способ определения скрытой крови в выделениях из молочной железы

Формула изобретения

Способ определения скрытой крови в выделениях из молочной железы, характеризующийся тем, что выделения, взятые из соска молочной железы, смешивают с реактивом, представляющим собой смесь раствора азопирама с 3%-ным раствором перекиси водорода в отношении 1:1, после чего проводят хроматографический анализ и визуально определяют по наличию фиолетово-синего, переходящего в сиреневое или бурое окрашивание, скрытую кровь в выделениях молочной железы.

Описание изобретения к патенту

ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Изобретение относится к медицине и может применяться при выявлении больных с синдромом патологической секреции, обусловленным новообразованиями в млечных протоках молочной железы, а также дисгормональными изменениями молочной железы.

ПРЕДШЕСТВУЮЩИЙ УРОВЕНЬ

Единственная физиологическая функция молочной железы - лактация -используется все меньше в современной жизни. Сокращается как количество рождаемых детей в высокоразвитых странах, так и сроки естественного вскармливания детей грудью. Такая невостребованность ресурсов женского организма ведет к тому, что ткань молочной железы, гормоны, участвующие в лактогенном процессе, расходуются недостаточно. В связи с этим возникает вялотекущий процесс лактации вне периода беременности и кормления грудью, что относится к патологической секреции, является одним из проявлений диффузной мастопатии - дисплазии молочных желез и поводом обращения к маммологам большого количества женщин с так называемыми серозными выделениями.

Кроме того, большое внимание специалистов вызывают выделения, связанные с наличием опухоли в протоке молочной железы - доброкачественной - внутрипротоковой папилломы, или злокачественной - папиллярной карциномы. От оперативности проведения диагностических мероприятий и соответствующего лечения во многом зависит исход заболевания.

Дифференциальная диагностика между патологическими процессами, вызывающими синдром патологической секреции, важна как для выявления опухолей молочной железы, в том числе и малых раков, так и для коррекции дисгормональных изменений.

При гормональных нарушениях в системе гипотолямус - гипофиз - яичники, или при нарушении утилизации гормонов, связанных с заболеваниями сердца и печени, или при экзогенном введении гормонов при заболеваниях щитовидной железы, яичников и т.п., клинически чаще наблюдаются выделения из нескольких протоков молочных желез с двух сторон. Визуально различаются выделения прозрачные, бесцветные, светло-желтые, серые или светло-бежевые, мутно-серые, голубоватые, мутно-зеленые вплоть до темно-зеленых. Разнообразные оттенки обусловлены давностью пребывания выделений в протоках и количеством детрита в них. Цитологически в мазках выявляются молозивные клетки, детрит, белковые массы.

Опухолевый процесс, поражающий стенку протока или кисты, из-за травмирования тканей опухоли позволяет обнаружить визуально плазмоподобные, сукровичные, янтарные выделения из соска, чаще с примесью свежей или измененной крови - кровянистая, бурая, темно-коричневая жидкость, в зависимости от степени распада эритроцитов.

Цитологически в мазках выявлялись элементы внутрипритоковой патологии - эритроциты, гемосидерофаги, единичные клетки или скопления кубического эпителия в сосочках, раковые клетки.

Наибольшие трудности и связанные с этим вопросы лечения больных возникают при сочетании описанных ранее форм патологической секреции.

При клиническом осмотре протоков с обильными серозными выделениями можно пропустить проток с кровянистыми выделениями, а сукровичные и скудно-кровянистые выделения, смешанные с молозивными, просто не различимы. Цвет их может быть необычным - мутно-желтым, мутно-оранжевым, серо-коричневым. Цитологическое исследование позволяет уточнить характер процесса и обнаружить элементы крови или клетки эпителия в выделениях из определенного протока. При обнаружении данных клеток это является показанием к проведению дополнительного исследования - дуктографии.

Любые выделения требуют цитологического контроля для исключения смешанной патологии. Но в ряде случаев цитологи, при обильных серозных выделениях и обилии цитологического материала, связанного с дисгармональной патологией, могут пропустить единичные эритроциты, измененные эритроциты принять за нейтрофилы, и наоборот.

Проанализированные существующие различные способы для определения скрытой крови: производных гемоглобина, дающих характерное окрашивание - гематина и гемохромогена - проба Геллера, проба Вебера, бензидиновая проба, реакция с амидопирином и уксусной кислотой, О-толидиновая проба - не дают нужного эффекта.

Известен способ определения наличия злокачественного процесса [1]. В сыворотке крови определяют магнийнезависимую ДНКазную активность при рН 5,0-7,5 и количественное содержание перхлорнорастворимой фракции. Способ достаточно сложен, однако позволяет обеспечить высокую степень выявляемости онкологических заболеваний, по заявлению авторов.

Известен способ В.Г. Малышева определения количества крови в порции мочи [2], включающий обработку пробы мочи уксусной кислотой, перекисью водорода и красителем с последующей регистрацией интенсивности окраски, который отличается тем, что с целью повышения точности способа пробу дополнительно обрабатывают диэтиловым эфиром, при этом обработке подвергают фиксированный объем мочи и гемолизата периферической крови, в качестве красителя используют смесь 20%-ного раствора амидопирина, 5%-ного раствора сернокислого анилина и 96-градусного этилового спирта, взятых в соотношении 1:1:5 по объему, которую добавляют к эфирному экстракту мочи, интенсивность окраски регистрируют спектрофотометрически, а количество крови рассчитывают по определенной формуле. Способ сложен и достаточно трудоемок.

В связи с этим возникла необходимость в простом и доступном способе определения крови в выделениях молочной железы.

РАСКРЫТИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Технический результат, на достижение которого направлено предлагаемое изобретение, заключается в том, чтобы предложить такой способ определения скрытой крови в выделениях из молочной железы, который позволял бы на ранней стадии диагностики быстро, просто и достаточно надежно выявить наличие скрытой крови в выделениях из молочных желез.

Достигается указанный технический результат следующим образом.

Способ определения скрытой крови в выделениях из молочной железы, включающий приготовление реактива, смешивание тестируемого образца с реактивом, хромагографический анализ тестируемого образца, отличающийся тем, что для приготовления реактива используют раствор азопирама, который смешивают с 3%-ным раствором перекиси водорода в отношении 1:1, затем небольшое количество выделений, взятых из соска молочной железы, смешивают с небольшим количеством полученного реактива, через 1-3 минуты путем хроматографического визуального анализа определяют наличие следов крови в выделениях, взятых из соска молочной железы, затем выделяют положительную и слабоположительную реакции, при этом для сохранения срока годности реактива в течение 1-3 месяцев при температуре от +1 до +6С, его компоненты помещают в разные емкости.

Таким образом, предлагаемый способ определения скрытой крови в выделениях молочной железы заключается в следующем. Сначала готовят реактив для определения скрытой крови в выделениях молочной железы. Для приготовления реактива используют раствор азопирама, который смешивают с равным количеством 3%-ного раствора перекиси водорода в соотношении 1:1. Затем на предметном стекле каплю выделений из соска молочной железы смешивают с каплей полученного реактива. Далее определяют присутствуют ли в выделениях следы крови путем визуального наблюдения: не позднее чем через три минуты появляется фиолетово-синее окрашивание, переходящее в сиреневое или бурое. В зависимости от интенсивности окрашивания выделяют положительную и слабоположительную реакции. Реактив годен в течение двух часов, поэтому используют две отдельные емкости: одну для раствора азопирама, другую для раствора перекиси водорода. В этом случае раствор азопирама в закрытой посуде при температуре, не превышающей +6С, может храниться до трех месяцев.

Кроме того, указанным способом были проведены отсроченные в течение одного месяца реакции с высушенной каплей выделений на стекле и с реакцией с засохшей каплей на фильтрованной и обычной белой бумаге. Результаты тестирования высушенных выделений совпадали с результатами тестирования свежих выделений. Таким образом, указанный способ позволяет определять наличие скрытой крови в выделениях из молочной железы также при проведения скрининговых осмотров.

ПРИМЕРЫ

Для приготовления реактива используют раствор азопирама, который смешивают с 3%-ным раствором перекиси водорода в отношении 1:1, затем небольшое количество выделений, взятых из соска молочной железы, смешивают с небольшим количеством полученного реактива, через 1,2 или 3 минуты путем хроматографического визуального анализа определяют наличие следов крови в выделениях, взятых из соска молочной железы, затем выделяют положительную и слабоположительную реакции.

Если при смешивании реактива с выделениями из соска молочной железы появляется окрашивание - это означает, что в выделениях присутствуют элементы крови.

Чем интенсивнее окрашивание, тем большее количество элементов крови присутствует в данном выделении из соска молочной железы.

Если при смешивании реактива с выделениями из соска молочной железы не появляется окрашивание - это означает, что в выделениях не присутствуют элементы крови.

Была осмотрена 141 женщина с выделениями из сосков в возрасте от 20 до 75 лет. В группе больных с выделениями, обусловленными гормональными изменениями, средней возраст составил 43.5 лет, в группе с подозрениями на новообразование протоков - 48.6 лет. При анализе результатов, полученных при определении скрытой крови в выделениях из молочных желез предлагаемым способом, учитывались данные комплексной диагностики: клинические визуальные данные - таблица 1, данные цитологического исследования - таблица 2, данные дуктографии (дуктография контрольной группы с молозивными выделениями и отсутствием цитологических показаний делалась лишь в единичных случаях) - таблица 3. Из приведенных в таблицах данных предварительного исследования видно, что данные, полученные указанным способом, соответствуют данным комплексной диагностики при выявлении косвенных признаков внутрипротоковых разрастаний.

В таблице 4 приведены данные о прооперированных больных при выявленной внутрипротоковой патологии, которые получены лишь у части больных. Как следует из таблицы, при диагностированном раке и внутрипротоковых папилломах тест, проведенный указанным способом на наличие скрытой крови в выделениях из молочной железы положителен в 100 и 98.3% соответственно. Наличие крови в выделениях из соска является важным признаком опухолевого процесса в протоках молочной железы.

ПРОМЫШЛЕННАЯ ПРИМЕНИМОСТЬ

Предлагаемый способ позволяет на ранней стадии диагностики быстро, просто и достаточно надежно проводить определение скрытой крови в выделениях из молочной железы, используя описанные реактивы и порядок их применения. Проведенные таким способом тестирования могут удачно дополнить цитологическое исследование, например, в таких случаях, когда единичные эритроциты обнаружить можно, или в случаях, когда измененные нейтрофилы ошибочно принимаются за эритроциты. Используя только указанный способ, без дуктографии и четкой локализации протоковой патологии нельзя провести экономные операции. Однако, если при попытке сделать дуктографию не удается войти в проток молочной железы и в случаях, когда из-за выраженной эктазии не удается распознать патологию протока молочной железы, данные, полученные предлагаемым способом, могут существенно помочь диагностике.

ИСТОЧНИКИ ИНФОРМАЦИИ

1. А.с. СССР №1777080, кл. G 01 N 33/50, публ. 23.11.92, Бюл.№43.

2. Патент РФ №2013777, кл. G 01 N 33/50, публ. 30.05.94, Бюл. №10.