средство, обладающее иммуномодулирующей активностью

Формула изобретения

Средство, обладающее иммуномодулирующей активностью на основе растительного сырья, отличающееся тем, что оно представляет собой водорастворимый полисахаридный комплекс (ПСК), полученный путем экстракции водой тысячелистника благородного с предварительной обработкой ацетоном.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к области медицины, в частности для выделения биологически активных веществ из лекарственного растительного сырья, конкретно водорастворимого полисахаридного комплекса из травы тысячелистника благородного, обладающего иммуномодулирующей активностью.

Известно лекарственное растительное сырье, обладающее иммуномодулирующей активностью: это ПСК, выделенный из корней женьшеня (Смолина Т.П. Иммуномодулирующее действие полисахаридов, выделенных из корня и культуры клеток женьшеня //Автореферат. - Владивосток. - 1994. – 21 с.), полисахаридный комплекс, выделенный из софоры японской (Горбачева Л.А. Целенаправленное фитохимическое изучение плодов софоры японской. - Канд.диссерт. - 1998) и др.

Однако лекарственные растения, из которых выделен полисахаридный комплекс и изучена его иммуномодулирующая активность, в основном имеют очень маленький ареал распространения.

Экстракт тысячелистника благородного применяется в фитотерапии при заболеваниях сердечно-сосудистой системы, желудочно-кишечного тракта (Растительные ресурсы СССР: Цветковые растения, их химический состав, использование; Семейство Asteraceae (Compositae)//Под ред. Соколова С.Я. - СПб.: Наука, 1993. - 352 с.), но в официнальной медицине не известны иммуномодулирующие свойства тысячелистника благородного.

Задачей изобретения является расширение ассортимента иммуномодулирующих средств за счет более рационального использования растительного сырья.

Поставленная задача решается тем, что предложен водорастворимый полисахаридный комплекс из сырья тысячелистника благородного, предварительно обработанного ацетоном.

Способ получения водорастворимого ПСК из травы тысячелистника благородного, обладающего иммуномодулирующей активностью, осуществляется следующим образом. Высушенное и измельченное сырье (размер частиц 2-3 мм) предварительно обработанное ацетоном, помещают в круглодонную колбу, заливают горячей очищенной водой в соотношении 1:10 и экстрагируют на кипящей водяной бане в течение 2-х часов. Экстракт фильтруют через слой марли, упаривают в вакууме до 1/5 первоначального объема, охлаждают. Вытяжку вливают в трехкратный объем 96%-ного этилового спирта и оставляют на 24 часа. Выпавший осадок водорастворимого полисахаридного комплекса отфильтровывают, промывают последовательно диэтиловым эфиром, этиловым спиртом 70%, 96%, ацетоном, высушивают при комнатной температуре. Полученный водорастворимый полисахаридный комплекс растворяют в небольшом количестве воды и переосаждают трехкратным количеством 96%-ного этанола. Выпавший осадок отфильтровывают и промывают как описано ранее.

Экспериментально установлено, что водорастворимый полисахаридный комплекс из травы тысячелистника благородного обладает выраженной иммуномодулирующей активностью.

Целью данного исследования было изучение водорастворимого полисахаридного комплекса из травы тысячелистника благородного на развитие гуморального иммунного ответа в норме при приеме антибиотика гентамицина и при экспериментальной стафилококковой инфекции, сопровождающейся развитием вторичного иммунодефицита.

Исследование влияния ПСК на развитие гуморального иммунного ответа в норме и при приеме антибиотика проводили на крысах линии Вистар, массой 150-190 мг. В качестве антигена использовали 5% взвесь эритроцитов барана по 0,25 мл на 100 г веса однократно, внутрибрюшинно.

Антибиотик гентамицин животным вводили в течение 5 дней в дозе 3 мг/кг внутримышечно. ПСК животные получали перорально трехкратно с интервалом в 24 часа в дозе 3,0 мг/кг, сразу же после введения антибиотика. Животных иммунизировали эритроцитами барана (ЭБ) в заключительный день введения ПСК. Показатели иммунного ответа: количество антителообразующих клеток (АОК) и количество розеткообразующих клеток (РОК) определяли на 5-й день после иммунизации. Результаты представлены в таблице 1.

Установлено, что водорастворимый полисахаридный комплекс из травы тысячелистника благородного увеличивают количество АОК примерно в 2,3 раз, а количество РОК - примерно в 1,9 раза.

Применение антибиотика снижает активность антителообразующих клеток в 4,4 раза, а активность розеткообразующих клеток - в 5,3 раза. Использование водорастворимого полисахаридного комплекса тысячелистника благородного значительно снижает иммуносупрессорное действие антибиотика, не доводя его до уровня контроля.

Изучение иммуномодулирующей активности также проводили на мышах гибридах (СВА 57BL/6), массой 15-21 г, используя модель генерализованной стафилококковой инфекции.

Модель генерализованной стафилококковой инфекции у мышей воспроизводили путем двухкратного с трехдневным интервалом введения 18-часовой культуры золотистого стафилококка (штам Жаева) в подушечку конечности в дозе 3х10⁸ микробных клеток (Моргунов И.Н. и др., 1982). Полисахаридный комплекс вводили животным однократно внутрибрюшинно в дозе 3,0 мг/кг массы животного одновременно со второй инъекцией культуры стафилококка и антигеном (ЭБ). Результаты эксперимента представлены в таблице 2.

В группе животных, которым вводили культуру стафилококка и антиген, отмечалось статистически достоверное угнетение уровня АОК и РОК (число АОК уменьшалось в 1,4 раз, число РОК - в 1,7 раз). Полисахаридный комплекс увеличивал число АОК в 1,3 раза, а количество РОК - в 1,4 раза, по сравнению с введением стафилококка.

Таким образом, водорастворимый полисахаридный комплекс из травы тысячелистника благородного обладает способностью снижать иммуносупрессирующие действия антибиотиков и стафилококковой инфекции, что обуславливает перспективность прикладного использования ПСК как иммунокоррегирующего средства.