способ инактивации вируса спида

Формула изобретения

Способ инактивации вируса СПИДа, включающий воздействие света на вирусный материал, отличающийся тем, что вирусный материал облучают модулированным светом на длинах волн 516,7; 517,2; 636,2 нм, с частотой модуляции 9,4-9,5 Гц.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к вирусологии, в частности к средствам лучевой нейтрализации вируса СПИД.

Известен способ инактивации вируса СПИДа с помощью облучения его светом [1] . Сущность изобретения заключается в том, что вирусный материал облучают комбинированным светом, соответствующим электронным переходам атомов магния 516,7; 517,2; 518,2 нм и атомов цинка 632,2 нм в течение 30-60 мин, в результате чего у вируса СПИДа происходят существенные изменения как в нуклеиновых кислотах, так и в ферменте обратной транскриптазы (ревертазы), что приводит к инактивации вируса.

Недостатком указанного способа является низкая инактивация вируса СПИДа.

Задачей изобретения является большая инактивация ферментной системы вируса.

Известно, что в качестве генетического материала вируса СПИД является молекула РНК, содержащая, как известно, пять атомов магния.

Известно также, что фермент обратная транскриптаза содержит в своем активном центре атом цинка. Было установлено, что успешное функционирование как молекулы РНК, так и фермента обратной транскриптазы будет только в том случае если электронные оболочки атомов магния и цинка будут находиться в спокойном (невозмущенном) состоянии.

В этой связи можно полагать, что при действии света с длиной волны, соответствующей электронным переходам атомов магния и цинка, произойдут существенные нарушения нормальной работы как обратной транскриптазы, так и самой молекулы РНК. Причем инактивация будет эффективнее, если облучение производить не сплошным светом, как это осуществлялось в [1], а прерывистым (модулированным) с определенной частотой.

Это позволит сильнее "расшатать" систему обратная транскриптаза - РНК, что приведет к большей инактивации вируса.

В этой связи был выполнен сравнительный эксперимент.

На модели клеточных лимфобластоидных клеточных линий СЕМ и МТ-4, инфицированных вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ) - штамм ВИЧ-1/В RU (острая инфекция) исследована возможность лучевой нейтрализации вируса.

Использовались следующие материалы и методы.

Клетки. Клетки МТ-4 выращивали в виде суспензии 100 мкг/мл гентамицина в концентрации 300000-500000 клеток в 1 мл.

Вирус. Штамм ВИЧ - 1/В RU получен из музея штаммов института вирусологии РАМП.

Перед инфицированием чувствительных к ВИЧ-1 клеток вирусный материал облучался (сплошным) светом на длинах волн 516,7; 517,2; 518,2; 636,2 нм, а затем этот же вирусный материал на этих же длинах волн облучался модулированным светом. Частота модуляции находилась в диапазоне от 1,0 до 10,0 Гц.

В качестве контроля использовали необлученный вирус (множественность инфекции 0,1lg ТЦЦ/50 клетка) отрицательно незаряженные клетки.

Инфицированные культуры инкубировали в течение 4-7 суток в атмосфере с 5% СО₂ и 98% влажности при температуре 37^oС.

В результате выполненного эксперимента оказалось, что облучение вирусного материала модулированным светом на указанных длинах волн существенно снизило образование вирусиндуцированных синцитиев и уровня вирусного агента.

Сравнительный анализ показал, что облучение вирусного материала модулированным светом повышает инактивацию на 20-25% по сравнению с инактивацией, вызванной сплошным светом.

Причем наилучшие результаты были получены при частоте модуляции 9,4-9,5 Гц.

Источник информации

1. Федченко П. П. , Туев В.В. Способ ннактивацни вируса СПИД. Патент 2097427 от 27.09.1997 г.