способ определения возраста эмбриона человека ранних сроков развития

Формула изобретения

Способ определения возраста эмбриона человека ранних сроков развития путем исследования абортивного материала по фрагменту тела эмбриона, отличающийся тем, что в гистологических препаратах определяют среднюю площадь срезов мезонефральных телец и если этот показатель равен 4880 - 5086 мкм², то возраст эмбриона - 4,5 недель развития, если этот показатель равен 8036 - 10219 мкм², то возраст эмбриона - 5 недель и более.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к медицине, а именно к эмбриологии. При проведении эмбриологических исследований существует реальная потребность в определении сроков развития эмбрионов человека 4,5 - 5 недель по объективным микроскопическим признакам непосредственно в гистологическом препарате.

Гистологические исследования процессов эмбрионального развития человека проводятся с целью получения сведений о закономерностях и особенностях гисто- и органогенезов у эмбрионов разного возраста. Для этого используются эмбрионы человека, получаемые в результате проведения медицинских абортов, в возрасте 4-12 недель внутриутробного развития. Эмбрионы, полученные таким способом, имеют многочисленные повреждения, часто представлены отдельными фрагментами. Определить точный срок развития эмбриона по внешним макроскопическим признакам, например, по теменно-копчиковой длине (Фалин Л.И., 1976), невозможно. Наиболее сложно определить возраст эмбрионов ранних сроков, а именно 4-5 недель внутриутробной жизни.

Прототипом для предлагаемого способа является метод определения возраста эмбриона Абрамова Б.Д., Гапиенко Е.Ф., Маркеловой И.В. (1975). Авторы в качестве критериев определения возраста эмбриона используют длину стопы, или бедренной кости, или высоту поясничного позвонка, или вес почки с надпочечником. Это макроскопический способ, позволяющий определить возраст эмбриона с 5,5 до 11 недель утробной жизни при наличии у эмбриона неповрежденных конечностей или сформированной почки.

Сущность предлагаемого нами способа заключается в определении срока развития эмбриона человека 4,5 и 5 недель утробной жизни путем микроскопического измерения площади мезонефральных телец Вольфова тела на гистологических препаратах торако-люмбальных фрагментов тела эмбриона. Нами впервые на большом количестве фактического материала (гистологические препараты эмбрионов 4,5-5 недель развития) установлена четкая зависимость размера величины мезонефральных телец Вольфова тела и возраста эмбриона. Основываясь на полученных корреляциях впервые, в качестве критерия определения возраста эмбриона используются размеры элементов нефрона мезонефроса (синонимы - первичная почка, туловищная почка, Вольфово тело) - мезонефральных телец, которые соответствуют определенному возрасту эмбриона. Поскольку на ранних этапах эмбрионального периода утробной жизни человека (4-5 недель) Вольфово тело является единственным органом, выполняющим жизненно важную для эмбриона экскреторную и гомеостатическую функцию, величина его структурно-функциональных элементов нефронов может быть использована как признак соответствующего возраста эмбриона. Мезонефральный нефрон состоит из почечного тельца и канальцев.

В результате проведенных нами морфометрических исследований на парафиновых гистологических препаратах неповрежденных человеческих эмбрионов с установленным по теменно-копчиковой длине сроком развития определена средняя площадь сечения мезонефральных телец в Вольфовом теле на каждом сроке развития, начиная с 4,5 недель до 10 недель утробной жизни с интервалом 3-4 дня. В период с 4-й до 10-й недели утробной жизни величина элементов телец закономерно изменяется. Установлены статистически достоверные различия средней площади сечения мезонефральных телец у эмбрионов 4,5 недель составляет 4880,24 - 5086,02 мкм², у эмбрионов 5 недель и более - 8036,2 - 10219,21 мкм² (см. таблицу, чертеж). В последующем проведенные нами контрольные определения средней площади мезонефральных телец у эмбрионов 4,5 и 5 недель развития, у которых срок развития определен по теменно-копчиковой длине, полностью подтвердили полученные нами результаты.

Для определения срока развития ранних эмбрионов определяют среднюю площадь сечения мезонефральных телец и сопоставляют с предлагаемыми цифрами. Если средняя площадь сечения телец Вольфова тела не превышает 5086,02 мкм², то возраст эмбриона соответствует 4,5 неделям утробной жизни, если средняя площадь сечения телец более 8036,20 мкм, то возраст эмбриона соответствует 5 и более неделям внутриутробной жизни.

Отличительными от прототипа признаками являются:

это микроскопический способ определения возраста эмбриона по фрагменту или части его тела, объектом служит гистологический препарат, содержащий элементы мезонефроса;

в качестве критерия определения возраста используется зависимость размера элементов нефрона мезонефроса - мезонефральных телец и возраста эмбриона;

предлагаются статистически достоверные размеры площади мезонефральных телец для каждого возраста: средняя площадь мезонефральных телец меньше 5086,02 мкм² характерна для эмбрионов 4,5 недель утробной жизни, средняя площадь мезонефральных телец больше 8036,20 мкм² характерна для эмбрионов 5 и более недель развития.

Примеры конкретного выполнения предлагаемого способа.

В качестве эмбрионального материала получено два деформированных эмбриона. Эмбрионам присвоены N N 148, 164. Эмбрионы представлены фрагментами тел, у которых разрушены краниальные концы и отсутствуют или деформированы зачатки конечностей. Внешние признаки и размеры фрагментов тел позволяют предположить, что данные эмбрионы имеют возраст примерно 4 - 6 недель развития. Однако определение точного возраста эмбриона по внешним данным не представляется возможным. Из эмбрионов приготовлены гистологические парафиновые препараты. Препараты окрашены гематоксилином Майера и эозином. С помощью окуляр- микрометра MOB-15 проведена морфометрия мезонефральных телец в каждом эмбрионе.

Эмбрион N 148. В результате измерения размеров мезонефральных телец средняя площадь среза тельца составляет 4797,64239,89 мкм². В соответствии с тем, что средняя площадь среза телец эмбриона N 148 не превышает 5086,02 мкм², возраст эмбриона определен как 4,5 недели.

Эмбрион N 164. В результате измерения размеров мезонефральных телец средняя площадь среза тельца составляет 9568,35344,56 мкм². В соответствии с тем, что средняя площадь среза телец эмбриона N 164 больше 8036,20 мкм², то возраст эмбриона определен как 5 или более недель развития.

В доступной нам литературе совокупность признаков, отраженная в формуле изобретения, нам не встречалась. Данный метод является объективным и доступным к применению в условиях стандартной гистологической или патологоанатомической лаборатории. Поэтому предлагаемый нами способ соответствует всем критериям изобретения и на него может быть выдан патент.

Предлагаемый способ определения возраста эмбриона человека ранних сроков развития разработан и используется в работе кафедр гистологии и эмбриологии, топографической анатомии и оперативной хирургии Тюменской государственной медицинской академии, лаборатории эмбриогенеза и токсикантов Научного Центра профилактического и лечебного питания Тюменского Научного Центра СО РАМН при определении точных сроков развития эмбрионов человека при проведении эмбриологических исследований.

Литература

1. Фалин Л.И. Эмбриология человека. М., Медицина, 1976.

2. Абрамов Б.Д., Гапиенко Е.Ф., Маркелова И.В. Некоторые критерии определения возраста эмбриона человека. Акушерство и гинекология. N 1, 1975 стр. 65-66 (прототип).