способ лечения колибактериоза телят

Формула изобретения

Способ лечения колибактериоза телят, включающий энтеросорбцию, отличающийся тем, что два раза в день в качестве сорбента используют полисорб ВП в дозе 100-300 мг/кг массы тела животного, к которому добавляют раствор перманганата калия в концентрации 0,05-0,1% в количестве 500-600 мл.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к микробиологии и фармакотерапии и может быть использовано для целенаправленного выбора средств эффективной терапии и лечебно-профилактических мероприятий при диарейных заболеваниях молодняка сельскохозяйственных животных.

Колибактериоз протекает с симптомами сепсиса и энтерита, возбудителем заболевания является Escherichia coli (кишечная палочка), которая постоянно обитает в кишечнике, обладает свойством токсинообразования. Заболевание наблюдается во все времена года в возрасте от 3 дней и старше и протекает в виде спорадических случаев.

Известны способы лечения колибактериоза с применением антибиотиков, сульфаниламидных препаратов, гипериммунных сывороток, колибактериофага и многочисленных симптоматических средств в зависимости от характера нарушения функций органов и систем организма (см. справочник по ветеринарии, сост. Г.А.Кононов: - Л., Колос, 1978 - с.274; Руководство по общей эпизоотологии под ред. И.А.Бакулова, А.Д.Третьякова. М., Колос, 1979 - с.383).

Известные способы лечения являются трудоемкими и длительными. Кроме того, комплексный подход к лечению сопряжен с высоким риском осложнений вследствие несовместимости лекарственных средств. Наряду с этим химиотерапевтические препараты способствуют формированию полирезистентных штаммов микроорганизмов, что снижает эффективность терапии. Использование противомикробных препаратов широкого спектра действия ведет к развитию дисбактериоза и возникновению суперинфекции.

Известен способ выделения из организма токсических соединений и патогенных микроорганизмов с помощью энтеросорбентов, в частности энтеросгеля - окись кремния на основе геля. Применяют при различных урологических заболеваниях, пищевых отравлениях, токсико-инфекционных поражениях печени, гастритах, диарее и других гнойно-септических процессах (см. “Использование энтеросорбента энтеросгель в клинике профзаболеваний” Методические рекомендации М., 2001 - с.12). Однако известный способ не обладает высоким лечебным эффектом, выпускаемая лекарственная форма в виде брикетированного геля не удобна для дозирования, при вскрытии упаковки препарат быстро высыхает.

Задачей изобретения является повышение терапевтического эффекта. Задача решается путем использования для адсорбции возбудителя Е.coli и токсинов в кишечнике высокочистого дисперсного кремнезема - полисорба ВП (ветеринарный пероральный) в дозе 100-300 мг/кг массы тела, к которому добавляют 0,05%-0,1% раствор перманганата калия (КМnO₄) в количестве 500-600 мл. Предлагаемую композицию задают два раза в день, лечение проводят в течение 2-3 дней. Разовую дозу предлагаемого препарата задают внутрь из сосковой поилки или резиновой бутылки.

Так как полисорб ВП имеет наиболее высокий объем мезопор (примерно 0,7 см ³/г) со средними размерами пор от 13 до 24 нм при соотношении V мезо : V макро=7:1, этот сорбент является оптимальным для удаления из кишечника средних и крупных молекул размерами 2-20 нм, в том числе возбудителя колибактериоза.

Препарат обладает выраженным патогенетическим действием. Полисорб гидрофилен, 100 мг его способен структурировать 1500-2000 мг воды, что предотвращает обезвоживание организма при диарейных заболеваниях.

В связи с тем, что частицы полисорба ВП значительно меньше по размеру, чем микробные клетки, препарат выступает в качестве бакагглютинина, склеивая между собой бактериальные тела, образуя огромные конгломераты. Активными центрами на поверхности сорбента являются в основном гидроксильные группы, благодаря чему полисорб принимает участие в окислительно-восстановительных процессах и может выступать в качестве антиоксиданта.

Добавлением раствора перманганата калия (КМnO₄) к полисорбу ВП достигается усиление лечебного эффекта предлагаемого сорбента.

Пример № 1

Изучение сорбентов

Для выбора средства этиотропной терапии проводили сравнительный анализ сорбентов. Взвесь Е.coli с концентрацией 1,36·10⁸ м.т. /мл готовили из суточной агаровой культуры в 5 мл стерильного физиологического раствора. В пробирки с приготовленной взвесью добавляли навески сорбентов: полифепан, энтеросгель, зоокарб, полисорб в дозе 100 мг/мл и оставляли для контакта на 30, 45 и 60 мин. Затем взвесь из каждой пробирки с соответствующим сорбентом фильтровали, фильтрат высевали в дозе 0,2 мл на плотные питательные среды (МПА Эндо, АГВ). В чашки с посевами на среде АГВ помещали стандартные бумажные диски с антибиотиками. В качестве контроля использовали чистую культуру без добавления сорбентов. Культивировали в течение 24 часов при 37°С в аэробных условиях, затем проводили подсчет колоний на питательных средах.

При взаимодействии Е.coli с полифепаном, энтеросгелем, зоокарбом в течение 30, 45, и 60 мин, а также в контроле наблюдали сплошной рост колоний. Положительный эффект наблюдали при взаимодействии Е.coli с полисорбом. Через 30 мин взаимодействия количество колоний на кровяном агаре составило - 2434, 45 мин - 2198, 60 мин - 1962. Полученные результаты представлены в таблице 1.

Таблица №1 Интенсивность поглощения Е.coli различными сорбентами
Сорбент	Количество колоний Е.coli на кровяном агаре
	Экспозиция 30 мин	Экспозиция 45 мин	Экспозиция 60 мин
Полифепан	+	+	+
Зоокарб	+	+	+
Энтеросгель	+	+	+
Полисорб ВП	2434	2198	1962
Полисорб+КМnO 4	-	-	-
Контроль	+	+	+
Примечание: “+” сплошной рост кишечной палочки, “-” отсутствие роста.

Из данных таблицы следует, что полисорб ВП по сравнению с другими сорбентами обладает более высокой сорбционной емкостью по отношению к Е.coli. Заявляемая композиционная смесь полисорб + КМnO₄ обладает выраженным бактерицидным действием.

С увеличением времени воздействия Е.coli с полисорбом количество колоний на питательных средах уменьшается (см.таблицу 2).

Таблица №2 Результаты сорбции Е.coli полисорбом
Время воздействия Е.coli с полисорбом	Питательные среды
	Кровяной агар	Эндо	АГВ
30 мин	60±0,5	48±0,5	Зб±0,5
45 мин	40±0,5	31±0,5	20±0,5
60 мин	18±0,5	17±0,5	5±0,5
Контроль	14601±0,5	14393±0,5	сплошной рост

Пример №2

Изучение интенсивности роста колоний E.coli под влиянием различных препаратов

Взвесь Е. coli с концентрацией 1,36·10⁷ м.т./мл готовили из суточной агаровой культуры в 5 мл стерильного физиологического раствора. Дополнительно готовили 0,1% раствор калия перманганата и 0,1% отвар коры дуба.

В пробирки № 1, 2, 3 со взвесью добавляли 200 мг полисорба, в пробирки № 4, 5, 6 - раствор перманганата калия; № 7, 8, 9 - раствор перманганата калия и 200 мг полисорба, № 10, 11, 12 - отвар коры дуба и в пробирки № 13, 14, 15 - отвар коры дуба и 200 мг полисорба.

Приготовленные смеси оставляли для взаимодействия на 30, 45 и 60 мин. Затем фильтровали через бумажный фильтр и фильтрат высевали в дозе 0,2 мл на среду Эндо.

Таблица №3 Влияние препаратов на интенсивность роста колоний Е.coli
Испытуемые препараты	Количество колоний Е.coli после воздействия препаратов в течение:
	30 мин	45 мин	60 мин
Полисорб ВП	25±3,57	1,33±0,33	-
Раствор калия перманганата	57±3,72	45,67±5,62	82,33±5,90
Полисорб ВП+КМnO4	-	-	-
Отвар кары дуба	+	+	+
Полисорб ВП+отвар коры дуба	2б±4,66	11±3,43	2±1,53
Примечание: “+” -сплошной рост кишечной палочки “-”-отсутствие роста.

Данные таблицы 3 свидетельствуют о том, что добавление отвара коры дуба к взвеси микробной культуры не снижает интенсивность роста Е. coli. Варьирующий эффект дает калия перманганат. Полисорб ВП через час после воздействия с кишечной палочкой приводит к прекращению роста колоний. Добавление к полисорбу отвара коры дуба не имеет практического значения, так как при этом адсорбирующая способность полисорба снижается. Максимальный бактерицидный эффект отмечен при использовании композиционной смеси полисорба ВП+ КМnO₄. В указанном сочетании препарат полностью подавлял рост колоний уже через 30 мин после взаимодействия с культурой.

Пример № 3

Производственные испытания

У пятнадцати телят черно-пестрой породы в возрасте 3-7 дней внезапно поднялась температура до 41-41,5°С, исчез аппетит. Животные почти не поднимались, конъюнктива и слизистая оболочки ротовой полости имели багрово-красный цвет, у всех телят отмечали признаки диареи. При бактериологическом исследовании фекалий выделены грамотрицательные бактерии, дающие агглютинацию с коли-сыворотками. Из больных животных было сформировано 3 группы по 5 голов в каждой.

Первая группа телят подвергалась лечению по схеме: левомицитин 30 мг/кг массы 2 раза в день, отвар коры дуба 1:10 по 100 мл на прием 2 раза в день и гипериммунная сыворотка по 40 мл внутримышечно однократно.

Вторая группа телят получала полисорб ВП: 50,100,200,300,400 мг/кг массы тела животного 2 раза в день.

Третья группа соответственно полисорб+КMnO₄. Оптимальная доза препарата выявлена 100-300 мг/кг массы тела животного.

Результаты лечения поедставлены в таблице № 4.

Таблица №4 Результаты лечения колибактериоза телят
Группы	Количество больных животных	Выздоровело животных	Продолжительность лечения	Среднесуточный привес за 1 месяц, кг
1	5	5	7±1,5	0,3±0,05
2	5	5	4±0,5	0,4±0,05
3	5	5	2,5±0,5	0,4±0,05

Данные таблицы 4 позволяют сделать вывод, что предлагаемый способ лечения колибактериоза композиционной смесью полисорб+КМnO ₄ сокращает длительность лечения по сравнению с традиционным методом в 3 раза и полисорбом в 2 раза.