способ подбора гомеопатических лекарственных средств для детей

Формула изобретения

Способ подбора гомеопатических лекарственных средств для детей, включающий забор крови у пациента, инкубирование мазков крови с тестируемыми препаратами, отличающийся тем, что забор крови проводят из капиллярного русла, проводят ее анализ цитохимическим методом и в качестве искомого выбирают препарат, вызывающий изменение ферментного статуса лимфоцитов не выходящее за пределы 0,1-50% от нормы относительно здорового индивидуума.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к медицине, а точнее к способам подбора гомеопатических лекарственных средств для выбора препарата или его разведения, используемого для лечения конкретного больного.

Известен способ традиционного подбора препарата, включающий в себя:

1. Сбор диагностических данных - полной и точной информации о заболевании.

2. Анализ собранной диагностической информации.

3. Выбор гомеопатического средства, наиболее отвечающего индивидуальным особенностям пациента и характеру его заболевания.

4. Назначение лекарства.

5. Наблюдение за реакцией организма пациента на назначенное лечение и принятие решения относительно повторного приема или замены лекарственного препарата [1].

Недостатком данного способа является длительность и ненадежность подбора препарата при неточном опросе пациента, особенно, если этим пациентом является ребенок.

Поэтому одной из важнейших задач современной медицины является разработка методических подходов, позволяющих оценить воздействие лекарственного препарата на организм человека in vitro.

Известен способ скрининга лекарственных препаратов, выбранный нами за прототип заявляемого изобретения, включающий в себя культивирование компонентов крови больного с тестируемыми препаратами, при этом введение препарата в кровь осуществляется в дозе, соответствующей 1:5000 от терапевтической. В качестве искомого выбирают препарат с наибольшим соотношением SH-SS групп в клеточной фракции больного. Количество SH-SS групп определяется методом прямого и обратного амперометрического титрования [2].

Недостатком этого способа является забор большого объема венозной крови (10 мл для прямого титрования) у больного, что является особо актуальным для новорожденных детей.

Задачей заявляемого изобретения является увеличение эффективности лечения больного путем повышения точности подбора гомеопатических лекарственных средств и сокращения времени исследования, а также уменьшение объема забираемой крови и снижение риска инфицирования.

Поставленная задача в способе подбора гомеопатических лекарственных средств для конкретного больного, включающем забор крови пациента и инкубирование мазков с тестируемыми препаратами, достигается тем, что забор крови проводят из капиллярного русла, проводят ее анализ цитохимическим методом и в качестве искомого препарата выбирают тот, который вызывает изменение ферментного статуса лимфоцитов, не выходящее за пределы 0,1-5,0% от нормы относительно здорового индивидуума.

Основным отличием заявленного способа является то, что забор крови производится из капиллярного русла, что значительно снижает объем забираемой крови и риск инфицирования, а также то, что анализ крови проводят цитохимическим методом.

В основу способа была положена способность лимфоцитов отражать изменением активности ферментов влияние лекарственных препаратов на общее состояние организма.

Способ осуществляется следующим образом:

Мазки крови готовят на обезжиренных предметных стеклах, используя кровь, взятую из пальца больного с помощью скарификатора. Количество мазков (обычно 5-9) зависит от количества тестируемых препаратов и их разведений.

Фиксацию препаратов проводят по принятой для цитохимического анализа методике в 8.18 М растворе ацетона, насыщенного динатриевой солью этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТА) при рН 5.3 и при комнатной температуре в течение 30 с. Затем препараты промывают дистиллированной водой и высушивают при комнатной температуре на воздухе.

1 мазок используют в качестве контрольного, оставшиеся (4-8) мазки инкубируют с растворами исследуемых препаратов при 37^oС в течение 15 мин в водном термостате. Для этого 1 гранулу исследуемого препарата растворяют в 1 мл физиологического раствора (0,9%-ный раствор NaCl), мазки помещают в чашки Петри (по 2 в каждую) и поверхность мазка равномерно покрывают раствором так, чтобы он не выходил за границы предметного стекла. Чашки Петри погружают в термостат на подставке.

После инкубации препараты промывают дистилированной водой и высушивают при комнатной температуре на воздухе.

Активность сукцинатдегидрогеназы (СДГ) в популяции лимфоцитов определяют количественным цитохимическим методом [3].

Метод основан на способности п-нитротетразолия фиолетового в процессе ферментативной реакции образовывать нерастворимые в воде круглые гранулы формазана, маркирующие активные митохондрии, что позволяет произвести их визуальный подсчет в определенном количестве лимфоцитов и рассчитать параметры структуры популяции.

Реакцию для выявления активности ферментов проводят в инкубационной среде, содержащей 70 мМ фосфатный буфер, 1 мМ ЭДТА, 0.84 мМ п-нитротетразолий фиолетовый при рН 7,3 и 37^oС в течение 60 мин в водном термостате. Для выявления активности СДГ добавляют 2.5 мМ янтарнокислый натрий (инкубации подвергают все мазки, включая контрольный).

После инкубации мазки промывают водой и погружают в насыщенный раствор метилового зеленого (ядерного красителя) на 15-20 с, после чего мазки вновь промывают и высушивают при комнатной температуре на воздухе.

Готовые мазки микроскопируют под водной иммерсией (увеличение 750 раз) на микроскопе Биолам Р-16. Об активности дегидрогеназы судят по количеству темно-фиолетовых гранул формазана, образовавшихся в лимфоците в процессе ферментативного восстановления п-нитротетразолия фиолетового. Для определения активности фермента в популяции лимфоцитов подсчитывают количество гранул в 30 клетках, а затем рассчитывают параметры распределения популяции методом статистической обработки результатов и в качестве искомого выбирают препарат, вызывающий изменение ферментного статуса лимфоцитов, близкого по показателям к норме относительно здорового индивидуума.

Изобретение иллюстрируется следующими примерами. В таблицах приведены цитохимические параметры СДГ лимфоцитов и их изменения под действием гомеопатических лекарственных средств в каждом конкретном случае, где Q - среднее арифметическое значение сукцинатдегидрогеназы, по изменению которой получают основную информацию об активности фермента в лимфоцитах (норма - 18.7-19.9 г/лф)

Q=x_i/K,

где x_i - число гранул в каждой клетке, К - число клеток.

В пределах популяции может происходить сближение или расхождение клеток по активности фермента, следовательно, для более полной характеристики состояния клеточной популяции используют несколько показателей, представляющих в совокупности ферментный статус клетки. Одним из этих показателей является коэффициент вариации (V). Он характеризует рассеивание вариантов относительно среднего значения, отражает гетерогенность клеток по активности фермента или относительную разнородность клеток. При существенном различии клеток по активности фермента - показатель высокий (норма - 0.35-0.47)

V=S/Q100%,

где S - среднеквадратичное отклонение.

Коэффициент асимметрии (А) характеризует распределение членов популяции по уровню активности относительно средней величины или уравновешенности клеточного пула с различной ферментативной активностью. При увеличении количества клеток с высокой активностью в сочетании с единичными низкоактивными клетками коэффициент асимметрии имеет отрицательный знак (А<0). При обратной ситуации - преобладание пула низкоактивных клеток в сочетании с единичными высокоактивными лимфоцитами - коэффициент асимметрии положителен (А>0) (норма -0.5 - +0.5)

A=(x_i-Q)³/KS³.

Коэффициент эксцесса (Е) характеризует избыток или недостаток клеток с нормальной (близкой к средней) активностью фермента. Нормальное количество типичных по активности фермента клеток (распределение клеток соответствует норме) наблюдается при нулевом эксцессе, избыток клеток со средней активностью - при положительном эксцессе, недостаток - при отрицательном эксцессе. Функциональное состояние покоя характеризуется эксцессом, приближенным к нулю (норма - 25-29)

E=(x_i-Q)⁴/KS⁴.

Относительная энтропия информации (Н) характеризует разнообразие клеток по их энзиматической активности. Теоретически, если все клетки популяции имеют одинаковую активность, то энтропия информации равна нулю. При большом клеточном разнообразии энтропия увеличивается независимо от активности фермента в клетках. Большое разнообразие клеток чаще наблюдается при высокой относительной энтропии информации. Отсутствие разнообразия - при одинаково низкой, нормальной или высокой активности во всех клетках (норма - 0.737-0.757)

V=- P_i lg P_i/lgK, P_i=n_i/K,

где n_i - число клеток с одинаковым количеством гранул.

Пример 1

Девочка Д. от 1 беременности, 1-х преждевременных родов на 28-29 неделе.

Основной диагноз: Перинатальная энцефалопатия. Гидроцефальный синдром.

Эхоэнцефалография: (возраст 25 дней)

В ПВО области зрительных ядер локальные участки уплотнения, расширение левого бокового желудочка до 26 мм.

Ребенок получал традиционное лечение, включающее диакарб, аспаркам, лазикс, 20%-ный раствор глюкозы.

В возрасте 1 мес 20 дней в лечение решено добавить гомеопатический препарат.

Данной клинической картине в той или иной степени могут быть подобны 2 гомеопатических препарата: Apis и Helleborus в низких разведениях.

Цитохимические параметры лимфоцитов, определенные после инкубации с препаратом Apis 3, не выходят за пределы 0,1-5,0% от нормальных показателей относительно здорового индивидуума, поэтому к терапии был подключен Apis 3 (см. табл. 1).

Пример 2

Мальчик К., 4 мес 9 дней. Из анамнеза: мальчик первый из двойни, от 2-ой беременности, 2-х срочных родов.

Основной диагноз: Перинатальная энцефалопатия.

Восстановительный период. Синдром повышенной нервно-рефлекторной возбудимости. Синдром мышечной дистонии.

При осмотре. В неврологическом статусе: Кожа мраморная, б.р. 4,54,5 см выбухает, пульсирует. При перкуссии головы гидроцефальный оттенок звука. Тремор подбородка при нагрузке. Глазных симптомов нет. Мышечная дистония с преобладанием повышения тонуса сгибателей в верхних конечностях D=S. Сухожильные рефлексы повышены, зоны расширены D=S. Голову держит хорошо, опора на руки слабая, ходьба на пальцах ног. Взгляд фиксирует, следит, эмоциональный.

Эхоэнцефалография: паренхима мозга, желудочки - без особенностей.

Цитохимические параметры лимфоцитов, определенные после инкубации с препаратом Apis 3, не выходят за пределы 0,1-5,0% от нормальных показателей относительно здорового индивидуума, поэтому к терапии был подключен Apis 3 (см. табл. 2).

Пример 3

Девочка П., 7 дней

Из анамнеза: девочка 2-я из двойни, от 1 беременности, 1-х преждевременных родов на 33 неделе.

Основной диагноз: Перинатальная энцефалопатия. Синдром мышечной дистонии. Гипертензионный синдром.

Эхоэнцефалография: Уплотнения в ПВО с обеих сторон. Боковые желудочки в области тел - 6 мм, задние рога справа - 22 мм, слева 12 мм. Кроме Apis и Helleborus тестировался препарат Natrum Sulfuricum, который показан при травмах головного мозга в острый период (см. табл. 3).

Учитывая примерно одинаковые цитохимические показатели при применении 3 и 4 препаратов, придпочтение отдано Helleborus 3, т.к. при идентичных значениях Q предпочтение отдается тому препарату, у которого наибольшее количество показателей не выходит за пределы 0,1 -5% от нормальных показателей относительно здорового индивидуума. В данном случае - это коэффициент вариации (V) и относительная энтропия информации (Н).

Срок скрининга оптимального препарата и его разведения составляет 2-3 ч.

Таким образом, предлагаемый способ позволяет увеличить эффективность лечения путем повышения точности и сокращения времени подбора препарата, а также уменьшить объем забираемой крови и снизить риск инфицирования. Способ опробирован в отделении недоношенных и маловесных детей НИИ педиатрии НЦЗД РАМН и может найти широкое клиническое применение в медицинской практике.

Источники информации

1. Камминг С. , Ульман Д. "Гомеопатический справочник на все случаи жизни", С.-Петербург, 1998, с. 39.

2. Патент РФ 2150700, кл. G 01 N 33/15, бюл. 16 - 10.06.2000.

3. Нарциссов Р. П. "Применение п-нитротетразолия фиолетового для количественного цитохимического определения дегидрогеназ лимфоцитов человека", Архив анатомии, гистологии, эмбриологии. 5, 1969, с. 85-91.