способ консервации биологической ткани

Формула изобретения

Способ консервации биологической ткани для трансплантации путем обработки ее раствором антибиотика и помещения в консервирующий раствор, включающий 0,9% раствор натрия хлорида с растворенными в нем антибиотиком и антиоксидантом, отличающийся тем, что в консервирующий раствор добавляют глицерин, а в качестве антиоксиданта используют имоксипин.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к медицине, а именно к консервации и хранению биологических тканей.

Известен способ консервации биологической ткани для трансплантации (Патент 2148318 от 10.05.2000, бюл. 13), заключающийся в том, что биологическую ткань, предварительно обработанную антибиотиком, помещают в консервирующий раствор, состоящий из 0,9% раствора хлорида натрия с растворенными в нем антибиотиком и изотиорбамином в качестве антиоксиданта. Биологическую ткань хранят в условиях замораживания при температуре -4-6^oС.

Недостатком способа является тот факт, что процесс кристаллизации консервирующего раствора под действием низких температур приводит к повреждению поверхностных слоев биологической ткани, что значительно сокращает сроки ее хранения.

Задачей изобретения является увеличение сроков хранения биологической ткани в условиях низких температур.

Поставленная задача решается тем, что в известном способе консервации биологической ткани для трансплантации путем обработки ее раствором антибиотика и помещения в консервирующий раствор, включающий 0,9% раствор натрия хлорида с растворенными в нем антибиотиком и антиоксидантом, согласно изобретению в консервирующий раствор добавляют глицерин, а в качестве антиоксиданта используют имоксипин.

Проведенные исследования показали, что добавление глицерина в консервирующий раствор обеспечивает защиту консервирующего раствора от кристаллизации в условиях низких температур (-8-10^oС) и, следовательно, предотвращает повреждение поверхностных слоев биологической ткани. Кроме того, присутствие глицерина способствует глубокому проникновению имоксипина, обладающего антиоксидантным действием, в поверхностные слои биологической ткани, что обеспечивает сохранение ее структуры в условиях длительного хранения. Для гистологических исследований были взяты 24 трансплантата (кусочки хряща), законсервированных по предлагаемому способу и способу-прототипу. Исследования проводились в сроки от 10 до 60 дней. При консервации хряща по способу-прототипу хрящ сохраняет свою нормальную структуру до 1 месяца, в дальнейшем в протоплазме клеток появляются незначительные дистрофические изменения. Однако общая структура хряща не изменяется, все клеточные элементы хорошо выявляются до 45 дня. В последующие сроки происходит медленное нарастание дистрофических изменений. Максимальный срок хранения трансплантата в замороженном состоянии (-4-6^oС) 4-5 месяцев с момента консервации. При консервации хряща по предлагаемому способу хрящ сохраняет свою нормальную структуру до 2-х месяцев. Общая структура хряща не изменяется, все клеточные элементы хорошо выявляются до 90 дня. Консервирующий раствор остается в жидком состоянии при низких температурах (-8-10^oС), и максимальный срок хранения трансплантата увеличивается до 8-10 месяцев. Сохранение структуры трансплантата подтверждается при оценке оптической плотности консервирующего раствора через каждые 10 дней хранения до 90-ого дня при температуре -4-8^oС. Исследования проводили на фотоколориметре КФК-2 МП (кювета 0,5 см, длина волны 490 нм). Данные исследования представлены в таблице.

Из таблицы видно, что относительная оптическая плотность консервирующего раствора по предлагаемому способу значительно ниже, чем по способу-прототипу, за счет отсутствия кристаллизации консервирующего раствора и сохранения структуры трансплантата.

Способ осуществляют следующим образом.

В стерильных условиях операционной или чистой перевязочной биологическую ткань (трансплантат), например четырехугольный хрящ перегородки носа человека, после предварительной обработки раствором антибиотика (канамицина сульфатом) укладывают в стерильный стеклянный флакон емкостью 10 мл, который заполняют 5 мл приготовленного консервирующего раствора. Консервирующий раствор содержит: 25 мл 0,9% раствора натрия хлорида, 1 г канамицина сульфата, 15 мл глицерина, 10 мл 1% раствора имоксипина. В консервирующий раствор должно входить не менее 20% глицерина. В таблице приведены данные для консервирующего раствора с содержанием глицерина 30% и 40%.

Предлагаемый способ консервации биологической ткани для трансплантации позволяет увеличить сроки хранения биологической ткани. Увеличение сроков хранения позволяет создать банк трансплантатов и избежать выполнения у больных, нуждающихся в реконструктивной операции, дополнительных операций для получения аутотрансплантатов.