способ получения тилозина

Формула изобретения

1. Способ получения тилозина, включающий получение солей тилозина, отличающийся тем, что для получения тилозина - основания для инъекционных форм - соли тилозина подвергают реакции с основаниями в водной среде при температуре от комнатной до 50^oC и pH 7,5 - 8,8, полученный осадок отфильтровывают и промывают водой.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что добавляют 0,5 - 5 М раствор основания в воде к водному раствору соли тилозина до pH 8,6 - 8,8 в течение времени 20 мин - 10 ч.

3. Способ по п.1, отличающийся тем, что растворы соли тилозина и основания добавляют одновременно в воду, в процессе реакции поддерживают pH реакционной смеси 7,5 - 8,6.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к способу получения препарата, принадлежащего к группе макролидных антибиотиков и предназначенного для лечения ряда инфекционных заболеваний животных.

Известны биохимические способы получения тилозина, заключающиеся в культивировании продуцента на питательных средах, с последующим выделением тилозина из культуральной жидкости путем экстракции [См. пат. НРБ N 20697, МПК C 12 D 9/16; пат. ЕПВ N 0045157, МПК C 07 H 17/08; пат. США N 4362881, МПК C 07 D 313/00].

Однако из культуральной жидкости его выделяют, предпочтительно, в виде солей винной или фосфорной кислот. В этой форме он и поступает в продажу как кормовой антибиотик. Для приготовления инъекционной формы тилозин требуется в виде основания, так как сроки годности и терапевтическая эффективность растворов солей тилозина сильно ограничены [British Pharmacopoeia (Vet), 1993, p. 45]. Тилозин-основание, полученный непосредственно из культуральной жидкости, становится пригодным для приготовления инъекционных растворов только после трудоемкой и дорогостоящей очистки, что обуславливает его высокую стоимость по сравнению с солями тилозина [Аксенова И.А. Тилозин: Производство и применение продуктов микробиологических производств. Обзорная информация. - М.: ВНИИСЭНТИ Минмедбиопрома СССР, 1988. - Вып. 2, с. 28].

Наиболее близким по технической сущности является способ получения тилозина в котором культуральную жидкость подвергают экстракции бутилацетатом, далее проводят реэкстракцию тилозина в водный раствор какой-либо кислоты, после удаления избытка кислоты раствор антибиотика концентрируют, высушивают и получают тилозин в виде водорастворимых солей. [Макухина А.М. и др. Производство и применение тилозина для ветеринарных целей. Обзорная информация, серия 6. - М., 1984, с. 12].

Тилозин, полученный данным методом, непригоден для приготовления инъекционных форм.

Задача изобретения - получение тилозина-основания, достаточно чистого для использования в инъекционных формах простым способом из доступных солей тилозина.

Поставленная задача решается синтезом тилозина-основания из солей обменной реакцией с основанием, полученный осадок фильтруют и промывают водой.

Реакцию проводят в водной среде при температурах от комнатной до 50^oC, добавляя 0,5-1 М раствор основания в воде к водному раствору соли тилозина до pH 8,6-8,8 или одновременно при перемешивании в небольшое количество воды 0,5-1 М раствор основания в воде и концентрированный водный раствор соли тилозина. В последнем случае в ходе реакции поддерживают pH среды от 7,5 до 8,6. После добавления всего количества соли тилозина pH доводят до 8,6-8,8. Реакцию проводят в течение времени от 20 мин до 10 ч.

Способ осуществляется следующим образом. Для получения тилозина-основания могут быть использованы, например, фосфат или тартрат тилозина, получаемые известными способами, например, как в прототипе. Соль подвергают реакции с основанием, таким как NaOH или KOH. Выпавший белый осадок тилозина-основания отфильтровывают, промывают дистиллированной водой и влажным растворяют в горячем пропиленгликоле. В полученном концентрате определяют содержание тилозина-основания известными методами, например ВЭЖХ, после чего из него готовят инъекционный раствор [British Pharmacopoeia (Vet.), 1993, p. 87].

Синтезированный таким образом препарат по данным ВЭЖХ содержит 92-98% тилозина-основания (в зависимости от содержания основного вещества в исходной соли тилозина), что удовлетворяет требованиям чистоты препарата для инъекционных форм. Выход тилозина-основания от 90% до количественного.

Пример 1

В раствор 3,5 кг (3,53 моль) тартрата тилозина в 30 л дист. воды в течение 20 мин при перемешивании добавляли 1 М водный KOH до pH в реакционной смеси 8,8. Реакцию вели при 20^oC. Выпавший осадок тилозина-основания отфильтровывали, промывали дист. водой (3х5 л), затем растворяли в 10 л пропиленгликоля. Выход тилозина-основания 97%.

Пример 2

В раствор 35 г (0,037 моль) фосфата тилозина в 30 мл дист. воды в течение 20 мин при перемешивании добавляли 1 М водный KOH до pH в реакционной смеси 8,8. Реакцию вели при 20^oC. Выпавший осадок тилозина-основания отфильтровывали, промывали дист. водой (3х5 мл), затем растворяли в 10 мл пропиленгликоля. Выход тилозина-основания 95%.

Пример 3

В раствор 3,5 кг (3,53 моль) тартрата тилозина в 30 л дист. воды в течение 10 ч при перемешивании добавляли 1 М водный NaOH до pH в реакционной смеси 8,6. Реакцию вели при 20^oC. Выпавший осадок тилозина-основания отфильтровывали, промывали дист. водой (3х5 л), затем растворяли в 10 л пропиленгликоля. Выход тилозина-основания 93%.

Пример 4

В раствор 3,5 кг (3,53 моль) тартрата тилозина в 30 л дист. воды в течение 20 мин при перемешивании добавляли 1 М водный KOH до pH в реакционной смеси 8,6. Реакцию вели при 50^oC. Выпавший осадок тилозина-основания отфильтровывали, промывали дист. водой (3х5 л), затем растворяли в 10 л пропиленгликоля. Выход тилозина-основания 92%.

Пример 5

В 20 л дист. воды при перемешивании добавляли одновременно 1 М водный раствор NaOH и раствор 3,5 кг (3,53 моль) тартрата тилозина в 6 л дист. воды. Добавление реагентов вели с такой скоростью, чтобы pH реакционной смеси был 7,50,05, а время реакции 40 мин. После добавления всего количества раствора тартрата тилозина pH довели до 8,8. Реакцию проводили при температуре 20^oC. Выпавший осадок тилозина-основания отфильтровывали, промывали дист. водой (3х5 л), затем растворяли в 10 л пропиленгликоля. Выход тилозина-основания 92%.

Пример 6

В 20 л дист. воды при перемешивании добавляли одновременно 3 М водный раствор KOH и раствор 3,5 кг (3,53 моль) тартрата тилозина в 6 л дист. воды. Добавление реагентов вели с такой скоростью, чтобы pH реакционной смеси был 8,80,05, а время реакции 40 мин. После добавления всего количества раствора тартрата тилозина pH довели до 8,8. Реакцию проводили при температуре 20^oC. Выпавший осадок тилозина-основания отфильтровывали, промывали дист. водой (3х5 л), затем растворяли в 10 л пропиленгликоля. Выход тилозина-основания 98%.

Пример 7

В 20 мл дист. воды при перемешивании добавляли одновременно 1 М водный раствор KOH и раствор (0,037 моль) фосфата тилозина в 6 л дист. воды. Добавление реагентов вели с такой скоростью, чтобы pH реакционной смеси был 8,3 0,05, а время реакции 2 ч. После добавления всего количества раствора фосфата тилозина pH довели до 8,8. Реакцию проводили при температуре 20^oC. Выпавший осадок тилозина-основания отфильтровывали, промывали дист. водой (3х5 мл), затем растворяли в 10 мл пропиленгликоля. Выход тилозина-основания 95%.

Пример 8

В раствор 35 г (0,0353 моль) тартрата тилозина в 0,30 л дист. воды в течение 20 мин при перемешивании добавляли 5 М водный метиламин до pH в реакционной смеси 8,8. Реакцию вели при 20^oC. Выпавший осадок тилозина-основания отфильтровывали, промывали дист. водой (3х5 л), затем растворяли в 0,10 л пропиленгликоля. Выход тилозина-основания 92%.