способ получения фармацевтически активных рекомбинантных белков
| Классы МПК: | A61K38/49 урокиназы; тканевый активатор плазминогена A61K31/19 карбоновые кислоты, например валилпролиновая кислота C12N9/72 урокиназа |
| Автор(ы): | АРИНИ Акилле (CH), КОППОЛЕККИЯ Раффаэлла (CH), ПАГАНИ Франческа Паола (IT), ХЕРБСТ Детлев (CH), ТОНЬИНИ Антонио (CH) |
| Патентообладатель(и): | СЕРБИОС-ФАРМА С.А. (CH) |
| Приоритеты: |
подача заявки:
2002-03-15 публикация патента:
27.04.2004 |
Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и касается способа получения зрелого рекомбинантного белка дц-уАП. Способ заключается в культивировании линии эукариотических клеток, генетически трансформированных клонированной последовательностью кДНК предшественника, и включает в себя инкубацию указанной линии клеток в среде для культивирования клеток, в которую были добавлены алкановые кислоты, их производные или их соли, в течение периода времени, по меньшей мере, равного 24 часам. Способ делает возможной секрецию рекомбинантных белков в среду культивирования в их физиологически активной (зрелой) форме. Преимущество изобретения заключается в разработке способа, позволяющего получение активного фермента дц- уАП. 6 з.п. ф-лы, 3 ил., 4 табл.
Рисунок 1, Рисунок 2, Рисунок 3, Рисунок 4, Рисунок 5, Рисунок 6, Рисунок 7, Рисунок 8, Рисунок 9, Рисунок 10, Рисунок 11, Рисунок 12, Рисунок 13, Рисунок 14, Рисунок 15, Рисунок 16, Рисунок 17, Рисунок 18, Рисунок 19, Рисунок 20, Рисунок 21, Рисунок 22, Рисунок 23, Рисунок 24, Рисунок 25, Рисунок 26, Рисунок 27, Рисунок 28, Рисунок 29, Рисунок 30, Рисунок 31, Рисунок 32, Рисунок 33, Рисунок 34, Рисунок 35, Рисунок 36, Рисунок 37, Рисунок 38
Формула изобретения
1. Способ получения двухцепочечного уАП (дц-уАП) в среде культивирования линии эукариотических клеток, генетически трансфицированных кДНК, кодирующей препроурокиназу человека, заключающийся в инкубации указанной линии клеток в среде для культивирования клеток, в которую добавлены алкановые кислоты, и/или их соли, и/или их производные, выбранные из масляной кислоты, бутирата натрия, пропионата натрия, бутирата магния, трибутирина и фенилбутирата, в течение периода времени, равного по меньшей мере 24 ч.2. Способ по п.1, где двухцепочечный уАП является уАП ВММ.3. Способ по п.1, где двухцепочечный уАП является уАП НММ.4. Способ по п.1, где указанная линия эукариотических клеток является линией клеток млекопитающих, выбранной из НЕК-293, CV-1, COS, BSC-1, MDCK, A-431, CHO, BHK, CHO-Messi.5. Способ по п.1, где указанный период времени составляет от 48 до 200 ч.6. Способ по п.4, где указанная культура клеток не содержит сыворотки.7. Способ по п.1, при котором указанную инкубацию проводят при температуре, равной или ниже 37
С.
Описание изобретения к патенту
Текст описания в факсимильном виде (см. графическую часть).Класс A61K38/49 урокиназы; тканевый активатор плазминогена
Класс A61K31/19 карбоновые кислоты, например валилпролиновая кислота
1 плазминогена слюны desmondus rotundus (rdspa