способ инактивации вируса спид

Формула изобретения

Способ инактивации вируса СПИД, включающий облучение клеток, содержащих вирус, отличающийся тем, что облучение проводят импульсным светом с частотой следования импульсов 9,4-9,5 Гц, одновременно группой длин волн 516,7; 517,2; 518,2; 636,2 нм, а также группой длин волн 874,0; 732,6; 403,0 нм соответствующих электронным переходам атомов марганца.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к вирусологии, к средствам лучевой инактивации вирусов.

Ближайшим аналогом предлагаемого способа является способ воздействия на вирус СПИДа, который облучали светом, соответствующего электронным переходам атомов цинка (636,2 нм) с экспозицией 30-60 мин и светом, соответствующего электронным переходам в атомах магния (516,7; 517,2; 518,2 нм) (RU 2097427, 27.11.1997 г.).

Недостатком этого способа является низкая инактивация вируса СПИД.

Цель изобретения - увеличение инактивации вируса СПИДа.

Известно, что ионы металлов могут существенным образом повлиять (дестабилизировать) на упорядоченную структуру РНК. Причем этот эффект будет наиболее выражен при больших концентрациях металлов в молекуле РНК. В работе (2) показано, что высокие концентрации двухвалентных металлов могут приводить к ошибочному спариванию оснований нуклеотидов, создавая тем самым источник ошибок в распространении генетической информации.

Металлы, которые обладают высокой координирующей способностью, проявляют оптимум активирующей способности при низких концентрациях, тогда как слабо координирующие ионы металлов сильно активируют фермент при более низких концентрациях металлов.

В зависимости от концентраций, необходимых для максимальной активации, ионы металлов можно расположить в следующий ряд: Мn>Со>Ni>Zn (2).

Отсюда следует, что марганец играет в этом процессе важнейшую роль. Он более прочно связывается с активируемым центром, которым является фосфатная группа, а также с ингибирующим центром, находящегося, как правило, в ферменте.

Поэтому изменением (вариациями) концентрации ионов марганца можно существенным образом повлиять (вмешаться) на биологический процесс, протекающий с участием РНК. Однако изменить концентрацию марганца биохимическим путем крайне сложно.

Вместе с тем, как показали наши исследования, ингибировать работу РНК можно путем подсветки РНК-вирусов на электронных переходах атомов марганца, а именно на длинах волн: 874,0; 732,6; 403,0 нм.

Подсветка же марганца на указанных длинах волн повысит его активность и тем самым уменьшит активность РНК-вирусов, что приведет к их инактивации.

В этой связи был выполнен специальный эксперимент.

На модулях клеточных лимфобластоидных клеточных линий СЕМ и МТ-4, инфицированных вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ) - штамм ВИЧ-1/В RU (острая инфекция), исследована возможность лучевой нейтрализации вируса.

Материалы и методы:

Клетки - клетки МТ-4 выращивали в виде суспензии в среде RPMI 1640 с 15% фетальной сыворотки телят, 100 мкг/мл гентамицина в концентрации 300000 - 500000 клеток в 1 мл. Вирус - Штамм ВИЧ-1/В RU получен из музея штаммов института вирусологии РАМН.

Результаты и обсуждения.

Перед инфицированием чувствительных к ВИЧ-1 клеток вирусный материал облучали светом на линиях магния (516,7; 517,2; 518,2 нм), на линиях цинка (636,2 нм) и линиях марганца (874,0; 732,6 и 403,0 нм) отдельно и в комбинации. Причем облучение вирусного материала производилось не сплошным светом, а импульсным с частотой следования импульсов 9,4-9,5 Гц.

После получения проб вируса монохроматическим светом материал вносили в лунки с клеточными культурами. В качестве положительного контроля использовали необлученный вирус (множественность инфекции 0,1 ед. ТЦД/50 клетка), отрицательного - незараженная клетка.

Инфицированные культуры инкубировали в течение 4-7 суток в атмосфере с 5% СО₂ и 98% влажности при 37°С. Полученные данные показали, что в случае комбинации света, соответствующего электронным переходам атомов магния и цинка снижается образование вирусиндуцированных синцитиев в целом на 65-70%. При этом отмечено заметное снижение уровня наполнения вирусного антигена в культуральной жидкости клеток, зараженных клеток.

Однако когда и комбинация света соответствующего электронным переходам атомов магния и цинка добавили свет, соответствующего электронным переходам атомов магния инактивация вируса повысилась в среднем на 25-30%, что доказывает перспективность заявляемого способа.

ЛИТЕРАТУРА

1. RU 2097427, 27.11.1997 г.

2. Неорганическая биохимия, т.2, изд. Мир, 1978 г.