популяций (ассоциаций) эпифитных микроорганизмов изучаются при их нанесении на срезанные и гербаризированные колосья злаковых культур, монтируемые на жестком основании с сохранением естественной пространственной ориентации колосьев (в вертикальном положении).

Предложенный способ осуществляется следующим образом.

На пенопластовом матраце монтируют заблаговременно собранные и гербаризированные колосья вместе с небольшим фрагментом (15-20 см) стебля путем введения (накалывания) соломины в пенопластовый матрац. Возможно в качестве жесткого основания для крепления стеблей использовать растильни, наполненные увлажненной почвой или песком. В этом случае соломина вводится в толщу субстрата, которым наполнена растильня. Укрепленные таким образом колосья в последующем опрыскивают суспензией клеток исследуемого микроорганизма. Затем отбирают часть колосьев для проведения микробиологического анализа с привлечением стандартных методик определения характеристик популяций микроорганизмов (метод смыва и др.).

Предлагаемый способ позволяет имитировать условия обитания микрофлоры колоса за счет сохранения его естественной пространственной ориентации. Эффективность способа обусловлена простотой его выполнения, при этом исключается использование материалов, требующих специальной подготовки (стерильные чашки Петри и др.). Достоинством способа является то, что в лаборатории всегда может быть заблаговременно заготовлен необходимый гербарный материал в количестве, обеспечивающем проведение массовых анализов в любое время года.