препарат, содержащий иммуноглобулин против венесуэльского энцефаломиелита лошадей из сыворотки крови лошадей жидкий (иммуноглобулин лошадиный вэл)

Формула изобретения

Препарат, содержащий иммуноглобулин против венесуэльского энцефаломиелита лошадей из сыворотки крови лошадей жидкий (иммуноглобулин лошадиный ВЭЛ), обладающий вируснейтрализующей активностью к вирусу ВЭЛ и используемый для экстренной профилактики и лечения ВЭЛ у людей, представляющий собой 9,0-11,0%-ный раствор иммуноглобулинов гипериммунной сыворотки крови лошадей, содержащей антитела к вирусу ВЭЛ, содержащий -глобулиновую фракцию в количестве не менее 90,0% от содержания общего белка, в качестве неспецифических примесей содержащий альбумин, - и -глобулиновые фракции в количестве не более 10,0% и остаточный этиловый спирт в количестве не более 4,0%, имеющий величину рН от 7,0 до 7,5 и характеризующийся индексом нейтрализации специфических антител к вирусу ВЭЛ не ниже 10000.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к области медицины, конкретно к лекарствам и медикаментам (к иммуноглобулинам) для терапевтических целей, и может быть использовано для экстренной профилактики и лечения венесуэльского энцефаломиелита лошадей у людей.

Вирус венесуэльского энцефаломиелита лошадей (ВЭЛ) вызывает одноименное тяжелое лихорадочное заболевание у людей.

У нас в стране и за рубежом для профилактики ВЭЛ разработаны живые аттенуированные и инактивированные вакцины [1-4]. Однако для иммунизации людей из групп повышенного риска в нашей стране нашли применение только две вакцины на основе аттенуированных штаммов 230 и 15 вируса ВЭЛ [3]. Живая вакцина на основе аттенуированного штамма СМ-27 вируса ВЭЛ, а также рекомбинантная вакцина VR 26 S в настоящее время являются экспериментальными.

В США существуют две вакцины, которые используются для иммунизации людей из групп повышенного риска [4]. Они имеют статус экспериментальных препаратов и не лицензированы. Живая аттенуированная вакцина ТС-83, полученная на культуре клеток, была использована для вакцинации людей в целях предупреждения лабораторных заражений. Данная вакцина в настоящее время лицензирована для применения на животных. Вторая экспериментальная инактивированная вакцина С-84, полученная инактивацией формалином штамма ТС-83 вируса ВЭЛ, используется исключительно для усиления иммунитета, создаваемого вакциной ТС-83 [4].

Средств экстренной профилактики ВЭЛ в настоящее время нет. Специфические противовирусные препараты отсутствуют. Для лечения заболевших применяется поддерживающая терапия (анальгетики и антиконвульсивные средства в случае необходимости) [4].

В экспериментах на животных показана высокая эффективность -интерферона и интерферона - индуктора JCLC как средства химиопрофилактики ВЭЛ после их инфицирования. Однако клинических данных, подтверждающих эффективность этих препаратов на людях, нет [4].

Средства экстренной специфической иммунопрофилактики также не разработаны.

Установлено, что альфа-вирусы, к которым относится ВЭЛ, способны индуцировать выработку протективных антител, защищающих животных от гибели при их заражении [5]. По данным R.J. Phillpotts и соавт. моноклональные антитела, специфичные к вирусу ВЭЛ, введенные мышам за 24 ч до или в пределах 24 ч после их заражения, защищают 100 и 50% животных, соответственно, от 100 ЛД₅₀ вируса ВЭЛ [6].

Целью настоящего изобретения является разработка препарата, содержащего иммуноглобулин против венесуэльского энцефаломиелита лошадей из сыворотки крови лошадей жидкого, предназначенного для экстренной профилактики и лечения ВЭЛ у людей.

Указанная цель достигается за счет способности вируса ВЭЛ индуцировать у животных выработку специфических протективных антител в ответ на их заражение и использования нативной гипериммунной сыворотки крови лошадей, содержащей антитела к вирусу ВЭЛ, в качестве сырья для получения препарата.

Сущность изобретения заключается в том, что препарат, содержащий иммуноглобулин против ВЭЛ жидкий, представляет собой 9,0-11,0%-ный раствор иммуноглобулинов гипериммунной сыворотки крови лошадей, содержащей антитела к вирусу ВЭЛ, обладает вируснейтрализующей активностью к вирусу ВЭЛ и при введении оказывает выраженное профилактическое и лечебное действие у людей при ВЭЛ.

Разработанный препарат, содержащий иммуноглобулин против венесуэльского энцефаломиелита лошадей из сыворотки крови лошадей жидкий, не имеет аналогов в мировой практике здравоохранения.

Пример выполнения

Сырьем для получения препарата иммуноглобулина является нативная гипериммунная лошадиная сыворотка, содержащая антитела к вирусу ВЭЛ. Выделение иммуноглобулина из сыворотки крови лошадей, содержащей антитела к вирусу ВЭЛ, проводят методом спиртового фракционирования на холоду по Кону [7].

Препарат, содержащий иммуноглобулин против венесуэльского энцефаломиелита лошадей из сыворотки крови лошадей, представляет собой прозрачную или слегка опалесцирующую жидкость, бесцветную или с желтоватым оттенком, иногда с наличием незначительного, легко разбивающегося при встряхивании осадка, с величиной рН от 7,0 до 7,5 и является 9,0-11,0%-ным раствором иммуноглобулинов сыворотки крови лошадей, содержащей антитела к вирусу ВЭЛ. Содержание гамма-глобулиновой фракции в нем составляет не менее 90,0% от количества общего белка. В качестве неспецифических примесей в препарате присутствуют альбумин, - и -глобулины в количестве не более 10,0% и остаточный этиловый спирт, содержание которого не более 4,0%. Препарат обладает вируснейтрализующей активностью к вирусу ВЭЛ (индекс нейтрализации специфических антител к вирусу ВЭЛ - не ниже 10000). Препарат стерильный, апирогенный и нетоксичный. При внутримышечном введении он оказывает выраженное профилактическое и лечебное действие при венесуэльском энцефаломиелите лошадей у людей.

Иммуноглобулин лошадиный ВЭЛ неоднократно был использован в различных аварийных ситуациях при возникновении опасности заражения людей в лаборатории при работе с вирусом ВЭЛ. В случае применения иммуноглобулина в качестве средства экстренной профилактики в течение часа после предполагаемого инфицирования ни у одного из сотрудников в последующем не было отмечено развитие заболевания. Применение иммуноглобулина с лечебной целью приводило к улучшению общего состояния больных ВЭЛ, предупреждало наступление второй волны лихорадки и сокращало продолжительность лихорадочного периода.

По физико-химическим и иммунобиологическим показателям препарат иммуноглобулина лошадиного ВЭЛ не отличается от других коммерческих иммуноглобулинов из сыворотки крови лошадей [8-10].

Было получено 33 серии препарата иммуноглобулина против венесуэльского энцефаломиелита лошадей из сыворотки крови лошадей. Характеристика препаратов представлена в таблице.

ФСП 42-0102-0243-00 и ФС 42-0029-00 на «Иммуноглобулин против венесуэльского энцефаломиелита лошадей из сыворотки крови лошадей жидкий (Иммуноглобулин лошадиный ВЭЛ)» утверждены 26.07.00 г. Руководителем Департамента Государственного контроля качества, эффективности, безопасности лекарственных средств и медицинской техники Минздрава России. Препарат зарегистрирован в РФ и внесен в Государственный реестр лекарственных средств.

БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЕ ДАННЫЕ

1. Вакцина венесуэльского энцефаломиелита лошадей культуральная очищенная концентрированная инактивированная сорбированная жидкая (Вакцина ВЭЛ). Регистрационный №92/353/13 // Государственный реестр медицинских средств. - М., 2001. - Т.1. - С.241.

2. Карпова Е.Ф., Цилинский Я.Я. Вакцинопрофилактика лабораторного персонала против ВЭЛ // Итоги науки и техники. Вирусология. М., 1992. - Т.27. - С.146-150.

3. Лукин Е.П., Мельников С.А., Дорохина Т.В. и др. Активная профилактика венесуэльского энцефаломиелита лошадей (ВЭЛ) в группах высокого риска // Материалы юбилейной научно-технической конференции "Фундаментальные и прикладные проблемы биотехнологии и медицины" 19-20 апреля 2000 г. - Санкт-Петербург, 2000. - С.66-68.

4. USAMRIID'S medical management of biological casualities. Handbook / Ed. M. Kortepeter, G. Christopher, T. Cieslak et al. - Fort Detrick, Frederick, Maryland, 2001. - Ed.4.

5. Casadevall A. Passive antibody administration (immediate immunity) as a specific defence against biological weapons // Emerg. Infect. Dis. - Vol.8, №8. - P.833-840.

6. Phillpotts R.J., Jones L.D., Howard S.C. Monoclonal antibody protects mice against infection and disease when given either before or up to 24 h after airborne challenge with virulent Venezuelan eguine encephalitis virus // Vaccine. - 2002. - Vol.20, №11-12. - P.1497-1504.

7. Cohn E.J., Strong L., Hughes W.L. et al. Preparation and properties of serum and plasma proteins // J. Amer. Chem. Soc. - 1946. - Vol.68, №3. - P.459-475.

8. Руководство по вакцинному и сывороточному делу / Под ред. П.Н. Бургасова. - М.: Медицина, 1978.

9. Справочник по применению бактерийных и вирусных препаратов / Под ред. С.Г. Дзагурова, Ф.Ф. Резепова. - М.: Медицина, 1975.

10. Государственная фармакопея СССР. - М.: Медицина, 1968. - Х изд.