средство для лечения аскосфероза и аспергиллеза у пчел

Формула изобретения

1. Применение производных 1Н-1,2,4-триазола формулы

при Х-Н, R=н-С₃Н₇(пенконазол);

при Х-ОН, R=н-С₄Н₉(гексаконазол)

для лечения аскосфероза и аспергиллеза пчел.

2. Применение смеси пенконазола или гексаконазола с клотримазолом (1-[(2-хлорфенил)дифенилметил]-1Н-имидазолом), взятых соответственно, мас.%:

Пенконазол или гексаконазол 3-90

Клотримазол 97-10

для лечения аскосфероза и аспергиллеза пчел.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к области ветеринарии и может быть использовано для лечения таких заболеваний пчел, как аскосфероз и аспергиллез [Пчеловодство. - М.: Советская энциклопедия, 1991, с 21].

Для лечения этих заболеваний разработано большое количество различных препаратов. Однако ассортимент действующих веществ (ДВ), которые собственно и обеспечивают лечебный эффект, очень невелико. Это в основном клотримазол, нистатин, ципроконазол, пропиконазол, 3,5,6-трихлорбензоксалон [А.Н.Мачнев, Н.А.Яременко. Эпизоотическая обстановка на пасеках России на рубеже тысячелетий. / Пчеловодство. 2000. № 1, с. 5].

Одним из широко применяемых средств для лечения аскосфероза и аспергиллеза пчел является пропиконазол - ДВ препарата Аскоцин, который требует 2-3 обработки, в дозе 25 мг на стандартный 10 рамочный улей [Аскоцин. Наставление по применению. /Регистрационное удостоверение N Р066-2.0558 департамента ветеринарии Министерства сельского хозяйства и продовольствия РФ].

Одним из наиболее высокоэффективных и поэтому часто применяемых ДВ является 1-[(2-хлорфенил)дифенилметил]-1Н-имидазол (клотримазол), на основе которого разработано большое количество препаратов. Лечебный эффект от их применения наступает после 3-4-кратной обработки в дозе 5-10 мг/улей [Ветеринарные препараты в России: Справочник. И.Ф.Кленова, Н.А.Яременко. - М.: Сельхозиздат, 2000, с. 451].

В результате длительного применения даже различных препаратов, но с одним и тем же ДВ, лечебный эффект уменьшается за счет возникновения резистентности у патологической микрофлоры. Поэтому рекомендуется постоянно чередовать препараты с различными ДВ [А.Н.Мачнев, Н.А.Яременко. Новое в борьбе с болезнями пчел. / Пчеловодство, 1999, № 1, с.53].

Целью изобретения является расширение ассортимента ДВ, что позволяет уменьшить выработку резистентности у патологической микрофлоры, сократить дозы и количество обработок.

Поставленная цель достигается за счет использования, для лечения аскосфероза и аспергиллеза пчел, производных 1Н-1,2,4-триазола общей формулы:

При Х=Н, R=н-С₃Н₇ 1-(2-(2,4-дихлорфенил)пентил)-1Н-1,2,4-триазол(пенконазол); при Х=ОН, R=н-C₄H₉ 2-(2,4-дихлорфенил)-1-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)гексан-2-ол (гексаконазол) или смесей пенконазола или гексаконазола с клотримазолом, взятых в соотношении в мас.% соответственно:

Пенконазол или гексаконазол 3-90

Клотримазол 97-10

Пенконазол и гексаконазол относятся к веществам низкой токсичности для теплокровных [Пестициды: Справочник. / Мартыненко В.И., Промоненков В.К., Кукаленко С.С. и др. - М.: Агропромиздат, 1992, с.317, 324]. Тестовые испытания показали, что они в дозах, многократно превышающих лечебные, не оказывают токсического воздействия на пчел.

Исследования проводили на базе Казанской государственной академии ветеринарной медицины. Перезимовавшие пчелиные семьи состояли из малого количества пчел, имели расширенные гнезда, минимальные запасы корма, были плохо утеплены. Растворы необходимой концентрации получали разведением до нужной концентрации свежеприготовленной эмульсии (0,1% по ДВ), получаемой при эмульгировании 1 г 10% р-ра ДВ в органическом растворителе (содержащего ПАВ), в 100 мл дистиллированной воды. Микропипеткой брали 5 мкл эмульсии и производили принудительное кормление пчел. В клеточке было помещено 30 таких накормленных пчел, столько же пчел было опрыснуто таким же количеством эмульсии. В третьей клеточке пчел не подвергали обработке. За пчелами наблюдали в течение 7 дней. Все пчелы остались живы. Таким образом, пчелы переносили дозу 5 мкг для всех составов (пенконазол, гексаконазол, клотримазолом или смесей пенконазола или гексаконазол с клотримазолом, взятых в соотношении 1:1) без признаков отравления, что на порядок выше доз при стандартной обработке.

Тестовые испытания по эффективности составов проводили с растворами 0,001; 0,01 и 0,1% концентрации по 10 мл на улочку. Каждый состав проверяли на одной семье. Пораженность расплода во всех ульях была приблизительно одинакова и составляла в среднем 58-65%. Количество мумий на участке сота 100 см² (10 на 10 см, по одному на соте), содержащего около 400 ячеек с расплодом, подсчитывали через 3, 7 и 14 дней. Участки выбрали с изначальным содержанием мумий 230-260 мумий на 100 см². Результаты представлены в таблицах 1-7.

Наибольшая эффективность проверяемых составов была при использовании максимальной концентрации 0,1% (10 мг на улочку, табл.3 и 6). Однако такие высокие дозы вызывали беспокойство отдельных пчел, повышение злобливости и даже гибель (по-видимому в результате большого различия в дозах, которые получали разные пчелы из-за неравномерного распределения препарата между ними). Хорошие показатели эффективности были обнаружены при использовании 1 мг ДВ на улочку (табл. 2 и 4), не было замечено никаких нежелательных эффектов на жизнедеятельность пчелиного улья в целом и отдельных особей. Наилучшими по эффективности из испытанных оказались смеси с содержанием ДВ 50:50. Пенконазол с клотримазолом и гексаконазол с клотримазолом при однократной обработке и концентрации 0,01% дали эффективность 87,4 и 85,5% соответственно, это выше, чем у чистых пенконазола, - 82,0%, гексаконазола - 80,8% и клотримазола - 75,0%. Хорошо видно, что использование смеси ДВ пенконазола или гексаконазола с клотримазолом позволяет добиться лечебного эффекта, превышающего механическую сумму лечебных эффектов ДВ в смеси. Таким образом, составы, представленные как чистым пенконазолом и гексаконазолом, так и их смесями с клотримазолом при дозе 1 мг ДВ на улочку, являются высокоэффективными средствами для лечения аскосфероза и аспергиллеза у пчел.

Границы содержания веществ в смеси определяли исходя из того, когда дальнейшее изменение его содержания не оказывает заметное влияние на изменение лечебного воздействия или приводило к уменьшению лечебного эффекта (за счет уменьшения доли другого компонента) или экономически не целесообразно. Например, добавка менее 3% пенконазола к клотримазолу уже не отличима от действия чистого клотримазола, а при содержании в смеси менее 10% клотримазола лечебный эффект уменьшался.

Данные составы могут быть использованы в качестве основы для создания конкретных лекарственных препаратов. Оптимальное сочетание компонентов в каждом конкретном случае зависит от соотношения лечебного эффекта и соотношения текущих цен на компоненты, формы применения, относительной растворимости компонентов в растворе (использованного в качестве основы конкретного лекарственного препарата для жидких препаратов) и множества других факторов.