способ оценки неспецифической резистентности организма

Формула изобретения

Способ оценки неспецифической резистентности организма путем исследования эпителиальных клеток ротовой жидкости, отличающийся тем, что у пациента берут ротовую жидкость, отстаивают ее, выделяют интерфазу добавляют к ней равное количество коммерческого эритроцитарного диагностикума, выдерживают смесь в течение 20 мин при температуре 37^oС, из смеси готовят мазок, окрашивают его по методу Романовского-Гимзе и исследуют под микроскопом, в мазке определяют адгезивную способность эпителиальных клеток по проценту адгезии, адгезивному числу и индексу адгезии, результаты оценивают в относительных величинах в сравнении с контрольной группой.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к медицине, а именно к стоматологии и иммунологии и предназначено для оценки состояния местного иммунитета.

Известен способ оценки неспецифической резистентности путем реакции адсорбции микроорганизмов (РАМ) клетками эпителия слизистой оболочки рта (Данилевский Н. Ф. , Магид Е.А., Мухин Н.А., Миликевич В.Ю. Заболевания пародонта. М.: Медицина, 1993. С. 97-98.).

Недостатки: недостаточная точность из-за отсутствия стандартизации объектов адгезии - в реакции адсорбции используют кокки, обсемененность которыми индивидуальна.

Изобретение направлено на решение задачи: повышение точности способа.

Указанная задача достигается путем использования в качестве объектов адгезии коммерческого эритроцитарного диагностикума из шигелл Зонне Санкт-Петербургского НИИВС. Оценка результатов осуществляется в относительных величинах в сравнении с контрольной группой (эталоном).

Способ осуществляется следующим образом: после 3-5 полосканий полости рта питьевой водой у пациента берут ротовую жидкость в количестве 1,5 мл в пробирку с предварительно добавленным в соотношении 1:4 стерильным раствором глюгицира. Смесь выдерживают в течение 2 часов при комнатной температуре. Отсасывают микропипеткой 0,1 мл интерфазы (часть жидкости, находящаяся на границе с осадком) и вносят в лунку микропланшета для иммунологических реакций. Затем в лунку вносят равное количество (0,1 мл) коммерческого эритроцитарного диагностикума из шигелл Зонне Санкт-Петербургского НИИВС, приготовленного по способу проф. Каплина В.Н. (Патент N 2131609. Способ диагностики фагоцитарной защиты/ Каплин В.Н., Шаврин А.П., Старкова А.В., Широкова Н. В. , Санакоева Л.П., Хачапуридзе Д.Р. Заявл. 19.12.97. Опубл. 10.06.99). Смесь выдерживают в термостате при температуре 37^oC в течение 20 мин, периодически встряхивают. После чего готовят мазок, фиксируют его в метиловом спирте 3-5 мин, окрашивают по методу Романовского-Гимзе, рассматривают под микроскопом (увеличение объектива 40х, увеличение окуляров 10х). В мазке определяют адгезивную способность эпителиальных клеток ротовой жидкости по показателям: проценту адгезии (количество эпителиальных клеток, обладающих адгезивной способностью из 100 учтенных), адгезивному числу (среднее число объектов адгезии, приходящееся на 100 эпителиальных клеток) и индексу адгезии (среднее число объектов адгезии, приходящееся на долю одной активной эпителиальной клетки). В мазке подсчитывают 100-200 неороговевших эпителиальных клеток. Параллельно осуществляют подсчет показателей адгезивной способности эпителиальных клеток ротовой жидкости, взятой у здоровых лиц, используемых в качестве контроля. В контрольной группе выводят средний уровень показателей. Результаты исследований оценивают в относительных величинах в сравнении с контрольной группой.

Примеры конкретного выполнения.

Пример 1. Больная К., 40 лет. Диагноз: хронический генерализованный пародонтит средней степени тяжести.

После 3 полосканий полости рта 100 мл питьевой воды у больной взяли ротовую жидкость в количестве 1,5 мл в пробирку с предварительно добавленным в соотношении 1:4 стерильным раствором глюгицира. Смесь выдержали в течение 2 часов при комнатной температуре. Отсосали микропипеткой 0,1 мл интерфазы и внесли в лунку микропланшета для иммунологических реакций. Затем в лунку внесли равное количество (0,1 мл) коммерческого эритроцитарного диагностикума из шигелл Зонне Санкт-Петербургского НИИВС. Смесь выдержали в термостате при температуре 37^oC в течение 20 минут, периодически встряхивали. После чего приготовили мазок, зафиксировали его в метиловом спирте 5 мин, окрасили по методу Романовского-Гимзе. В мазке определили адгезивную способность эпителиальных клеток по показателям: проценту адгезии, адгезивному числу и индексу адгезии. Параллельно осуществили подсчет показателей адгезивной способности эпителиальных клеток ротовой жидкости, взятой у здоровых лиц, используемых в качестве контроля. В контрольной группе вывели средний уровень показателей.

Результаты исследований в относительных величинах по отношению к контрольной группе: процент адгезии - 125,3%; адгезивное число - 154,6%; индекс адгезии - 135,9%.

После курса лечения у больной К. повторно определили уровень неспецифической резистентности организма с помощью адгезивной способности эпителиальных клеток ротовой жидкости. Получили следующие результаты: процент адгезии - 70,4%; адгезивное число - 95,2%; индекс адгезии - 149,2%.

До лечения у больной К. наблюдали повышенный уровень неспецифической резистентности организма (активация адгезивной способности эпителиальных клеток), после проведенного курса лечения отмечали снижение показателей адгезивной способности эпителиальных клеток к контрольным значениям.

Пример 2. Больная М., 37 лет. Диагноз: хронический генерализованный пародонтит средней степени тяжести. После 5 полосканий полости рта 100 мл питьевой воды у больной взяли ротовую жидкость в количестве 1,5 мл в пробирку с предварительно добавленным в соотношении 1:4 стерильным раствором глюгицира. Смесь выдержали в течение 2 часов при комнатной температуре. Отсосали микропипеткой 0,1 мл интерфазы и внесли в лунку микропланшета для иммунологических реакций. Затем в лунку внесли равное количество (0,1 мл) коммерческого эритроцитарного диагностикума из шигелл Зонне Санкт-Петербургского НИИВС. Смесь выдержали в термостате при температуре 37^oC в течение 20 минут, периодически встряхивали. После чего приготовили мазок, зафиксировали его в метиловом спирте 5 мин, окрасили по методу Романовского-Гимзе. В мазке определили адгезивную способность эпителиальных клеток по показателям: проценту адгезии, адгезивному числу и индексу адгезии. Параллельно осуществили подсчет показателей адгезивной способности эпителиальных клеток ротовой жидкости, взятой у здоровых лиц, используемых в качестве контроля. В контрольной группе вывели средний уровень показателей.

Результаты исследований в относительных величинах по отношению к контрольной группе: процент адгезии - 56,34%; адгезивное число - 19,9%; индекс адгезии - 39%.

После курса лечения у больной М. повторно определили уровень неспецифической резистентности организма с помощью адгезивной способности эпителиальных клеток ротовой жидкости. Получили следующие результаты: процент адгезии - 108,5%; адгезивное число - 88,7%; индекс адгезии -90,2%.

У больной М. до лечения диагностировали снижение неспецифической резистентности организма (угнетение адгезивной способности эпителиальных клеток), после проведенного курса лечения отмечали нормализацию показателей адгезивной способности эпителиальных клеток.

Пример 3. Больной В., 30 лет. Диагноз: хронический генерализованный пародонтит легкой степени тяжести.

После 3 полосканий полости рта 100 мл питьевой воды у больного взяли ротовую жидкость в количестве 1,5 мл в пробирку с предварительно добавленным в соотношении 1:4 стерильным раствором глюгицира. Смесь выдержали в течение 2 часов при комнатной температуре. Отсосали микропипеткой 0,1 мл интерфазы и внесли в лунку микропланшета для иммунологических реакций. Затем в лунку внесли равное количество (0,1 мл) коммерческого эритроцитарного диагностикума из шигелл Зонне Санкт-Петербургского НИИВС. Смесь выдержали в термостате при температуре 37^oC в течение 20 минут, периодически встряхивали. После чего приготовили мазок, зафиксировали его в метиловом спирте 5 мин, окрасили по методу Романовского-Гимзе. В мазке определили адгезивную способность эпителиальных клеток по показателям: проценту адгезии, адгезивному числу и индексу адгезии. Параллельно осуществили подсчет показателей адгезивной способности эпителиальных клеток ротовой жидкости, взятой у здоровых лиц, используемых в качестве контроля. В контрольной группе вывели средний уровень показателей.

Результаты исследований в относительных величинах по отношению к контрольной группе: процент адгезии - 46,5%; адгезивное число - 41,1%; индекс адгезии - 37,6%.

После курса лечения у больного В. повторно определили уровень неспецифической резистентности организма с помощью адгезивной способности эпителиальных клеток ротовой жидкости. Получили следующие результаты: процент адгезии - 111,3%; адгезивное число - 98,7%; индекс адгезии - 98%.

У больного В. до лечения диагностировали снижение неспецифической резистентности организма (угнетение адгезивной способности эпителиальных клеток), после проведенного курса лечения отмечали нормализацию показателей адгезивной способности эпителиальных клеток.

Предлагаемый способ менее трудоемок в исполнении, чем известный, может быть применен для комплексного обследования пациентов, оценки эффективности предпринятых лечебных мероприятий, при заболеваниях пародонта и слизистой оболочки рта. Использование коммерческого эритроцитарного диагностикума позволяет количественно стандартизировать объекты адгезии, что повышает чувствительность диагностического метода.