способ определения концентрации белка в моче

Формула изобретения

Способ определения концентрации белка в моче, включающий исследование мочи, отличающийся тем, что измеряют электросопротивление мочи до и после ее фильтрации через фильтр с порами в 2-3 нм, после чего по разнице электросопротивлений определяют концентрацию белка в моче.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к способам экспресс-диагностики, и может быть использовано в лабораторных условиях и в операционной при экстренном измерении концентрации белка в моче (например, при операции пересадки почки). Из известных способов определения концентрации белка в моче наиболее точным является фотометрический. Он основан на биуретовой реакции. Для его реализации необходим ряд реактивов:

1 - изотонический раствор NaCl,

2 - 0,2 моль/л раствор NaOH,

3 - 0,5% раствор KJ,

4 - К, Na виннокислый, 4-х водный (сегнетова соль)

5 - CuSO₄5H₂O,

6 - калибровочный раствор альбумина (100 г/л в физрастворе).

Ход определения концентрации белка в моче.

Из реактивов 2, 3, 4, 5 приготавливают биуретовый реактив. 0,1 мл исследуемой мочи смешивают с 5 мл рабочего биуретового раствора. Через 30 мин производят измерение на фотометре при длине волны 500-550 нм против холостой пробы. Расчет количества белка ведется по калибровочному графику.

Недостатками этого способа являются необходимость в расходуемых реактивах, большая трудоемкость и длительность (не менее 40 мин) исследования. Кроме того, ручной фотометрический метод исключает возможность мониторинга измерений и автоматического вывода информации на компьютер или принтер [1] .

Задачей предложенного способа измерения концентрации белка в моче является упрощение и сокращение времени определения белка.

Поставленная задача в способе определения концентрации белка в моче, включающем исследование мочи, достигается измерением электросопротивления мочи до и после ее фильтрации через фильтр с порами в 2-3 нм, после чего по разнице величин электросопротивлений определяют концентрацию белка в моче.

Предлагаемый способ в медицинской и патентной литературе на обнаружен, что позволяет сделать вывод о соответствии его критерию "новизна".

Сущность предлагаемого изобретения состоит в том, что электросопротивление мочи измеряют до и после ее фильтрации через фильтр с порами в 2-3 нм, после чего по разнице величин электросопротивлений определяют концентрацию белка в моче.

Измерение электросопротивления мочи до и после ее фильтрации позволяет определить электросопротивление мочи, содержащей белок и очищенной от него, а разница величин электросопротивлений линейно соответствует концентрации белка в моче. Это доказано нами в ходе экспериментальных работ. Концентрация белка в моче прямо пропорционально связана с электросопротивлением мочи (табл. 1), а абсолютная разница величин электросопротивлений соответствует концентрации белка в моче (табл. 2). Использование фильтра с порами в 2-3 нм (2l0^-9м) позволяет достичь полной очистки мочи от белка. Размеры молекулы белка, например альбумина, составляют 4-6 нм. Уменьшение размеров пор фильтра увеличивает время фильтрации и может привести к отфильтровыванию других веществ, что повлияет на изменение суммарного электросопротивления.

Способ осуществляется следующим образом: исследуемую мочу вводят шприцом в датчик измерения электросопротивления и определяют общее электросопротивление мочи, после чего мочу пропускают через фильтр с порами в 2-3 нм и повторно определяют ее электросопротивление. Затем по разнице величин электросопротивлений определяют концентрацию белка в моче (табл. 2).

Сравнительное определение концентрации белка в моче фотометрическим и предлагаемым способом:

180 мл мочи здорового человека разделены на 9 порций по 20 мл. В 8 порций добавлен альбумин и в них получена концентрация белка от 10 до 80 г/л. Измерение концентрации белка в каждой порции проводились трижды фотометрическим и предлагаемым способом. Полученные результаты отражены в табл. 3.

Анализ полученных данных показывет, что точность предлагаемого способа определения белка в моче примерно на 1% выше фотометрического, а затрачиваемое на измерение время в 9-10 раз меньше.

Измерение электросопротивлений и пересчет разницы в концентрацию белка легко автоматизируются, что позволяет создать автоматический анализатор белка.

Предлагаемый способ позволяет значительно сократить время определения концентрации белка в моче (до 5 мин), отказаться от использования химических реактивов, и упростить процесс измерения (табл. 3).

Предлагаемый способ определения концентрации белка в моче прошел испытания в отделении пересадки почки РНЦХ РАМН и найдет широкое применение в лабораторной и клинической практике.

Источники информации

1. Справочник. Лабораторные методы исследования в клинике. Под редакцией проф. В. В. Меньшикова. М. , 1987, с. 174, 175.