способ получения спермопродукции от быков производителей

Формула изобретения

Способ получения спермопродукции от быков производителей, включающий введение биологически активного вещества и отбор спермы на искусственную вагину, отличающийся тем, что в качестве биологически активного вещества используют препарат натриевой соли клопростенола, который инъецируют внутримышечно за 30-45 мин перед садкой в дозе 750 мкг на животное.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к сельскому хозяйству, в частности к животноводству.

Известен способ получения спермопродукции от быков-производителей, включающий садку на механический станок или на подставное животное (бык, вол) и получение спермы в специально подготовленную искусственную вагину. Взятие спермы производят согласно графику в специальном манеже, куда приводят производителя из бычатника [1].

Однако указанный способ не позволяет полностью использовать возможности репродуктивной системы быков, то есть имеющийся запас спермиев, обусловленный генотипом.

Кроме того, при продолжительном применении известного способа в однообразных условиях манежа у значительной части животных наблюдается угасание половых рефлексов, снижение количества и качества получаемой спермопродукции.

При получении от быков 6-7 эякулятов в неделю в придатке семенника, семяпроводе и в ампулах семяпровода содержится около 60 млрд. сперматозоидов. При этом непосредственно в семяпроводе и его ампулах накапливается соответственно 1,4 и 1,9 млрд. сперматозоидов. Без существенных изменений сперматозоиды здесь сохраняются до двух суток. Следовательно, здесь всегда есть определенное количество спермиев в разных стадиях старения и отмирания. В связи с этим выживаемость и биологическая ценность сперматозоидов из ампул и семяпроводов невысока. Если бык слабо возбужден и садку делает вяло, то в эякулят сперматозоиды попадают, в основном, из ампул и семяпроводов. Для стимуляции воспроизводительной функции используют биологически активные препараты.

Известен способ стимуляции спермопродукции у быков-производителей путем скармливания после отбора спермы дважды в неделю препарата Гоферт из расчета 2 г на животное. Препарат Гоферт состоит из углекислого лития и глауберовой соли в соотношении 1:2 [2]. При попадании в организм животного препарат стимулирует синтез простагландина, в результате чего у быков увеличивается объем эякулята и концентрация в нем сперматозоидов.

Однако указанный способ имеет ряд недостатков. Так, скармливание этого препарата не у всех животных вызывает адекватную реакцию на продуцирование простагландина, а следовательно, и на повышение воспроизводительной способности быков. Это происходит в связи с наличием значительных индивидуальных различий по живой массе, возрасту, породе и др., что обуславливает спонтанный синтез простагландина в организме быков.

Кроме того, применение этого способа стимуляции требует значительных затрат труда и времени, связанных с необходимостью точного дозирования и индивидуального скармливания небольших доз препарата.

Наиболее близким по технологической сущности является способ получения спермопродукции от производителей в искусственную вагину с использованием эстуфалана [3]. Эстуфалан - синтетический аналог простагландина F₂ , действующим началом которого является 17,18,19,20-татранор-16 (м-хлорфенокси), препарат отечественного производства. Его используют для повышения спермопродуктивности у хряков-производителей дозами 225-275 мкг, который инъецируют хрякам за 30-50 минут до садки. Однако на жвачных животных эстуфалан не испытывался.

Предполагается, что инъекции простагландинов окажут также положительное влияние и на воспроизводительную функцию быков-производителей как опосредованно - через гипоталамо-гипофизарную (нейрогуморальную) систему организма, так и за счет усиления клеточных процессов в самих семенниках, повышения сократительной активности гладких мышц придатка семенника, семяпровода и его ампул.

Целью нашего изобретения является повышение эффективности способа получения спермы. Это достигается путем стимуляции воспроизводительной способности быков-производителей.

Сущность способа заключается в использовании внутримышечно за 30-45 минут перед садкой синтетического аналога простагландина F₂ -эстрофана, натриевой соли клопростенола [4] дозой 750 мкг, повышающем уровень лютропина и тестостерона в крови производителей.

Предлагаемый способ обеспечивает повышение воспроизводительной способности быка, усиливает половой рефлекс, увеличивает объем эякулята, концентрацию, активность сперматозоидов и повышение абсолютного показателя их живучести, то есть биологической полноценности сперматозоидов быка вне организма.

Способ осуществляется следующим образом.

Садки быков (дуплетные) на всем протяжении опыта (3 месяца) осуществляли дважды в неделю на механический станок. При этом перед первой садкой на неделе животным инъецировали за 30-45 минут до садки внутримышечно эстрофан дозой 750 мкг. Через 30-45 минут после введения эстрофана, быков из станков переводили в манеж, где и осуществляли взятие спермы от них с помощью искусственной вагины. Вторая садка на неделе для животных данной группы была контрольной, то есть получение спермы проводили без инъекции простагландина, обычным способом.

На протяжении всего опыта осуществляли контроль над клиническим состоянием подопытных животных. Проводили оценку половой активности быков, определяли объем эякулята, активность и абсолютный показатель живучести спермиев, их концентрацию и общее количество в эякуляте.

Критерием для выявления более эффективного способа являлось количество и качество получаемой от быков спермопродукции.

Примеры, иллюстрирующие изобретение.

Пример 1. Поскольку ранее эстуфалан не применялся на быках-производителях мы провели его испытание параллельно с предлагаемым препаратом - эстрофаном. Для выбора оптимальной концентрации простагландинов - прототипа эстуфалана, действующим началом которого является 17,18,19,20-тетранор-16 (м-хлорфенокси) и опытного эстрофана, действующим началом которого является натриевая соль клопростенола, был проведен опыт по методу групп-периодов на быках-производителях 3-6 летнего возраста симментальской и голштинской пород, принадлежащих Федеральному государственному унитарному предприятию по племенной работе “Белгородское”.

По методу зоотехнических аналогов сформировали две группы животных по пять голов в каждой. Изучали влияние инъекций каждого препарата в дозах 500, 750 и 900 мкг на половую активность и спермопродукцию быков-производителей.

Опыт был разбит на три периода, по одному месяцу каждый, В первый период испытывали дозы простагландинов 500 мкг, во второй - 750 мкг, в третий - 900 мкг. Кормление, содержание и использование подопытных быков были одинаковыми на всем протяжении опыта. Режим использования - две дуплетных садки в неделю. Перед первой садкой на неделе препараты животным не инъецировали (контрольные садки).

Контроль за спермопродукцией проводили на основе изучения следующих показателей: объема эякулята (в миллилитрах), концентрации (в млрд./мл), активности спермиев (в баллах), количества заготовленных спермодоз (в шт.), абсолютного показателя выживаемости (в условных единицах) замороженной-оттаянной спермы. Контроль над половой активностью осуществляли по времени проявления и реализации полового рефлекса (в сек).

Результаты испытаний прототипа и предлагаемого способа в сравнении с известным (без использования препаратов) приведены в табл. 1 и 2.

Из данных, приведенных в табл. 1 видно, что эстуфалан стимулирует воспроизводительную функцию у быков-производителей. Так, при использовании различных доз простагландина время реализации полового рефлекса сократилось на 5,2-13,9%, объем эякулятов увеличился на 5,9-16,1%, активность спермиев возросла на 2,8-10,4%, концентрация их увеличилась на 3,2-11,4%, спермопродукция возросла на 5-26,6%, а показатель выживаемости сперматозоидов увеличился на 11,4-28,7%. При этом наиболее оптимальной оказалась доза 500 мкг, при которой показатели объема эякулятов, активности спермиев, их концентрация, количество полученных сперматозоидов, увеличились, соответственно, на 16,1; 10,4; 11,4; 22,2 и 26,6% по сравнению с контрольными садками.

Таблица №1. Влияние инъекций эстуфалана на показатели половой активности и спермопродукции быков-производителей.

№№ гр.

Доза препарата (мл)

Время реализации пол.рефлекса (сек)

Объем эякулята (мл)

Активность спермиев (балл)

Концентрация спермиев (млрд./мл)

Получено спермодоз в эякуляте (шт.)

Абсолютн. показат. выживаемости (усл. ед.)

1

500

90,8±7,2

3,6±0,6

7,4±0,8

0,93±0,06

220±12,3

13,3±1,4

о

105,4±9,4

3,1±0,6

6,7±0,7

0,88±0,04

180±13,1

10,5±1,2

Разница (%)

-13,8

+16,1

+10,4

+11,4

+22,2

+26,6

2

750

76,3±6,9

4,4±0,5

8,2±0,9

0,86±0,05

250±11,7

13,0±1,3

0

85,6±8,1

4,1±0,7

7,9±0,7

0,85±0,02

233±13,4

10,1±1,2

Разница (%)

-11,9

+7,3

+3,8

+1,2

+7,3

+28,7

3

900

88,0±6,1

3,6±0,4

7,3±0,5

0,89±0,04

231±12,0

12,0±1,1

0

92,8±7,0

3,4±0,3

7,1±0,5

0,86±0,03

22013,4

10,5±1,3

Разница (%)

-5,2

+5,9

+2,8

+3,5

+5

+11,4

Таблица №2. Влияние инъекций эстрофана на половую активность и качество спермопродукции быков-производителей.

№№ гр.

Доза препарата (мл)

Время реализации пол. рефлекса (сек)

Объем эякулята (мл)

Активность спермиев (балл)

Концентрация спермиев (млрд./мл)

Получено спермодоз в эякуляте (шт.)

Абс. показ. выживаемости (усл.ед.)

1

500

79,0±6,7

3,5±,5

7,5±0,7

0,87±0,04

244,0±4,2

15,3±1,4

0

116,0±8,1

3,2±0,6

7,0±0,7

0,76±0,06

189,7±11,0

10,8±1,1

Разница (%)

-31,9

+9,4

+7,1

+13,0

+30,0

+41,7

2

750

80,3±5,4

3,7±0,4

8,5±0,6

0,98±0,03

253,0±10,2

14,5±1,2

0

107,8±6,9

3,1±0,5

7,5±0,5

0,83±0,04

183,0±9,4

10,2±1,3

Разница (%)

-26,0

+19,4

+13,3

+18,1

+38,3

+39,2

3

900

88,4±7,0

3,6±0,4

7,7±0,6

0,84±0,03

220,0±10,3

13,2±1,6

0

0,57±6,8

3,2±0,2

7,5±0,5

0,78±0,04

190,0±8,7

11,0±1,2

Разница (%)

-7,6

+12,5

+2,7

+7,7

+11,6

+20

Эффективность воздействия предлагаемого простагландина - эстрофана на воспроизводительную функцию быков оказалась выше (табл.2).

Из данных табл.2 следует, что оптимальной оказалась доза 750 мкг. У быков этой группы время реализации полового рефлекса сократилось на 26,0%; объем эякулята увеличился на 19,4%; активность сперматозоидов и их концентрация увеличились соответственно на 13,3% и 18,1%; количество спермодоз в одном эякуляте возросло на 38,3%, а абсолютный показатель выживаемости спермиев увеличился на 39,2%.

Пример 2. Проведено сравнительное испытание эффективности прототипа - эстуфалана и предлагаемого способа в оптимальных концентрациях.

Наиболее емкими показателями величины воспроизводительной функции у быков-производителей являются время, необходимое для реализации полового рефлекса, уровень повышения биологической полноценности сперматозоидов (S_a) и общее количество активных сперматозоидов в среднем эякуляте (табл. 3).

Таблица №3. Влияние инъекций эстрофана и эстуфалана в оптимальных дозах на показатели половой активности и спермопродукции быков-производителей.
№№ п/п	Препарат	Доза (мкг)		Время реализации полового рефлекса		Количество спермиев в эякуляте		Абсолютный показатель выживаемости (S a)
				сек	%	млрд	%	Усл. единицы	%
1	Эстрофан	750		80,3±5,4	74,5	3,2±0,05	152,4	14,5±1,2	140,7
2	эстуфалан	500		90,8±7,2	84,7	2,4±0,3	114,3	13,2±1,4	128,3
3	Без препарата	0		107,8±7,5	100	2,1±0,03	100	10,3±1,3	100
Разница между			1-2	10,5	-10,2	0,8	38,1	1,3	12,6
группами			1-3	27,5	-25,5	1,1	52,4	4,2	40,7

Из материалов табл.3 следует, что предлагаемый способ по сравнению с известными более эффективен. У быков первой группы время реализации полового рефлекса сократилось на 10,2%, количество активных спермиев в одном эякуляте увеличилось на 38,1%, а абсолютный показатель выживаемости сперматозоидов после замораживания и оттаивания возрос на 12,% по сравнению с прототипом.

У животных третьей (контрольной) группы, не получавших препараты, исследуемые показатели воспроизводительной функции были хуже: по времени реализации полового рефлекса на 25,5%, по количеству активных сперматозоидов в одном эякуляте - на 52,4%, а абсолютный показатель выживаемости, характеризующий биологическую полноценность спермиев - на 40,7%.

Таким образом, сравнительные испытания показали, что применение предлагаемого способа более активно стимулирует воспроизводительную функцию у быков-производителей и дает возможность повысить в среднем на 38,1-52,4% объем получаемой от них спермопродукции (по сравнению с известным способом).

Источники информации

1. Инструкция по организации и технологии работы станций и предприятий по искусственному осеменению сельскохозяйственных животных. М., Колос, 1981.

2. Деряженцев В.И. и др. Способ получения спермопродукции от быков-производителей. А.С. №1724137. Бюллетень №48, 1991 г.

3. Деряженцев В.И. и др. “Способ получения спермопродукции от хряков-производителей”. А.С. №1703088; Бюллетень №1 от 07.01.1992 г.

4. Наставления по использованию эстрофана. СПОФА, объединение фармацевтических заводов. Прага, 1984.