производные азаиндола

Формула изобретения

1. Производное азаиндола формулы I или его фармацевтически

приемлемая соль,

где

выбирают из группы, состоящей из

R₁, R₂, R₃, R₄ каждый независимо выбран из группы, состоящей из Н, C₁ -С₆алкила, С₂-С₆алкенила, галогена, -CN, фенила, нитро, OC(O)R₁₅, C(O)R₁₅, C(O)OR₁₆, OR₁₉, SR₂₀ и NR ₂₁R₂₂;

R₁₅ независимо выбран из группы, включающей Н, C₁-С₆алкил и С ₂-С₆алкенил;

R₁₆, R ₁₉ и R₂₀ каждый независимо выбран из группы, включающей Н, C₁-С₆алкил, С_1-6 алкил, замещенный от одного до трех атомами галогена;

R ₂₁ и R₂₂ каждый независимо выбран из группы, включающей Н, ОН, C₁-С₆алкил;

R ₅ представляет собой (O)_m, где m имеет значение 0 или 1;

n имеет значение 1 или 2;

R₆ выбирают из группы, включающей Н, C₁-C₆ алкил, С₃-C₆алкенил, C(O)R₂₄ , C(O)OR₂₅; при условии, что атомы углерода, которые содержат углерод-углеродную двойную связь указанного С₃ -С₆алкенила не являются точкой присоединения к азоту, к которому присоединен R₆;

R₂₄ выбирают из группы, состоящей из Н, C₁-C₆алкила;

R₂₅ представляет собой C₁-C ₆алкил;

R₇, R₈, R₉ , R₁₀, R₁₁, R₁₂, R₁₃ и R₁₄ каждый независимо выбран из группы, включающей Н, C₁-С₆алкил;

Ar выбирают из группы, включающей

A₁, А₂, А₃, А₄ , A₅, В₁, В₂, В₃, В₄, C₁, C₂, С₃ каждый независимо выбран из группы, включающей Н, галоген, C₁ -С₆алкил, -CN, нитро, N₃.

2. Соединение по п.1 или его фрамацевтически приемлемая соль, выбранное из группы, включающей соединения 5а, 5b, 5c, 5d, 5e, 5f, 5g, 5h, 5i, и 5ai как определено ниже

3. Соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль, выбранное из группы, включающей соединения 5j, 5k и 5l как определено ниже

4. Соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль, имеющее формулу 5m, представленную ниже

5. Соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль, выбранное из группы, включающей соединения 8а, 15а, 16а, 16d и 16е, определенные ниже

6. Соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль, выбранное из группы, включающей соединения 9а, 9b, 10а, 11а, 11b, 11с, 12а, 14а, 17a-17f, 18a, 19а и 20а, определенные ниже

7. Соединение по п.6 или его фармацевтически приемлемая соль, в котором R₂ представляет собой -ОМе, R ₄ представляет собой водород и R₁₄ представляет собой (R)-метил.

8. Соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль, выбранное из группы, включающей соединения 13а, 21а, и 21b, определенные ниже

9. Соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль, в котором R₂, R₃ и R₄ каждый независимо выбран из группы, включающей Н, -ОСН₃ , -ОСН₂CF₃, -OiPr, -OnPr, галоген, CN, NO₂, C₁-С₆алкил, NHOH, NH ₂, Ph, SR₂₀ и N(СН₃)₂.

10. Соединение по п.9 или его фармацевтически приемлемая соль, в котором n имеет значение 2; R₁ выбирают из группы, включающей Н, C₁-С₆алкил и СН ₂СН=СН₂;

и R₅ представляет собой (O)_m, где m имеет значение 0.

11. Соединение по п.10 или его фармацевтически приемлемая соль, в котором R ₇, R₈, R₉, R₁₀, R ₁₁, R₁₂, R₁₃ и R₁₄ каждый независимо является Н или СН₃, в котором при условии, что один или два члена группы R₇-R₁₄ представляют собой СН₃ и оставшиеся члены группы R₇-R ₁₄ являются Н.

12. Соединение по п.11 или его фармацевтически приемлемая соль, в котором один из членов группы A₁, А₂, А₃, А₄, А ₅, B₁, В₂, В₃, В ₄, С₁, С₂, С₃, выбирают из группы, включающей водород, галоген и амино и оставшиеся члены группы A₁, А₂, А₃, А₄ , А₅, B₁, В₂, В₃, В₄, С₁, С₂, С₃, представляют собой водород.

13. Соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль, формулы

где R₂ выбирают из группы, включающей Н, -ОСН ₃, -ОСН₂CF₃, -OPr, галоген, CN, NO₂ и NHOH;

R₄ выбирают из группы, включающей Н, -галоген, -CN и гидрокси; и

R₁₄ представляет собой СН₃ или Н.

14. Соединение по п.1, в котором R₄ выбирают из группы, включающей ОН, CN, галоген, -ОСОСН₃ и C₁-С₆ алкил.

15. Соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль, формулы

где R₂ выбирают из группы, включающей Н, F, Cl, Br, OMe, CN или ОН;

R₄ выбирают из группы, включающей Н, C₁-С₆алкил, С₂ -С₆алкенил, -Cl, OMe, CN, ОН, Ph фенил или -С(O)СН ₃;

n имеет значение 2;

R₈, R₉, R₁₀, R₁₁, R₁₂ , R₁₃ и R₁₄ каждый независимо является Н или СН₃, при условии, что 0-2 членов группы R ₈, R₉, R₁₀, R₁₁, R ₁₂, R₁₃ и R₁₄ могут быть метилом и остальные члены группы R₈, R₉, R ₁₀, R₁₁, R₁₂, R₁₃ и R ₁₄ являются Н;

и

R₆ представляет собой водород или метил.

16. Соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль, выбранное из группы, включающей соединения 5р, 5r, 5s, 5q, 5t, 5u, 5v и 27с, определенные ниже

17. Соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль формулы

где R₄ выбирают из группы, включающей H, С ₁-С₆алкил, С₂-С₆алкенил, Cl, OMe, CN, ОН, фенил и -С(O)СН₃;

n представляет собой 2;

R₈, R₉, R_10, R₁₁, R₁₂, R₁₃ и R₁₄ каждый является независимо H или СН₃, при условии, что 0-2 членов группы R₈, R₉, R₁₀ , R₁₁, R₁₂, R₁₃ и R₁₄ , могут быть СН₃, а остальные члены группы R₈ , R₉, R₁₀, R₁₁, R ₁₂, R₁₃ и R₁₄ являются H; и

R₆ представляет собой Н или СН₃.

18. Соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль, выбранное из группы, включающей соединения 5w, 5x, 5y, 5z и 5ak, определенные ниже

19. Соединение по п.15, в котором R₄, R ₇, R₈, R₉, R₁₀, R ₁₁, R₁₂, R₁₃ и R₁₄ являются Н; и R₂ является - ОМе.

20. Соединение по п.15, в котором R₂, R₄, R₇, R ₈, R₉, R₁₀, R₁₁, R ₁₂, R₁₃ и R₁₄ являются Н.

21. Соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль формулы

где R₂ представляет собой Н, F, Cl, Br, OMe, CN или ОН;

R₄ выбирают из группы, включающей Н, C₁-C₆алкил, С₁-С₆ алкенил, Cl, OMe, CN, ОН, фенил и -С(O)СН₃;

n имеет значение 2;

R₈, R₉, R ₁₀, R₁₁, R₁₂, R₁₃ и R ₁₄ каждый независимо является Н или СН₃, при условии, что вплоть до двух других заместителей могут быть метилом;

R₁ представляет собой водород;

R ₅ является незамещенным; и

R₆ представляет собой водород или метил.

22. Соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль формулы

где R₂ представляет собой Н, -ОСН₃ , -ОСН₂CF₃, -OPr, галоген, CN, NO₂ или NHOH;

R₄ представляет собой Н, -галоген, -CN или гидрокси;

один или два члена R₇-R ₁₄ представляют собой метил и оставшиеся члены представляет собой водород;

n имеет значение 2;

R₁ представляет собой водород;

R₅ представляет собой (O)_m, где m представляет собой 0; и

R ₆ представляет собой водород, метил или аллил.

Описание изобретения к патенту

Область техники

Настоящее изобретение относится к соединениям, обладающим лекарственными и биоактивными свойствами, их фармацевтическим композициям, а также способам их применения. В частности, изобретение касается производных азаиндолпиперазиндиамида, которые обладают уникальной антивирусной активностью. В особенности, настоящее изобретение касается соединений, пригодных для лечения ВИЧ-инфекции и СПИДа.

Уровень техники

ВИЧ-1 (вирус-1 человеческого иммунодефицита) остается главной медицинской проблемой, поскольку по всемирной оценке инфицированы 33.6 миллиона человек. Число случаев ВИЧ-инфекции и СПИДа (приобретенный синдром иммунодефицита) быстро повышается. В 1999 г. было сообщено о новых инфекциях у 5.6 миллионов человек и о 2.6 миллионах умерших от СПИДа. В настоящее время доступные лекарственные препараты для лечения ВИЧ-инфекции включают шесть нуклеозидных ингибиторов обратимости транскриптазы (RT) (зидовудин, диданозин, ставудин, ламивудин, залтитабин и абасавир) (zidovudine, didanosine, stavudine, lamivudine, zalcitabine and abacavir), три ненуклеозидных ингибитора обратимости транскриптазы (невирапин, делавирдин и эфавиренз) (nevirapine, delavirdine and efavirenz), а также пять пептидомиметических ингибиторов протеазы (саквинавир, индинавир, ритонавир, нельфинавир и ампренавир) (saquinavir, indinavir, ritonavir, nelfinavir and amprenavir). Каждый из указанных лекарственных препаратов способен только кратковременно ограничить размножение вирусов, если их используют как таковые. Однако, когда их используют в сочетании (комбинации), эти лекарственные препараты оказывают сильное воздействие на вирусы и прогрессирование болезни. Фактически, было подтверждено документально, что существенные сокращения в показателях смертности среди пациентов, заболевших СПИДом, являются следствием широкого применения комбинационной терапии. Однако, несмотря на эти впечатляющие результаты, от 30 до 50% пациентов в конечном счете не вылечиваются при применении комбинационной терапии лекарственных препаратов. Неэффективность действия лекарственных препаратов, несоответствие, ограниченное действие внутри некоторых типов клеток (например, большинство нуклеозидных аналогов не могут быть профосфорилированы в отдельных клетках) может служить оценкой неполного подавления восприимчивых вирусов. Кроме того, высокая скорость размножения и быстрое преобразование ВИЧ-1 вместе с частым включением мутаций, приводит к появлению устойчивости к лекарственным препаратам и лечение становится невозможным, когда присутствует сверхоптимальная концентрация лекарственных препаратов (Larder и Kemp; Gulick; Kuritzkes; Morris-Jones et al.; Schinazi et al.; Vacca и Condra; Flexner; Berkhout и Ren et al.; (Ref.6-14)). Таким образом, имеется необходимость создания новых анти-ВИЧ агентов, демонстрирующих отличные свойства устойчивости и благоприятную фармакокинетику, также как и безопасность, чтобы обеспечить альтернативное лечение.

В настоящее время в качестве запатентованных лекарственных препаратов против ВИЧ-1 доминируют либо нуклеозидные ингибиторы обратимости транскриптазы, либо ингибиторы пептидомиметической протеазы. Недавно полученные ненуклеозидные ингибиторы обратимости транскриптазы (NNRTIs) играют все более и более важную роль в терапии ВИЧ-инфекций (Pedersen & Pedersen, Ref.15). В литературе описаны по крайней мере 30 различных классов NNRTI (De Clercq, Ref.16) и несколько NNRTIs прошли клинические испытания. Дипиридодиазепинон (невиралин), бензоксазинон (эфавиренз) и производные бис(гетероарил) пиперазина (делавирдин) одобрены для клинического применения. Однако главным недостатком в развитии и применении NNRTIs является их склонность к быстрому появлению штаммов, резистентных к лекарственным препаратам как в культуре клеточной ткани, так и у подвергнутых лечению индивидуумов, в особенности тех, которых прошли монотерапию. Как следствие, возникает значительный интерес для выявления большого количества NNRTIs со сниженной способностью к развитию резистентности (Pedersen & Pedersen, Ref.15).

Имеются сообщения о нескоторых производных индола, включая индол-3-сульфоны, пиперазининдолы, пиразининдолы и производные 5Н-индоло[3,2-b][1,5]бензотиазепина, как об ингибиторах обратимости ВИЧ-1 транскриптазы (Greenlee et al., Ref.1; Williams et al., Ref.2; Romero et al., Ref.3; Font et al., Ref.17; Romero et al., Ref.18; Young et al., Ref.19; Genin et al., Ref.20; Silvestri et al., Ref.21). Индольные 2-карбоксамиды также были описаны как ингибиторы клеточной адгезии и ВИЧ-инфекции (Boschelli et al., US 5,424,329, Ref.4). И, наконец, были описаны как ингибиторы ВИЧ-1 протеазы природные продукты на основе 3-замещенного индола (семикохлиодинол А и В, дидеметиластерихинон и изокохлиодинол (Semicochliodinol А и В, didemethylasterriquinone и isocochliodinol) (Fredenhagen et al., Ref.22).

Ранее были описаны близкие по структуре производные азаиндоламида (Kato et al., Ref.23; Levacher et al., Ref.24; Mantovanini et al., Ref.5(a); Cassidy et al., Ref.5(b); Scherlock et al., Ref.5(с)). Однако эти структуры представляют собой скорее азаиндолмоноамиды, чем несимметричные производные азаиндолпиперазиндиамида и, кроме того, отсутствуют упоминания о применении этих соединений для лечения антивирусных инфекций, в частности ВИЧ-инфекции. Ничто в перечисленных ссылках не может быть определено, как раскрытие или предположение относительно новых соединений по настоящему изобретению и их применения для ингибирования ВИЧ-инфекции.

КРАТКОЕ СОДЕРЖАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение включает в себя соединения формулы I или их фармацевтически приемлемые соли, которые являются эффективными антивирусными агентами, в частности действуют как ВИЧ ингибиторы.

где:

выбирают из группы, состоящей из

R₁, R₂, R₃, R₄ каждый независимо выбран из группы, состоящей из Н, C₁-C₆ алкила,

С₂-С₆алкенила, галогена, -CN, фенила, нитро, OC(O)R₁₅, C(O)R₁₅, C(O)OR₁₆ , OR₁₉, SR₂₀ и NR₂₁R ₂₂;

R₁₅ независимо выбран из группы, включающей Н, C₁-С₆алкил и С₂-С₆ алкенил;

R₁₆, R₁₉ и R₂₀ каждый независимо выбран из группы, включающей Н, C₁ -С₆алкил, C₁-C₆алкил, замещенный от одного до трех атомами галогена;

R₂₁ и R ₂₂ каждый независимо выбран из группы, включающей Н, ОН, C₁-С₆алкил;

R₅ представляет собой (O)_m, где m имеет значение 0 или 1;

n имеет значение 1 или 2;

R₆ выбирают из группы, включающей Н, С₁-С₆алкил, С₃ -С₆алкенил, C(O)R₂₄, C(O)OR₂₅ ; при условии, что атомы углерода, которые содержат углерод-углеродную двойную связь указанного С₃-С₆алкенила, не являются точкой присоединения к азоту, к которому присоединен R₆;

R₂₄ выбирают из группы, состоящей из Н, C₁-C₆алкила;

R₂₅ представляет собой C₁-C₆алкил;

R ₇, R₈, R₉, R₁₀, R ₁₁, R₁₂, R₁₃ и R₁₄ каждый независимо выбран из группы, включающей Н, C₁ -C₆алкил;

Ar выбирают из группы, включающей

A₁, А₂, А₃, А₄ , A₅, B₁, B₂, В₃, В₄, C₁, C₂, С₃ каждый независимо выбран из группы, включающей Н, галоген, C₁ -C₆алкил, -CN, нитро, N₃.

Предпочтительными являются соединения формулы I или их фармацевтически приемлемые соли, в которых R₂-R₄ независимо представляет собой Н, -ОСН₃, -ОСН₂CF₃, -OiPr, -OnPr, CN, NO₂, C₁-С₆алкил, NHOH, NH₂, SR₂₀ или N(СН₃) ₂.

Также предпочтительны соединения формулы I, в которых один или два R₇-R₁₄ независимо представляют собой метил, а другие заместители представляют собой водород.

Также предпочтительны соединения формулы I, в которых один из A₁-A₅, В₁-B ₄, C₁-С₃ представляют собой либо водород, галоген, или амино и остальные заместители представляют собой водород.

Также предпочтительны соединения формулы, приведенной ниже

где

R₂ представляет собой Н, F, Cl, Br, OMe, CN или ОН;

R₄ представляет собой C ₁-C₆алкил, С₂-С₆алкенил, Cl, OMe, CN, ОН, Ph или -С(O)СН₃;

n имеет значение 2;

R₈, R₉, R₁₀, R ₁₁, R₁₂, R₁₃ и R₁₄ каждый независимо является Н или СН₃ при условии, что вплоть до двух этих заместителей могут быть метилом;

R₁ представляет собой водород;

R₅ является незамещенным;

R₆ представляет собой водород или метил.

К наиболее предпочтительным относятся соединения или их фармацевтически приемлемые соли следующей формулы

где

R₂ представляет собой Н, -ОСН ₃, -OCH₂CF₃, -OPr, галоген, CN, NO ₂ или NHOH;

R₄ представляет собой Н, -галоген, -CN или гидрокси;

Один или два члена R ₇-R₁₄ представляют собой метил и оставшиеся члены представляют собой водород;

n имеет значение 2;

R₁ представляет собой водород;

R₅ представляет собой (O)_m, где m представляют собой О;

R₆ представляет собой водород, метил, или аллил.

К другим наиболее предпочтительным относятся соединения формулы

где

R₂ выбирают из группы, включающей Н, F, Cl, Br, OMe, CN и ОН;

R₄ выбирают из группы, включающей Н, C₁-C₆алкил, С₂ -С₆алкенил, Cl, OMe, CN, ОН, фенил и -С(O)СН₃ ;

n имеет значение 2;

R₈, R ₉, R₁₀, R₁₁, R₁₂, R ₁₃ и R₁₄ каждый независимо является Н или СН ₃ при условии, что 0-2 членов группы R₈ , R₉, R₁₀, R₁₁, R₁₂ , R₁₃ и R₁₄ могут быть СН₃, а остальные члены группы R₈, R₉, R ₁₀, R₁₁, R₁₂, R₁₃ и R ₁₄ являются Н;

R₆ представляет собой Н или СН₃.

К другим наиболее предпочтительным аспектам изобретения относятся соединения формулы, приведенной ниже

где

R₄ выбирают из группы, включающей Н, C₁-C₆алкил, С₂-С₆ алкенил, Cl, ОМе, CN, ОН, фенил и -С(O)СН₃;

n имеет значение 2;

R₈, R₉, R ₁₀, R₁₁, R₁₂, R₁₃ и R ₁₄ каждый независимо является Н или СН₃ при условии, что 0-2 членов группы R₈, R₉, R₁₀, R₁₁, R₁₂, R₁₃ и R₁₄ могут быть СН₃, а остальные члены группы R₈, R₉, R₁₀, R₁₁ , R₁₂, R₁₃ и R₁₄ являются Н;

R₆ представляет собой Н или СН₃ .

Поскольку соединения в соответствии с настоящим изобретением могут иметь асимметричные центры и соответственно существовать в виде смесей диастереоизомеров и энантиомеров, настоящее изобретение включает индивидуаьные формы диастереоизомеров и энантиомеров соединений формулы I.

ДЕТАЛЬНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Препаративные процессы и анти-ВИЧ-1 активность новых аналогов азаиндолпиперазиндиамида формулы I приведены ниже. Далее приведены также определения различных терминов.

Термин «С₁ -C₆алкил», как его используют в описании и в формуле изобретения (если контекст не указывает на другое), означает линейные или разветвленные цепи алкильных групп, такие как метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, трет-бутил, амил, гексил и тому подобное. Аналогично "C₁-₆алкенил" или "C₁-₆алкинил" включает линейные или разветвленные цепочечные группы.

"Галоген" имеет отношение к хлору, брому, йоду или фтору.

Физиологически приемлемые соли и пролекарства соединений, описанные здесь, входят в границы настоящего изобретения. Термин фармацевтически приемлемые соли, как его используют в описании и в формуле изобретения, как предполагается, включает нетоксичные основные аддитивные соли. Пригодные соли включают те, которые получают из органических и неорганическх кислот, таких как без ограничения соляная кислота, бромистоводородная кислота, фосфорная кислота, серная кислота, метансульфоновая кислота, уксусная кислота, винная кислота, молочная кислота, сульфиновая кислота, лимонная кислота, малеиновая кислота, фумаровая кислота, сорбиновая кислота, аконитовая кислота, салициловая кислота, фталевая кислота и тому подобное. Термин фармацевтически приемлемая соль, как его здесь используют, как предполагается, включает соли кислотных групп, таких как карбоксилат, с такими притивоионами, как аммоний, соли щелочных металлов, в частности натрия или калия, соли щелочноземельных металлов, в частности кальция или магния, и соли с пригодными органическими основаниями, такие как низшие алкиламины (метиламин, этиламин, циклогексиламин и тому подобное), или замещенные низшие алкиламины (например, гидроксилзамещенные алкиламины, такие как диэтаноламин, триэтаноламин или трис(гидроксиметил)-аминометан), или с основаниями, такими как пиперидин или морфолин.

В способе настоящего изобретения термин "антивирусное эффективное количество" означает общее количество каждого активного компонента способа, которое достаточно, чтобы показать заметное преимущество при лечении больных, то есть достигнуть исцеления острого состояния, характеризуемое ингибированием ВИЧ-инфекции. Когда термин применяют для индивидуальных активных инградиентов, вводимых по единому, он относится к одному ингредиенту. Когда термин применяют к комбинации, он имеет отношение к объединенному количеству активных ингредиентов, как результат терапевтического эффекта, при введении в комбинации, последовательно или одновременно. Термины "обрабатывать, лечение, обработка", как их используют в настоящем изобретении и в формуле изобретения, означает предотвращение или улучшение состояния при заболеваниях, связанных с ВИЧ-инфекцией.

Настоящее изобретение также направлено на комбинации (или сочетании) соединений с одним или более представителями, пригодными для лечения СПИДа. Например, соединения настоящего изобретения могут эффективно вводиться либо в периоды предварительного выявления и/или последующего выявления, в комбинации с эффективным количеством антивирусных препаратов против СПИДа, иммуномодуляторов, противоинфекционных препаратов или вакцин, таких как приведены в таблице 1.

Таблица 1 АНТИВИРУСНЫЕ ПРЕПАРАТЫ
Лекарственный препарат, Название	Производитель	Показания
097	Hoechst/Bayer	ВИЧ-инфекция, СПИД, ARC (ингибитор RT)
Ампренивир 141 W94 GW141	Glaxo Wellcome	ВИЧ-инфекция, СПИД, ARC (ингибитор протеазы)
Абакавир (1592U89) GW1592	Glaxo Wellcome	ВИЧ-инфекция, СПИД, ARC (ингибитор RT)
Ацематан	Carrington Labs (Irving, TX)	ARC
Ацикловир	Burroughs Wellcome	ВИЧ-инфекция, СПИД, ARC, в комбинации с AZT
AD-439	Tanox Biosystems	ВИЧ-инфекция, СПИД, ARC
AD-519	Tanox Biosystems	ВИЧ-инфекция, СПИД, ARC
Адефовир дипивоксил	Gilead Sciences	ВИЧ-инфекция
AL-721	Ethigen (Los Angeles, CA)	ARC, PGL ВИЧ-инфекция положительная, СПИД
Альфа интерферон	Glaxo Wellcome	Саркома Капози, ВИЧ-инфекция в комбинации с w/ретровирусом
Анзалицин LM.427	Adria Laboratories (Dublin, ОН) Erbamont (Stamford, CT)	ARC
Антитело, которое нейтрализует рН лабильный альфа абберантный интерферон	Advanced Biotherapy Concepts (Rockville, MD)	СПИД, ARC
AR177	Aronex Pharm	ВИЧ-инфекция, СПИД, ARC
бета-фтор-ddA	Nat'l Cancer Institute	Связанные со СПИДом болезни
BMS-232623 (CGP-73547)	Bristol-Myers Squibb/ Novartis	ВИЧ-инфекция, СПИД, ARC (ингибитор протеазы)
BMS-234475 (CGP-61755)	Bristol-Myers Squibb/Novartis	ВИЧ-инфекция, СПИД, ARC (ингибитор протеазы)
Сl-1012	Wamer-Lambert	ВИЧ-1 инфекция
Цидофовир	Gilead Science	CMV ретинит герпес, вирусная папилома
Сульфат курдлана	AJI Pharma USA	ВИЧ-инфекция
Цитомегаловирус иммуннглобулин	Medlmmune	CMV ретиниты
Цитовенодный Ганцикловир	Syntex	Угроза зрению CMV
		перефирийные CMV ретиниты
Делавиридин	Pharmacia-Upjohn	ВИЧ-инфекция, СПИД, ARC (RT нгибитор)
Сульфат декстрана	Ueno Fine Chem. Inc. Ltd. (Osaka, Japan)	СПИД, ARC, ВИЧ-инфекция Положительная асимптоматика
ddC Дидезоксицитрон	Hoffinan-La Roche	ВИЧ-инфекция, СПИД, ARC
ddl Дидезоксицитрон	Bristol-Myers Squibb	ВИЧ-инфекция, СПИД, ARC; комбинация с AZT/d4T
DMP-450	AVID(Camden,NJ)	ВИЧ-инфекция, СПИД, ARC (ингибитор протеазы)
Эфавиренц (DMP 266) (-)6-хлор-4-(S)-циклопропилэтинил-4(S)-трифтор-метил-1,4-дигидро-2Н-3,1-бензоксазин-2-он, СТОКРИН	DuPont Merck	ВИЧ-инфекция, СПИД. ARC (ненуклеозидный RT ингибитор)
EL10	Elan Corp, PLC (Gainesville, GA)	ВИЧ-инфекция
Фамцикловир	Smith Kline	герпес опоясывающий лишай, герпес симплексный
FTC	Emory University	ВИЧ-инфекция, СПИД, ARC (ингибитор транскриптазы)
GS840	Hoechst Marion Roussel	ВИЧ-инфекция, СПИД, ARC (ингибитор транскриптазы)
HBY097	Gilead	ВИЧ-инфекция, СПИД, ARC (ненуклеозидные Ингибиторы транскриптазы)
Гиперицин	VIMRx Pharm.	ВИЧ-инфекция, СПИД, ARC
Рекомбинаторный интерферон бета человеческий	Triton Biosciences (Almeda, CA)	СПИД, Саркома Капози, ARC
Интерферон альфа-n3	hiterferon Sciences	ARC, СПИД
Индинавир	Merck	ВИЧ-инфекция, СПИД, ARC, бессимптомная ВИЧ-инфекция положительная, также в комбинации с AZT/ddl/ddC
ISIS 2922	ISIS Pharmaceuticals	CMV ретиниты
KNI-272	Nat'l Cancer Institute diseases	болезни, ассоциированные с ВИЧ-инфекцией
Ламивудин, 3ТС	Glaxo Wellcome	ВИЧ-инфекция, СПИД. ARC (ингибитор транскриптазы);
		также с AZT
Лабукавир	Bristol-Myers Squibb	CMV инфекция
Нелфинавир	Agouron Pharmaceuticals	ВИЧ-инфекция, СПИД, ARC (ингибитор протеазы)
Невирапин	Boeheringer bigleheim	ВИЧ-инфекция, СПИД, ARC (RT ингибитор)
Новапрен	Novaferon Labs, Inc. (Akron, OH)	ВИЧ-ингибитор инфекции
Пептид Т октановая последовательность	Peninsula Labs (Behnont, CA)	СПИД
Фосфоноформиат	Astra Pharm. Products, Inc.	CMV ретиниты, ВИЧ-инфекция, другие CMV инфекции
PNU-140690	Pharmacia Upjohn	ВИЧ-инфекция, СПИД, ARC (ингибитор протеазы)
Пробукол	Vyrex Sheffield Med. Tech (Houston, TX)	ВИЧ-инфекция, СПИД
Ривонавир	Abbott	ВИЧ-инфекция,
		СПИД, ARC (ингибитор протеазы)
Саквинавир	Hoffinann-LaRoche	ВИЧ-инфекция, СПИД, ARC (ингибитор протеазы)
Ставудин d4T Дидегидродезокситимидин	Bristol-Myers Squibb	ВИЧ-инфекция, СПИД, ARC
Валахщкловир	Glaxo Wellcome	Генитальные HSV & CMV инфекции
Виразол Рибавирин	Viratek/ICN (Costa Mesa, CA)	Бессимптомная ВИЧ-инфекция положительная, LAS, ARC
VX-478	Vertex	ВИЧ-инфекция, СПИД, ARC
Залцитабин	Hofflnann-LaRoche	ВИЧ-инфекция, СПИД. ARC, с AZT
Зидовудин; AZT	Glaxo Wellcome	ВИЧ-инфекция, СПИД. ARC, Саркома Капози, в комбинации с др. терапиями

Таблица 2 ИММУНОМОДУЛЯТОРЫ
Лекарст. препарат, название	Производитель	Показания
AS-101	Wyeth-Ayerst	СПИД
Бропиримин	Pharmacia Upjohn	Развитый СПИД
Ацеман	Carrington Labs, Inc. (Irving, TX)	СПИД, ARC
CL246.738	American Cyanamid Lederle Labs	СПИД, Саркома Капози
EL10	Elan Corp, PLC (Gainesville, GA)	ВИЧ-инфекция
FP-21399	Fuki Immunol Pharm	Блоки ВИЧ-инфекций, объединенные с CD4+клетки
Гамма Интерферон	Genentech	ARC, в комбинации с w/TNF (фактор некроза опухоли)
Гранулоцитный Макрофаговая колония стимулирующего фактора	Genetics Institute Sandoz	СПИД
Гранулоцитный Макрофаговая колония стимулирующего фактора	Hoechst-Roussel Immunex	СПИД
Гранулоцитный Макрофаговая колония стимулирующего фактора	Schermg-Plough	СПИД, ВИЧ-инфекция комбинация с w/AZT
Hiv Core Particle Иммуностимулянт	Rorer	Серопозитивная ВИЧ-инфекция
IL-2 Интерлейкин-2	Cetus	СПИД, в комбинации w/AZT
IL-2 Интерлейкин-2	Hoffman-LaRoche Immunex	СПИД, ARC, ВИЧ-инфекция в комбинации w/AZT
IL-2 Интерлейкин-2 (альдеслукин)	Chiron	СПИД, увеличение CD4 в клеточном отсчете
Иммуноглобулин внутривенный (человека)	Cutter Biological (Berkeley, CA)	Педиатрия СПИДа, в комбинации w/AZT
IMREG-1	Imreg (New Orleans, LA)	СПИД, Саркома Капози, ARC, PGL
IMREG-2	Imreg	СПИД, Саркома Капози, ARC, PGL
	(New Orleans, LA)
Имутиол диэтил-дитокарбамат	Merieux Institute	СПИД, ARC
Альфа-2 Интерферон	Schering Plough	Саркома Капози w/AZT, СПИД
Метионин Энкефалин	TNI Pharmaceutical (Chicago, IL)	СПИД, ARC
МТР-РЕ Мирамил-Трипетит	Ciba-Geigy Corp.	Саркома Капози
Гранулоционная колония фактора стимул.	Amgen	СПИД, в комбинация w/AZT
Ремун	Immune Response Corp.	Иммунотерапия
rCD4 Рекомбинационный растворимый чел. CD4	Genentech	СПИД, ARC
rCD4-lgG гибриды		СПИД, ARC
Рекомбинационный растворимый чел. CD4
Интерферон Альфа 2а	Hoffman-La Roche	Саркома Калози СПИД, ARC в комбинации w/AZT
SK&F106528 Растворимый Т4	Smith Kline	ВИЧ-инфекция
Тимопентин	Immunobiology Research Institute (Annandale, NJ)	ВИЧ-инфекция
Фактор некроза опухоли; TNF	Genentech	ARC, в комбинации с w/гамма интерфероном

Таблица 3 ПРОТИВОИНФЕКЦИОННЫЕ
Лекарственный препарат название	Производитель	Показания
Клидамицин с Примахином	Pharmacia Upjohn	PCP
Флуконазол	Pfizer	Криптококковый менингит, кандидиоз
Pastille Нистагин Pastille	Squibb Corp.	Предотвращение орального кандидамикоза
Орнидол Эфлорнитин	Merrell Dow	PCP
Пентамидин Изетионат (ТМ & IV)	LyphoMed (Rosemont, IL)	PCP лечение
Триметоприн		Антибактериальный
Триметоприн/ сульфа		Антибактериальный
Пиритрексим	Burroughs Wellcome	РСР-лечение
Пентамидин изетион для ингаляции	Fisons Corporation	PCP-профилактика
Спирамицин	Rhone-Poulenc	Криптоспоридийная Диарея
		менингит
Триметотриксат	Warner-Lambert	PCP
Даунорубицин	NeXstar, Sequus	Саркома капози
Рекомбинационный Человеческий эритропоэтин	Ortho Phaim. Corp	Серьезная ассоц. анемия с AZT терапией
Рекомбинационный Человеческий гормон	Serono	СПИД-связан. Изнурение, кахексия
Ацетат Мегестрола	Bristol-Myers Squibb	Лечение ассоц. анорексии, W/СПИД
Тестостерон	Alza, Smith Kline	СПИД-изнурение
Общее энтеральное питание	Norwich Eaton Pharmaceuticals	Диарея и малабсорбция, связанные СПИД

Кроме того, соединения по настоящему изобретению могут быть применены в комбинациях, которые включают, более чем три анти-ВИЧ лекарственных препарата. Были исследованы комбинации четырех или даже пяти ВИЧ лекарственных препаратов и, как ожидается, соединения настоящего изобретения будут полезным компонентом таких комбинаций.

Кроме того, соединения по настоящему изобретению могут быть применены в комбинации с другим классом веществ для лечения СПИДа, которые называются ВИЧ входящими ингибиторами. Примеры таких ВИЧ входящих ингибиторов рассмотрены в DRUGS OF THE FUTURE 1999. 24(12), pp.1355-1362; CELL, Vol.9, pp.243-246, Oct.29, 1999; and DRUG DISCOVERY TODAY, Vol.5, №5, May 2000, pp.183-194.

Подразумевается, что набор комбинаций соединений по настоящему изобретению с противовирусными препаратами против СПИДа, иммуномодуляторами, противоинфекционными препаратами, ВИЧ входящими ингибиторами или вакцинами, не ограничивается списком в вышеупомянутой таблице, и он может включать в принципе любую комбинацию с любой фармацевтической структурой, полезной для лечения СПИДа.

Предпочтительными являются сочетания для одновременного или альтернативного лечения, содержащие соединения по настоящему изобретению и ингибиторы ВИЧ-протеазы и/или ненуклеозидный ингибитор - обратимости ВИЧ транскриптазы. Необязательным четвертым компонентом в комбинации является нуклеозидный ингибитор обратимости ВИЧ транскриптазы, такой как AZT, ЗТС, ddC или ddl. Предпочтительным ингибитором ВИЧ-протеазы является индинавир, который представляет собой сульфатную соль N-(2(R)-гидрокси-1-(S)-инданил)-2(R)-фенилметил-4-(S)-гидрокси-5-(1-(4-(3-пиридилметил)-2(S)-N'-(трет-бутилкарбоксамидо)-пиперазинил))-пентанамида этанолата, который синтезируют согласно US 5413999. Индинавир обычно вводят в виде дозы 800 мг три раза в день. Другие предпочтительные ингибиторы протеазы представляют собой нелфинавир и ритонавир. Другой предпочтительный ингибитор ВИЧ-протеазы представляет собой саквинавир, который вводят в дозе 600 или 1200 мг в день. И наконец, новый ингибитор протеазы, BMS-232632, который на текущий момент проходит клинические испытания, может стать предпочтительным ингибитором. Предпочтительные ненуклеозидные ингибиторы ВИЧ-обратимости транскриптазы включают эфавиренц. Получение ddC, ddl и AZT также описано в ЕРО 0484071. Указанные комбинации могут оказывать неожиданное воздействие на сокращение распространения и степени инфецирования ВИЧ-инфекцией. Предпочтительные сочетания включают следующие сочетания (1) индинавир с эфавиренцом и, необязательно, AZT, и/или 3ТС, и/или ddl и/или ddC; (2) индинавир и любой из AZT, и/или ddl, и/или ddC, и/или 3ТС, в особенности индинавир и AZT и 3ТС; (3) ставудин и ЗТС и/или зидовудин; (4) зидовудин и ламивудин, и 141W94 и 1592U89; (5) зидовудин и ламивудин.

В таких сочетаниях соединение по настоящему изобретению и другие активные агенты могут быть введены отдельно или все вместе. В дополнение к сказанному, введение одного элемента может быть осуществлено до, во время или последовательно с введением других агентов (а).

Родственные азаиндолы, такие как 4-азаиндол, 5-азаиндол, 6-азаиндол или 7-азаиндол, получают с помощью методик, описанных в литературе (Mahadevan et al., Ref.25(a)) или Hands et. al. Ref.25(b) и они являются коммерчески доступными (7-азаиндол из Aldrich Co.). В указанной ссылке, а также в аналогичных ссылках приведены некоторые примеры замещенных азаиндолов. Специалист в данной области может определить общую методику, которая распространяется на азаиндолы, имеющие различные заместители в исходных продуктах. Азаиндолы могут быть также получены через пути, описанные на схемах 1 и 2.

На схеме 1 синтез индола по Бартоли (Dobson et al., Ref.25(С)) распространен на получение замещенных азаиндолов. Нитропиридин 22 взаимодействует с избытком винилмагнийбромида при -78°С. После нагревания до -20°С получают желаемый азаиндол 1. Как правило, эти температурные интервалы являются оптимальными, но в конкретных примерах могут варьироваться обычно не более, чем на 20°С, однако случается и более, чтобы оптимизировать выход. Винилмагнийбромид является коммерческим продуктом, который получают в виде раствора в тетрагидрофуране или в некоторых случаях более оптимально его можно готовить в свежем виде из винилбромида и магния, используя известные методики. Винилмагнийхлорид также может быть применен в других примерах.

На схеме 2 ацетилен конденсируют с галогенпиридином 23 при использовании Pd(0) катализатора, чтобы получить 24. Последующая обработка основанием приводит к циклизации 24, что дает желаемый азаиндол 1 (Sakamoto et al., Ref.26). Пригодные основания для второй стадии включают метилат натрия, алкоксидные основания натрия, лития или калия.

Общие методики получения азаиндолпиперазиндиамида 5 формулы I описаны на схеме 3 и схеме 4.

Азаиндол 1, реагирует с MeMgl (метилмагнийиодид) и ZnCl ₂ (хлорид цинка), после чего добавляют ClCOCOOMe (метилхлороксоацетат), что дает глиоксилметиловый эфир 2 азаиндола (Shadrina et al., Ref.27). Альтернативно соединение 2 может быть получено путем взаимодействия азаиндола 1 с избытком ClCOCOOMe в присутствии AICI₃ (хлорида алюминия) (Sycheva et al., Ref.28). Гидролиз метилового эфира 2 дает калийную соль 3, которую подвергают конденсации с монобензоилированными производными пиперазина 4 в присутствии DEPBT (3-(диэтоксифосфорилокси)-1,2,3-бензотриазин-4(3Н)-оном) и N,N-диизопропилэтиламином, обычно известных как основание Ханига, чтобы получить азаиндолпиперазиндиамид 5 (Li et al., Ref.29). Монобензоилированные производные пиперазина 4 могут быть получены согласно хорошо разработанной методике, такой как описана у Desai et al., Ref.30(a), Adamczyk et al., Ref.30(b), Rossen et al., Ref.30(c) и Wang et al., 30(д) и 30(е).

Альтернативная методика получения 5 включает обработку азаиндола 1, полученного как описано в литературе или из коммерческих источников с MeMgl и ZnCl₂, с последующим добавлением ClCOCOCl (оксалилхлорида) либо в ТГФ (тетрагидрофуране), либо в этиловом эфире, что дает смесь желаемого продукта, глиоксилхлорида 6 и ацилхлорида 1, схема 4. Полученную смесь глиоксилхлорида 6 и ацилхлорида 7 затем конденсируют с монобензоилированными производными пиперазина 4 в основных условиях, что дает продукт 5 в виде смеси двух соединений (n=1 и 2).

Общие пути дальнейшей фунционализации азаиндольных колец приведены на схеме 5. Должно быть понятно, что символ RX означает, что он представляет собой общее определение остальных заместителей из R₄-R ₂, которые находятся на азаиндольном кольце. Как показано на схеме 5, азаиндол может быть окислен до соответствующего N-оксидного производного 8 при использовании mCPBA (метахлорпербензойной кислотой) в ацетоне или ДМФА (диметилформамиде) (уравнение (ур.) 1, Harada et al., Ref.31 и Antonini et al., Ref.32). N-оксид 8 может быть превращен в различные замещенные производные азаиндола, используя хорошо известные реагенты, такие как оксихлорид фосфора (POCl₃) (ур.2, Schneller et al., Ref.33(a)) или трибромид фосфора (ур.2, Wozniak et al., Ref.33(b)), реагенты Гриньяра RMgX (R=алкил, Х=Cl, Br или I) (ур.4, Shiotani et al., Ref.34), триметилсилилциамид (TMSCN) (yp.5, Minakata et al., Ref.35), Ac₂O (yp.6, Klemm et al., Ref.36), тиол через тиолат натрия или другие тиолаты (ур.7, Shiotani et al., Ref.37), спирт через алкоксиды металла, как в ссылке 37 или (ур.8, Hayashida et al., Ref.38) и амин (ур.9, используя аммиак или амин в присутствии TsCl в хлорформе/воде как у Miura et al., Ref.39; или в аналогичных условиях, но 10% водным раствором NaOH, также описанным в Solekhova et al., Ref.40). В таких условиях (соответственно) атом хлора или брома, нитрильная группа, алкильная группа, гидроксильная группа, тиольная группа, апкоксигруппа и аминогруппа могут быть включены в пиридиновое кольцо. Аналогично тетраметиламмоний фторид (Me₄NF) превращает N-оксиды 8 во фторазаиндолы (ур.3). Дальнейшие стандартные модификации ОН группы также хорошо обеспечивают алкоксифункцию (ур.6).

Нитрирование N-оксидов азаиндола приводит к включению нитрогруппы азаиндольное кольцо, как показано на схеме 6 (ур.10, Antonini et al., Ref.32). Нитрогруппа может быть затем замещена с помощью различных нуклефильных агентов, таких как OR, NR ¹R² или SR, по хорошо известной химической схеме (ур.11, Regnouf De Vains et al., Ref.41(a), Miura et al., Ref.41(b), Profft et al., Ref.41(с)). Полученные N-оксиды 16 быстро восстанавливают до соответствующих азаиндолов 17, используя трихлорид фосфора (PCl₃) (ур.12, Antonini et al., Ref.32 и Nesi et al., Ref.42) или другие восстанавливающие агенты. Аналогично нитрозамещенный N-оксид 15 может быть восстановлен до азаиндола 18, используя трихлорид фосфора (ур.13). Нитрогруппа соединения 18 может быть восстановлена до любого гидроксиламина (NHOH) (ур.14, Walser et al., Ref.43(a) и Barker et al., Ref.43(b)) или амино (NH ₂) группы (ур.15, Nesi et al., Ref.42 и Ayyangar et al., Ref.44) путем тщательного подбора различных условий восстановления.

Алкилирование атома азота в позиции 1 производных азаиндола может быть достигнуто, используя NaH в качестве основания, ДМФА как растворителя и алоилгалоида или сульфоната в качестве алкилирующего агента, согласно процессу, описанному в литературе (Mahadevan et al., Ref.45) (ур.16, схема 7).

Галоиды могут быть превращены в разнообразные функциональности, такие как нитрил (ур.17), аминогруппа (ур.18) и/или алкоксигруппа (ур.19) (Схема 8), используя хорошо разработанные методики. Примеры указанных типов превращений, раскрытых в равенстве, приведенном в ур.17, раскрыты в Sakamoto et al. (Ref.46(а)), где цианид меди используют для образования нитрила из галоида, у Halley et al. (Ref.46(b)), который получает нитрилы через цианид меди I в ДМФА, Yamaguchi et al. (Ref.46 (c)), Funhoff et al. (Ref.46(д)), а также используют CuCN в NMP, Shiotani et al. (Ref.37). Обычно реакция CuCN для замещения галогена требует нагревания. Температуры, такие как 145°С в течение 18 часов, как было найдено, являются предпочтительными, но эти условия могут варьироваться. Температура может быть повышена или понижена вплоть до 100°С и время реакции может варьироваться от столь небольшого как 30 минут, до столь длинного как 80 часов в зависимости от температуры реакции и субстрата. Как альтернатива уравнению 17, Klimesova et al. используют в качестве исходного первичный амид (который может быть получен из карбоновой кислоты, как широко описано) и оксихлоридфосфор для образования нитрила (Ref.47) и Katputzky et al. (Ref.48). Как показано в уравнении 18, галоиды могут быть замещены аминами или аммиаком. Некоторые примерные условия описаны в Shiotani et. al. ссылка 37 и в Katputzky et.al. ссылка 48. Например, нагревание галоида 9 в избытке первичного или вторичного амина как растворителя при температуре кипения (или между 20°С и 200°С) приводит к замещению галогена, что обеспечивает амины 27. В случае аммиака или летучих аминов может быть использован автоклав, как описано в Katputzky et al. ссылка 48, чтобы осуществлять реакцию без потери летучего амина при нагревании. Реакции могут быть отслежены с помощью ТСХ или жидкостной хроматографии, при этом температуру реакции поднимают пока осуществляется взаимодействие. Поскольку амин дорог, можно применять диоксаны или пиридины в качестве сорастворителей. Альтернативная методика применяет модифицированный метод палладиевого катализа по Hartwig (Yale) или Buchwald (MIT), чтобы вызвать замещения.в мягких условиях. Как показано в ур.19 на схеме 8, алкоксиды могут быть использованы для замещения галогенов в 9, чтобы обеспечить эфиры 26. Обычно указанное превращение лучшие осуществлять при добавлении натрия к раствору родственного спирта, чтобы образовать алканоат. В качестве альтернативы можно использовать сильное основание, такое как NaH, или NaN(SiMe ₃)₂. Соответствующие литиевые или калийные основания, а также металлы также могут быть использованы. Обычно используют избыток основания относительно галогена, который должен быть замещен. Кроме того, обычно используют от двух до двадцати эквивалентов алконоата при десяти предпочтительных. Реакцию осуществляют при кипении с обратным холодильником или при температуре от 30°С до 200°С. Как правило, приблизительно 80°С являются оптимальными. Реакция протекает в течение от четырех до восьми часов до ее полного завершения, обычно от 12 до 48 часов. Как описано выше в ур.18, реакцию можно отслеживать. Обычные условия для замещения с помощью метилата натрия в метаноле раскрыты в Shiotani et al. ссылка 37, в общей методике, используемой для получения продуктов примеров 5а, 5с и 6 ссылки.

Нитрильная группа может быть превращена в карбоновую кислоту 28 (ур.20) при использовании водного раствора гидроксида натрия в этаноле по Miletin et al., Ref.49(а); или, используя КОН в водном растворе этанола по Shiotani et al., Ref.49(b); или, используя 6N HCl как в El Hadri et al., Ref.49(с)). Нитрильная группа может быть превращена в сложный эфир 29 (ур.21), используя метоксид натрия в метаноле по Heirtzler et al., Ref.50(а); или, используя HCl в метаноле по Norrby et al., Ref.50(b)). Нитрильная группа может быть превращена в амид 30 (ур.22), используя серную кислоту по Sitsun'Van et al., Ref.51(а); или, используя уксусную кислоту, трет-бутанол, серную кислоту и ацетонитрил по Reich et al., 51(b); или, используя MeOS(O)₂F no Salfetnikova et al., 51(с)).

На схема 10 метильная группа на пиридиновом кольце может быть также окислена до карбоновой кислоты 28 при использовании К₂Cr₂O₇ в 98% серной кислоте как в ур.23, Oki et al., Ref.52(а); или, используя триоксид хрома в конц. серной кислоте по Garelli et al., Ref.52(b); или, используя диоксид селена в пиридине по Koyama et al., Ref.52(с)). Карбоновая кислота может быть превращена в сложный эфир 29 при использовании HCl в 10% метаноле как в ур.24, Yasuda et al., Ref.53(а); или, используя тионилхлорида, а затем алкилалкоксид натрия по Levine et al., 53(b); или, используя спирт и РуВОР в NMM, DMAP и ДМФА по Hoemann, 53(с)).)). Карбоновая кислота может быть превращена в амид 30 при использовании водного раствора КОН с последующим оксалилхлоридом в бензоле, а затем триэтиламином в дихлорметане по (ур.25, Norman et al., Ref.54(а); или с помощью нагревания амина с кислотой по Jursic et al., 54(b); или путем присоединения амина к кислоте с помощью N,N-карбонилдиимидазола Strekowski et al., 54(с); или используя оксалилхлорид в диэтилэтиловом эфире и амин по Shi et al., 54(д)).

Альтернативная стратегия для синтеза соединения, содержащего различные заместители Аг, показана на схеме 11. Бензамидная часть диамида 5 может быть селективно гидролизована, что используют для получения промежуточного 31. Конденсация амина 31 с другими карбоновами кислотами в присутствии DEBPT и основания при использовании условий, описанных выше, для ранее описанных конденсаций обеспечивает другие новые диамиды 5.

Получение соединения 35, представленное на схеме 12, осуществляют из коммерчески доступного 32, как описано у dark, G. J.. ссылка 56. Методика Бартоли, описанная на схеме 1, использована для приготовления 4-метокси-6-азаиндола 36. Восстановление бромидов при использовании трансферного гидрирования обеспечивает желаемый 4-метоксииндол 37. Соединение 36 может быть превращено в разделяемую смесь монобромидов через селективный обмен бромида лития, используя трет-Buli при низких температурах, лежащих между от -100 до -78°, с последующим захолаживанием с помощью хлорида аммония.

Альтернативная методика, описанная на схеме 3 для ацилирования хлорметилоксалата в 3-положении, была применена к 37, что обеспечивает промежуточное 38. Затем следует осуществление методики на схеме 3, что обеспечивает соединение 39. Поскольку методика, описанная на схеме 12, является предпочтительным путем, по которому получают соединение 39 и другие соединения формулы I, был разработан альтернативный путь, приведенный на схеме 13 для получения таких соединений. Пиррол 40 получают по методике, описанной у Anderson, Н. J., ссылка 57; гидролиз эфира 40 осуществляют, используя стандартные условия, такие как гидроксид калия в этаноле при температуре окружающей среды в течение ˜2 часов или пока не завершится образование 2-пирролкарбоксальдегид-4-оксоацетата калия. Раствор указанной карбоксилатной соли, гидрохлорида N-бензоилпиперазина, 3-(диэтоксифосфорилокси)-1,2,3-бензотриазин-4(3Н)-она и триэтиламина в ДМФА перемешивают в течение приблизительно одного дня или пока не завершится реакция, что обеспечивает после выделения и крсталлизации амид 41. Амид/альдегид 41 перемешивают в виде взвеси в EtOH короткое время от 1 до 60 мин, охлаждают до 0°С (или до температуры между -15 и 20°), а затем перемешивают с гидрохлоридом глицинметилового эфира, триэтиламином (или альтернативно основанием Ханига, 2,6-лутидином или без основания) и цианборгидридом натрия, чтобы получить амин 42. Указанное превращение может быть выполнено, используя альдегид 41, гидрохлорид глицин метилового эфира и триацетоксиборгидрид натрия либо в дихлорметане, тетрагидрофуране или C₁ -C₄ спирте как растворителе. Альтернативно свободное основание глицинметилового эфира может быть замещено по другой методике и дегидратирующий агент, такой как молекулярные сита, может быть использован в реакции перед добавлением боргидрида как восстанавливающего агента. Альтернативно указанное превращение может быть выполнено при осуществлении вначале защиты пиррольного азота бензоилом (из бензоилхлорида и третичного амина) или бензильного остатка (бензилбромида, NaH или DBU в ТГФ). Защитные группы могут быть удалены при желании, используя соответственно гидролиз водным раствором основания или гидрирование соответственно. Метиловый эфир 42 гидролизуют, используя карбонат калия в метаноле, чтобы получить после подкисления с HCl соответствующую карбоновую кислоту. Кислоту помещают в безводную метансульфоновую кислоту, содержащую пентоксид фосфора, который заранее готовят за период от 15 до 40 минут и нагревают приблизительно до 110° (обычно между 90 и 150°) в течение короткого времени приблизительно 15 минут, но обычно менее чем час и затем выливают на лед. Ацилирование или бензоилирование продукта при использовании, например, модифицированных условий реакции Шоттен-Баумана (дихлорметан, карбонат калия и бензоилхлорид) обеспечивает кетон 43. Реакция с диметоксипропаном и безводной п-толуолсульфокислотой приводит к промежуточному енолу эфира, который в реакции с хлоранилом обеспечивает соединение 39. Енол эфира может быть альтернативно приготовлен, используя триметилортоацетат и сульфоновую кислоту как катализатор. Азаиндолы, такие как 39, могут быть переведены в нитрилы, которые являются разнообразными промежуточными продуктами, путем окисления до N-оксида, а затем взаимодействием с DEPC и TEA или оксихлоридом фосфора, а затем CuCN в ДМФА. Детали реакций превращения 41 в 43-45 при использовании этих условий на аналогичном субстрате описаны в ссылке 58, Suzuki, H.; Iwata, С.; Sakurai, К.; Tokumoto, К.; Takahashi, H.; Hanada, M.; Yokoyama, Y.; Murakami, Y., Tetpahedron, 1997, 53(5), 1593-1606. Необходимо отметить, что на схемах 12 и 13 4b может быть замещен любым субстратом, представленным формулой 4 на схеме 4. Также должно быть отмечено, что индолы 37, 39, 44 и 45 могут быть переработаны, используя подходящие химические реакции, которые описаны на схемах 5-11 и которые описывают общую методику функционализации азаиндолов.

DEPBT=3-(диэтоксифосфорилокси)- 1.2.3-бензотриазин-4(3Н)-он

DMP=2,2-диметоксипропан

DEPC=диэтилцианофосфонат

Схема 13

Должно быть отменчено, что 2-хлор-5-фтор-3-нитропиридин может быть приготовлен с помощью методики в примере 5В в ссылке 59 Marfat et al. Химические процессы на схемах 1 и 3 обеспечивают производное, которое соответствует общей формуле 5 и имеет 6-азакольцо и R₂=F и R₄=Cl. В частности, реакцией 2-хлор-5-фтор-3-нитропиридина с 3 эквивалентами винилмагнийбромида, используя обычные условия, описанные здесь, обеспечивают 4-фтор-7-хлор-6-азаиндол с высокий выходом. Добавление указанного соединения к раствору трихлорида алюминия в дихлорметане с последующим перемешиванием при температуре окружающей среды в течение 30 минут с хлорметил или хлорэтилоксалатом обеспечивает эфир. Гидролиз с помощью КОН в стандартных условиях обеспечивает соль кислоты, которая реагирует с пиперазинами 4 (например, 1-бензоилпиперазином) в присутствии DEPBT в стандартных условиях, описанных здесь, что обеспечивает соединение 5, описанное выше. Соединение, содержащее бензоилпиперазин представляет собой N-(бензоил)-N'-[(4-фтор-7-хлор-6-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин и представляет собой соединение 5av. 7-хлорная часть в 5av может быть использована в методиках указанного изобретения, что обеспечивает желаемые производные, в котором R₄ замещают согласно формуле изобретения. Например, экспонирование 5av с метилатом натрия в кипящем метаноле обеспечивает соединение 5aу, в котором 6-азаиндольное кольцо содержит 4-фтор- и 7-метоксизаместитель. Альтернативно 4-фтор-7-хлор-6-азаиндол может быть введен в реакцию с метилатом натрия, а затем проведен через последовательности, как описано выше, чтобы получить N-(бензоил)-N'-[(4-фтор-7-метокси-6-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин, 5ау. 4-Фтор-7-хлор-6-азаиндол может также быть введен в реакцию с CuCN/ДМФА, как описано в ур.17, чтобы получить 7-цианопромежуточное содержание, которое может быть гидролизовано до кислоты, как описано в ур.21 схема 9, используя HCl в СН₃ОН при комнатной температуре в течение 12 часов, с последующим нагреванием с обратным холодильником для завершения реакции. Кислота может быть превращена в мягких условиях в метиловый эфир добавлением диазометана в этиловом эфире к перемешиваемому раствору кислоты в диазометане при температуре окружающей среды или при более низкой температуре. Эти условия являются стандартными для использования диазометана, который приемлемо получают в виде раствора в диэтиловом эфире er Diazald®, в соответствии с инструкциями к набору от Aldrich Chemical Co. Метиловый эфир может быть проведен через ацилирование, используя оксалилхлорида, как показано в схема 4, а затем сконденсирован с пиперазином (бензоилпиперазином, например), чтобы получить соответствующий 4-фтор-7-карбометокси-6-азаиндол, который при добавлении к раствору метиламина в воде обеспечивает 5az, а именно N-(бензоил)-N'-[(4-фтор-7-(N-метилкарбоксамидо)-6-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин. Такие же химические последовательности описанные выше для 4-фтор-7-хлориндола, могут быть выполнены, используя 7-хлор-4-азаиндол и (R)-3-метил-N-бензоилпиперазин 4а, что обеспечивает 5abc, которое представляет собой (R)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(7-метокси-4-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин или 5abd, который представляет собой (R)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(7-(N-метикарбоксамидо)-4-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин. Исходный 7-хлор-4-азаиндол представляет собой соединение 11 и его приготовление описано, например, в экпериментальной части.

Должно быть понятно, что в дополнение к соединениям 5a-5abd соединения 8, 11-30, 39, 44 и 45 являются соединениями формулы I, входят в область изобретения.

Детальное описание многих методик получения аналогов пиперазина для указанного изобретения и условия для проведения их реакций, описаны в РСТ WO 00/76521, опубликованного December 21, 2000.

В общих методиках замещения азаиндольного кольца, описанных выше, каждый способ может быть применен несколько раз и допустимы комбинации процессов для получения азаиндолов, содержащих различные заместители. Применение указанных процессов обеспечивает другие соединения формулы I.

Антивирусная активность

Антивирусная активность соединений была определена на HeLa CD4 CCR5 клетках, инфицированных монофекций, вызываемой ВИЧ-1 репортерным вирусом в присутствии соединения при концентрациях 10 мкМ. Вирусная инфекция оценивалась в течение 3 дней после заражения путем определения экспрессии люциферазы из интегрированной вирусной ДНК вируса в инфицированных клетках (Chen et al., Ref.55). Процент ингибирования для каждого соединения высчитывается путем определения уровня экспрессии люциферазы в клетках, инфицированных в присутствии каждого соединения как процент указанных клеток, исследуемых к клеткам, инфецированным в отсутствии соединения и вычитанием таким образом определенной величины из 100. Соединения, которые демонстрируют антивирусную активность без заметной токсичности при концентрации 10 мкМ, представлены в Таблице 4.

Таблица 4

Соединение #	n	R 7-14	Средний % ингибирования при или 10 мкМ
5а	2	R7-13=H, R 14=(R)-Me	>99%
5b	2	R 7-8=R10-14=H, R9 =Et	90%
5c	1	R7-8 =R10-14-H, R9=Et	80%
5d	2	R7-14=H	98%
5е	2	R7-8=R10-14 =H, R9=Me	80%
5f	2	R7·13=H, R14 =(S)-Me	80%
5g	2	R 7·13=H, R14=Et	70%
5h	2	R7-12=H, R 13=R14=Me	80%
5i	2	R7-8=R10-13=H, R 9=R14=Me	89%

Соединение #	R	R 14	Средний % ингибирования при или 10 мкМ
5j	Н	Н	90%
5k	Н	(R)-Me	>99%

Соединение #	R	R 14	Средний % ингибирования при или 10 мкМ
5l	Н	(R)-Ме	>99%

Соединение #	R	R 14	Средний % ингибирования при или 10 мкМ
5n	Н	(R)-Ме	93%

Соединение #	Средний % ингибирования при или 10 мкМ
5m	60%

Соединение #	R2	Средний % ингибирования при или 10 мкМ
8а	H	90%
15а	NO2	70%
16а	Оме	>99%
16d	OEt	88%
16е	SPr	50%

Соед. #	R2	R4	R 14	Средний % ингибирования при или 10 мкМ
9а	Cl	H	(R)-Me	>99%
9b	Н	Cl	(R)-Me	>99%
10а	NO 2	F	(R)-Me	>99%
11а	H (когда R4=Me), Me (когда R4=H)	Me (когда R2=H), H (когда R2 =Me)	(R)-Me	99%
11b	H (когда R 4=Ph), Ph (когда R4=H)	Ph (когда R2=H), H (когда R 2=Ph)	(R)-Me	85%
11с	H (когда R 4=винил), Винил (когда R4=H)	Винил (когда R2=H), H (когда R2=винил)	(R)-Me	48%
12a	H	CN	(R)-Me	>99%
14a	H	ОН	(R)-Me	>99%
17a	OMe	H	(H)-Me	>99%
17d	OMe	H	(S)-Me	98%
17e	OMe	H	Me	94%
17b	ОСН 2CF3	H	(R)-Me	99%
17C	0-i-P	H	(R)-Me	>99%
18a	NO2	H	(R)-Me	80%
19a	NHOH	H	(R)-Me	98%
20a	NH2	H	(R)-Me	95%
17f	H	PrS	(R)-Me	>99%

Соединение #	Средний % ингибирования при или 10 мкМ
13а	>99%

Соединение #	R	Средний % ингибирования при или 10
21а	Me	70%
21b	-СН2-СН=СН2	95%

Соед. #	R	R 14	Средний % ингибирования при или 10 мкМ
5р	Н	Н	40%
5r	Н	(R)-Me	>99%
5s	Н	(S)-Me	56%
5q	Н	Me	97%
5t	Cl	Н	>99%
5u	Cl	(R)-Me	99%
5v	Ome	(R)-Me	>99%
27c	Nme2	(R)-Me	63%

Соединение #	Средний % ингибирования при или 10 мкМ
8b	91%

Соединение #	R4	R	Средний % ингибирования при или 10 мкМ
5w	Н	Н	98%
5х	Me	Н	99%
5У	Cl	Н	>99%
5z	ОМе	Me	97%

Экперементальные методики

Биология

«M» означает микромоль; мкМ

«мл» или «мл» означает миллилитр;

«l», означает микролитр; мкл

«mg» означает миллиграмм;

«nM» означает наномоль данных, представленных в виде средних значений

«а» имеет отношение к проценту ингибирования, при этом представленные данные означают значение по крайней мере двух экспериментов с дублированием значений для каждого эксперемента.

Материалы и экпериментальные методы используют, чтобы получить результаты переданные в Таблице 4, как описано ниже.

В Таблице 4 и далее применяются следующие определения:

Клетки:

Получение вируса - клеточная линия эмбриональной почки человека, 293, размноженная в Dulbecco's Modified Eagle среде (Life Technologies, Gaithersburg, MD), содержащей 10% эмбриональной бычьей сыворотки (FBS, Sigma, St. Louis, МО).

Вирусная инфекция - эпителиальная клеточная линия человека, HeLa, экспрессирующая ВИЧ-1 рецепторы CD4 и CCD5, размноженная в Dulbecco's Modified Eagle среде (Life Technologies, Gaithersburg, MD), содержащей 10% эмбриональной бычьей сыворотки (FBS, Sigma, St. Louis, МО) с добавлением 0.2 мг/мл генетицина (Life Technologies, Gaithersburg, MD) и 0.4 мг/мл зеоцина (Invitrogen, Carlsbad, CA).

Вирус - однократный инфекционный вирус-репортер, произведенный сотрансфекцией клеточной линии 293 эмбриональной почки человека с ВИЧ-1 покрытым ДНК вектором экспрессии и провирусной кДНК, содержащей покрытую делеционную мутацию и ген-репортер люциферазы, встроенный вместо ВИЧ-1 nef последовательности (Chen и др., ссылка 55). Трансфекции осуществляют с помощью lipofectAMINE PLUS реагента, как описано производителями (Life Technologies, Gaithersburg, MD).

Эксперименты

1. Соединение добавляют к HeLa CD4 CCR5 клеткам, помещенным на 96-ячеечную подложку при плотности клеток 5×10 ⁴ клеток на ячейку в 100 мкл Dulbecco's Modified Eagle среды, содержащей 10% эмбриональной бычьей сыворотки в концентрации <20 мкМ.

2. Затем к клеткам на подложке добавляют 100 мкл однократного инфекционного вируса-репортера в Dulbecco's Modified Eagle среде и соединение при приблизительной численности инфекции (MOI) 0.01, обеспечивая конечный объем 200 мкл на ячейку и конечную концентрацию соединения <10 мкМ.

3. Образцы собирают через 72 часа после инфицирования.

4. Вирусную инфекцию исследуют, измеряя экспрессию люциферазы из вирусной ДНК в инфицированных клетках с использованием измерительного оборудования для гена-репортера люциферазы (Roche Molecular Biochemicals, Indianapolis, IN). Супернатанты инфицированных клеток удаляют и добавляют 50 мкл Dulbecco's Modified Eagle среды (без красного фенола) и 50 мкл измерительного реагента для люциферазы, приготовленного как описано производителем (Roche Molecular Biochemicals, Indianapolis, IN) на ячейку. Затем определяют активность люциферазы путем измерения люминесцентности, используя Wallac microbeta сцинтилляционный счетчик.

5. Рассчитывают процентное ингибирование для каждого соединения с помощью определения уровня экспрессии люциферазы в клетках, инфицированных в присутствии каждого соединения, к процентному соотношению уровня экспрессии люциферазы, измеренному для клеток, инфицированных при отсутствии соединения, и вычитают определенную величину из 100.

Способ экстраполяции % ингибирования при 10 мкМ

Данные в Таблице 4 получают, используя обычные процедуры, указанные выше, или используя следующие методы. Данные не представлены для всех соединений, так как данные для всех соединений представлены альтернативным способом в Таблице 5. Процентное ингибирование для каждого соединения рассчитывают определением уровня экспрессии люциферазы в клетках, инфицированных в присутствии каждого соединения, к процентному соотношению уровня экспрессии люциферазы, измеренному для клеток, инфицированных при отсутствии соединения и вычитая определенную величину из 100. Для соединений, тестируемых при концентрации менее чем 10 мкМ, процентное ингибирование при 10 мкМ определяют экстраполяцией, используя программу XLfit, устанавливающую кривую, Microsoft Excel программного обеспечения. Кривые получают по 10 точкам данных (% ингибирования, определенный при 10 концентрациях соединения), используя четыре параметра базовой модели (XLfit модель 205: у=А+((В-А)/(1+((С/х)^D))), где А=минимум у, В=максимум у, С=logEC₅₀, D=фактор наклона и х и у - известные значения данных. Экстраполяции осуществляют с найденными параметрами А и В.

Биологические данные, определенные как EC₅₀

Таблица 5 представляет данные для соединений, сгруппированные по их ЕС₅₀, которая обеспечивает дополнительный способ для сравнения антивирусной активности соединений по изобретению. Эти величины рассчитывают следующим способом. Эффективная концентрация пятидесятипроцентного ингибирования (ЕС₅₀) рассчитывают с помощью Microsoft Excel XLfit, устанавливающую кривую, программного обеспечения. Для каждого соединения кривые получают из процентного ингибирования, рассчитанного при 10 различных концентрациях, используя четыре параметра базовой модели (модель 205).

Таблица 5. Данные биологических испытаний, выраженные через ЕС50
Соединения* с EC50s	Соединения с EC50s>1 мкМ, но <5 мкМ	Соединения c EC50 <1 мкМ
>0.4 нМ: 5 ac.	5h, 11b, 18a,	5а, 5b, 5c, 5d,
>0.5 мкМ:		5е, 5f, 5g, 5i, 5j,
5м, 5р, 5s,		5k, 5l, 5n, 5q,
5ab, 5ad, 5ae,		5r, 5t, 5u, 5v,
16b, 16с, 16h,		5w, 5x, 5y, 5z, 5ai, 5ak,
17f, 17g, 17h,		8a, 8b, 9a, 9b, 10a,
>5 мкМ: 5 af,		11а, 12а, 13а,
5аr, 5ah, 8e,		15а, 16а, 16d,
11c, 16e, 17g,		17а, 17b, 17с,
		17d, 17e, 19а,
		20а, 21а, 21b,
		27с, 39

*Некоторые из приведенных соединений тестируют при более низкой концентрации, чем их EC₅₀, но они показывают некоторую способность вызывать ингибирование и таким образом они должны быть оценены для определения точной EC₅₀ при более высокой концентрации.

Была предпринята попытка исключить соединения, которые не проявляют потенциала к ингибированию (к ним относятся те, которые не показывают некоторые возможности для ингибирования (те, которое могут иметь EC₅₀>100 мкМ).

Химия

Все данные по жидкостной хроматографии (LC) получают на Shimadzu LC-10AS жидкостном хроматографе, используя SPD-10AV УФ-Vis детектор с масс-спектрометрическими данными (МС), определенными, используя Micromass Platform для LC в виде электроспрея.

LC/MS Метод (например, идентификация соединения)

Колонка A: YMC ODS-A S7 3.0×50 мм колонка

Колонка В: PHX-LUNA C18 4.6×30 мм колонка

Градиент: 100% Растворитель А/0% Растворитель В to 0%

Растворитель А/100% Растворитель В

Градиент по времени: 2 минуты

Время выдержки 1 минута

Скорость потока: 5 мл/мин

Длина волны детектора: 220 нм

Растворитель А: 10% СН₃ОН/90% Н₂ О/0.1% трифторуксусной кислоты

Растворитель В: 10% H₂O/90% СН₃ОН/0.1% трифторуксусной кислоты

Соединения, очищенные препаративной HPLC, разбавляют в метаноле (1.2 мл) и очищают, используя следующую методику на Shimadzu LC-10A автоматизированной препаративной ВЭЖХ системе.

Методика препаративной ВЭЖХ (например, очистка соединения)

Методика очистки: Начальный градиент (30% В, 70% А) до конечного градиента (100% В, 0% А) в течение более 20 минут, выдержка 3 минуты (100% В, 0% А)

Растворитель А: 10% СН ₃ОН/90% H₂O/0.1 % трифторуксусной кислоты.

Растворитель В: 10% H₂O/90% СН₃ОН/0.1 % трифторуксусной кислоты.

Колонка: YMC C18 S5 20х100 мм колонка

Длина волны детектора: 220 нм

Типичные методики и характеристики отдельных примеров

Типичная методика получения соединения по схеме 1

1) Получение Азаиндола 1

Получение азаиндола. Методика А: Получение 7-хлор-6-азаиндола 1е: 2-хлор-3-нитропиридин 22е (5.0 г) растворяют в сухом ТГФ (200 мл). Затем раствор охлаждают до -78°С, добавляют избыток винилмагнийбромида (1.0 М в ТГФ, 100 мл). Затем реакцию оставляют при -20°С на восемь часов перед захолаживанием 20%-ным NH ₄Cl (150 мл). Водную фазу экстрагируют EtOAc (3×150 мл). Объединенные органические слои сушат над MgSO₄ . После фильтрации и концентрации сырой продукт очищают на хроматографической колонке с силикагелем, что дает 1.5 г 7-хлор-6-азаиндола 1е с 31% выходом.

Ниже приведены характеристики соединений структурной формулы 1:

Соединение 1e, R=Cl, 7-хлор-6-азаиндол: ¹Н ЯМР (500 мГц, CD₃OD) 7.84 (д, 1Н, J=7.95 Гц), 7.76 (м, 2Н), 6.61 (д, 1Н, J=5.45 Гц). MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для C₇H₆ ClN₂: 153.02; найдено 152.93; HPLC (высокоэффективная жидкостная хроматография - ВЭЖХ) время задержки: 0.51 минут (колонка А).

Соединение 1f, R=ОМе, 7-Метокси-6-азаиндол: MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для C₈H₉SN ₂O: 149.07; найдено 149.00. ВЭЖХ время задержки: 0.42 минут (колонка А).

Характеристики соединений 1, имеющих следующую структуру, полученные с помощью методики, описанной выше:

Соединение 1g, R₂=H, R₄=Me, 7-Метил-4-азаиндол: MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для C₈H₉ N₂: 133.08; найдено 133.01. ВЭЖХ время задержки: 0.34 минут (колонка А).

Соединение 1ak, R₂=Cl, R ₄=Me, 5-Хлор-7-метил-4-азаиндол: MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для C₈H₈ClN₂: 167.04; найдено 166.99. ВЭЖХ время задержки: 1.22 минут (колонка В).

Получение азаиндола, Способ А: Получение 7-Бензилокси-4-азаиндол 1j: К раствору бензилового спирта (16.6 г) в 200 мл ДМФА медленно добавляют NaH (4.8 г). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 часов, что дает бензоксид натрия, который переносят в раствор гидрохлорида 4-хлор-3-нитропиридина 22j (20 г) в ДМФА (100 мл). Полученную смесь выдерживают при перемешивании в течение 10 часов перед захолаживанием водой. Затем удаляют ДМФА под вакуумом, сырой продукт суспендируют в воде и экстрагируют EtOAc (3×250 мл). Органическую фазу сушат над MgSO₄ и концентрируют с образованием остатка, который очищают путем перекристаллизации, что дает 6.1 г 4-бензокси-3-нитропиридина 22j.

Характеристика соединения 22j:

4-Бензилокси-3-нитропиридин: MS м/е: (М+Н) ⁺ вычислено для С₁₂Н₁₁N ₂О₃: 231.08; найдено 231.06. ВЭЖХ время задержки: 1.46 минут (колонка А).

Получение соединения 1j, 7-бензокси-4-азаиндол: Общая процедура и условия описаны для реакции по Бартоли, которую используют, чтобы получить соединение 1е, которое приедено ниже.

Характеристика соединения 1j:

Соединение 1j, 7-бензилокси-4-азаиндол: ¹Н ЯМР (500 мгц, CDCl₃) 8.64 (уширенный, 1Н), 8.34 (д, 1H, J=5.35 Гц), 7.40 (м, 6Н), 6.72 (д, 1Н, J=3.25 Гц), 6.67 (д. 1Н, J=5.45 Гц), 5.35 (с.2Н); ¹³С ЯМР (125 мГц, CDCl₃) 151.1, 147.9, 145.2, 135.8, 128.8, 128.6, 127.9, 126.3, 119.6, 103.9, 99.6, 70.2. MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для С ₁₄Н₁₃N₂O: 225.10; найдено 225.03. ВЭЖХ время задержки: 1.11 минут (колонка А).

Получение азаиндола, типичный пример способа В: Получение 7-хлор-4-азаиндола 1i:

Избыток SnCl₂ (25 г) осторожно добавляют в раствор гидрохлорида 4-хлор-3-нитропиридина (5 г) в концентрированной HCl и реакционную массу перемешивают в течение 12 часов. Концентрирование смеси под давлением приводит к смеси, которую затем нейтрализуют 2N NaOH до рН 6-7. Водную фазу экстрагируют EtOAc (5×100 мл). Органические слои затем объединяют, сушат над безводным растворм MgSO₄ и концентрируют в вакууме, что дает сырой продукт (2.2 г), являющийся 4-хлор-3-нитропиридином, который достаточно чист для непосредственного применения в дальнейшей реакции.

7 г Сырого продукта из предыдущей стадии растворяют в 200 мл ТФК (трифторуксусной кислотой). Затем в перемешиваемый раствор осторожно добавляют 10.7 г NBS. После 8 часов растворитель удаляют в вакууме. Остаток растворяют в 2N NaOH (200 мл) и слой водного раствора экстрагируют EtOAc (3×200 мл). Объединенные органические слои сушат над MgSO₄ и концентрируют, что дает сырой продукт, который затем очищают через перекристаллизацию в гексане, что дает 5 г 3-амино-2-бром-4-хлорлиридина.

Характеристика 3-амино-2-бром-4-хлорпиридина: MS м/е: (М+Н) ⁺ вычислено для C₅H₅BrClN₂ : 206.93; найдено 206.86. ВЭЖХ время задержки: 1.32 минут (колонка В).

К раствору 3-амино-2-бром-4-хлорпиридина в 250 мл этилового эфира добавляют 8.4 г трифторуксусного ангидрида при 0°С. Через 10 минут добавляют 5.3 г Na₂CO₃ и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 10 часов, затем реакционную массу захолаживают водой (100 мл). Водную фазу экстрагируют EtOAc (3×150 мл). Объединенные органические слои сушат над MgSO₄ и концентрируют с образованием остатка, который очищают на хроматографической колонке с силикагелем, что дает 3.7 г соединения 23i.

Характеристика соединения 23i:

2-Бром-4-хлор-3-трифторацетаминопиридин: MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для C₇H₄ BrClF₃N₂O: 302.90; найдено 302.91. ВЭЖХ время задержки: 1.48 минут (колонка В).

Смесь соединения 23i (0.9 г), триметилсилилацетилена (0.49 г), Pd Cl₂ (PPh₃)₂ (0.1 г) и Cul (0.05 г) в Et ₃N (1.5 мл) нагревают до 100°С в герметизированной колбе в течение 10 часов. Затем растворитель удаляют под вакуумом. Остаток распределяют между водой (10 мл) и EtOAc (10 мл). Водную фазу экстрагируют EtOAc (2×10 мл). Объединенные органические слои сушат над MgSO₄ и концентрируют под вакуумом, что дает сырой продукт 24i, который используют в дальнейшей реакции без очистки.

Характеристика соединения 24i:

Соединение 24i, 4-Хлор-3-трифторацетамидо-2-(триметилсилилэтинил)пиридин: MS м/е: (М+H)⁺ вычислено для С₇Н₄ BrClF₃N₂О: 321.04; найдено 320.99. ВЭЖХ время задержки: 1.79 минут (колонка В).

Смесь соединения 24i (0.28 г) и этилата натрия (0.30 мл) в 20 мл этанола нагревают при кипении с обратным холодильником в течение 10 часов в атмосфере азота. Затем растворитель удаляют под вакуумом, остаток очищают, используя автоматическую систему Shimadzu для препаративной ВЭЖХ, что дает соединение 1i (0.1 г).

Характеристика соединения 1i:

Соединение 1i, 7-Хлор-4-азаиндол: ¹H ЯМР (500 мГц, CD₃OD) 8.50 (д, 1Н, J=6.20 Гц), 8.10 (д, 1H, J=3.20 Гц), 7.71 (д, 1Н, J=6.30 Гц), 6.91 (д, 1Н, J=3.25 Гц). MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для C₇H₆ClN₂: 153.02; найдено 152.90. ВЭЖХ время задержки: 0.45 минут (колонка А).

1) Получение 3-глиоксилметилового эфира азаиндола 2

Ацилирование азаиндола, способ А: Получение метил (7-азаиндол-3-ил)-оксоацетата 2а: К раствору 7-азаиндола 1а (20.0 г, 0.169 моль) в сухом CH ₂Cl₂ (1000 мл) добавляют 62.1 мл MeMgl (3.0M в Et₂O, 0.186 моль) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивают также при комнатной температуре в течение 1 часа перед добавлением ZnCl₂ (27.7 г, 0.203 моль). Через час по каплям вспрыскивают в раствор метилхлороксоацетат (24.9 г, 0.203 моль). Затем реакционную массу перемешивают в течение 8 часов, захолаживают метанолом, после чего все растворители упаривают, остаток распределяют между этилацетатом (500 мл) и Н₂О (300 мл). Водную фазу нейтрализуют насыщенным Na₂СО₃ до рН 6-6.5 и экстрагируют EtOAc (3×500 мл). Затем органические слои объединяют, промывают 0.1 N HCl (3×200 мл), сушат над безводньм MgSO₄ и концентрируют в вакууме, что дает сырой продукт 2а (14.3 г, 41.5%), который достаточно чист для дальнейшей реакции.

Ацилирование азаиндола, способ В: Получение метил(5-азаиндол-3-ил)-оксоацетата 2b: 5-Азаиндол 1b (0.5 г, 4.2 ммоль) добавляют к суспензии AlCl ₃ (2.8 г, 21.0 ммоль) в CH₂Cl₂ (100 мл). Перемешивание продолжают при комнатной температуре в течение 1 часа, затем добавляют по каплям метилхлороксоацетат (2.5 г, 21.0 ммоль). Реакционную массу перемешивают в течение 8 часов. Затем осторожно добавляют 20 мл СН₃ОН для охлаждения реакционной массы и растворители удаляют под вакуумом. Остаток твердого вещества очищают с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (EtOAc/СН₃ОН=10:1), что дает 0.6 г (70%) ацилированного продукта 2b.

Характеристика соединений 2:

Соединение 2а, Метил (7-азаиндол-3-ил)-оксоацетат: ¹Н ЯМР (300 мГц, DMSO-d₆) 8.60 (с, 1Н), 8.47 (д, 1Н, J=7.86 Гц), 8.40 (д, 1Н, J=4.71 Гц), 7.34 (дд, 1Н, J=7.86, 4.77 Гц). 3.99 (с, 3Н); ¹³С ЯМР (75 мГц, DMSO-d₆) 178.7, 163.3. 149.0, 145.1, 138.8, 129.7, 119.0, 118.0, 111.2, 52.7. MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для С₁₀H ₉N₂O₃: 205.06; найдено 205.04. ВЭЖХ время задержки: 0.94 минут (колонка А).

Соединение 2b, Метил(5-азаиндол-3-ил)-оксоацетат: ¹Н ЯМР (500 мГц, CD₃OD) 9.61 (с, 1Н), 9.02 (с, 1Н), 8.59 (д, 1H, J=6.63 Гц), 8.15 (д, 1Н, J=6.60 Гц), 4.00 (с, 3Н); ¹³С ЯМР (125 мГц, CD ₃OD) 178.9, 163.0, 145.6, 144.2, 138.3, 135.0, 124.7, 116.3, 112.1, 53.8. MS м/е: (М+H)⁺ вычислено для С₁₀H ₉N₂О₃: 205.06; найдено 205.04. ВЭЖХ время задержки: 0.32 минут (колонка А).

Соединение 2с, Метил (6-азаиндол-3-ил)-оксоацетат: MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для С₁₀H₉ N₂О₃: 205.06; найдено 205.14. ВЭЖХ время задержки: 0.61 минут (колонка А).

Соединение 2d, Метил (4-азаиндол-3-ил)-оксоацетат: MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для С₁₀Н₉ N₂О₃: 205.06; найдено 204.99. ВЭЖХ время задержки: 0.34 минут (колонка А).

Соединение 2е, Метил (7-хлор-6-азаиндол-3-ил)-оксоацетат; ¹Н ЯМР (500 мГц, DMSO-d₆) 8.66 (с, 1Н), 8.17 (д, 1Н, J=5.35 Гц), 8.05 (д, 1Н, J=5.30 Гц), 3.91 (с, 3Н); ¹³С ЯМР (125 мГц, DMSO-d₆ ) 178.4, 162.7, 141.3, 140.9, 134.6, 133.0, 130.1, 115.4, 113.0, 52.8. MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для С₁₀Н ₈ClN₂О₃: 239.02; найдено 238.97. ВЭЖХ время задержки: 1.18 минут (колонка А).

Соединение 2f, Метил (7-метокси-6-азаиндол-3-ил)-оксоацетат: MS м/е: (M+H)⁺ вычислено для C₁₁H₁₁ N₂O₄: 235.07; найдено 234.95. ВЭЖХ время задержки: 0.95 минут (колонка А).

Соединение 2h, Метил (7-хлор-4-азаиндол-3-ил)-оксоацетат. MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для С₁₀Н₈ ClN₂О₃: 239.02; найдено 238.97. ВЭЖХ время задержки: 0.60 минут (колонка А).

Соединение 2i, Метил (7-гидроксил-4-азаиндол-3-ил)-оксоацетат: MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для C₁₀H₉ N₂O₄: 221.06; найдено 220.96. ВЭЖХ время задержки: 0.76 минут (колонка А).

Соединение 2ak, Метил (5-хлор-7-метил-4-азаиндол-3-ил)-оксоацетат: MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для С₁₁Н₁₀ ClN₂О₃: 253.04; найдено 252.97. ВЭЖХ время задержки: 1.48 минут (колонка В).

Получение соединения 2j, метил (7-метоксил-1-метил-4-азаиндол-3-ил)-оксоацетат: К раствору соединения 2i (27 мг) в 10 мл сухого ДМФА добавляют 4.4 мг NaH. Через 1 час добавляют 26 мг Mel и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 10 часов. Затем удаляют под вакуумом ДМФА, что дает сырой продукт 2j, который используют в дальнейшей реакции без очистки.

Характеристика соединений 2j:

Соединение 2j, Метил (7-метокси-1-метил-4-азаиндол-3-ил)-оксоацетат: MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для C₁₂H₁₃ N₂O₄ 249.09; найдено 249.33. ВЭЖХ время задержки: 0.91 минут (колонка А).

2) Получение азаиндол 3-глиоксилата калия 3

Получение (7-Азаиндол-3-ил)-оксоацетата калия 3а: Соединение 2а (43 г, 0.21 моль) и К₂СО₃ (56.9 г, 0.41 моль) растворяют в СН₃ОН (200 мл) и Н₂О (200 мл). Через 8 часов продукт 3а выпадает из раствора в осадок. Фильтрование дает 43 г соединения 3а в виде белого твердого вещества с 90.4% выходом.

Характеристика соединений 3:

Соединение 3а, (7-Азаиндол-3-ил)-оксоацетат калия: ¹Н ЯМР (300 мГц, DMSO-d₆) 8.42 (д, 1H, J=7.86 Гц), 8.26 (д, 1Н, J=4.71 Гц), 8.14 (с, 1Н), 7.18 (дд, 1Н, J=7.86, 4.71Hz); ¹³C ЯМР (75 мГц, DMSO-d ₆) 169.4; 148.9, 143.6, 135.1, 129.3, 118.2, 117.5, 112.9. MS м/е: (М+Н)⁺ соответствующей кислоты соединения 3а (3а-К+Н) вычислено для С₉Н₇Н₂O₃ : 191.05; найдено 190.97. ВЭЖХ время задержки: 0.48 минут (колонка А).

Соединение 3b, (5-Азаиндол-3-ил)-оксоацетат калия: MS м/е: (M+H)⁺ соответствующая кислота соединения 3b (3b-К+Н) вычислено для C₉H₇N₂ O₃: 191.05; найдено 191.02. ВЭЖХ время задержки: 0.13 минут (колонка А).

Соединение 3с, (6-Азаиндол-3-ил)-оксоацетат калия: MS м/е: (М+Н)⁺ соответствующая кислота соединения 3с (3с-К+Н) вычислено для C₉H₇N₂ O₃: 191.05; найдено: 190.99. (колонка А). ВЭЖХ время задержки: 0.23 минут

Соединение 3d, (4-Азаиндол-3-ил)-оксоацетат калийя: MS м/е: (М+Н)⁺ соответствующая кислота соединения 3d (3d-K+H) вычислено для С₉Н₇N₂ O₃: 191.05; найдено 190.87. ВЭЖХ время задержки: 0.19 минут (колонка А).

Соединение 3е, (7-Хлор-6-азаиндол-3-ил)-оксоацетат калия: MS м/е: (М+Н)⁺ соответствующая кислота соединения 3е (3е-К+Н)⁺ вычислено для С₉Н₆ ClN₂O₃: 225.01; найдено 224.99. ВЭЖХ время задержки: 0.93 минут (колонка А).

Соединение 3f, (7-Метокси-6-азаиндол-3-ил)-оксоацетат калия: MS м/е; (М+Н)⁺ соответствующая кислота соединения 3f (3f-K+H)⁺ вычислено для С₁₀Н₉ N₂O₄: 221.06; найдено 220.97. ВЭЖХ время задержки: 0.45 минут (колонка А).

Соединение 3h, (7-Хлор-4-азаиндол-3-ил)-оксоацетат калия: MS м/е: (М+Н)⁺ соответствующая кислота соединения 3h (3h-K+H)* вычислено для С₉Н₆ClN ₂O₃: 225.01; найдено 225.27. ВЭЖХ время задержки: 0.33 минут (колонка А).

Соединение 3j, (7-Метоксил-1-метил-4-азаиндол-3-ил)-оксоацетат калия: MS м/е: (М+Н)⁺ соответствующая кислота соединения 3j (3j-K+H)⁺ вычислено для С₁₁H₁₁ N₂O₄ 235.07; найдено 235.01. ВЭЖХ время задержки: 0.36 минут (колонка А).

Соединение 3ak, (5-Хлор-7-метил-4-азаиндол-3-ил)-оксоацетат калия: MS м/е: (М+Н)⁺ соответствующая кислота соединения 3ak (3аb-К+Н)⁺ вычислено для C₁₀H₈ ClN₂O₃: 239.02; найдено 238.94. ВЭЖХ время задержки: 1.24 минут (колонка В).

1) Получение азаиндолпиперазиндиамида 5

Типичная процедура получения соединения по схеме 3

Получение (R)-Н-(бензоил)-3-метил-N'-[(7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазина 5а: 7-Азаиндол 3-глиоксилат калия 3а (25.4 г, 0.111 моль), (R)-3-метил-N-бензоилпиперазин 4а (22.7 г, 0.111 моль), 3-(диэтоксифосфорилокси)-1,2,3-бензотриазин-4(3Н)-он (DEPBT) (33.3 г, 0.111 моль) и основание Ханига (28.6 г, 0.222 моль) смешивают в 500 мл ДМФА. Полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 8 часов.

ДМФА удаляют путем упаривания при пониженном давлении и остаток распределяют между этилацетатом (2000 мл) и 5% водным раствором Na₂ СО₃ (2×400 мл). Водный слой экстрагируют этилацетатом (3×300 мл). Органическую фазу объединяют и сушат над безводным MgSO₄. Концентрация в вакууме дает сырой продукт, который очищают с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с EtOAc/СН₃ОН (50:1), что дает 33 г продукта 5а с 81% выходом.

Типичная процедура получения соединения по схеме 4

Получение N-(бензоил)-2-этил-N'-[(7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазина 5b и N-(бензоил)-2-этил-N'-[(7-азаиндол-3-ил)-карбонил]-пиперазина 5с: К раствору 7-азаиндола 1а (1.0 г, 8.5 ммоль) в сухом диэтиловом эфире (20 мл) добавляют 3.1 мл MeMgl (3.0M в Et₂O, 9.3 ммоль) при комнатной температуре. Полученную смесь также перемешивают при комнатной температуре в течение 1 часа, а затем добавляют ZnCl₂ (1М в этиловом эфире, 10.2 мл, 10.2 ммоль). Через час осторожно вспрыскивают раствор оксалилхлорида (10.7 г, 85 ммоль). Затем реакционную массу перемешивают в течение 8 часов, растворитель и избыток оксаилхлорида удаляют под вакуумом, что дает остаток, содержащий смесь 6а и 7а.

Затем остаток растворяют в сухом СН₃СН (8 мл), после чего последовательно добавляют в раствор монобензоилированный пиперазин 4b (0.25 г, 1.15 ммоль) и пиридин (1 г, 12.7 ммоль). Через час растворители удаляют и остаток очищают, используя Shimadzu автоматизированную систему для препаративной ВЭЖХ, что дает соединение 5b (20 мг, 0.6%) и соединение 5с (16 мг, 0.5%).

Характеристика соединений 5, имеющих следующую общую структуру:

Соединение 5а, n=2, R_7-13=H, R₁₄ =(R)-Me, (R)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: ¹Н ЯМР (300 мГц, CD₃OD) 8.57 (д, 1Н, J=5.97 Гц), 8.38 (д, 1H, J=4.20 Гц),8.27 (м, 1H), 7.47 (с, 5Н), 7.35 (т, 1H, J=5.13 Гц), 4.75-2.87 (м, 7Н), 1.31 (уширенный, 3Н); ¹³С ЯМР (75 мГц, CD₃OD) 185.6, 172.0, 166.3, 148.9, 144.6, 137.0, 134.8, 130.2, 129.9, 128.4, 126.6, 118.6, 118.0, 112.2, 61.3, 50.3. 45.1, 35.5, 14.9, 13.7. MS м/е: (М+H)⁺ вычислено для C₂₁H ₂₁N₄O₃: 377.16; найдено 377.18. ВЭЖХ время задержки: 1.21 минут (колонка А).

Соединение 5ai, n=2, R_7·13=H, R₁₄=Me, N-(бензоил)-3-метил-N'-[(7-азаиндол-3-ил)-оксоацетпл]-пиперазин: MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для C₂₁H₂₁ N₄O₃: 377.16; найдено 377.0 5.

Соединение 5b, n=2, R_7·8=R_10·14 =H, R₉=Et, N-(бензоил)-2-этил-N'-[(7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: ¹H ЯМР (500 мГц, CD₃OD) 8.63 (с, 1Н), 8.40 (с, 1H), 8.25 (м, 1H), 7.42 (м, 6Н), 4.70-2.90 (м, 7Н), 1.80-0.60 (м, 5Н); ¹³С ЯМР (125 мГц, CD ₃OD) 186.8, 174.2, 168.3, 149.6, 145.4, 138.8, 136.9, 132.6, 131.3, 130.0, 128.0. 120.2, 117.7, 114.1, 58.4, 52.2, 47.5. 44.8, 23.0, 10.9, 10.7. MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для С₂₂ Н₂₃Н₄O₃: 391.18; найдено 391.22. ВЭЖХ время задержки: 1.35 минут (колонка А).

Соединение 5с, n=1, R_7·8=R_10·14=H, R ₉=Et, N-(бензоил)-2-этил-N'-[(7-азаиндол-3-ил)-карбонил]-пиперазин: ¹H ЯМР (500 мГц, CD₃OD) 8.33(м, 2Н), 7.87 (с, 1H), 7.47 (м, 5Н), 7.33 (м, 1H), 4.74-2.90 (м, 7Н), 1.78-0.75 (м, 5Н); ¹³С ЯМР (125 мГц, CD ₃OD) 168.0, 164.2, 162.8, 147.0, 142.8, 136.9, 133.1, 132.8, 131.3, 130.4, 130.0, 128.6, 118.4, 110.3, 57.0, 53.4, 46.7. 24.0, 10.7. MS м/е: (M+H)⁺ вычислено для C₂₁H₂₃ N₄O₂: 363.18; найдено 363.22. ВЭЖХ время задержки: 1.14 минут (колонка А).

Соединение 5d, n=2, R_7·12=H, N-(бензоил)-N'-[(7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: ¹Н ЯМР (500 мГц, CD₃OD) 8.62 (с, 1H), 8.44 (с, 1H), 8.26 (с, 1H), 7.46 (с, 5Н), 7.29 (м, 1H), 3.97-3.31 (м, 8Н). MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для C₂₀H₁₉N₄O₃: 363.15; найдено 363.24. ВЭЖХ время задержки: 1.18 минут (колонка А).

Соединение 5е, n=2, R_7·8=R_10·14 =Н, R₉=Me, N-(бензоил)-2-метил-N'-[(7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: ¹H ЯМР (500 мГц, CD₃OD) 8.64 (с, 1H), 8.51 (с, 1H), 8.28 (м, 1H), 7.42 (м, 6Н), 4.48-2.90 (м, 7Н), 1.26 (м, 3Н); ¹³С ЯМР (125 мГц, CD₃ OD) 185.3, 171.4, 166.8, 164.0, 147.9, 143.6, 137.3, 135.3, 131.2. 129.8, 128.4, 126.2, 118.6, 112.4, 49.4, 45.9, 45.6, 45.1, 40.8, 40.4, 14.1. MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для C₂₁ H₂₁N₄O₃: 377.16; найдено 377.21, ВЭЖХ время задержки: 1.26 минут (колонка А).

Соединение 5f, n=2, R_7·13=Н, R₁₄=(S)-Me, (S)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: ¹H ЯМР (500 мГц, CD₃OD) 8.64 (с, 1Н), 8.39 (с.1Н), 8.26 (м, 1H), 7.44 (м, 6Н), 4.71-3.79 (м, 7Н), 1.26 (м, 3Н); ¹³С ЯМР (125 мГц, CD₃ OD) 185.5, 171.9, 166.0, 158.4, 147.6, 143.5, 137.2, 134.8, 131.3, 129.8, 128.3, 126.6, 118.6, 112.4, 50.3, 45.1, 41.2, 40.3, 14.9, 13.7. MS м/е: (М+H)⁺ вычислено для C₂₁H ₂₁N₄O₃: 377.16; найдено 377.21. ВЭЖХ время задержки: 1.25 минут (колонка А).

Соединение 5g, n=2, R_7·13=Н, R₁₄=Et, N-(бензоил)-3-этил-N'-[(7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: ¹Н ЯМР (500 мГц, CD₃OD) 8.65 (уширенный, 1Н), 8.40 (с, 1H), 8.27 (м. 1Н), 7.46 (м, 6Н), 4.73-3.00 (м, 7Н), 1.80-0.58 (м, 5Н); ¹³С ЯМР (125 мГц, CD₃OD) 187.1, 173.0, 168.0, 149.2, 145.0, 138.8, 136.4, 133.0, 131.4, 129.9, 128.2, 120.2, 114.1, 57.5, 46.0, 43.0, 37.5, 23.0, 10.7. MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для С₂₂H₂₃ N₄O₃: 391.18; найдено 391.20. ВЭЖХ время задержки: 1.33 минут (колонка А).

Соединение 5h, n=2, R_7·12=Н, R₁₃=R₁₄=Me, N-(бензоил)-3,3-диметил-N'-[(7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для С₂₂Н₂₃ Н₄O₃: 391.18; найдено 390.98. ВЭЖХ время задержки: 1.22 минут (колонка А).

Соединение 5i, n=2, R_7·8=R_10·13=Н, R₉ =R₁₄=Me, транс-N-(бензоил)-2,5-диметил-N'-[(7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: ¹Н ЯМР (500 мГц, CD₃OD) 8.58 (м, 1H), 8.37 (д, 1H, J=15.7 Гц), 8.25 (м, 1H), 7.77 (м, 1H), 7.46 (м, 5H), 5.09-3.16 (м, 6Н), 1.30 (м, 6Н). I MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для С₂₂Н₂₃N ₄O₃: 391.18; найдено 391.11. ВЭЖХ время задержки: 1.22 минут;(колонка А).

Соединение 5ab, n=2, R_7·9=R_10·13=Н, R₁₄ =i-Pr, N-(бензоил)-3-изопропил-N'-[(7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]'пиперазин: MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для C₂₃H₂₅ N₄O₃: 405.19; найдено 405.22. ВЭЖХ время задержки: 1.52 минут (колонка А).

Соединение 5ас, n=2, R_7·8=R_10·14=Н, R₉ =i-Pr, N-(бензоил)-2-изопропил-N'-[(7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для C₂₃H₂₅ N₄O₃: 405.19; найдено 405.25. ВЭЖХ время задержки: 1.53 минут (колонка А).

Соединение 5ad, n=1, R_7·8=R_10·14=H, R₉ =i-Pr, N-(бензоил)-2-изопропил-N'-[(7-азаиндол-3-ил)-карбонил]-пиперазин: MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для C₂₂H₂₅ N₄O₂: 377.20; найдено 377.23. ВЭЖХ время задержки: 1.34 минут (колонка А).

Соединение 5ае, n=2, R_7·8=R_10·14=H, R₉ =пентил, транс-N-(бензоил)-2-пентил-N'-[(7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для С₂₅Н₂₉ Н₄O₃: 433.22; найдено 433.42. ВЭЖХ время задержки: 1.74 минут (колонка А).

Характеристика соединения 5, имеющего следующую общую структуру:

Когда

Соединение 5j, R₁₄=H, N-(пиридин-2-ил)-N'-[(7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: ¹H ЯМР (500 мГц, CD₃OD) 8.65-7.30 (м, 8Н), 4.00-3.33 (м, 8Н). MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для С₁₉Н₁₈N₅О ₃: 364.14; найдено 364.08. ВЭЖХ время задержки: 0.97 минут (колонка А).

Соединение 5k, R₁₄=(R)-Me, (R)-N-(пиридин-2-ил)-3-метил-N'-[(7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: ¹Н ЯМР (300 мГц, CD₃OD) 8.67-7.38 (м, 8Н), 4.76-3.00 (м, 7Н), 1.35 (м, 3Н); ¹³ С ЯМР (75 мГц, CD₃OD) 186.0, 168.9, 166.6, 152.9, 148.5, 144.0, 138.7, 137.8, 131.8, 125.6, 124.0, 119.0, 112.9, 51.3, 50.9, 50.7, 46.7, 46.2, 45.7, 42.6, 42.0, 41.8, 40.8, 36.6, 35.7, 15.5, 14.2. MS м/е: (М+H) ⁺ вычислено для С₂₀Н₂₀N ₅О₃: 378.16; найдено 378.14. ВЭЖХ время задержки: 1.02 минут (колонка А).

Когда

Соединение 5l, R₁₄=(R)-Me, (R)-N-(5-бромфуран-2-ил)-3-метил-N'-[(7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: ¹Н ЯМР (500 мГц, CD₃OD) 8.59 (д, 1H, J=9.4 гц), 8.37 (с, 1Н), 8.26 (м, 1Н), 7.34 (д, 1Н, J=10.1 Hz), 7.06 (с, 1H), 6.59 (с, 1Н), 4.56-3.16 (м, 7Н), 1.30 (м, 3Н); ¹³С ЯМР (125 мГц, CD₃OD) 187.2, 167.8, 161.0, 150.1, 149.8, 145.8, 138.7, 132.1, 127.0, 120.5, 120.2, 119.8, 114.8, 113.9, 51.8, 47.0, 42.0, 37.0, 16.6, 15.4. MS м/е: (MtH)⁺ вычислено для C₁₉H ₁₈BrN₄O₄: 445.05; найдено 445.18. ВЭЖХ время задержки: 1.35 минут (колонка А).

Характеристика соединения 5m

Соединение 5m, (R)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(5-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: ¹Н ЯМР (500 мГц, CD₃OD) 9.62 (уширенный, 1Н), 8.72 (м, 1H), 8.61 (д, 1Н, J=4.5 Гц), 8.16 (д, 1H, J=5.8 Гц), 7.51 (уширенный, 6Н), 4.90-3.10 (м, 7Н), 1.35 (уширенный, 3Н). MS м/е: (M+H)⁺ вычислено для C ₂₁H₂₁N₄O₃ 377.16, найдено 377.15. ВЭЖХ время задержки: 0.89 минут (колонка А).

Характеристика соединений 5, имеющих следующую общую структуру:

Соединение 5р, Х=Н, Y=Н, N-(бензоил)-N'-[(6-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для С₂₀Н₁₉ N₄O₃ 363.15, найдено 363.09. ВЭЖХ время задержки: 0.96 минут (колонка А).

Соединение 5q, Х=Н, Y=Me, N-(бензоил)-3-метил-N'-[(6-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для С₂₁H₂₁ N₄О₃ 377,16, найдено 377.11. ВЭЖХ время задержки: 0.99 минут (колонка А).

Соединение 5g, Х=Н, Y=(R)-Me, (R)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(6-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для С₂₁H₂₁ N₄О₃ 377.16, найдено 377.10. ВЭЖХ время задержки: 0.99 минут (колонка А).

Соединение 5s, X=H, Y=(S)-Me, (S)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(6-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для C₂₁H₂₁ N₄O₃ 377.16, найдено 377.10. ВЭЖХ время задержки: 1.00 минут (колонка А).

Соединение 5t, Х=Cl, Y=H, N-(Бензоил)-N'-[(7-Хлор-6-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для C₂₀H₁₈ ClN₄O₃ 397.11, найдено 397.26. ВЭЖХ время задержки: 1.60 минут (колонка В).

Соединение 5u, Х=Cl, Y=(R)-Me, (R)-N-(Бензоил)-3-метил-N'-[(7-Хлор-6-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для C₂₁H₂₀ ClN₄O₃ 411.12, найдено 411.16. ВЭЖХ время задержки: 1.43 минут (колонка А).

Соединение 5v, Х=ОМе, Y=(R)-Me, (R)-N-(Бензоил)-3-метил-N'-[(7-метокси-6-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для C₂₁H₂₀ ClN₄O₃ 407.17, найдено 407.13. ВЭЖХ время задержки: 1.31 минут (колонка А).

Характеристика соединений 5, имеющих следующую общую структуру:

Соединение 5w, Х=H, Y=(R)-Me, Z=H, (R)-N-(Бензоил)-3-метил-N'-[(4-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для C₂₁H₂₁ N₄O₃ 377.16, найдено 377.14. ВЭЖХ время задержки: 0.96 минут (колонка А).

Соединение 5х, Х=СН₃, Y=(R)-Me, Z=H, (R)-N-(Бензоил)-3-метил-N'-[(7-метил-4-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для С₂₁Н₂₁ N₄O₃ 391.18, найдено 391.15. ВЭЖХ время задержки: 1.15 минут (колонка А).

Соединение 5у, Х=Cl, Y=(R)-Me, Z=H, (R)-N-(Бензоил)-3-метил-N'-[(7-Хлор-4-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для С₂₁С₂₀ ClN₄О₃ 411.12, найдено 411.04. ВЭЖХ время задержки: 1.10 минут (колонка А).

Соединение 5z, Х=ОМе, Y=(R)-Me, Z=Me, (R)-N-(Бензоил)-3-метил-N'-[(7-метокси-1-метил-4-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для C₂₃H₂₅ N₄O₄: 421.19, найдено 421.05. ВЭЖХ время задержки: 1.06 минут (колонка А).

Соединение 5ak, (R)-N-(Бензоил)-3-метил-N'-[(5-хлор-7-метил-4-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для С₂₂Н₂₂ ClN₄O₃ 425.24, найдено 425.04. ВЭЖХ время задержки: 1.72 минут (колонка В).

Типичная процедура для получения соединений по схемам 5, 6 и 7

1) N-оксид образованием (уравнение 1, Схема 5)

Получение (R)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(7-оксид-7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазина 8а: 10 г 7-азаиндолпиперазиндиамида 5a (26.6 ммоль) растворяют в 250 мл ацетона. Затем добавляют в раствор 9.17 г mCPBA (53.1 ммоль). Продукт 8а выпадает в осадок из раствора в виде белого твердого вещества через 8 часов, после чего его собирают фильтрованием. После высушивания в вакууме получают 9.5 г соединения 8а с 91% выходом. Дальнейшая очистка не требуется.

Характеристика соединений 8, имеющих следующую общую структуру:

Соединение 8а, R=(R)-Me, (R)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(7-оксид-7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: ¹Н ЯМР (300 мГц, DMSO-d₆) 8.30 (д, 1Н, J=12.2 Гц), 8.26 (д, 1Н, J=10.1 Гц), 8.00 (д, 1H, J=7.41 Гц), 7.41 (с, 5Н), 7.29 (м, 1Н), 4.57-2.80 (м, 7Н), 1.19 (уширенный, 3Н); ¹³С ЯМР (75 мГц, DMSO-d₆ ) 186.2, 170.0, 165.0, 139.5, 136.9, 136.7, 135.5, 133.5, 129.7, 128.5, 126.9, 121.6, 119.9, 113.6, 49.4, 44.3, 15.9, 14.8. MS м/в: (М+Н)⁺ вычислено для C₂₁H₂₁ N₄O₄: 393.16; найдено 393.16. ВЭЖХ время задержки: 1.05 минут (колонка А).

Соединение 8е, R=Н, N-(бензоил)-N'-[(7-оксид-7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для C₂₀H₁₉ N₄O₄: 379.14; найдено 379.02. ВЭЖХ время задержки: 1.15 минут (колонка А).

Соединение 8с, R=(S)-Me, (S)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(7-оксид-7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин. MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для C₂₁H₂₁ N₄O₄: 393.16; найдено 393.05.

Соединение 8d, R=Me, N-(бензоил)-3-метил-N'-[(7-оксид-7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для C₂₁H₂₁ N₄O₄: 393.16; найдено 393.05.

Характеристика соединения 8b

Соединение 8b, (R)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(6-оксид-6-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: MS м/е: (M+H)⁺ вычислено для C₂₁H₂₁ N₄O₄: 393.16; найдено 393.08. ВЭЖХ время задержки: 1.06 минут (колонка А).

Хлорирование (уравнение 2, Схема 5)

Получение (R)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(4-хлор-7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазина 9а: 55 мг N-оксида 7-азаиндолпиперазиндиамида (0.14 ммоль) 8а растворяют в 5 мл POCl₃. Реакционную смесь нагревают до 60°С в течение 4 часов. После охлаждения смесь выливают на охлажденный льдом насыщенный раствор NaHCO₃ и водную фазу экстрагируют EtOAc (3×50 мл). Объединенные органические слои сушат над MgSO₄ и концентрируют в вакууме. Сырой продукт очищают, используя автоматизированную систему Shimadzu для препаративной ВЭЖХ, что дает соединение 9а (15 мг, 26%).

Характеристика соединения 9а:

Соединение 9а, (R)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(4-хлор-7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: ¹Н ЯМР (500 мГц, DMSO-d₆) 5 13.27 (уширенный, 1Н), 8.46 (м, 2Н), 7.43 (м, 6Н), 5.00-2.80 (м, 7Н), 1.23 (уширенный, 3Н). MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для С₂₁Н ₂₀ClH₄O₃: 411.12; найдено: 411.09. ВЭЖХ время задержки: 1.32 минут (колонка А).

Нитрование N-оксида (уравнение 10, Схема 6)

Получение (R)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(4-нитро-7-оксид-7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазина 15а: N-оксид 8а (10.8 г, 27.6 ммоль) растворяют в 200 мл трифторуксусной кислоты и 20 мл дымящейся азотной кислоты. Реакционную смесь перемешивают в течение 8 часов и захолаживают метанолом, затем фильтруют, фильтрат концентрируют в вакууме, что дает сырой продукт 15а в виде коричневого твердого вещества, которое переносят на следующую стадию без дальнейшей очистки. Небольшое количество сырого продукта очищают, используя автоматизированную систему Shimadzu для препаративной ВЭЖХ, что дает 3 мг вещества 15а.

Характеристика соединений 15, имеющих следующую общую структуру:

Соединение 15а, R=(R)-Me, (R)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(4-нитро-7-оксид-7-азаиндол-3-ип)-оксоацетил]-пиперазин: MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для C₂₁H₂₀ N₅O₆: 438.14; найдено 438.07. ВЭЖХ время задержки: 1.18 минут (колонка А).

Соединение 15b, R=(S)-Me, (S)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(4-нитро-7-оксид-7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для C₂₁H₂₀ N₅O₆: 438.14; найдено 438.02. ВЭЖХ время задержки: 1.18 минут (колонка А).

Соединение 15с, R=Me, N-(бензоил)-3-метил-N'-[(4-нитро-7-оксид-7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для C₂₁H₂₀ N_sO₆: 438.14; найдено 438.02. ВЭЖХ время задержки: 1.18 минут (колонка А).

4) Фторирование (уравнение 5, Схема 3)

Получение (R)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(4-нитро-6-фтор-7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазина 10a: 20 мг сырого продукта N-оксида 4-нитро-7-азаиндол пиперазиндиамида 15а и избыток Me₄NF (300 мг) растворяют в 5 мл DMSO-d ₆. Реакционную смесь нагревают до 100°С в течение 8 часов. После охлаждения DMSO-d₆ удаляют с помощью продувания азотом. Остаток распределяют между этилацетатом (10 мл) и 2N NaOH раствором (10 мл). Водную фазу экстрагируют EtOAc (2×10 мл). Органические слои объединяют и концентрируют в вакууме, что дает остаток, который в дальнейшем очищают, используя автоматизированную систему Shimadzu для препаративной ВЭЖХ, что дает соединение 10a (8.3 мг).

Характеристика соединения 10a:

Соединение 10a: (R)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(4-нитро-6-фтор-7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: ¹Н ЯМР (300 мГц, ацетон-d₆) 8.44 (д, 1Н, J=8.24 Гц), 7.47 (с, 6Н), 4.80-3.00 (м, 7Н), 1.29 (уширенный, 3Н). MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для C ₂₁H₁₉FN₅O5: 440.14; найдено 440.14. ВЭЖХ время задержки: 1.40 минут (колонка В).

5) Алкилирование и арилирование (уравнение 4, Схема 5)

Получение (R)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(4 или 6)-метил-7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазина 11а: Избыток MeMgl (3М в ТГФ, 0.21 мл, 0.63 ммоль) добавляют в раствор N-оксид 7-азаиндолпиперазиндиамида 8а (25 мг, 0.064 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре и затем захолаживают метанолом. Растворители удаляют в вакууме, остаток разбавляют метанолом и очищают, используя автоматизированную систему Shimadzu для препаративной ВЭЖХ, что дает соединение 11а (6.7 мг, 27%).

Характеристика соединений 11, имеющих следующую общую структуру:

Соединение 11а: R=Me, (R)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(4 или 6)-метил-7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для С₂₂Н₂₃Н ₄O₃: 391.18; найдено 391.17. ВЭЖХ время задержки: 1.35 минут (колонка В).

Соединение 11b: R=Ph, (R)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(4 или 6)-фенил-7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для C₂₇H_2S N₄O₃: 453.19; найдено 454.20. ВЭЖХ время задержки: 1.46 минут (колонка В).

Соединение 11с, R=СН=СН₂, (R)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(4 или 6)-винил-7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: MS м/е: (M+Na)⁺ вычислено для C₂₃H ₂₂N₄NaO₃: 425.16; найдено 425.23. ВЭЖХ время задержки: 1.12 минут (колонка А).

6) Нитрильное замещение и хлорирование (уравнение 5, Схема 5).

Получение (R)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(6-хлор-7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазина 9b и (R)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(6-циано-7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазина 12a: N-оксид 8а (0.20 г, 0.51 ммоль) суспендируют в 20 мл сухого ТГФ, к которому добавляют TMSCN (0.3 г, 3.0 ммоль) и BzCl (0.28 г, 2.0 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 часов и затем нагревают при кипении с обратным холодильником в течение 5 часов. После охлаждения смесь наливают в 100 мл насыщенного раствора NaHCO₃ и водную фазу экстрагируют EtOAc (3×50 мл). Органическую фазу объединяют и концентрируют в вакууме с образованием остатка, который разбавляют метанолом и очищают, используя автоматизированную систему Shimadzu для препаративной ВЭЖХ, что дает соединение 12а (42 мг, 20%) и соединение 9b (23 мг, 11%).

Характеристика соединений 9b и 12а:

Соединение 9b, (R)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(6-хлор-7-азаиндол-З-ил)-оксоацетил]-пиперазин: ¹Н ЯМР (500 мГц, DMSO-d₆) 8.39 (м, 2Н), 7.42 (м, 6Н), 5.00-2.80 (м, 7Н), 1.19 (уширенный, 3Н); ¹³С ЯМР (125 мГц, DMSO-d₆) 185.8, 170.0, 165.1, 147.9, 145.1, 137.4, 135.4, 132.2, 129.5, 128.3, 126.8, 118.6. 116.1, 111.8, 49.3, 47.2, 44.2, 15.6, 14.5. MS м/е: (М+H)⁺ вычислено для C₂₁H₂₀ ClN₄O₃: 411.12; найдено 411.09. ВЭЖХ время задержки: 1.43 минут (колонка А).

Соединение 12а, (R)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(6-циано-7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: ¹H ЯМР (500 мГц, DMSO-d₆) 8.67 (м, 2Н), 7.86 (с, 1Н), 7.42 (м, 5Н), 4.80-2.80 (м, 7Н), 1.22 (уширенный, 3Н); ¹³С ЯМР (125 мГц, DMSO-d ₆) 185.7, 170.0, 164.8, 148.5, 140.9, 135.3, 130.3, 129.5, 128.3, 126.8, 126.2, 123.0, 120.4, 118.0, 111.8, 49.4, 47.3, 44.2, 15.6, 14.5. MS м/е: (М+H)⁺ вычислено для С₂₂H ₂₀N₅O₃: 402.16; найдено 402.13. ВЭЖХ время задержки: 1.29 минут (колонка А).

7) Гидроксилирование (уравнение 6. Схема 5)

Получение (R)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(1-ацетил-6-ацетокси-7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазина 13а: 20 мг N-оксида 7-азаиндолпиперазиндиамида 8а растворяют в 5 мл уксусного ангидрида (Ac₂O). Реакционную смесь нагревают при кипении с обратным холодильником в течение 8 часов. После охлаждения растворители удаляют в вакууме, что дает продукт 13а, который достаточно чист для дальнейшей реакции.

Характеристика соединения 13а:

Соединение 13а, (R)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(1-ацетил-6-ацетокси-7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: ¹Н ЯМР (300 мГц, ацетон-d₆) 8.67 (м, 2Н), 7.47 (с, 5Н), 7.27 (д, 1H, J=8.34 Гц), 4.90-2.80 (м, 7Н), 2.09 (с, 6Н), 1.30 (уширенный, 3Н); ¹³С ЯМР (75 мГц, ацетон-d₆) 187.0, 170.8, 169.0, 168.6, 164.9, 155.3, 136.5, 134.7, 134.2, 133.2, 130.0, 129.8, 127.5, 118.9, 115.4, 113.8, 50.3, 45.4, 41.3, 36.3, 25.5, 20.5, 16.0, 14.8. MS м/е: (M+Na)⁺ вычислено для С₂₅Н₂₄N₄O ₆Na: 499.16; найдено 499.15. ВЭЖХ время задержки: 1.46 минут (колонка В).

Получение (R)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(6-гидроксил-7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазина 14а: Сырой продукт 13а и избыток К₂СО₃ (100 мг) смешивают с СН₃ОН и Н₂О (1:1). Реакционную смесь перемешивают в течение 8 часов. СН₃ ОН удаляют в вакууме, водную фазу экстрагируют EtOAc (3×10 мл) и органические слои объединяют и концентрируют. Полученный продукт очищают, используя автоматизированную систему Shimadzu для препаративной ВЭЖХ, что дает 1 мг соединения 14а (5% из соединение 8а).

Характеристика соединения 14а:

Соединение 14а, (R)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(6-гидроксил-7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: MS м/е: (M+H)⁺ вычислено для C₂₁H₂₁ N₄O₄: 393.16; найдено 393.12. ВЭЖХ время задержки: 1.13 минут (колонка А).

8) Образование тиола (уравнение 7, Схема 5)

Получение (R)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(6-пропилтио-7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазина 17f. К 100 мг раствора соединения 9а в 10 мл CHCl₃ добавляют TsCl (63 мг) и раствор перемешивают в течение 5 минут. Затем добавляют 2 мл пропилтиола и реакционную смесь еще перемешивают в течение 8 часов. После концентрации сырой продукт очищают, используя автоматизированную систему Shimadzu для препаративной ВЭЖХ, что дает 1,4 мг соединения 17f.

Характеристика соединения 17f:

Соединение 17f, (R)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(6-пропилтио-7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для С₂₄Н₂₇ Н₄O₃S: 451.18; найдено 451.09. ВЭЖХ время задержки: 1.45 минут (колонка А).

9) Замещение нитрогруппы (уравнение 11, Схема 6)

Получение (R)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(4-метокси-7-оксид-7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазина 16а: 100 мг сырого соединения 15а из предыдущей стадии растворяют в 6 мл 0.5М MeONa в СН₃ОН. Реакционную смесь нагревают при кипении с обратным холодильником в течение 8 часов и растворитель удаляют под вакуумом, что дает смесь, содержащую продукт 16а и другие неорганические соли. Указанную смесь используют на следующей стадии без дальнейшей очистки. Небольшую порцию смеси сырых продуктов очищают, используя автоматизированную систему Shimadzu для препаративной ВЭЖХ, что дает 5 мг соединения 16а.

Характеристика соединения 16, имеющего следующую общую структуру:

Соединение 16а, Х=ОМе, R=(R)-Me, (R)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(4-метокси-7-оксид-7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: MS м/е: (M+H)⁺ вычислено для C₂₂H₂₃ N₄O₅ 423.17, найдено 423.04. ВЭЖХ время задержки: 0.97 минут (колонка А).

Соединение 16f, Х=ОМе, R=(S)-Me, (S)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(4-метокси-7-оксид-7˜азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для C₂₂H₂₃ N₄O₅ 423.17, найдено 423.02.

Соединение 16g, X=OMe, R=Me, N-(бензоил)-3-метил-N'-[(4-метокси-7-оксид-7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: MS м/е: (М+Н)* вычислено для С₂₂Н₂₃N ₄O₅ 423.17, найдено 423.03.

Соединение 16b, Х=ОСН₂CF₃₁, R=(R)-Me, (R)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(4-(2,2,2-трифторэтокси)-7-оксид-7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: ¹H ЯМР (500 мГц, CD₃OD) 8.44 (уширенный, 1Н), 8.30 (м, 1Н), 7.50 (уширенный, 5Н), 7.14 (уширенный, 1Н), 4.90-3.10 (м, 9Н), 1.30 (м, 3Н). MS м/е: (М+Н) ⁺ вычислено для С₂₃Н₂₂F ₃N₄О₅: 491.15; найдено 491.16. ВЭЖХ время задержки: 1.17 минут (колонка А).

Соединение 16с, Х=ОСН(СН₃)₂, R=(R)-Me, (R)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(4-(1-метилэтокси)-7-оксид-7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: ¹Н ЯМР (500 мГц, CD₃OD) 8.48 (с, 1Н), 8.24 (м, 1H), 7.46 (м, 5Н), 7.13 (с, 1Н), 5.03-3.00 (м, 8Н), 1.49-1.15 (м, 9Н). MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для C₂₄H₂₇N₄O₅: 451.20; найдено 451.21. ВЭЖХ время задержки: 1.14 минут (колонка А).

Соединение 16d, Х=ОСН₂СН₃, R=(R)-Me, (R)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(4˜этокси-7-оксид-7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для С₂₃Н₂₅ N₄O₅: 437.18; найдено 437.13. ВЭЖХ время задержки: 1.08 минут (колонка А).

Соединение 16е Х=SCH₂CH₂CH₃, R=(R)-Me, (R)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(4-пропилтио-7-оксид-7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: ¹Н ЯМР (500 мГц, CD₃OD) 8.24 (м, 2Н), 7.45 (м, 5Н), 7.25 (с, 1Н), 4.90-3.00 (м, 9Н), 1.81 (уширенный, 2Н), 1.30 (м, 6Н). MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для C₂₄H₂₇N₄O ₄S: 467.18; найдено 467.14. ВЭЖХ время задержки: 1.30 минут (колонка А).

Соединение 16h, Х=NHMe, R=(R)-Me, (R)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(4-метиламино-7-оксид-7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для C₂₂H₂₄ N₅O₄: 422.18; найдено 422,09. ВЭЖХ время задержки: 1.19 минут (колонка А).

10) Восстановление N-оксида (уравнение 12, Схема 6)

Получение (R)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(4-метокси-7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазина 17а: 48 мг сырого продукта 16а суспендируют в 30 мл этилацетата при комнатной температуре. Добавляют 1 мл PCl₃ и реакционную смесь перемешивают в течение 8 часов. Затем ее осторожно выливают на лед, захолаживая раствор 2N NaOH. После выделения органического слоя водную фазу экстрагируют EtOAc (6×80 мл). Органические слои объединяют и концентрируют в вакууме, что дает остаток, который очищают, используя автоматизированную систему Shimadzu для препаративной ВЭЖХ, что дает 38 мг соединения 17а.

Характеристика соединений 17, имеющих следующую общую структуру:

Соединение 17а, R=Ome, Х=(R)-Me, (R)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(4-метокси-7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: ¹H ЯМР (300 мГц, CD₃OD) 8.24 (д, 1Н, J=5.7 Гц), 8.21 (м, 1Н), 7.47 (с, 5Н), 6.90 (д, 1Н, J=5.7 Гц), 4.71-3.13 (м, 10Н), 1.26 (уширенный, 3Н); ¹³С ЯМР (75 мГц, CD₃OD) 185.3, 172.0, 167.2, 161.2, 150.7, 146.6, 135.5, 134.8, 129.9, 128.3, 126.7, 112.8, 106.9, 100.6, 54.9, 50.2, 48.1, 45.1, 14.5, 13.8. MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для C₂₂H ₂₃N₄O₄: 407.17; найдено 407.19. ВЭЖХ время задержки: 1.00 минут (колонка А).

Соединение 17d, R=Ome, X=(S)-Me, (S)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(4-метокси-7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для C₂₂H₂₃ N₄O₄: 407.17; найдено 407.03.

Соединение 17е, R=Ome, Х=Me, N-(бензоил)-3-метил-N'-[(4-метокси-7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для C₂₂H₂₃ N₄O₄: 407.17; найдено 407.03.

Соединение 17b, R=ОСН₂CF₃, X=(R)-Me, (R)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(4-(2,2,2-трифторэтокси)-7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил)-пиперазин: ¹H ЯМР (500 мГц, CD₃OD) 8.33 (с, 1Н), 8.19 (м, 1H), 7.45 (м, 5Н), 7.05 (с, 1Н), 4.90-3.00 (м, 9Н), 1.29 (уширенный, 3Н); ¹³С ЯМР (125 мГц, CD ₃OD) 185.7, 174.0, 168.3, 162.0, 151.0, 146.1, 138.5, 136.4, 131.4, 130.0, 128.2, 114.8, 109.5, 103.6, 67.2, 66.9, 52.0, 47.0, 16.4, 15.3. MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для С₂₃Н ₂₂F₃Н₄O₄: 475.16; найдено 475.23. ВЭЖХ время задержки: 1.22 минут (колонка А).

Соединение 17с, R=ОСН(СН₃)₂, Х=(R)-Me, (R)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(4-(1-метилэтокси)-7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: ¹Н ЯМР (500 мГц, CD₃OD) 8.42 (с, 1H), 8.24 (м, 1H), 7.47 (м, 5Н), 7.21 (с, 1H), 5.20-3.00 (м, 8Н), 1.51 (уширенный, 6Н), 1.22 (уширенный, 3Н); ¹³ С ЯМР (125 мГц, CD₃OD) 185.4, 173.6, 167.9, 166.1, 145.3, 141.4, 138.2, 136.4, 131.5, 129.7, 128.2, 113.9, 111.4, 104.0, 75.5, 54.4, 53.7, 51.8, 46.9, 22.1, 16.4, 15.3. MS м/е: (M+H)⁺ вычислено для С ₂₄Н₂₇N₄O₄: 435.20; найдено 435.20. ВЭЖХ время задержки: 1.15 минут (колонка А).

Соединение 17м, R=ОСН₂СН₃, Х=(R)-Me, (R)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(4-этокси-7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для C₂₃H₂₅ N₄O₄: 421.19; найдено 421.13. ВЭЖХ время задержки: 1.13 минут (колонка А).

Соединение 17g, R=SCH₂CH₂CH₃, Х=(R)-Me, (R)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(4-пропилтио-7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил)-пиперазин: MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для C₂₄H₂₇ N₄O₄S: 451.18; найдено 451.13. ВЭЖХ время задержки: 1.50 минут (колонка А).

Соединение 17h, R=NHMe, X=(R)-Me, (R)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(4-метиламино-7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: MS м/е: (M+H)⁺ вычислено для С₂₂Н₂₄ N₅О₃: 406.19; найдено 406.03. ВЭЖХ время задержки: 1.19 минут (колонка А).

Характеристика соединения 18а

Соединение 18а, (R)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(4-нитро-7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазина: ¹Н ЯМР (300 мГц, CD₃OD) 8.58 (с, 1Н), 8.53 (м, 1Н), 7.64 (с, 1Н), 7.47 (с, 5Н), 4.90-3.00 (м, 7Н), 1.30 (уширенный, 3Н); ¹³С ЯМР (75 мГц, CD ₃OD) 184.1, 172.1, 165.6, 151.9, 149.6, 145.5, 139.4, 134.8, 129.7, 128.4, 126.7, 111.6, 111.2, 107.4, 53.7, 48.4, 45.9, 15.0, 13.7. MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для C₂₁H₂₀ N₅O₅: 422.15; найдено 422.09. ВЭЖХ время задержки: 1.49 минут (колонка В).

11) Восстановление нитрогруппы до гидроксиамина (уравнение 14, Схема 6)

Получение (R)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(4-гидроксиламино-7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазина 19а: 10 мг Pd (10% активированного углерода) добавляют к раствору соединения 18а (48 мг, 0.11 ммоль) в метаноле (10 мл) в атмосфере водорода. Реакционную смесь перемешивают в течение 8 часов при комнатной температуре. После фильтрования фильтрат концентрируют в вакууме с образованием остатка, который очищают, используя автоматизированную систему Shimadzu для препаративной ВЭЖХ, что дает соединение 19а (7.9 мг, 17%).

Характеристика соединения 19а:

Соединение 19а, (R)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(4-гидроксиламино-7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: MS м/е.: (М+Н)⁺ вычислено для C₂₁H ₂₂N₅O₄: 408.17; найдено 408.21. ВЭЖХ время задержки: 1.03 минут (колонка А).

12) Восстановление нитрогруппы до аминогруппы (уравнение 15, Схема 6)

Получение (R)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(4-амино-7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазина 20а: 114 мг Na₂S·2H₂O (1 ммоль) добавляют к раствору соединения 18а (20 мг, 0.048 ммоль) в СН₃ ОН (5 мл) и Н₂О (5 мл). Реакционную смесь нагревают при кипении с обратным холодильником в течение 8 часов. После охлаждения реакционную смесь концентрируют в вакууме с образованием остатка, который очищают, используя автоматизированную систему Shimadzu для препаративной ВЭЖХ, что дает 4 мг соединения 20а (21.3%).

Характеристика соединения 20а:

Соединение 20а, (R)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(4-амино-7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: ¹H ЯМР (500 мГц, CD₃OD) 8.16 (м, 1Н), 8.01(д, 1Н, J=8.1 Гц), 7.47 (м, 5Н). 6.66 (с, 1Н), 4.90-3.00 (м,7Н), 1.30 (уширенный, 3Н). MS м/е: (M+H)⁺ вычислено для С₂₁Н₂₂Н₅O ₃: 392.17; найдено 392.14. ВЭЖХ время задержки: 0.96 минут (колонка А).

13) Алкилирование атома азота в положении 1 (уравнение 16, Схема 7)

Получение (R)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(1-метил-7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазина 21 a: NaH (2 мг, 60% чистый, 0.05 ммоль) добавляют к раствору соединения 5а (10 мг, 0.027 ммоль) в ДМФА. Через 30 минут вспрыскивают Mel (5 мг, 0.035 ммоль) в смесь с помощью шприца. Реакционную смесь перемешивают в течение 8 часов при комнатной температуре и захолаживают метанолом. Смесь распределяют между этилацетатом (2 мл) и Н₂О (2 мл). Водную фазу экстрагируют EtOAc (3×2 мл). Органические слои объединяют, сушат над безводным MgSO₄ и концентрируют в вакууме, что дает сырой продукт, который очищают, используя автоматизированную систему Shimadzu для препаративной ВЭЖХ, что дает соединение 21а (2.5 мг, 24%). Характеристика соединений 21, имеющих следующую общую структуру:

Соединение 21а, R=Me, (R)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(1-метил-7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: ¹H ЯМР (500 мГц, CD₃OD) 8.56 (уширенный, 1Н), 8.42 (с, 1H), 8.30 (м, 1Н), 7.47 (м, 6Н), 4.90-3.00 (м,7Н), 3.96 (с, 3Н), 1.28 (уширенный, 3Н). MS м/е: (M+Na)⁺ вычислено для C₂₂H₂₂ N₄O₃Na: 413.16; найдено 413.15. ВЭЖХ время задержки: 1.47 минут (колонка В).

Соединение 21b, R=СН ₂-СН=СН₂, (R)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(1-аллил-7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: ¹H ЯМР (500 мГц, CD₃OD) 5 8.37 (м, 3Н), 7.44 (м, 6Н), 6.08 (м, 1H), 5.22-3.06 (м, 11H), 1.27 (м, 3Н); ¹³С ЯМР (75 мГц, CD₃OD) 184.2, 184.1, 170.8, 165.0, 146.7, 143.5, 137.9, 133.8, 131.4, 129.2, 128.8, 127.3, 125.6, 117.9, 117.4, 116.3, 110.3, 50.4, 49.7, 49.1, 45.7, 44.0, 41.0, 39.6, 34.8, 14.0, 12.8,. MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для С₂₄Н₂₅Н ₄O₃: 417.19; найдено 417.11. ВЭЖХ время задержки: 1.43 минут (колонка А).

14) Реакции замещения галогена (уравнение 18, Схема 8)

Получение (R)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(7-диметиламино-6-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазина 27c: Смесь соединения 5u (50 мг) и 4 мл диметиламина (40% в воде) нагревают до 150°С в герметизированной колбе в течение 18 часов. Затем растворители удаляют под вакуумом и остаток очищают, используя Shimadzu автоматизированную систему для препаративной ВЭЖХ, что дает 10 мг соединения 27с.

Характеристика соединения 27с:

Соединение 27с, (R)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(7-диметиламино-6-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для C₂₃H₂₆ N₅O₃ 420.20, найдено 420.16. ВЭЖХ время задержки: 1.13 минут (колонка А).

15) Модификация бензоильного остатка (уравнение 26, Схема 11)

Гидролиз бензоиламида; получение (R)-2-метил-N-[(4-метокси-7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазина 31а: Соединение 17а (0.9 г) и КОН (2.0 г) перемешивают в растворе EtOH (15 мл) и воды (15 мл). Реакционную массу нагревают при кипении с обратным холодильником в течение 48 часов. Растворители удаляют под вакуумом и полученный остаток очищают с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (EtOAc/Et₃N=от 100:1 до 3:1), что дает 0.6 г соединения 31 а.

Характеристика соединения 31а:

Соединение 31 а, (R)-2-метил-N-[(4-метокси-7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для С₁₅Н₁₉ N₄О₃ 303.15, найдено 303.09. ВЭЖХ время задержки: 0.29 минут (колонка А).

Образование диамида: Получение (R)-N-(4-азидо-2,3,5,6-тетрафторбензоил)-3-метил-N'-[(4-метокси-7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазина 5n: Амин 31а (0.15 г), 4-азидо-2,3,5,6-тетрафторбензойную кислоту (0.12 г), 3-(диэтоксифосфорилокси)-1,2,3-бензотриазин-4(3Н)-он (DEPBT) (0.15 г) и основание Ханига (0.5 мл) смешивают в 5 мл ДМФА. Затем смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 8 часов. После этого растворители удаляют под вакуумом и остаток очищают, используя Shimadzu автоматизированную систему для препаративной ВЭЖХ, что дает 10 мг соединения 5n.

Характеристика соединения 5n:

Соединение 5n, (R)-N-(4-азидо-2,3,5,6-тетрафторбензоил)-3-метил-N'-[(4-метокси-7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для C₂₂H₁₈ F₄N₇O₄ 520.14, найдено 520.05. ВЭЖХ время задержки: 1.42 минут (колонка А).

Соединение 5af, Ar=4,5-дибромфенил, (R)-N-(3,5-дибромбензил)-3-метил-N'-[(4-метокси-7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для C₂₂H₂₁ Br₂N₄O₄ 562.99, найдено 562.99. ВЭЖХ время задержки: 1.54 минут (колонка А).

Соединение 5ag, Ar=4-[3-(трифторметил)-3Н-диазирин-3-ил]фенил, (R)-N-[4-(3-(трифторметил)-3Н-диазирин-3-ил)бензил]-3-метил-N'-[(4-метокси-7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: MS м/е: (М+Н)* вычислено для С₂₄Н₂₂F ₃N₆O₄ 515.17, найдено 515.02. ВЭЖХ время задержки: 1.55 минут (колонка А).

Новое уравнение:

Получение (R)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(4-гидроксил-7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазина 5ah: Сырой продукт соединения 17а (100 мг) и избыток TMSI (0.25 мл) перемешивают в CHCl₃. Затем реакционную смесь перемешивают в течение 6 дней. Растворитель удаляют в вакууме, сырой продукт очищают, используя автоматизированную систему Shimadzu для препаративной ВЭЖХ, что дает соединение 4.4 мг структуры 5ah.

Характеристика соединения 5ah:

Соединение 5ah, (R)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(4-гидроксил-7-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин: MS м/е: (М+Н)⁺ вычислено для C₂₁H₂₁ N₄O₄: 393.16; найдено 393.11. ВЭЖХ время задержки: 1.46 минут (колонка В).

Альтернативные методики, пригодные для синтеза соединения 39

Получение 5,7-дибром-4-метокси-7-азаиндола 36: Винилмагнийбромид (0.85 М в ТГФ, 97.7 мл, 83.0 ммоль) добавляют в течение более 30 минут к перемешиваемому раствору 2,6-дибром-3-метокси-5-нитропиридина (7.4 г, 23.7 ммоль) в ТГФ (160 мл) при -75°С. Раствор перемешивают один час при -75°С и в течение ночи при -20°С, повторно охлаждают до -75°С и захолаживают насыщенным водным раствором NH₄Cl (-100 мл). Реакционной смеси дают нагреться до комнатной температуры, промывают рассолом (-100 мл) и экстрагируют Et₂O (150 мл) и СН₂Cl₂ (2×100 мл). Объединенную органику сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют. Остаток очищают с помощью флэш-колоночной хроматографии (SiO₂, 3:1 гексаны/EtOAc) с выходом 5,7-дибром-4-метокси-7-азаиндола 36 (1.10 г, 3.60 ммоль, 15%) в виде бледно-желтого твердого вещества.

Характеристика 36: ¹Н ЯМР (500 мГц, CDCl ₃) 8.73 (уширенный с, 1Н), 7.41 (дд, J=3.1, 2.8 Гц, 1Н), 6.69 (д, J=3.1, 2.2 Гц, 1Н), 4.13 (с, 3Н); ¹³С ЯМР (125 мГц, CDCl₃) 146.6, 133.7, 128.8, 127.5, 120.2, 115.6, 101.9, 60.7. MS м/е (М+Н)⁺ вычислено для C ₈H₇Br₂N₂O: 304.88; найдено 304.88. ВЭЖХ время задержки: 1.31 минут (колонка А).

Получение 4-метокси-7-азаиндол 37: Раствор 5,7-дибром-4-метокси-7-азаиндола 36 (680 мг, 2.22 ммоль), 5% Pd/C (350 мг, 0.17 ммоль) и гидразина (2.5 мл, 80 ммоль) в EtOH нагревают при кипении с обратным холодильником в течение 1 часа. Реакционной смеси дают остыть до комнатной температуры, фильтруют через целит и фильтрат концентрируют. Водный раствор NH₄OH (11% в Н₂О, 45 мл) добавляют к остатку и раствор экстрагируют CH₂Cl ₂ (3×30 мл). Объединенную органику сушат (MgSO ₄), фильтруют и концентрируют с выходом 4-метокси-7-азаиндола 37 (290 мг, 1.95 ммоль, 88%) в виде оранжевого твердого вещества.

Характеристика 37: ¹Н ЯМР (500 мГц, CDCl ₃) 8.61 (уширенный с, 1Н), 8.52 (с, 1H), 7.88 (с, 1Н), 7.30 (д, J=2.9 Гц, 1Н), 6.69 (д, J=2.9 Гц, 1Н), 4.03 (с, 3Н). MS м/е (М+Н)⁺ вычислено для C₈H₉ N₂O: 149.06; найдено 148.99. ВЭЖХ время задержки: 0.61 минут (колонка А).

Получение 38: Треххлористый алюминий (67 мг, 0.50 ммоль) добавляют к раствору 4-метокси-6-азаиндола (15 мг, 0.10 ммоль) в СН₂Cl₂ (2 мл) и перемешивают при комнатной температуре в течение 30 мин. Добавляют метилхлорацетат (0.020 мл, 0.21 ммоль) и реакционную смесь перемешивают в течение ночи. Затем реакционную массу захолаживают СН₃ОН (0.20 мл), перемешивают 5 часов, и после чего фильтруют (промывая CH ₂Cl₂). Затем фильтрат промывают насыщенным водным раствором NH₄OAc (2×10 мл) и Н₂ О (10 мл) и концентрируют с получением 38 (5 мг) в виде желтого твердого вещества.

Характеристика 38: ¹H ЯМР (500 мГц, CDCl₃) 8.65 (с, 1Н), 8.36 (с, 1Н), 8.02 (с, 1Н), 4.03 (с, 3Н), 3.96 (с, 3Н). MS м/е (М+H)⁺ вычислено для С₁₁Н₁₀N₂O ₄: 235.06; найдено 234.96. ВЭЖХ время задержки: 0.63 минут (колонка А).

Получение N-бензоил-N'-[(2-карбоксальдегидпиррол-4-ил)-оксоацетил]-пиперазина 41: Раствор этил 4-оксоацетил-2-пирролкарбоксальдегида 40 (17.0 г, 87.1 ммоль) перемешивают два часа в 25 мл КОН (3.56 М в Н ₂О, 88.8 ммоль) и EtOH (400 мл). Образовавшийся белый осадок собирают с помощью фильтрования, промывают EtOH (-30 мл) и Et ₂O (˜30 мл) и сушат под высоким вакуумом с получением 15.9 г 2-пирролкарбоксальдегида-4-оксоацетата калия в виде белого твердого вещества, которое используют без дальнейшей очистки. Раствор 2-пирролкарбоксальдегида-4-оксоацетата (3.96 г, 19.3 ммоль), N-бензоилпиперазин гидрохлорида (4.54 г, 19.7 ммоль), 3-(диэтоксифосфорилокси)-1,2,3-бензотриазин-4(3Н)-она (5.88 г, 19.7 ммоль) и триэтиламина (3.2 мл, 23 ммоль) перемешивают в течение дня в ДМФА (50 мл). Реакционную смесь фильтруют в Н ₂O (300 мл), экстрагируют CH₂Cl₂ (3×200 мл) и объединенную органику концентрируют на роторном испарителе, чтобы удалить CH₂Cl₂. Затем сырой продукт (все еще в ДМФА) разбавляют Н₂О (200 мл) и дают ему кристаллизоваться в течение 48 часов. После этого твердое вещество собирают с помощью фильтрования и сушат под высоким вакуумом (P₂O₅) с получением N-бензоил-N'-[(2-карбоксальдегидапиррол-4-ил)-оксоацетил]-пиперазина 41 (3.3 г, 9.7 ммоль, 45% более двух стадий) в виде светло-желтого твердого вещества. Дальнейшая очистка не требуется.

Характеристика 41: ¹H ЯМР (500 мГц, CDCl₃) 9.79 (с, 1Н), 9.63 (с, 1Н), 7.82 (с, 1H), 7.51-7.34 (м, 6Н), 4.05-3.35 (м, 8Н). MS м/е (М+H)⁺ вычислено для C₁₈H ₁₈N₃O₄: 340.12; найдено 340.11. ВЭЖХ время задержки: 1.04 минут (колонка А).

Получение 42: N-бензоил-N'-[(2-карбоксальдегидпиррол-4-ил)-оксоацетил]-пиперазин 41 (3.3 г, 9.7 ммоль) перемешивают в виде суспензии в EtOH (100 мл) в течение 15 мин, охлаждают до 0°С и после чего он вступает в реакцию с гидрохлоридом глицинметилового эфира (3.66 г, 29.2 ммоль), триэтиламином (1.50 мл, 11 ммоль) и цианборгидридом натрия (672 мг, 10.7 ммоль). Реакционной смеси дают нагреться до комнатной температуры, перемешивают 24 часа и выливают на лед (˜400 мл). Раствор экстрагируют EtOAc (3×300 мл) и объединенную органику промывают рассолом (300 мл), сушат (MgSO₄ ) и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают с помощью препаративной тонкослойной хроматографии (SiO₂ , 9:1 EtOAc/СН₃ОН, R_f=0.2) с выходом 42 (2.4 г, 5.8 ммоль, 60%) в виде белого твердого вещества.

Характеристика 42: ¹Н ЯМР (500 мГц, CDCl₃ ) 9.33 (с, 1Н), 7.49 (с, 1H), 7.58-7.32 (м, 5Н), 6.50 (с.1Н), 3.90-3.35 (м, 8Н), 3.81 (с, 2Н), 3.74 (с, 3Н), 3.40 (с.2Н). MS м/е (М+Н)⁺ вычислено для C₂₁H₂₅ N₄O₅: 413.17; найдено 413.17. ВЭЖХ время задержки: 0.84 минут (колонка А).

Получение 43: Метиловый эфир 42 (485 мг, 1.17 ммоль) и К₂СО₃ (325 мг, 2.35 ммоль) в СН₃ОН (6 мл) и H₂O (6 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение трех часов. Реакционную смесь затем захолаживают концентрированной HCl (0.40 мл) и концентрируют под высоким вакуумом. Часть твердого осадка (200 мг, 0.37 ммоль) добавляют к перемешиваемому раствору Р ₂O₅ (400 мг, 1.4 ммоль) в метансульфокислоте (4.0 г, 42 ммоль) (которая уже была перемешана вместе с этиловым эфиром при 110°С в течение 45 мин) при 110°С и перемешивают в течение 15 мин. Реакционную смесь выливают на дробленный лед (˜20 г), перемешивают 1 час, подщелачивают с К₂ СО₃ (5.0 г, 38 ммоль), разбавляют CH₂Cl ₂ (20 мл), бензоилхлоридом (1.0 мл, 8.5 ммоль) и перемешивают 1 час. Реакционную смесь экстрагируют СН₂Cl₂ (3×20 мл) и объединенную органику сушат (Na₂ SO₄) и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают с помощью препаративной тонкослойной хроматографии (SiO ₂, EtOAc, R_f=0.5) с выходом 43 (101 мг, 0.21 ммоль, 57%) в виде грязно-белого твердого вещества.

Характеристика 43: MS м/е (М+Н)⁺ вычислено для C ₂₇H₂₄N₄O₅: 485.17; найдено 485.07. ВЭЖХ время задержки: 1.15 минут (колонка А).

Получение 39. R=ОМе, N-(бензоил)-N'-[(4-метокси-6-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин:

В колбе объемом 1 л, оборудованной ловушкой Дина-Старка, гидрат n-толуолсульфокислоты (55 мг, 0.29 ммоль) и бензол (5 мл) нагревают при кипении с обратным холодильником в течение 1 часа. Раствор охлаждают до комнатной температуры и его подвергают взаимодействию с 2,2-диметоксипропаном (0.10 мл, 0.81 ммоль) и 43 (46 мг, 0.095 ммоль). Реакционную смесь перемешивают 1 час, разбавляют CH₂Cl₂ (2 мл), перемешивают 30 минут, затем окисляют с помощью тетрахлорбензохинона (150 мг, 0.61 ммоль) и перемешивают в течение ночи. Реакционную смесь выливают в 5% водный раствор NaOH (20 мл) и экстрагируют CH ₂ Cl₂ (3×25 мл). Объединенную органику сушат (Na₂SO₄) и концентрируют при пониженном давлении. Остаток подвергают препаративной тонкослойной хроматографии (Et₂O), основную часть вещества экстрагируют и повторно подвергают препаративной тонкослойной хроматографии (SiO ₂, 9:1 EtOAc/СН₃ОН, R_f=0.15) с получением 39 (3 мг, 0.008 ммоль, 6%) в виде белого твердого вещества.

Соединение 39, R=ОМе, N-(бензоил)-3-метил-N'-[(4-метокси-6-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин:

Характеристика 39: ¹Н ЯМР (500 мГц, CD ₃OD) 8.49 (с, 1Н), 8.35 (с, 1Н), 7.98 (с, 1Н), 7.53-7.38 (м, 5Н), 4.02 (с, 3Н), 3.97-3.42 (м, 8Н). MS м/е (М+H)⁺ вычислено для C₂₁H₂₃N₄O ₅: 393.15; найдено 393.13. ВЭЖХ время задержки: 0.85 минут (колонка А).

Получение 5av N-(бензоил)-N'-[(4-фтор-7-хлор-6-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазина и 5av' (R)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(4-фтор-7-хлор-6-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазина

Должно быть отмечено, что 2-хлор-5-фтор-3-нитропиридин может быть приготовлен по способу, описанному в примере 5В, из ссылки 59 Marfat et al. Схема, представленная ниже, раскрывает некоторые подробности, которые улучшают выход указанного синтеза. Химический процесс по Барроли на Схеме 1 используют, чтобы получить азаиндол 1zz с приведенными ниже подробностями.

Соединение zz1' (1.2 г, 0,01 моль) растворяют в 2.7 мл серной кислоты при комнатной температуре. Заранее сешанные дымящую азотную кислоту (1 мл) и серную кислоту добавляют по каплям при 5-10°С к раствору соединения zz1'. Реакционную смесь нагревают до 85°С в течение одного часа, затем охлаждают до комнатной температуры и выливают на лед (20 г). Желтое твердое вещество zz2' собирают фильтрованием, промывают водой и сушат на воздухе с получением 1.01 г соединения zz2'.

Соединение zz2' (500 мг, 3.16 ммоль) растворяют в оксихлориде фосфора (1.7 мл, 18.9 ммоль) и ДМФА (катализатор) при комнатной температуре. Реакцию нагревают до 110°С в течение 5 часов. Избыток POCl ₃ удаляют в вакууме. Остаток хроматографируют на силикагеле (CHCl₃, 100%), что дает 176 мг продукта zz3'.

Соединение zz3' (140 мг, 0.79 ммоль) растворяют в ТГФ (5 мл) и охлаждают до -78°С под N₂. Добавляют по каплям бромид винилмагния (1.0М в этиловом эфире, 1.2 мл). После упомянутого добавления реакционную смесь выдерживают при -20°С в течение около 15 часов. Реакционную массу затем захолаживают насыщенным раствором NH₄Cl, экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои промывают рассолом, сушат над MgSO₄, концентрируют и хроматографируют, что дает около 130 мг соединения 1zz.

Химические реакции на схеме 3 обеспечивают производные, которые соответствуют общей формуле 5 и имеют 6-азакольцо и R₂=F и R₄=Cl. В особенности, реакция 2-хлор-5-фтор-3-нитропиридина с 3 эквивалентами винилмагнийбромида при использовании типичных условий, описанных здесь, обеспечивает получение 4-фтор-7-хлор-6-азаиндола с высоким выходом. Прибавление этого соединения к раствору треххлористого алюминия в дихлорметане при перемешивании при температуре окружающей среды в течение последующих 30 минут, а затем с хлорметил или хлорэтилоксалатом обеспечивают получение эфира. Гидролиз с КОН как стандартном процессе обеспечивает получение соли кислоты, которая реагирует с пиперазинами 4 (например, 1-бензоилпиперазин) в присутствии DEPBT в стандартных условиях, описанных здесь, что обеспечивает получение соединения 5, описанного выше. Соединение с бензоилпиперазиновым остатком представляет собой N-(бензоил)-N'-[(4-фтор-7-хлор-6-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин, т.е. соединение, обозначенное 5av.

Соединение с (R)-метилбензоилпиперазиновым остатком представляет собой 5av' (R)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(4-фтор-7-хлор-6-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин, т.е. соединение, обозначенное 5av'

Характеристики 5av N-(бензоил)-N'-[(4-фтор-7-хлор-6-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин и 5av' (R)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(4-фтор-7-хлор-6-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин

¹Н ЯМР (500 мГц, CD₃OD): 8.40 (с, 1H), 8.04 (с, 1Н), 7.46 (bc, 5Н), 3.80-3.50 (м, 8Н). LC/MS: (ES+) м/е (М+Н)⁺=415, RT=1.247.

¹Н ЯМР (500 мГц, CD₃OD): 8.42 (с, 1/2Н), 8.37 (с, 1/2Н), 8.03 (с, 1Н), 7.71˜7.45 (м, 5Н), 4.72-3.05 (м, 7Н), 1.45˜1.28 (м, 3Н). LC/MS: (ES+) м/е (М+Н) ⁺=429, RT=1.297. LC/MS колонка: YMC ODS-A C18 S7 3.0×50 мм. Начало %В=0, окончание %В=100, Градиент время=2 мин, Скорость потока=5 мл/мин. Длина волны=220 нм. Растворитель А=10% СН ₃ОН - 90% H₂O - 0.1% ТФК. Растворитель В=90% СН₃ОН - 10% Н₂O - 0.1% ТФК.

Аналогично могут быть получены соединения 5ау, 5az, 5abc и 5abd

5ау N-(бензоил)-N'-[(4-фтор-7-метокси-6-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин

5az N-(бензоил)-N'-[(4-фтор-7-(N-метилкарбоксамидо)-6-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин.

5abc (R)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(7-метокси-4-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин

5abd (R)-N-(бензоил)-3-метил-N'-[(7-(N-метилкарбоксамидо)-4-азаиндол-3-ил)-оксоацетил]-пиперазин.

Соединения по настоящему изобретению могут быть введены орально, парентерально (включая подкожные инъекции, внутривенные, внутримышечные, внутригрудинные инъекции или путем ингаляции), с помощью спрея или ректально в виде состава дозированной формы, содержащей подходящие фармацевтически-приемлемые носители, адъюванты и наполнители.

Так, в соответствии с настоящим изобретением также обеспечивается способ лечения и фармацевтическая композиция для лечения вирусных инфекций, таких как ВИЧ инфекция и СПИД. Лечение включает введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, фармацевтической композиции, содержащей фармацевтический носитель и терапевтически эффективное количество соединения по настоящему изобретению.

Фармацевтическая композиция может быть в форме орально вводимых суспензий или таблеток: назальных спреев, стерильно приготовленных инъекций, например, в виде стерильных водных или масляных суспензий для инъекций или в виде суппозиторий.

В случае орального введения в виде суспензии указанные композиции готовят согласно известной из уровня техники технологии изготовления фармацевтических составов и могут содержать микрокристаллическую целлюлозу в качестве объемного наполнителя, алгиновую кислоту или алгинат натрия в качестве суспендирующего агента, метилцеллюлозу в качестве связующего компонента и подсластители/отдушки, известные из уровня техники. В качестве быстрорастворимых таблеток указанные соединения могут содержать микрокристаллическую целлюлозу, дикальций фосфат, крахмал, стеарат магния и лактозу и/или другие эксипиенты, связующие, разрыхлители, расширители, разбавители и смазки, известные из уровня техники.

Растворы и суспензии для инъекций могут быть составлены согласно известному уровню техники при использовании нетоксичных, парентерально приемлемых разбавителей или растворителей, таких как маннитол, 1,3-бутандиол, вода, раствор Рингера или изотонический раствор хлорида натрия или подходящих диспергирующих, смачивающих и суспендирующих агентов, таких как стерильные масла, включая синтетические моно- или диглицериды, и жирные кислоты, включая олеиновую кислоту.

Соединения по настоящему изобретению могут быть введены человеку орально в дозе, находящейся в интервале от 1 до 100 мг/кг веса человека, разделенной на части. Одна предпочтительная доза находится в интервале от 1 до 10 мг/кг веса тела при оральном приеме по частям. Другая предпочтительная доза находится в интервале от 1 до 20 мг/кг веса тела при приеме орально по частям. Должно быть понятно, однако, что уровень конкретной дозы и частота ее введения любому пациенту может варьироваться в зависимости от различных факторов, включая активность конкретного применяемого соединения, метаболической устойчивости и времени действия активного соединения, возраста больного, его общего здоровья, пола, диеты, пути и времени введения, степени экскреции, комбинации лекарств, серьезности заболевания и проводимой общей терапии.

Сокращения или альтернативные названия

ТФК	Трифторуксусная кислота
ДМФА	N,N-Диметилфopмaмид
ТГФ	Тетрагидрофуран
CH3OH	Метанол
Ether	Диэтилэтиловый эфир
DMSO	Диметилсульфоксид
EtOAc	Этилацетат
Ac	Ацетил
Bz	Бензоил
Me	Метил
Et	Этил
Pr	Пропил
Py	Пиридин
Hunig's Base	N,N-Диизопропилэтиламин
DEPBT	3-(диэтоксифосфорилокси)-1,2,3-бензотриазин-4(3Н)-он
DEPC	диэтилцианофосфат
DMP	2,2-диметоксипропан
mCPBA	мета-хлорпербензойная кислота
Азаиндол	1H-пирролопиридин
4-азаиндол	1Н-пирроло[3,2-b)]пиридин
5-азаиндол	1Н-пирроло[3,2-с]пиридин
6-азаиндол	1Н-пирроло[2,3-с]пиридин
7-азаиндол	1Н-Пирроло[2,3-b]пиридин