омега-амиды n-арилсульфонил-аминокислот

Формула изобретения

1. Омега-амиды N-арилсульфонил-аминокислот формулы I

и/или стереоизомерная форма соединения формулы I, и/или физиологически приемлемая соль соединения формулы I,

где R¹ означает 1. фенил,

2. фенил, однократно замещенный 2.6. галогеном, 2.15. остатком гетероцикла из следующей группы: морфолин, пирролидин,

R² означает атом водорода,

R³ означает

1. -(С₁-С₄)-алкил-С(О)-N(R⁶)-R⁷, где R⁶ и R⁷ вместе с азотом, с которым они связаны, образуют остаток формулы IIa, IIe

где q=0 или 1;

Z означает атом углерода или ковалентную связь;

R⁸ означает атом водорода или галоген,

2. -(С₁-С₄)-Алкил-С(О)-Y, где Y означает остаток формул IIc или IId

где R⁸ означает атом водорода или галоген;

R⁹ означает 2.1 атом водорода,

3.-(С₁-С₄)-Алкил-С(О)-N(R⁹)-(CH₂)_о-N(R⁴)-R⁵, причем R⁹ имеет указанные выше значения; о=2;

R⁴ и R⁵ вместе с кольцевой аминогруппой образуют 4-7-членное кольцо, в котором один атом углерода замещен на -О-; А означает а) ковалентную связь; B означает а) -(СН₂)_m-, где m=0;

X означает –CH= CH-.

2. Соединение формулы I по п.1, отличающееся тем, что R¹ означает 1. фенил или 2. фенил, однократно замещенный галогеном; R² означает атом водорода; R³ означает 1. -(С₁-С₄)-алкил-С(О)-N(R⁶)-R⁷, где R⁶ и R⁷ вместе с азотом, с которым они связаны, образуют остаток формулы IIa

где q=0 или 1;

Z означает атом углерода;

R⁸ означает атом водорода или галоген,

2. -(С₁-С₄)-Алкил-С(О)-Y, где Y означает остаток формул IIc или IId

где R⁸ означает атом водорода или галоген;

R⁹ означает атом водорода или

3. -(С₁-С₄)-алкил-С(О)-N(R⁹)-(CH₂)_о-N(R⁴)-R⁵, причем R⁹ означает атом водорода, о=2; R⁴ и R⁵ вместе с кольцевой аминогруппой образуют 4-7-членное кольцо, в котором один атом углерода замещен на -О-; А означает а) ковалентную связь; B означает а) -(СН₂)_m-, где m=0.

3. Соединение формулы I по п.1, отличающееся тем, что оно является соединением из группы, включающей 2-(бифенил-4-сульфониламино)-4-(нафталин-1-ил-карбамоил)-масляную кислоту, 2-(бифенил-4-сульфониламино)-4-(нафталин-2-ил-карбамоил)-масляную кислоту, 2-(бифенил-4-сульфониламино)-4-(2-фениламино-этил-карбамоил)-масляную кислоту, 2-(4"-хлор-бифенил-4-сульфониламино)-4-(3-морфолин-4-ил-пропилкарбамоил)-масляную кислоту, трифторацетат 4-(3-(4-(бифенил-4-сульфониламино)-4-карбокси-бутириламино)-пропил)-4-морфолиния, 2-(бифенил-4-сульфониламино)-5-(2,3-дигидроиндол-1-ил)-5-оксопентановую кислоту, 5-(2,3-дигидроиндол-1-ил)-5-оксо-2(4"-пирролидин-1-ил-бифенил-4-сульфониламино)-пентановую кислоту, 2-(4"-хлор-бифенил-4-сульфониламино)-5-(2,3-дигидроиндол-1-ил)-5-оксопентановую кислоту, 2-(4"-бром-бифенил-4-сульфониламино)-5-(2,3-дигидро-индол-1-ил)-5-оксопентановую кислоту, 2-(4"-хлор-бифенил-4-сульфониламино)-5-(5-фтор-2,3-дигидроиндол-1-ил)-5-оксопентановую кислоту, 2-(4"-бром-бифенил-4-сульфониламино)-5-(5-фтор-2,3-дигидроиндол-1-ил)-5-оксо-пентановую кислоту, 5-(5-фтор-2,3-дигидроиндол-1-ил)-5-оксо-2-(4"-пирролидин-1-ил-бифенил-4-сульфониламино)-пентановую кислоту и 5-(5-фтор-2,3-дигидроиндол-1-ил)-2-(4"-морфолин-4-ил-бифенил-4-сульфониламино)-5-оксопентановую кислоту.

4. Соединение формулы I по п.1, отличающееся тем, что оно является солью 2-амино-2-(гидроксиметил)-1,3-пропандиола, солью триметиламина, солью триэтиламина, солью этаноламина или солью триэтаноламина.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к омега-амидам N-арилсульфониламинокислот, способу их получения и примению их в качестве лекарственных средств.

В заявках ЕР 0606046, WO 95/35276 и WO 96/27583 описаны арилсульфонаминогидроксамовые кислоты и их действие в качестве ингибиторов матричной металлопротеиназы. Специальные арилсульфонаминокарбоновые кислоты служат в качестве промежуточных продуктов для получения ингибиторов тромбина (ЕР 0468231) и ингибиторов альдозоредуктаз (ЕР 0305947). В заявке ЕР 0757037 описано также действие производных сульфониламинокислот в качестве ингибиторов металлопротеиназы.

При поиске активных соединений для лечения заболеваний соединительных тканей было показано, что предложенные согласно изобретению сульфониламинокарбоновые кислоты являются сильными ингибиторами матричных металлопротеиназ. При этом особое значение придается торможению стромелизина (ММР-3) и нейтрофильной коллагеназы (ММР-8), поскольку оба фермента участвуют в разложении протеогликанов как важные компоненты хрящевой ткани (A.J.Fosang и др. J. Clin. Invest., 98 (1996), 2292-2299). Равным образом к семейству белков матричных металлопротеиназ относятся такие ферменты, которые участвуют в структурном разрушении и построении компонентов матрицы. Например, ММР-1 (коллагеназа-1) выполняет жизненно важную функцию, поскольку она участвует в расщеплении природного коллагена, в частности, там, где имеют место морфогенетические изменения. Медицинские биологически активные вещества, которые хотя и способны ингибировать ММР-3 и ММР-8, но остаются неактивными по отношению к ММР-1, таким образом являются предпочтительными. Особенно предпочтительным с точки зрения здоровья человека или животного может быть такое биологически активное вещество, которое наряду с умеренным ингибированием ММП-3 и -8 не оказывает или оказывает только слабое влияние на ММР-1. Поэтому изобретение относится к соединению формулы I

и/или стереоизомерной форме соединения формулы I, и/или физиологически приемлемой соли соединения формулы I, причем R" означает

1. фенил,

2. фенил, который одно- или двукратно замещен

2.1 (С₁-С₆)-алкилом, линейным, циклическим или разветвленным,

2.2 гидроксигруппой,

2.3 (С₁-С₆)-алкил-С(O)-O-,

2.4 (С₁-С₆)-алкил-O-,

2.5 (С₁-С₆)-алкил-O- (С₁-С₄)-алкил-O-,

2.6 галогеном,

2.7 -СF₃,

2.8 -CN,

2.9 -NO₂,

2.10 НО-С(О)-,

2.11 (С₁-С₆)-алкил-O-С(O)-,

2.12 метилендиоксогруппой,

2.13 R⁴-(R⁵)N-C(O)-

2.14 R⁴-(R⁵)N- или

2.15 гетероциклом из следующей группы:

изоксазолидин, морфолин, изотиазолидин, тиоморфолин, пиразолидин, имидазолидин, пиперазин, азетидин, пиррол, пирролин, пирролидин, пиридин, азепин, пиперидин, оксазол, изоксазол, имидазол, пиразол, тиазол, изотиазол, диазепин, тиоморфолин, пиримидин и пиразин, которые незамещены или замещены заместителями, описанными с 2.1 по 2.14, или

3. гетероароматическая группа, из нижеследующих от 3.1 по 3.15 групп, которая незамещена или замещена, как описано с 2.1 по 2.14,

3.1 пиррол,

3.2 пиразол,

3.3 имидазол,

3.4 триазол,

3.5 тиофен,

3.6 тиазол,

3.7 оксазол,

3.8 изоксазол,

3.9 пиридин,

3.10 пиримидин,

3.11 индол,

3.12 бензотиофен,

3.13 бензимидазол,

3.14 бензоксазол или

3.15 бензотиазол,

R², R⁴ и R⁵ являются одинаковыми или различными и означают

1. атом водорода,

2. (С₁-С₆)-алкил-,

3. НО-С(O)-(С₁-С₆)-алкил-,

4. фенил-(СН₂)_n-, где фенил не замещен или одно- или двукратно замещен, как описано с 2.1 по 2.14, и n означает целое число нуль, 1 или 2, или

5. пиколил или

6. R⁴ и R⁵ вместе с кольцевой аминогруппой образуют 4-7-членное кольцо, в котором в случае необходимости один из атомов углерода заменен -О-, -S- или -NH-,

R³ означает

1. -(С₁-С₄)-алкил-С(O)-N(R⁶)-R⁷, где R⁶ и R⁷ вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют остаток формулы IIа, IIb или IIе

причем в формулах IIа, IIb и IIе

q означает целое число нуль, 1 или 2 и

r означает целое число нуль или 1,

Z означает атом углерода, азота, кислорода или серы или ковалентную связь и

R⁸ означает атом водорода или значения, описанные для R¹ под 2.1 до 2.14,

2. -(С₁-С₄)-алкил-С(O)-Y,

где Y означает формулу IIс или IId

причем в формулах IIс и IId

R⁸ означает атом водорода или имеет значения, описанные для R¹ под 2.1 до 2.14 и

R⁹ означает 2.1 атом водорода

2.2 (С₁-С₆)-алкил-,

2.3 НО-С(O)-(С₁-С₆)-алкил-,

2.4 фенил- (СН₂)_n-, где фенил не замещен или одно- или двукратно

замещен, как описано для R¹ с 2.1

по 2.14, и n означает целое число

нуль, 1 или 2, или

2.5 пиколил или

3. -(С₁-С₄)-алкил-C(O)N(R⁹)-(CH₂)_o-N(R⁴)-R⁵, причем R⁹ имеет указанные выше значения, о означает целое число 2, 3, 4 или 5 и

R⁴ и R⁵ имеют указанные выше значения,

А означает

a) ковалентную связь,

b) -О-,

c) -СН=СН- или

d) -CC-,

B означает

а) -(СН₂)_m-, где m означает целое число нуль, 1, 2, 3,

4, 5 или 6,

b) -O-(СН₂)_р, где р означает целое число от 1 до 5, или

c) -СН=СН- и

Х означает -СН=СН-, атом кислорода или атом серы.

Предпочтительным является соединение формулы I, где R’ означает

1. фенил или

2. фенил, который однократно замещен

2.1 (С₁-С₆)-алкилом, где алкил является линейным, циклическим или разветвленным,

2.2 -ОН,

2.3 (С₁-С₆)-алкил-С(О)-О-,

2.4 (С₁-С₆)-алкил-O-,

2.5 (С₁-С₆)-алкил-O-(С₁-С₄)-алкил-O-,

2.6 галогеном,

2.7 -СF₃ или

2.8 R⁴-(R⁵)N-, R², R⁴ и R⁵ являются одинаковыми или различными и означают

1. атом водорода,

2. (С₁-С₆)-алкил- или

3. R⁴ и R⁵ вместе с кольцевой аминогруппой образуют 4-7-членное кольцо, в котором в случае необходимости один из атомов углерода заменен -О-, -S- или -NH-,

R³ означает

1. -(С₁-С₄)-алкил-С(О)-N(R⁶)-R⁷, где R⁶ и R⁷ вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют остаток формулы IIа, причем в формуле IIа

q означает целое число нуль или 1 и

Z означает атом углерода, азота, кислорода или серы и

R⁸ означает атом водорода или значения, описанные для R¹ под 2.1 до 2.8,

2. -(С₁-С₄)-алкил-С(O)-Y, где

Y означает остаток формулы IIс или IId, причем в формулах IIс и IId

R⁸ означает атом водорода или имеет значения, описанные для R¹ под 2.1 до 2.8 и

R⁹ означает атом водорода или

3. -(С₁-С₄)-aлкил-C(O)-N(R⁹)-(CH₂)_o-N(R⁴)-R⁵, причем

R⁹ означает атом водорода,

о означает целое число 2 или 3 и

R⁴ и R⁵ являются одинаковыми или различными и означают

1. атом водорода,

2. (С₁-С₆) -алкил или

3. R⁴ и R⁵ вместе с кольцевой аминогруппой образуют 4-7-членное кольцо, в котором в случае необходимости один из атомов углерода заменен на -О-, -S- или -NH-,

А означает ковалентную связь или -О-,

В означает

a) -(СН₂)_m-, где m обозначает целое число нуль, 1 или 2,

b) -O-(CH₂)_p, где р означает целое число 1 или 2, и

Х означает -СН=СН-.

Кроме этого, предпочтительным является соединение формулы I, где

R’ означает

1. фенил или

2. фенил, который однократно замещен

2.1 хлором,

2.2 бромом,

2.3 фтором,

2.4 пирролидином или

2.5 морфолином,

R² означает атом водорода,

R³ означает

1. -(С₁-С₄)-алкил-С(O)-N(R⁶)-R⁷, где R⁶ и R⁷ вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют остаток формулы IIа, причем в формуле IIа

q означает целое число нуль или 1,

Z означает атом углерода и

R⁸ означает атом водорода, хлор, бром или фтор,

2. - (С₁-С₄)-алкил-С(O)-Y, где

Y означает остаток формулы IIс или IId, причем в формулах IIc и IId

R⁸ и R⁹ означают каждый атом водорода или

3. -(С₁-С₄)-алкил-C(O)-N(R⁹)-(CH₂)_o-N(R⁴)-R⁵, причем

R⁹ означает атом водорода,

о означает целое число 2 или 3 и

R⁴ и R⁵ являются одинаковыми или различными и независимо друг от друга означают

1. атом водорода,

2. фенил или

3. морфолин,

А означает ковалентную связь или -О-,

В означает ковалентную связь и

Х означает -СН=СН-.

В частности предпочтительными являются следующие соединения: 2-(бифенил-4-сульфониламино)-4-(нафталин-1-ил-карбамоил)-масляная кислота, 2-(бифенил-4-сульфониламино)-4-(нафталин-2-ил-карбамоил)-масляная кислота, 2-(бифенил-4-сульфониламино)-4-(2-фениламиноэтилкарбамоил)-масляная кислота, 2-(4’-хлорбифенил-4-сульфониламино)-4-(3-морфолин-4-ил-пропилкарбамоил)-масляная кислота, трифторацетат 4-(3-(4-(бифенил-4-сульфониламино)-4-карбоксибутириламино)-пропил)-4-морфолиния, 2-(бифенил-4-сульфониламино)-5-(2,3-дигидроиндол-1-ил)-5-оксопентановая кислота, 5-(2,3-дигидроиндол-1-ил)-5-оксо-2-(4’-пирролидин-1-ил-бифенил-4-сульфониламино)-пентановая кислота, 2-(4’-хлорбифенил-4-сульфониламино)-5-(2,3-дигидроиндол-1-ил)-5-оксопентановая кислота, 2-(4’-бромбифенил-4-сульфониламино)-5-(2,3-дигидроиндол-1-ил)-5-оксопентановая кислота, 2-(4’-хлорбифенил-4-сульфониламино)-5-(5-фтор-2,3-дигидроиндол-1-ил)-5-оксопентановая кислота, 2-(4’-бромбифенил-4-сульфониламино)-5-(5-фтор-2,3-дигидроиндол-1-ил)-5-оксопентановая кислота, 5-(5-фтор-2,3-дигидроиндол-1-ил)-5-оксо-2-(4’-пирролидин-1-ил-бифенил-4-сульфониламино)-пентановая кислота или 5-(5-фтор-2,3-дигидроиндол-1-ил)-2-(4’-морфолин-4-ил-бифенил-4-сульфониламино)-5-оксопентановая кислота.

Выражением "R⁴ и R⁵ вместе с кольцевой аминогруппой образуют 4-7-членное кольцо и/или один из атомов углерода заменен на -О-, -S- или -NH-" обозначают остаток, произведенный, например, от изоксазолидина, морфолина, изотиазолидина, тиоморфолина, пиразолидина, имидазолидина, пиперазина, азетидина, пиррола, пирролина, пирролидина, пиридина, азепина, пиперидина, пиразола или диазепина. Под "галогеном" понимают фтор, хлор, бром или йод. Под "алкилом" понимают углеводородный остаток, углеводородная цепь которого может быть линейной или разветвленной.

Исходные вещества для химических превращений известны или могут быть легко получены по известным из литературы способам.

Изобретение относится также к способу получения соединения формулы I и/или стереоизомерной формы соединения формулы I, и/или физиологически приемлемой соли соединения формулы I, отличающемуся тем, что (как описано в способе А, смотри примеры)

а) аминокарбоновую кислоту формулы II

где R¹¹ означает атом водорода или обычную в химии пептидов сложноэфирную защитную группу, s означает целое число нуль, 1, 2 или 3, R¹⁰ означает остаток -OR¹², где R¹² является отщепляемой в присутствии R¹¹ сложноэфирной защитной группой или атомом водорода, или R¹⁰ означает остаток -N(R⁶)-R⁷, где R⁶ и R⁷ определены в формуле I, подвергают взаимодействию с производным сульфокислоты формулы III

где R’, X, А и В определены в формуле I и Y означает атом галогена, имидазолил или OR¹³, где R¹³ представляет собой атом водорода, (С₁-С₆)-алкил, фенил или бензил, который в случае необходимости замещен,

в присутствии основания или в случае необходимости обезвоживающего средства до образования соединения формулы IV

где R’, А, X, В, R², s, R¹⁰ и R¹¹ имеют указанные выше значения,

и затем возможно присутствующую в остатке R¹⁰ защитную группу R¹² в присутствии защитной группы R¹¹ отщепляют и затем вводят остаток -N(R⁶)R⁷ путем соответствующего, известного из химии пептидов, активирования карбоксильной группы, отщепляют имеющуюся защитную группу R¹¹ и получают соединение формулы I, или (как описано в способах В и С, смотри примеры)

b) ангидрид аминокислоты формулы V

в котором R¹³ означает атом водорода и R¹⁴ представляет собой известную из химии пептидов N-защитную группу, такую как, например, карбобензилокси группа (Z), или R¹³ и R¹⁴ означают циклическую N-защитную группу, например фталимидогруппу, и s определено выше, подвергают взаимодействию с первичным или вторичным остатком -N(R⁶)-R⁷ с раскрытием цикла до образования промежуточного продукта формулы VI

где R¹³, R¹⁴, s, R⁶ и R⁷ имеют указанные выше значения,

причем это раскрытие цикла в зависимости от защитной группы и условий реакции (сравни X. Huang, X. Luo, Y.Roupioz, J.W. Keillor, J. Org. Chem., 1997, 62, 8821-8825), как правило, идет региоселективно, что приводит к изомерам формулы VI, которые при образовании смеси региоселективных изомеров могут быть обогащены путем кристаллизации или хроматографии; затем присутствующие защитные группы R¹³ и/или R¹⁴ отщепляют с высвобождением аминов и затем производят N-сульфонирование производным сульфокислоты формулы III, как описано под а), которое приводит к продукту формулы I, или

с) соединение формулы I, полученное по способам а) или b), которое благодаря его химической структуре встречается в энантиомерных формах, выделяют в виде чистых энантиомеров путем солеобразования с энантиомерно-чистыми кислотами или основаниями путем хроматографии на хиральных стационарных фазах или путем образования производных с помощью хиральных энантиомерночистых соединений, таких как аминокислоты, путем разделения полученных при этом диастереомеров и отщепления хиральных вспомогательных групп, или

d) соединение формулы I, полученное по способу а), b) или с) либо выделяют в свободной форме, либо, в случае наличия кислотных или основных групп, превращают в физиологически приемлемые соли.

В качестве подходящих защитных групп предпочтительны N-защитные группы, используемые в химии пептидов, например защитные группы уретанового типа, бензилоксикарбонил (Z), трет-бутилоксикарбонил (Воc), 9-флуоренилоксикарбонил (Fmoc), аллилоксикарбонил (Alloc), или типа амидов кислот, в частности формил, ацетил или трифторацетил, также как и алкильного типа, например бензил.

В качестве исходных продуктов для получения производных сульфокислот формулы III предпочтительно пригодны сульфокислоты или их соли формулы VII, например

причем R¹⁵ означает остаток, описанный для R¹ под 2.1 до 2.14. Производные сульфокислот формулы III, которые в качестве R¹⁵ содержат вторичный или циклический амин типа -N(R⁴)-R⁵, предпочтительно и с высокими выходами получают катализируемым Pd замещением бисарилгалогенида, предпочтительно бромида, вторичным амином в соответствии с описанными в литературе стадиями (сравни A.S.Guram, R.A.Rennels, S.L.Buchwald; Angew. Chem., 1995, 107, 1456-1459) и последующим сульфохлорированием хлорсульфоновой кислотой. Причем сульфохлоридная функция благодаря направляющему действию аминогруппы предпочтительно направляется в желаемое пара-положение.

Предпочтительно используемый катализатор дихлорбис(тритолилфосфин)палладий(II) может быть получен аналогично R.F.Heck в "Palladium Reagents in Organic Syntheses", Academic Press, Лондон (1985), стр. 18, исходя из три-о-толилфосфина, хлорида палладия(II) и LiCl в метаноле.

Для получения арилсульфоновых кислот формул VIIa и VIIb пользуются предпочтительно способом сульфонирования, описанным в Houben-Weyl "Methoden der Organischen Chemie", том 9, стр. 540-546, концентрированной серной кислотой, в случае необходимости в присутствии катализатора, триоксидом серы и продуктами его присоединения или галогенсульфокислотами, такими как хлорсульфоновая кислота. Особенно в случае простого дифенилового эфира формулы VIIb надежным является применение концентрированной серной кислоты и уксусного ангидрида в качестве растворителя (сравни С.М.Suter, J. Am. Chem. Soc., 53 (1931), 1114) или взаимодействие с избытком хлорсульфоновой кислоты (J.P.Bassin, R.Cremlyn и F.Swinbourne; Phosphorus, Sulfur and Silicon 72 (1992), 157). Сульфокислоты согласно формулам VIIc, VIId или VIIe можно получить известным способом, в котором соответствующий арилалкилгалогенид подвергают взаимодействию с сульфитами, такими как сульфит натрия или сульфит аммония, в водном или водно-спиртовом растворе, причем взаимодействие может ускоряться в присутствии солей тетраорганоаммония, такого как тетрабутиламмонийхлорид.

В качестве производных сульфокислот согласно формуле III, в частности, находят применение хлорангидриды сульфокислот. Для их получения соответствующие сульфокислоты, также в форме их солей, таких как соли натрия, аммония или пиридиния, известным способом вводят в реакцию с пентахлоридом фосфора или тионилхлоридом в отсутствие или в присутствии растворителя, такого как трихлорид фосфора, или инертного растворителя, такого как метиленхлорид, циклогексан или хлороформ, обычно при температуре реакции от 20С до температуры кипения используемой реакционной среды. Предпочтительно проводят прямое сульфохлорирование соответствующего ароматического соединения хлорсульфоновой кислотой, сульфурилхлоридом или пиросульфурилхлоридом (Houben-Weyl, Methoden der Organischen Chemie, том 9 (1995), стр. 572-579).

Взаимодействие производных сульфокислот формулы III с аминокислотами формулы II согласно вариантам способа а) или b) предпочтительно протекает по типу реакции Шоттен-Баумана. В качестве оснований здесь особенно применимы гидроксиды щелочных металлов, такие как гидроксид натрия, но также и ацетаты, гидрокарбонаты, карбонаты щелочных металлов и амины. Взаимодействие проводят в воде или в смешивающемся или не смешивающемся с водой растворителе, таком как тетрагидрофуран (ТГФ), ацетон, диоксан или ацетонитрил, причем температуру реакции обычно поддерживают от 10 до 50С. Для случая, когда реакцию проводят в безводной среде, находят применение прежде всего тетрагидрофуран или метиленхлорид, ацетонитрил или диоксан в присутствии основания, такого как триэтиламин, N-метилморфолин, N-этил- или диизопропилэтиламин, возможно, в присутствии N,N-диметиламинопиридина в качестве катализатора.

В другом варианте, особенно при использовании полярного исходного продукта, который представлен в незащищенной форме, аминокислоты формулы II могут сначала с помощью силилирующего агента, такого как бистриметилсилилтрифторацетамид (BSTFA), переводить в силилированную форму и затем подвергать взаимодействию с производными сульфокислот до образования соединений формулы IV.

Получение физиологически приемлемых солей из соединений формулы I, способных к солеобразованию, включая их стереоизомерные формы, осуществляют известными способами. Карбоновые кислоты образуют с основными реагентами, такими как гидроксиды, карбонаты, гидрокарбонаты, алкоголяты, а также аммиак или органические основания, например 2-амино-2-(гидроксиметил)-1,3-пропандиол (трометамин), триметил- или триэтиламин, этаноламин или триэтаноламин, или также основные аминокислоты, может быть лизин, орнитин или аргинин, устойчивые соли щелочных, щелочноземельных металлов или в случае необходимости замещенные аммониевые соли. Соли соединения формулы I, которые образованы с названными органическими основаниями, обладают высокой водорастворимостью. Если соединения формулы I содержат основные группы, могут быть получены с сильными кислотами также устойчивые аддитивные соли кислот. К ним относятся как неорганические, так и органические кислоты, такие как хлористоводородная, бромистоводородная, серная, фосфорная, метансульфоновая, бензолсульфоновая, пара-толуолсульфоновая, 4-бромбензолсульфоновая, уксусная, щавелевая, винная, трифторметилсульфоновая, циклогексиламидосульфоновая, янтарная или трифторуксусная кислоты.

Изобретение относится также к лекарственным средствам, отличающимся активным содержанием по меньшей мере одного соединения формулы I и/или физиологически приемлемой соли соединения формулы I и/или в случае необходимости стереоизомерной формы соединения формулы I вместе с фармацевтически подходящим и физиологически приемлемым носителем, добавкой и/или другими биологически активными или вспомогательными веществами.

Благодаря их фармакологическим свойствам предложенные соединения применимы для профилактики и терапии всех таких заболеваний, на протекание которых оказывают влияние матрично-отщепляемые металлопротеиназы. К ним относятся дегенеративные заболевания суставов, такие как остеоартрозы, ревматоидные артриты, спондилёзы, атрофия хряща после суставных травм или иммобилизации суставов, например после поражений мениска или надколенной чашечки или разрывы связок. Далее сюда относятся заболевания соединительных тканей, такие как коллагенозы, периодонтальные заболевания, которые могут вести к потере зуба, нарушения заживления ран и хронические заболевания двигательного аппарата, такие как воспалительные, обусловленные иммунологически или условиями обмена веществ острые и хронические поражения кожи, артропатии, миалгии и нарушения костного обмена веществ (как остеопороз). Медицинское введение соединений формулы I согласно изобретению может быть показано при заболеваниях сосудов, например закупорке кровеносных сосудов, атеросклеротических бляшках или аневризмах, особенно при угрожающих разрывом, например, при стенозах любого патогенеза. Далее соединения формулы I пригодны для лечения воспалений, ран и гнойников, в частности, на коже, раковых заболеваний, в частности, для блокирования или приостановления образования и распространения метастазов, а также при карциноме груди. Лечение кахексии, анорексии, септического шока, пародонтоза, периодонтита являются следующими медицинскими областями применения предложенных соединений.

Лекарственные средства согласно изобретению обычно вводят перорально или парентерально. Но возможно также ректальное или трансдермальное применение.

Изобретение относится также к способу получения лекарственного средства, который отличается тем, что по меньшей мере одно соединение формулы I с фармацевтически подходящим и физиологически приемлемым носителем и в случае необходимости с другими подходящими активными веществами, добавками или вспомогательными веществами переводят в подходящую форму применения.

Пригодными твердыми или галеновыми формами применения являются, например, гранулы, порошки, драже, таблетки, (микро)капсулы, суппозитории, сиропы, соки, суспензии, эмульсии, капли или растворы для инъекций, а также препараты с пролонгированным высвобождением активного вещества, при получении которых находят применение обычные вспомогательные средства, такие как носители, разбрызгивающие средства, связующие, покрывные, набухающие, внешние или внутренние смазочные средства, вкусовые вещества, подслащивающие средства и солюбилизаторы. В качестве часто применяемых веществ должны быть названы карбонат магния, диоксид титана, лактоза, маннит и другие сахара, тальк, молочный белок, желатина, крахмал, целлюлоза и ее производные, животные и растительные жиры, такие как рыбий жир, подсолнечное, арахисовое или кунжутное масло, полиэтиленгликоль и растворитель, а также стерильная вода и моно- или полиатомные спирты, такие как глицерин.

Предпочтительно фармацевтические препараты получают и вводят в дозированных единицах, причем каждая единица содержит в качестве активного компонента определенную дозу предложенного соединения формулы I. В случае твердых дозированных единиц, таких как таблетки, капсулы, драже или суппозитории, эти дозы могут содержать примерно до 1000 мг, предпочтительно каждая примерно от 50 до 300 мг, и в случае инъекционных растворов в ампулах примерно до 300 мг, предпочтительно примерно от 10 до 100 мг.

Для лечения взрослого, весом примерно 70 кг, пациента в зависимости от активности соединений согласно формуле I дневные дозы примерно от 20 до 1000 мг активного вещества, предпочтительно примерно от 100 до 500 мг. В зависимости от состояния, однако, могут также применяться более высокие или более низкие дневные дозы. Прием дневных доз может производиться как однократно в форме отдельной дозированной единицы или нескольких меньших дозированных единиц, так и путем многократного приема разделенных доз с интервалами.

Соединения, являющиеся основой изобретения, идентифицированы путем ядерного резонанса и масс-спектроскопии, причем в случае наличия регио- или диастереоизомерных форм для однозначного подтверждения структуры наряду с ¹H- и ¹³С- использованы многомерные ЯМР-методы. Спектры ¹H-ЯМР сняты на 400 МГц устройстве фирмы Bruker, как правило, с тетраметилсиланом (TMS) в качестве внутреннего стандарта и при комнатной температуре (КТ). Конечный продукт определяли, как правило, методами масс-спектроскопии (FAB-, ESI-MS с положительной или отрицательной ионизацией). Температурные данные приведены в градусах Цельсия, КТ означает комнатную температуру (от 22 до 26С). Использованные сокращения либо объяснены, либо соответствуют обычным обозначениям.

Примеры получения

Способ А)

Пример 5. Трифторацетат 4-(3-(4-(бифенил-4-сульфониламино)-4-карбоксибутириламино)-пропил)-4-морфолиния

Стадия 1: сульфонирование глутамил-трет-бутилового эфира

3 г (0,0148 моля) L-Glu-O-трет-Вu растворяли в 29,5 мл 0,5 н. NaOH и 250 мл тетрагидрофурана (ТГФ), охлаждали на ледяной бане до 0С и одновременно (при поддерживании рН 8,5) прибавляли по каплям примерно за 30 минут раствор 4,476 г (0,0177 моля) бифенилсульфонилхлорида в 35 мл ТГФ и 29,52 мл водного 0,5 н. NaOH. После удаления ледяной бани перемешивают 3 часа при комнатной температуре и окончание реакции определяют путем тонкослойной хроматографии (ТСХ). Удаляют ТГФ при пониженном давлении, экстрагируют один раз диэтиловым эфиром, подкисляют 1 н. НСl до рН 1,5, продукт многократно экстрагируют этилацетатом, сушат и удаляют растворитель при пониженном давлении. Остается 2,89 г продукта, который может подвергаться дальнейшему превращению без дополнительной очистки.

Стадия 2: превращение в амид

0,25 г (0,596 ммоля) продукта со стадии 1 растворяют в 50 мл абсолютного ТГФ, прибавляют 0,119 г (0,63 ммоля) EDC (гидрохлорида 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида) и 0,0845 г (0,55 ммоля) гидрата 1-гидроксибензотриазола, перемешивают 30 минут, затем осторожно прибавляют 0,268 мл (1,79 ммоля) N-(3-аминопропил)-морфолина и перемешивают еще 8 часов. Смешивают с водой, подкисляют 1 н. НСl до рН 2, несколько раз экстрагируют этилацетатом, промывают разбавленной NaCl, сушат и упаривают. Выход 250 мг. Дальнейшая очистка может быть осуществлена путем хроматографии на силикагеле с помощью дихлорметана/метанола, 9:1.

Стадия 3: отщепление защитной группы

0,11 г продукта со стадии 2 растворяют в 5 мл трифторуксусной кислоты и 5 мл дихлорметана и перемешивают в атмосфере инертного газа до окончания реакции (контроль ТСХ) примерно 3 часа при комнатной температуре. После упаривания многократно извлекают дихлорметаном и сушат при пониженном давлении. Остается 0,11 г соединения примера 5 в виде трифторацетата.

Способ В)

Пример 6. 2-(Бифенил-4-сульфониламино)-5-(2,3-дигидроиндол-1-ил)-5-оксопентановая кислота

Стадия 1: взаимодействие фталоил-L-глутамилангидрида с дигидроиндолом

1,5 г (0,0058 моля) фталоил-L-глутамилангидрида растворяют в 15 мл абсолютного диоксана и в течение 10 мин по каплям прибавляют раствор 0,813 мл (0,0073 моля) дигидроиндола в 15 мл диоксана. Нагревают до окончания реакции (примерно 5 часов, контроль ТСХ) до 40С, упаривают, извлекают несколько раз при пониженном давлении дихлорметаном. Выход 2,7 г (продукт содержит примерно 15 мол.% диоксана).

Стадия 2: отщепление защитной группы

2,43 г продукта со стадии 1 растворяют в 30 мл этанола и прибавляют 0,39 мл (0,0080 моля) гидразингидрата. Перемешивают 3 часа при 80С, упаривают при пониженном давлении досуха, смешивают остаток с 50 мл 25%-ной водной уксусной кислоты и нагревают приблизительно за 10 мин до 80С. Затем охлаждают на водяной бане и отсасывают выпавший осадок, снова смешивают осадок с уксусной кислотой и повторяют эту операцию. Оставшийся остаток фталилгидразида отбрасывают. Очищенный фильтрат упаривают и получают 0,7 г продукта.

Стадия 3: введение N-арилсульфонильного остатка

0,5 г (0,002 моля) продукта со стадии 2 вместе с 0,45 г (0,0033 моля) карбоната калия растворяют в 50 мл ТГФ/воды (1:1) и в течение 20 мин прибавляют по каплям раствор 0,61 г (0,0024 моля) бифенилсульфонилхлорида, растворенного в 50 мл ТГФ. Перемешивают при КТ до окончания реакции (примерно от 6 до 8 часов, контроль ТСХ), один раз экстрагируют диэтиловым эфиром, подкисляют 1 н. НСl до рН 1,5, продукт несколько раз экстрагируют этилацетатом, сушат и упаривают при пониженном давлении. После высушивания осталось 0,42 г продукта примера 6.

Способ С)

Пример 8. 2-(4’-Хлорбифенил-4-сульфониламино)-5-(2,3-дигидроиндол-1-ил)-5-оксопентановая кислота

Стадия 1: взаимодействие Cbz-Glu-ангидрида с 2,3-дигидро-1Н-индолом

5 г (0,019 моля) L-Cbz-глутамилангидрида вместе с 2,56 мл (это соответствует 0,023 моля) 2,3-дигидро-1Н-индола растворяют в 100 мл абсолютного диметилсульфоксида и перемешивают 30 мин при комнатной температуре (КТ), а также еще 30 мин при 40С до окончания реакции (контроль ТСХ). Смесь вносят в воду, несколько раз экстрагируют этилацетатом, органическую фазу промывают 1 н. НСl и насыщенным раствором NaCl, сушат и упаривают. Выход 7,07 г.

Стадия 2: отщепление Сbz(карбобензокси)-защитной группы

6,8 г (0,018 моля) продукта со стадии 1 в течение 30 мин растворяют в 60 мл 33%-ного раствора НВr/уксусная кислота и перемешивают до окончания реакции при КТ (примерно 15 часов, контроль ТСХ). Полученный после упаривания при пониженном давлении сырой продукт несколько раз извлекают дихлорметаном и смешивают с метанолом/водой (10:1), продукт отфильтровывают, сушат и еще раз перемешивают в ТГФ. После отсасывания и сушки при пониженном давлении остается 2,13 г кристаллического гидробромида с чистотой 98% (после ВЭЖХ).

Восстановительное отщепление защитной группы аналогично примеру 12, стадия 4 дает гидрохлорид 2-амино-5-(2,3-дигидроиндол-1-ил)-5-оксопентановой кислоты с выходом 85%.

Стадия 3: 2-(4’-хлорбифенил-4-сульфониламино)-5-(2,3-дигидроиндол-1-ил)-5-оксопентановая кислота

0,33 г (1 ммоль) продукта со стадии 2 растворяют в 60 мл ТГФ/воды (1:1) и с применением устройства для титрования и 0,5 н. NaOH устанавливают рН 12. При постоянном рН в течение примерно 45 мин прибавляют по каплям раствор 0,345 г (1,2 ммоля) 4’-хлорбифенил-4-сульфонилхлорида, растворенного в 30 мл ТГФ. Перемешивают еще 2 часа при рН 12 (контроль ТСХ), смешивают с 0,1 н. НСl до рН 2, несколько раз экстрагируют этилацетатом, промывают водой, сушат и упаривают. Выход 0,395 г, температура плавления 182С и чистота более 92%.

Определяемая в качестве примеси 4-хлорбифенилсульфоновая кислота может быть удалена путем хроматографии или осаждением.

Пример 12. 5-(5-Фтор-2,3-дигидроиндол-1-ил)-5-оксо-2-(4’-пирролидин-1-ил-бифенил-4-сульфониламино)-пентановая кислота

Стадия 1: бифенил-4-ил-пирролидин

10,0 г (0,043 моля) 4-бромбифенила вместе с 3,7 г (0,052 моля) пирролидина и 6,2 г (0,0642 моля) трет-бутанолята натрия суспендируют в 600 мл толуола и прибавляют 900 мг катализатора - дихлорбис(тритолилфосфин)палладия (II). Нагревают 8 часов с обратным холодильником, охлаждают, смешивают с водой/этилацетатом, органическую фазу промывают водой, сушат над сульфатом натрия и упаривают. Остаток растворяют примерно в 300 мл трет-бутилметилового эфира и прибавлением 50 мл 1 н. эфирной НСl осаждают гидрохлорид продукта. Выход 6,0 г, температура плавления выше 125С (разложение).

Стадия 2: 4’-пирролидин-1-ил-бифенил-4-сульфонилхлорид

6 г (0,023 моля) продукта со стадии 1 при охлаждении и под защитным газом порциями вносят в 11 мл хлорсульфоновой кислоты и за 3,5 часа нагревают до 60С. Раствор выливают на лед, доводят суспензию прибавлением твердого карбоната натрия до рН 8, выпавший продукт отсасывают и сушат при пониженном давлении. Выход 7 г, температура плавления выше 282С (разложение).

Стадия 3: взаимодействие Z-Glu-ангидрида с 5-фтор-2,3-дигидро-1Н-индолом

8,8 г (0,0334 моля L-Z-глутамилангидрида вместе с 5,5 г (0,04 моля) 5-фтор-2,3-дигидро-1Н-индола растворяют в 150 мл абсолютного диметилсульфоксида и перемешивают при КТ до окончания реакции (примерно 3 часа, контроль ТСХ). Смесь вносят в воду, несколько раз экстрагируют этилацетатом и органическую фазу промывают 1 н. НСl и насыщенным NaCl, сушат и упаривают. Выход 13,2 г.

Стадия 4: отщепление Z-защитной группы

13 г (0,0325 моля) продукта со стадии 3 растворяют в 450 мл метанола и 33 мл 1 н. НСl, добавляют на кончике шпателя палладий и гидрируют при 40 бар и 60С до окончания реакции (контроль ТСХ). После фильтрования и упаривания сырой продукт извлекают при кипячении с обратным холодильником ТГФ, оставшийся после охлаждения твердый гидрохлорид отфильтровывают и сушат при пониженном давлении. Выход 7,1 г, температура плавления выше 212С.

Стадия 5: 5-(5-фтор-2,3-дигидроиндол-1-ил)-5-оксо-2-(4’-пирролидин-1-ил-бифенил-4-сульфониламино)-пентановая кислота

0,303 г (1 ммоль) продукта со стадии 4 растворяют в 60 мл ТГФ/воды (1:1) и с помощью титрующего устройства (модель 686, фирма Metrohm) и 0,5 н. NaOH устанавливают рН 12,0. При поддерживании постоянного рН в течение примерно 45 мин прибавляют по каплям раствор 0,39 г (1,2 ммоля) продукта со стадии 2, растворенного в 40 мл ТГФ. Перемешивают еще 2 часа при рН 12 (контроль ТСХ), смешивают с 0,1 н. НСl до рН 2, несколько раз экстрагируют этилацетатом, промывают водой, сушат и упаривают. Продукт очищают путем хроматографии на силикагеле (дихлорметан/метанол, 95:5). Выход 0,393 г, температура плавления 216С.

Способ D)

Пример 15. Трометаминовая соль 2-(4’-хлорбифенил-4-сульфониламино)-5-(2,3-дигидроиндол-1-ил)-5-оксопентановой кислоты

104,5 г (0,21 моля) соединения согласно примеру 8 суспендируют в 1000 мл этанола и нагревают до 50С. Затем прибавляют 25,4 г трометамина (2-амино-2-(гидроксиметил)-1,3-пропандиола, TRIS), растворенного в 100 мл воды. Смесь короткое время нагревают до кипения и фильтруют горячей. Прозрачный фильтрат оставляют нагреваться до КТ, при этом выпадает соль. Ее отсасывают и дважды промывают по 150 мл этанола/воды в соотношении 9:1 и сушат в эксикаторе. Выход 93,9 г (72%) трометаминовой соли.

Пример 16. 2-(4’-Хлорбифенил-4-сульфониламино)-5-(2,3-дигидроиндол-1-ил)-5-оксопентаноат-трис-(2-гидроксиэтил)-аммония

0,05 г продукта из примера 8 растворяют в 3,18 г ацетона, прибавляют 0,01 г триэтаноламина, раствор фильтруют и помещают в открытой колбе Эрленмейера в ТСХ-камеру, дно которой примерно на 1 см покрыто трет-бутилметиловым эфиром. Образование кристаллов наступает через 10 часов и полностью заканчивается через 4-5 дней. Раствор декантируют и полученный продукт сушат при пониженном давлении. Выход 0,06 г, температура плавления 120С.

Примеры с 1 по 5 таблицы 1 получены по способу А), примеры 6 и 7 по способу В) и примеры с 8 по 14 по способу С). Исходный продукт, необходимый для введения боковой арилсульфонильной цепи примера 13 (4’-морфолин-4-ил-бифенил-4-сульфонилхлорид) получен аналогично способу С), стадия 1.

Фармакологические примеры

Приготовление и определение ферментативной активности каталитических доменов стромелизина и нейтрофильной коллагеназы человека

Оба фермента - стромелизин (ММР-3) и нейтрофильная коллагеназа (ММР-8) - были приготовлены по Ye и др. (Biochemistry, 31 (1992), стр.11231-11235) или Weithmann и др. (Inflamm Res, 46(1997), 246-252). Для измерения ингибирующего действия на ферментативную активность инкубировали 70 мкл буферного раствора и 10 мкл раствора фермента с 10 мкл 10%-ного (об./об.) водного раствора диметилсульфоксида в течение 15 минут. После прибавления 10 мкл 10%-ного (об./об.) водного раствора диметилсульфоксида, который содержит 1 ммоль/л субстрата, за ферментативной реакцией следили методом флуоресцентной спектроскопии (328 нм (возб)/393 нм(эм)).

Ферментативную активность определяли как прибавление экстинкции в минуту. Приведенные в таблице 2 значения IC₅₀ были измерены как такие концентрации ингибитора, которые каждый раз ведут к 50%-ному ингибированию фермента. Буферный раствор содержит 0,05% Brij (Sigma, Deisenhofen, Германия), а также 0,1 моль/л пиперазин-N,N’-бис[2-этансульфоновой кислоты]/NaOH, 0,1 моль/л NaCl, 0,01 моль/л CaCl₂ и 0,1 моль/л пиперазин-N,N’-бис[2-этансульфоновой кислоты] (рН 6,5).

Раствор фермента содержит 5 мкг/л полученного по Ye и др. ферментативного домена. Раствор субстрата содержит 1 ммоль/л флуорогенного субстрата (7-метоксикумарин-4-ил)ацетил-Рrо-Lеu-Gly-Lеu-3-(2’,4’-динитрофенил)-L-2,3-диаминопропионил-Аlа-Аrg-NН₂ (Bachem, Heidelberg, Германия).

Определение растворимости в воде свободной 2-(4’-хлорбифенил-4-сульфониламино)-5-(5-фтор-2,3-дигидроиндол-1-ил)-5-оксопентановой кислоты согласно примеру 8 и ее трометаминовой соли согласно примеру 15

1. Используемые материалы

1.1 Исследуемые вещества

a) соединение согласно примеру 8; 2-(4’-хлорбифенил-4-сульфониламино)-5-(5-фтор-2,3-дигидроиндол-1-ил)-5-оксопентановая кислота,

b) соединение согласно примеру 15; трометаминовая соль 2-(4’-хлорбифенил-4-сульфониламино)-5-(5-фтор-2,3-дигидроиндол-1-ил)-5-оксопентановой кислоты.

1.2 Реагенты

вода: деионизированная, ацетонитрил: LiChrosolv (Merck), диэтиламин: для синтеза (Merck), уксусная кислота: концентрированная и 1 н. (Merck).

2. Проведение эксперимента

2.1 2-(4’-Хлорбифенил-4-сульфониламино)-5-(5-фтор-2,3-дигидроиндол-1-ил)-5-оксопентановая кислота

В колбу Эрленмейера емкостью 100 мл помещали примерно 50 мг проверяемого вещества согласно 1.1a). После добавления 10 мл воды перемешивали при 25С. Через 2 часа, а также через 3 часа аликвоты отбирали и центрифугировали. По 1 мл образца разбавляли подвижной фазой до 10 мл. Концентрацию активного компонента определяли при помощи ВЭЖХ по отношению к внешнему стандарту. Повторение эксперимента.

2.2 Трометаминовая соль 2-(4’-хлорбифенил-4-сульфониламино)-5-(5-фтор-2,3-дигидроиндол-1-ил)-5-оксопентановой кислоты

В колбу Эрленмейера емкостью 100 мл помещали примерно 800 мг трометаминовой соли согласно 1.1b). После добавления 10 мл воды перемешивали при 25С. Через 2 часа, а также через 3 часа аликвоты отбирали и центрифугировали. По 1 мл образца разбавляли подвижной фазой до 100 мл. Концентрацию активного компонента определяли при помощи ВЭЖХ по отношению к внешнему стандарту. Повторение эксперимента.

3. Анализ

Инструмент: устройство ВЭЖХ Gynkotek

Колонка: стационарная фаза: ChiraDex 5 мкм, Merck

Размеры: 250 мм х 4,0 мм

Подвижная фаза: ацетонитрил 440 мл; вода 560 мл; диэтиламин

мл; установлено рН 6,4 уксусной кислотой.

Инъекционные объемы: 10 мкл

Течение: 0,8 мл/мин

Температура колонки: 40С

Определение: УФ при 261 нм

5. Результаты см. в таблице 3

Зависящее от времени различие в значениях растворимости 2-(4’-хлорбифенил-4-сульфониламино)-5-(5-фтор-2,3-дигидроиндол-1-ил)-5-оксопентановой кислоты может быть связано с явлением пересыщенности/насыщенности. В качестве результата выбрано значение, полученное через 3 часа.

Растворимость в воде трометаминовой соли 2-(4’-хлорбифенил-4-сульфониламино)-5-(5-фтор-2,3-дигидроиндол-1-ил)-5-оксопентановой кислоты выше примерно на фактор 600, чем таковая свободной 2-(4’-хлорбифенил-4-сульфониламино)-5-(5-фтор-2,3-дигидроиндол-1-ил)-5-оксопентановой кислоты.