способ определения активности 5-альфа-редуктазы "in vitro"

Формула изобретения

Способ определения активности 5--редуктазы in vitro, включающий исследование ферментативной реакции образования 5--дигидротестостерона из тестостерона, отличающийся тем, что определение проводят при значениях концентраций тестостерона от 1 до 600 нг/л и выявляют минимальную активность 5--редуктазы при концентрации тестостерона, соответствующей физиологической норме у мужчин.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к медицине, в частности к урологии. Прототипом изобретения является способ определения активности 5-альфа-редуктазы при применении проскара (Faller В. , Farley D. , Hanpeter N. Finasteride, a slow-binding 5--reductase inhibitor//Biochemistry,1993,32,5705-5710).

Недостатком прототипа является то, что проскар, снижая активность 5-альфа-редуктазы, не устраняет патогенетических причин, приводящих к повышению активности фермента.

Цель изобретения - выявление минимальной активности 5-альфа-редуктазы в исследованиях "in vitro" при различных значениях концентрации тестостерона.

Сущность изобретения заключается в том, что минимальная активность 5-альфа-редуктазы наблюдается при уровне тестостерона, соответствующем физиологической норме у мужчин.

После 40 лет у мужчин отмечается снижение уровня циркулирующего в крови тестостерона (Vermulen F., Rubens R., Verdoner L. Testosterone secretion and metabolism in male senescence. // J. Clin. Endocrinol. 34: 730-735.1972). В этот период наблюдается увеличение уровня 5-альфа-дигидротестостерона вследствие повышенной активности 5-альфа-редуктазы, что в свою очередь является одним из ведущих факторов в патогенезе доброкачественной гиперплазии и рака предстательной железы (Bruchovsky N., Rennie P.S., Batzold F.N., Goldenberg S.L., Fletlher Т., Mc.Loughlin M.G. Kinetic parameters of 5--reductase. Activity in stroma and epithelium on normal, hyperplastic and carcinomatous human prostates J.C.E.M. 1988,67-4, pp. 806-816).

В опытах на животных под воздействием больших доз андрогенов выявлено образование рака предстательной железы (Лопаткин Н. А. Руководство по урологии. М., Медицина, 1988.- Т.3.С.504).

Проведенные исследования показали, что любое отклонение уровня тестостерона от физиологической нормы как в сторону уменьшения (при частичном возрастном андрогенном дефиците - PADAM), так и в сторону увеличения (злоупотребление андрогенными препаратами) приводит к повышению активности 5-альфа-редуктазы, что сопровождается увеличением продукции 5-альфа-дигидротестостерона и соттветственно повышением вероятности развития доброкачественной гиперплазии и рака предстательной железы. Наиболее значимым фактором профилактики этих заболеваний можно рассматривать поддержание уровня тестостерона в пределах физиологической потребности, при которой не наблюдается повышения активности 5-альфа-редуктазы.

Приведенные положения подтверждаются данными исследований:

одинаковые штаммы фибробластов крайней плоти человека инкубировали в течение 2 ч при +37^oC на средах с различными концентрациями тестостерона. Активность 5-альфа-редуктазы, которая восстанавливает тестостерон в 5-альфа-дигидротестостерон, оценивали измерением 5-альфа-дигидротестостерона иммуноферментным методом. Для этого использовались тест-система фирмы "Cytimmyne" серии АТА 906 DA.

Были получены следующие результаты, представленные в таблице.

Данные исследования свидетельствуют о минимальной активности 5-альфа-редуктазы при уровне тестостерона - 7,0 нг/мл, что соответствует физиологической концентрации тестостерона (норма содержания тестостерона в плазме крови у мужчин составляет 5,0-9,0 нг/мл (в среднем 6,5 нг/мл); Афиногенова С. А. и др. Биохимия гормонов и гормональная регуляция. М.: Наука, 1976, с. 254). Увеличение активности фермента наблюдалось как при низком, так и при высоком содержании тестостерона.

Это подтверждает возможность рассмотрения нормального уровня тестостерона, как наиболее важного условия нормализации активности 5-альфа-редуктазы и образования 5-альфа-дигидротестостерона.