способ оценки эффективности лечения ортопедотравматологических больных

Формула изобретения

Способ оценки эффективности лечения ортопедотравматологических больных путем биохимического исследования крови, отличающийся тем, что в плазме крови больного определяют количество липидов и церулоплазмина, хемилюминесценцию липопротеидов низкой плотности (ЛПНП) и хемилюминесценцию липопротеидов высокой плотности (ЛПВП) за 60 с в кфотонах, на основании полученных показателей рассчитывают коэффициент эффективности k по формуле



где ХлЛПНП - хемилюминесценция липопротеидов низкой плотности;

ХлЛПВП - хемилюминесценция липопротеидов высокой плотности;

ОЛ - количество общих липидов;

ЦП - концентрация церулоплазмина,

сравнивают со значением k30, определенным для здоровых людей, и считают лечение эффективным, если показатель k уменьшается от первоначального значения в сторону нормы, и недостаточно эффективным, если k увеличивается.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к области медицины, а именно к ортопедии и травматологии, и может быть использовано для определения эффективности проводимого консервативного и оперативного лечения ортопедотравматологических больных.

Известен способ определения интенсивности регенерации костной ткани при переломе [1] путем исследования содержания в костной ткани оксипролина, гексозамина и гексуроновых кислот.

Данный способ сложен, травматичен, так как для определения состояния регенерации кости, материал приходиться брать из костной ткани оперативным путем.

Известен способ определения развития ложного сустава при переломе кости [2], по количеству цитрата в сыворотке венозной крови. Данный способ диагностики прошел апробацию только на кроликах, а не на больном, поэтому по нему трудно судить о таких же патологических изменениях, но у человека. Данный метод всего лишь показывает биохимические изменения в организме, происходящие в ответ на формирование ложного сустава.

Наиболее близким по значению является способ оценки эффективности лечения ишемической болезни сердца антиоксидантами [3], который определяют по степени аутоокисляемости выделенных липидов из эритроцитарной массы.

Метод не позволяет достаточно широко осветить те процессы, которые происходят в организме у ортопедотравматологического больного при различных методах оперативного и консервативного лечения, данный способ показывает оценку только тех изменений, которые происходят в организме при лечении антиоксидантами.

При повреждении опорно-двигательного аппарата в организме человека происходят сложные биохимические процессы, направленные на восстановление анатомической целостности поврежденного сегмента, на восстановление его функции, на восстановлении функции органов и систем. Важно знать, как идет процесс восстановления поврежденных структур, и при выявлении каких-либо отклонений, вовремя коррегировать процесс лечения.

Нами предлагается новый способ оценки эффективности лечения больных в травматологии и ортопедии по количественному анализу общих липидов, церуллоплазмина, хемилюминесценции липопротеидов низкой и высокой плотности плазмы крови человека, имеющего повреждение опорно-двигательного аппарата.

Предложенный способ позволит своевременно оценить качество лечения, спрогнозировать возможные осложнения.

Предложенный способ отличается от ранее предложенных тем, что в исследование включены важные качественные показатели перекисных окислений, такие как хемилюминесценция липопротеидов низкой и высокой плотности, определяется церуллоплазмин плазмы крови, для повышения специфичности и достоверности вводится коэффициент.

Предложенный способ осуществляется следующим образом.

Определяется количество общих липидов по известным методикам.

К 0,02 мл сыворотки крови прибавляют 1,5 мл концентрированной серной кислоты. Содержимое перемешивают и помещают на 15 минут в водяную баню. После охлаждения гидролизата отмеривают 0,1 мл (контрольная проба 0,1 мл концентрированной серной кислоты), который переносят в другие пробирки, содержащие 1,5 мл фосфорнованилинового реактива. После перемешивания пробы оставляют стоять 50 мин при комнатной температуре. Оптическую плотность пробы (А1) и эталонного раствора (А2) измеряют на фотоэлектроколориметре при длине волны 510-550 нм в кювете толщиной слоя 10 мм против контрольного раствора. Расчет производят по формуле [х=А1/А28 (г/л)]. Исследуется липидный состав плазмы крови, взятой из периферических сосудов. Разделение фракции липопротеидов проводят осаждением липопротеидов низкой (ЛПHП) и очень низкой (ЛПОП) плотности фракций липопротеидов, добавлением хлорида магния в конечной концентрации 170 ммоль, в присутствии 200 Ед/мл гепарина. Затем после предварительной инкубации на льду в течение 30 мин, пробу центрифугируют при 1500g. При этом в элюате остается фракция липопротеидов высокой плотности (ЛПВП), а фракцию (ЛПНП+ЛПОНП) извлекают растворением осадка 2-молярным раствором сульфата аммония.

Затем определяют хемилюминесценцию продуктов перекисного окисления липидов. Инициированную перекисью водорода в присутствии избытка ионов железа (II) хемилюминесценцию определяют следующим образом. В кювету хемилюминометра последовательно вносят - 0,2 мл фосфатного буфера рН 7,4; 0,1 мл пробы (плазмы или разделенные фракции липопротеидов); 0,4 сульфата железа(II) (28 мг в 100 мл дисцил. воды) и 0,2 мл 3%-ного раствора перекиси водорода. Определяют общую светосумму за 30 и 60 секунд в кфотонах, среднюю скорость реакции за каждые 10 секунд измерения и максимальное значение интенсивности хемилюминесценции за время измерения. Наиболее информативным и общим показателем является показатель общей светосуммы за 60 секунд.

По известным методикам определяется церуллоплазмин плазмы крови для этого в обычные химические пробирки вносят по 0,1 мл сыворотки (без следов гемолиза), в одну из пробирок. Служащую контрольной (она может содержать любую другую сыворотку). Добавляют 2 мл раствора фтористого натрия (с целью инактивации ферментативной активности церуллоплазмина). Затем во все пробирки помещают по 8 мл ацетатного буфера и по 1 мл раствора р-фенилендиамина (используемого в качестве субстрата). Пробирки встряхивают и ставят на 1 час в водяную баню с температурой +37^oС. После инкубации во все пробирки, за исключением контрольной, доливают по 2 мл раствора фтористого натрия. Содержимое пробирок перемешивают и переносят в холодильник, где выдерживают в течение 30 мин при +4^oС. Пробы колометрируют на ФЭКе с зеленым светофильтром (530 нм) в кюветах с шириной слоя 10 мм. Результаты сравнивают с данными контрольной пробы (бледно-розовая окраска).

Умножая значения оптической плотности на коэффициент пересчета 875, получают величину концентрации церуллоплазмина в мг/л.

Для подтверждения достоверности метода нами были взяты две группы пациентов.

Первая группа являлась контрольной в нее входили 15 абсолютно здоровых лиц в возрасте от 19 до 65 лет

Во вторую группу вошли 36 человек в возрасте от 18 до 68 лет с различными повреждениями опорно-двигательного аппарата. У всех больных производился забор крови до лечения во время лечения и при окончании для определения показателей общих липидов, церуллоплазмина, хемилюминесценцию липопротеидов высокой и низкой плотности. У исследуемой группы больных показатели менялись в зависимости от периода лечения, метода лечения и исхода. При благоприятном исходе показатели приходили в норму. Среднестатистические значения показателей в зависимости от периода лечения и исхода приведены в таблице.

Для обобщения и анализа полученных результатов для определения большей достоверности, рассчитывается коэффициент k по формуле:



где ХлЛПНПОЛ - произведение абсолютных показателей хемилюминесценции липопротеидов низкой плотности и общих липидов плазмы крови: ХлЛПВПЦП - произведение величины хемилюминесценции липопротеидов высокой плотности к количеству церуллоплазмина плазмы крови, отношение полученных данных определяет диагностический коэффициент - k, по полученному значению которого можно судить о эффективности лечения ортопедотравматологического больного на момент исследования, так как коэффициент включает в себя количественные значения общих липидов, липопротеидов низкой и высокой плотности церуллоплазмина. Даже если значение одного из них изменилось, и это влечет за собой изменение коэффициента, что позволяет судить об эффективности лечения.

У первой группы больных показатели диагностического коэффициента - k были стабильными 30. У второй группы больных диагностический коэффициент имел различные значения, до лечения и при неудовлетворительных результатах он был больше 30, если лечение оказывалось адекватным - показатель снижался.

Для иллюстрации проводимых исследований приводим следующие клинические примеры.

Больной П., 38 лет, поступил в травматологическое отделение с диагнозом: закрытый двойной перелом левой бедренной кости в нижней и средней трети со смещением отломков. При поступлении проведена противошоковая терапия, новокаиновая блокада места перелома, наложено скелетное вытяжение за бугристость большеберцовой кости. У больного взята кровь, моча на клиническое исследование - имеется легкая степень анемии. Параллельно проведено биохимическое исследование крови для определения хемилюминесценции липопротеидов низкой и высокой плотности, которые соответствовали значениям ЛПВП - 622 кфотон, ЛПНП - 1896 кфотон, общие липиды - 3,1 г/л, церуллоплазмин - 0,1 г/л. Коэффициент при этом равен - 94,5. Больному предложен оперативный метод лечения, от которого он отказался. Проводилось консервативное лечение: скелетное вытяжение с последующим наложением кокситной гипсовой повязки. На высоте консервативного лечения проводилось биохимическое исследование крови, получены следующие данные ХлЛПВП - 850 кфотон, ХлЛПНП - 1900 кфотон, общие липиды - 3,2 г/л, церуллоплазмин - 0,11. Коэффициент k - 65, это означает не эффективность данного метода лечения. Перед снятием кокситной гипсовой повязки вновь произведено определение ХлЛПВП - 860 кфотон, ХлЛПНП - 1910 кфотон, общих липидов - 3,2 г/л, церуллоплазмина - 0,1 г/л. Коэффициент k сответствовал - 71. Лечение не эффективно, что подтверждено рентгенограммами - имеется двойной ложный сустав. Больному произведена операция: резекция ложного сустава пристеночная аутопластика костным трансплантатом, стабильный остеосинтез. Через две недели после операции показатель эффективности лечения значительно улучшился k - 43, соответственно ХлЛПНП - 1908 кфотон, ХлЛПВП - 920 кфотон, общие липиды - 3,53 г/л, церуллоплазмин - 0,17 г/л. Через четыре месяца после операции коэффициент k - 30, что соответствовало норме, показатели ХлЛПНП - 1904 кфотон, ХлЛПВП - 1369 кфотон, церуллоплазмин - 0,18 г/л, общие липиды - 3,9 г/л.

На рентгенограмме полная консолидация ложных суставов.

Больной Р. , 64 года, поступил с диагнозом: закрытый перелом костей правой голени в средней трети со смещением отломков. Биохимические показатели крови соответствовали ХлЛПНП - 1702 кфотон, ХлЛПВП - 560 кфотон, общие липиды - 2,5 г/л, церуллоплазмин - 0,15 г/л.

Коэффициент k - 75. Больному произведен стабильный остеосинтез по методике АО. Через две недели после операции после снятия швов определены ХлЛПНП - 1802 кфотон, ХлЛПВП - 854 кфотон, общие липиды - 3,6 г/л, церуллоплазмин - 0,15 г/л. Коэффициент k - 50,4, что соответствовало значительному улучшению показателей. Через три месяца после операции повторили анализ ХлЛПВП- 1460 г/л, ХлЛПНП - 1806 г/л, общие липиды - 4,34 г/л, церуллоплазмин - 0,18 г/л, коэффициент k - 29. На рентгенограмме консолидация перелома, разрешена полная нагрузка на ногу.

Анализ.

Проведены биохимические исследования плазмы крови у пациентов, на количественное содержание общих липидов, церуллоплазмина, определялась хемилюминесценция липопротеинов высокой и низкой плотности. Исследования проводились у контрольной группы людей и у больных с различными повреждениями опорно-двигательного аппарата до лечения, во время лечения, в конце лечения. Прослежена закономерность изменения вышеперечисленных биохимических показателей в зависимости от вида и эффективности проводимого лечения. В процессе исследования выявлено, что исследуемые показатели не всегда и не все сразу реагируют на проводимые коррективы в лечении, поэтому для упорядочения анализа полученных результатов введен коэффициент k, который всегда объективно отражает те изменения, которые происходят в организме в результате проводимых лечебных мероприятий, не зависимо положительно или отрицательно они влияют на процесс выздоровления.

Коэффициент k у здоровых людей равен или меньше 30, что подтверждают исследования, проводимые у контрольной группы людей. При недостаточно эффективном проводимом лечении показатель увеличивается, а если лечение эффективно показатель уменьшается от первоначальных цифр и со временем нормализуется.

Практически предложенный способ оценки эффективности лечения ортопедотравматологических больных может быть использован в здравоохранении для улучшения качества лечения и своевременного выбора других эффективных методов лечения.

Литература

1. О. П. Тимошенко, В.А. Филиппенко, Ф.С. Леонтьева. Способ определения интенсивности регенерации костной ткани при переломе. Описание изобретения к авторскому свидететельству 1160310.

2. П. Ф. Переслытских, Б.Я. Власов. Способ определения развития ложного сустава при переломе кости. Описание изобретения к авторскому свидетельству 1642392.

3. А.Н. Кудрин, В.С. Смоленский, В.М. Хусаинов, А.А. Аблидер, Н.И. Капитонов. Способ оценки эффективности лечения ишемической болезни сердца антиоксидантами. Описание изобретения к авторскому свидетельству 1273801.