способ прогнозирования эффективности лечения кандидоза органов мочевой системы

Формула изобретения

Способ прогнозирования эффективности лечения кандидоза органов мочевой системы, включающий микроскопическое исследование пробы высушенной мочи, отличающийся тем, что исследуют пробу мочи, высушенную в форме капли при температуре 20-30^oС, и при наличии анизотропных включений Х-образной и звездчатой формы проводят 2-3 дневный курс противогрибковой терапии, затем осуществляют повторное исследование и при наличии анизотропных включений, при определении споровых форм или вегетирующих молодых кандид прогнозируют неэффективность лечения, при отсутствии анизотропных включений прогнозируют благоприятный исход лечения.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторному исследованию.

Известны лабораторные способы выявления кандидоза:

- основанные на посеве биологического материала (кровь, моча, ликвор и др. отделяемое) на питательные среды (агар Сабуро, сусло-агар, кандида-агар),

- серологические исследования для выявления специфических антител в сыворотке крови и гистологические исследования материалов, полученных при биопсии или аутопсии (Р.Н. Реброва. "Грибы рода Candida при заболеваниях негрибковой этиологии", М., "Медицина", 1989, с. 27-35).

Недостатком этих способов являются относительно поздние сроки диагностики кандидоза и, как следствие, отсутствие возможности прогнозировать эффективность действия антимикотических препаратов.

Наиболее близким к заявляемому способу является микроскопический метод определения кандидоза, который заключается в нанесении на поверхность предметного стекла капли материала в форме мазка, окрашивании его метиленовым синим по Граму или другими красителями с целью выявления почкующихся клеток гриба или нитей мицелия в материале из соскобов кожи, ногтевых чешуек, гное, моче (В.М. Лещенко. "Лабораторная диагностика грибковых заболеваний", М., Медицина, 1977, с. 107-111).

Однако тот метод имеет тот недостаток, что осуществляется, в основном, когда у больного выражена клиническая картина заболевания и результат исследования выступает в качестве подтверждающего. При этом по исчезновению клеток гриба или мицелия в исследуемом материале можно оценивать эффективность терапии, однако прогнозировать результат лечения, например, назначенным препаратом, этим способом не удается.

Для лечения детей и лиц старших возрастных групп очень важен прогноз эффективности лечения, так как он позволяет принять адекватные меры по предупреждению развития грозных осложнений кандидоза. Тем более, что у новорожденных с первых дней жизни вероятность заражения кандидами довольно высока (внутриутробное заражение, высокий процент - 40-60% - генитального кандидоза у матерей) и проведение специальных исследований на висцеральный кандидоз, например, органов мочевой системы, может значительно запаздывать. Особой диагностической значимостью для детей, особенно раннего возраста, является возможность прогнозировать эффективность лечения, поскольку более длительная терапия связана с приемом препаратов, не безразличных для организма ребенка, особенно при наличии у него сопутствующих осложнений или заболеваний (Самсыгина Г. А. , Буслаева Г.Н. "Лечение кандидоза у детей", Ж. "Детский доктор", 5, 1999, с. 34-36). Это же обстоятельство имеет аналогичное значение и для лиц старших возрастных групп.

Поставленной задачей было устранение указанных недостатков и создание такого способа прогнозирования эффективности лечения, который позволил бы достаточно быстро и доступно выявлять кандиды при исследовании мочи, даже начиная, например, с первых минут рождения детей, и назначать контролируемое лечение с целью предупреждения возникновения устойчивых к препарату грибов.

Это достигается тем, что в способе прогнозирования эффективности лечения кандидоза органов мочевой системы, включающем микроскопическое исследование пробы высушенной мочи, предложено исследовать пробу мочи, высушенную в форме капли при температуре 20-30^oC и при наличии анизотропных включений X-образной и звездчатой форм проводить 2-3-дневный курс противогрибковой терапии, затем осуществлять повторное исследование и при наличии анизотропных включений, при определении споровых форм или вегетирующих молодых кандид прогнозировать неэффективность лечения, при отсутствии анизотропных включений - благоприятный исход лечения.

На фиг. 1 изображены анизотропные включения X-образной и звездчатой форм грибов рода Candida в высушенной капле мочи больного ребенка с кандидозом органов мочевой системы. Поляризационно-оптическая микроскопия. Х90; фиг. 2 демонстрирует малую эффективность лечения - анизотропные структуры кандид видоизменяются, начинается распад. Поляризационно-оптическая микроскопия. Х90; фиг. 3 демонстрирует отбор высокоустойчивых к назначенному препарату кандид, которые переходят в споровую форму. Поляризационно-оптическая микроскопия. Х90; фиг. 4 демонстрирует новый цикл вегетирующих молодых форм кандид как результат неэффективной терапии. Поляризационно-оптическая микроскопия. X3G; фиг. 5 демонстрирует отсутствие анизотропных включений в высушенной капле мочи. Микроскопия в преходящем свете. X90.

Способ осуществляется следующим образом.

Берут 0,01 - 0,03 мл мочи, наносят на поверхность предметного стекла в форме капли, высушивают при температуре 20-30^oC в течение 40-60 минут, определяют анизотропные включения X-образной и звездчатой форм при оптической микроскопии и при их наличии диагностируют грибковое поражение органов мочевой системы. При последующих исследованиях мочи через 2-3 дня, в течение которых проводят противогрибковую терапию, при выявлении анизотропных структур палочковидной формы, споровых включений или вегетирующих молодых кандид прогнозируется неэффективный результат лечения, при отсутствии анизотропных включений прогнозируется благоприятный исход лечения.

Пример 1.

Ребенок С. , 3-и сутки после рождения. Диагноз: Гидронефроз, нефроптоз правой почки. Морфофункциональная незрелость.

Были проведено оптическое исследование мочи предложенным способом: выявлены анизотропные структуры X-образной и звездчатой форм (фиг. 1).

Заключение: грибковое поражение (кандидоз) органов мочевой системы.

Через трое суток у больного при микробиологическом исследовании была выделена кандида - Candida albicans и назначено лечение низоралом.

Спустя 2 суток после приема низорала при повторном исследовании мочи больного были выявлены анизотропные структуры палочковидной формы и споровые образования на фоне детритных масс (гибели части кандид). Прогноз эффективности лечения неблагоприятный. Однако лечение было продолжено тем же препаратом и в той же дозировке. Спустя двое суток в образце высушенной мочи на фоне детритных масс определены анизотропные двухконтурные споровые образования и единичные палочковые структуры (фиг. 2). Прогнозируется неблагоприятный исход лечения. Произведена смена лекарственного препарата - назначен дифлюкан. Спустя двое суток лечения дифлюканом - анизотропные структуры в высушенной капле мочи отсутствуют. Прогноз эффективности лечения благоприятный.

Пример 2.

Ребенок А., 7-е сутки после рождения. Диагноз: Острый пиелонефрит. Поликистоз правой почки.

Оптическое исследование мочи предложенным способом: образец изотропен (свечения каких-либо включений нет, см. фиг. 5).

Заключение: не обнаружено грибкового поражения (кандидоза) органов мочевой системы.

Отсутствие грибов у больного было подтверждено также и при микробиологическом исследовании.

Пример 3.

Больной М., 89 лет. Диагноз: Обострение кадькулезного пиелонефрита. Хроническая почечная недостаточность. Соп. : бронхиальная астма, хронический бронхит, эмфизема легких. Атеросклероз сосудов сердца и мозга.

Оптическое исследование мочи предложенным способам: выявлены анизотропные структуры X-образной формы.

Заключение: грибковое поражение (кандидоз) органов мочевой системы.

В дальнейшем при микробиологическом исследовании мочи у больного была выделена кандида - Candida albicans. Спустя трое суток после проведенного комплексного лечения, включающего антимикотическую и антибиотикотерапию в образце высушенной мочи выявлены вегетирующие молодые формы кандид в виде отдельных скоплений мелкой зернистости (фиг. 4). Прогноз лечения неблагоприятен. Спустя 2 суток весь образец мочи заполнен анизотропными структурами вегетирующих кандид, среди которых определяются споровые формы с вегетацией молодых форм (фиг. 3). Прогноз лечения крайне неблагоприятен. Спустя сутки больной умер от развившихся осложнений основного заболевания.

Предлагаемый способ позволяет довольно быстро (в течение 1,5-2 часов) определять грибковое поражение органов мочевой системы и своевременно назначать противогрибковое лечение, а также прогнозировать эффективность применяемой терапии и корректировать ее с целью предупреждения быстрого развития генерализованных осложнений, в том числе кандидозного сепсиса. Кроме того, исследование неинвазивно, а количество материала для анализа минимально.