способ количественной цитологической оценки эффективности сперматогенеза

Формула изобретения

Способ подготовки препарата для количественной цитологической оценки эффективности сперматогенеза, включающий взятие биоптата тканей семенника, обработку пробы, производство мазка из капли препарата, высушивание его, окрашивание, отличающийся тем, что обработка 100 мг тканей включает гомогенизацию с 2 мл среды № 199 в течение 5 мин, с добавлением 250 мкл сыворотки IV группы крови и 250 мкл эритроцитарной массы IV группы крови.

Описание изобретения к патенту

Данный способ относится к медицине, а именно к андрологии. Известен способ исследования гистологических тканей яичка [1].

Способ включает забор материала в достаточном количестве (не менее 0,5 куб. см), соответствующую обработку раствором формалина, проводку через спирты возрастающей крепости (в течение в среднем одной недели), приготовление гистологических срезов при помощи аппарата - микротома, окраска, исследование готового препарата под микроскопом.

Известна также миелограмма - качественное и количественное исследование состояния гемопоэза по картине костного мозга после проведения стернальной пункции [2]. Способ включает забор материала, обработку его буферными растворами (в частности, часто применяется фосфатный буфер), затем производится мазок на стекле по стандартной методике, который высушивается и окрашивается. При микроскопировании получают количественную и качественную оценку состоянию костного мозга аналогично анализу крови.

Целью изобретения является сокращение времени и повышение точности диагностики.

Поставленная цель достигается тем, что биоптат тканей семенника помещают в гомогенизатор со средой № 199, гомогенизируют с добавлением сыворотки IV группы крови и эритроцитов IV группы крови. Затем каплю гомогената помещают на предметное стекло, делают мазок, высушивают, окрашивают и с помощью микроскопа проводят дифференциальную диагностику и количественный подсчет отдельных групп клеток сперматогенеза.

Время приготовления препарата по данному способу сокращается, препарат готовят во время лечебно-диагностического мероприятия, что также способствует ускорению постановки диагноза. На препарате нет агглютинации и практически отсутствуют поврежденные клетки, что дает возможность четкой дифференцировки клеток всех стадий сперматогенеза и повышает точность диагностики. Возможность количественного подсчета клеток каждой генерации сперматогенного эпителия аналогично подсчету клеток в миелограммах и расчет количества этих клеток в железе в целом также ведет к повышению точности диагностики.

Способ осуществляется следующим образом. Берут 100 мг ткани семенника, измельчают лезвием на предметном стекле. Пробу помещают в гомогенизатор с 2 мл среды № 199 и гомогенизируют в течение 5 минут. Добавляют 250 мкл сыворотки IV группы крови и 250 мкл эритроцитарной массы IV группы крови. Аккуратно перемешивают. Наносят каплю взвеси на предметное стекло и по стандартной методике изготовляют мазок, который потом высушивают и окрашивают по Романовскому-Гимзе. Подсчет клеток проводят с использованием светового микроскопа под масляной иммерсией с объективом 90, окуляром 10.

Способ опробован в лаборатории на 80 подопытных животных - самцах белых крыс. Параллельно для сопоставления проводились исследования гистологических препаратов тканей яичка.

Способ использовался в клинических условиях для диагностики заболеваний у 3 больных. В этом случае материал, взятый во время биопсии (пункции) яичка массой 50 мг, исследовали описанным выше способом, но объем среды № 199 составлял 1 мл.

Источники информации

1. Елисеев В.Г., Афанасьев Ю.И., Юрина Н.А. Гистология. - 3 изд. - М.: Медицина, 1983.

2. Руководство по гематологии под редакцией чл.-кор. АМН СССР А.И. Воробьева, изд. 2, переработанное, в 2-х томах, М.: Медицина, 1985.