способ прогнозирования неблагоприятного течения гнойно- воспалительного заболевания микробной этиологии

Формула изобретения

Способ прогнозирования неблагоприятного течения гнойно-воспалительного заболевания микробной этиологии, включающий взятие патологического материала, выделение чистых культур возбудителей, их идентификацию и определение у выделенных возбудителей способности к инактивации факторов естественной противоинфекционной резистентности, отличающийся тем, что после выделения чистых культур возбудителей определяют количество их видов и, в случае выявления двух и более видов, определяют у выделенных чистых культур возбудителей антилизоцимную активность и способность к инактивации бактериальной активности сыворотки крови (АЛА и СИБАС соответственно) и при уровне выраженности этих признаков хотя бы у одного из возбудителей для энтеробактерий АЛА больше или равной 5 мкг/мл, для стафилококков АЛА больше или равной 3 мкг/мл, для стрептококков и псевдоманад АЛА больше или равной 1 мкг/мл и для всех видов возбудителей СИБАС менее 60% прогнозируют длительное течение гнойно-воспалительного заболевания без возникновения гнойно-септических осложнений, при выявлении хотя бы у одного из возбудителей СИБАС больше или равной 60% прогнозируют длительное заболевание с возникновением гнойно-септических осложнений, требующих повторного оперативного вмешательства, а при уровне антилизоцимной активности для энтеробактерий менее 5 мкг/мл, для стафилококков менее 3 мкг/мл, для стрептококков и псевдоманад - менее 1 мкг/мл и при выявлении хотя бы у одного из возбудителей СИБАС больше или равной 60% прогнозируют непродолжительное течение заболевания с возникновением гнойно-септических осложнений, требующих повторного оперативного вмешательства.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к медицине, а именно к медицинской микробиологии, и может быть использовано для прогнозирования течения гнойно-воспалительных заболеваний микробной этиологии, в частности вызванных условно-патогенными микроорганизмами (стафилококками, стрептококками, энтеробактериями, псевдомонадами).

Гнойно-воспалительные заболевания являются одной из актуальных проблем современной хирургии, больные с данной патологией составляют до 1/3 всех хирургических больных (1, 2). Спектр возбудителей хирургической инфекции характеризуется большим разнообразием: помимо традиционно известных возбудителей гнойно-воспалительных заболеваний стафилококков и стрептококков, все большее этиологическое значение приобретает грамотрицательная микрофлора - энтеробактерии и псевдомонады (1, 2, 3, 4). Другой особенностью, характеризующей этиологический аспект гнойно-воспалительных хирургических заболеваний, является все более частое выделение ассоциаций бактериальных патогенов из очагов хирургической инфекции, что сопровождается более тяжелым течением заболевания (1, 3).

Традиционный подход к решению проблемы прогнозирования характера течения гнойно-воспалительного заболевания микробной этиологии связан с изучением комплекса факторов естественной противоинфекционной резистентности макроорганизма, снижение уровня которых рассматривается как одна из причин неблагоприятного течения инфекционного процесса (5, 6).

В настоящее время для прогнозирования неблагоприятного течения гнойно-воспалительных заболеваний стафилококковой и энтеробактериальной этиологии используется подход, основанный на изучении у возбудителей способности к инактивации ряда факторов естественной противоинфекционной резистентности (7).

Известен способ прогнозирования неблагоприятного течения гнойно-воспалительного заболевания, вызванного культурами Staphylococcus aureus или Escherichia coli, включающий определение у возбудителя антикомплементарной активности и прогнозирование течения гнойно-воспалительного заболевания, вызванного выделенными возбудителями, по уровню выраженности данного признака (8).

Однако данный способ основан на определении у возбудителя способности только одного из факторов естественной противоинфекционной резистентности - антикомплементарной активности, что не позволяет оценить персистентный потенциал микроорганизма в целом и, следовательно, вызывает необходимость проведения в этом случае дополнительных исследований.

Известны способы прогнозирования течения гнойно-воспалительного заболевания микробной этиологии, основанные на изучении у возбудителя способности к инактивации одного из факторов естественной противоинфекционной резистентности (лизоцима) - антилизоцимной активности (9, 10).

Однако данные способы основаны также на определении у возбудителя способности к инактивации только одного фактора естественной резистентности, что не позволяет достаточно полно оценить способность патогена к длительной персистенции в организме больного, подвергающегося воздействию комплекса различных факторов противоинфекционной резистентности, суммарный антимикробный эффект которых может изменяться при различных вариантах взаимодействия последних (11).

Также к недостаткам вышеуказанных способов прогнозирования неблагоприятного течения гнойно-воспалительного заболевания микробной этиологии следует отнести невозможность прогнозирования гнойно-воспалительных заболеваний стрептококковой и псевдомонадной этиологии, а также трудности в прогнозировании заболеваний, вызванных ассоциациями микроорганизмов, поскольку результатом симбионтных взаимоотношений между последними может быть усиление патогенного и персистентного потенциала (1, 3).

Наиболее близким к заявляемому способу по назначению и совокупности существенных признаков является способ прогнозирования неблагоприятного течения гнойно-воспалительного заболевания микробной этиологии, вызванного в частности Staphylococcus aureus, включающий забор пробы патологического материала (возбудителя воспалительного процесса изолируют из гнойного отделяемого, полученного при вскрытии постинъекционного абсцесса), выделение чистой культуры, ее идентификацию и определение ее способности к инактивации факторов естественной противоинфекционной резистентности. Анализ наличия и выраженности способности возбудителя к инактивации отдельных факторов естественной противоинфекционной резистентности позволяет идентифицировать случаи постинъекционных абсцессов с вероятным прогнозом их неблагоприятного течения (13).

Однако известный способ имеет ряд недостатков. Так, например, он позволяет прогнозировать неблагоприятное течение постинъекционных абсцессов только стафилококковой этиологии, что сужает область применения способа, так как возможны многочисленные случаи гнойно- воспалительных заболеваний, этиологическими агентами которых являются коагулазонегативные стафилококки, стрептококки, энтеробактерии, псевдомонады, а также ассоциации микроорганизмов. К недостаткам данного способа можно отнести и то, что он больше подходит для научно-исследовательских целей, тогда как его применение в клинической практике затруднено из-за сложности математических расчетов и построения модели прогноза течения заболевания, основанной на вероятностно-статистических причинах.

Также способ не позволяет прогнозировать возникновение в ходе гнойно-воспалительного заболевания гнойно-септических осложнений, требующих повторного оперативного вмешательства.

Заявляемый способ решает задачу повышения эффективности прогнозирования неблагоприятного течения гнойно-воспалительного заболевания микробной этиологии и расширения области применения.

Для решения указанной задачи в заявляемом способе прогнозирования неблагоприятного течения гнойно-воспалительного заболевания микробной этиологии проводят взятие пробы патологического материала, выделяют чистые культуры возбудителей, идентифицируют их до вида, определяют количество видов и, в случае выделения двух и более видов, определяют у выделенных чистых культур возбудителей антилизоцимную активность и способность к инактивации бактерицидной активности сыворотки крови (АЛА и СИБАС соответственно) и при уровне выраженности этих признаков хотя бы у одного из возбудителей для энтеробактерий АЛА5 мкг/мл, для стафилококков АЛА3 мкг/мл, для стрептококков и псевдомонад АЛА1 мкг/мл и для всех видов возбудителей СИБАС менее 60% прогнозируют длительное течение гнойно-воспалительного заболевания без возникновения гнойно-септических осложнений, а при выявлении хотя бы у одного из возбудителей СИБАС60% прогнозируют длительное течение гнойно-воспалительного заболевания с возникновением гнойно-септических осложнений, требующих повторного оперативного вмешательства. При уровне же антилизоцимной активности для энтеробактерий менее 5 мкг/мл, для стафилококков менее 3 мкг/мл, для стрептококков и псевдомонад менее 1 мкг/мл и при выявлении хотя бы у одного из возбудителей СИБАС60% прогнозируют непродолжительное течение гнойно-воспалительного заболевания с возникновением гнойно-септических осложнений, требующих повторного оперативного вмешательства.

Новым в заявляемом способе является то, что после выделения чистых культур возбудителей определяют количество их видов и, в случае выделения двух и более видов, определяют у выделенных чистых культур возбудителей антилизоцимную активность и способность к инактивации бактерицидной активности сыворотки крови (АЛА и СИБАС соответственно) и при уровне выраженности этих признаков хотя бы у одного из возбудителей для энтеробактерий АЛА5 мкг/мл, для стафилококков АЛА3 мкг/мл, для стрептококков и псевдомонад АЛА1 мкг/мл и для всех видов возбудителей СИБАС менее 60% прогнозируют длительное течение гнойно-воспалительного заболевания без возникновения гнойно-септических осложнений, а при выявлении хотя бы у одного из возбудителей СИБАС60% прогнозируют длительное течение гнойно-воспалительного заболевания с возникновением гнойно-септических осложнений, требующих повторного оперативного вмешательства. При уровне же антилизоцимной активности для энтеробактерий менее 5 мкг/мл, для стафилококков - менее 3 мкг/мл, для стрептококков и псевдомонад - менее 1 мкг/мл и при выявлении хотя бы у одного из возбудителей СИБАС60% прогнозируют непродолжительное течение гнойно-воспалительного заболевания с возникновением гнойно-септических осложнений, требующих повторного оперативного вмешательства.

Достигаемый при осуществлении изобретения технический результат состоит в том, что заявляемый способ позволяет повысить эффективность прогнозирования неблагоприятного течения гнойно-воспалительного заболевания микробной этиологии за счет возможности прогнозирования гнойно-септических осложнений, требующих повторного оперативного вмешательства, а следовательно, подобрать оптимальные схемы лечения, сокращающие сроки пребывания больного в стационаре. Также преимуществом заявляемого способа перед известными аналогами является то, что способ может быть применим для прогнозирования течения гнойно-воспалительного заболевания микробной этиологии, возбудителями которого являются стрептококки, псевдомонады, а также ассоциации микроорганизмов, что в последние годы все чаще наблюдается в хирургической практике и сопровождается более тяжелым течением заболевания.

Проведенные авторами теоретические и экспериментальные исследования позволили установить корреляционную зависимость между наиболее значимыми бактериологическими показателями, длительностью течения и частотой осложнений при гнойно-воспалительном заболевании. Результаты проведенных исследований представлены в табл. 1.

Как видно из табл. 1, высоко информативными оказались такие бактериологические показатели, как: коэффициент видового разнообразия Симпсона, антилизоцимная активность возбудителя, а также его способность к инактивации БАС.

Известно, что коэффициент видового разнообразия Симпсона отражает видовое богатство ассоциаций возбудителей (18).

Из научно-технических и патентных источников известно применение антилизоцимной активности стафилококков и энтеробактерий для прогнозирования неблагоприятного течения постинъекционных абсцессов и холецистита (10, 14).

Также известно, что одним из важнейших факторов, определяющих состояние неспецифического противоинфекционного иммунитета, является бактерицидная активность сыворотки (БАС) крови, антимикробный эффект которой связан с действием различных взаимодействующих между собой составляющих: лизоцима, системы белков комплемента, иммуноглобулинов, катионных пептидов различной природы и др. (11, 12). Уровень данных факторов в сыворотке крови характеризует степень ее бактерицидности, что позволяет оценивать БАС как интегральный показатель, отражающий состояние естественной противоинфекционной резистентности организма (15).

Авторами установлено, что условно-патогенные микроорганизмы, являющиеся возбудителями гнойно-воспалительных заболеваний, обладают способностью инактивировать бактерицидную активность сыворотки крови (16).

Авторами установлена информативность совместного определения коэффициента видового разнообразия Симпсона, антилизоцимной активности возбудителей и их способности к инактивации БАС для прогнозирования неблагоприятного течения гнойно-воспалительного заболевания.

Для этого было обследовано 106 больных с гнойно-септической инфекцией мягких тканей (абсцессы, флегмоны) различной локализации, из которых у 52 отмечалось обычное (со сроками госпитализации до 18 дней) и 54 больных - длительное (более 18 суток) течение заболевания; при этом у 17 больных в течение заболевания отмечалось развитие гнойно-воспалительных осложнений, потребовавших повторного оперативного вмешательства, у остальных больных течение заболевания протекало без осложнений и было расценено в этом плане как благоприятное. У всех больных из гнойного отделяемого выделяли чистую культуру возбудителя, определяли количество различных видов микроорганизмов, изолированных от одного больного. Микроорганизмы идентифицировали до вида с использованием биохимических тестов фирмы "Lachema" (Чехия). Выделено 129 штаммов стафилококков, 48 штаммов стрептококков, 106 штаммов энтеробактерий и 19 штаммов псевдомонад. У всех штаммов изучали наличие и выраженность антилизоцимной активности и способности к инактивации БАС. Антилизоцимную активность и способность микроорганизмов к инактивации БАС определяли по известным методикам (16, 17).

Изучение видового разнообразия бактериальных патогенов, изолированных от больных с различным течением гнойно-воспалительного заболевания, позволило выявить следующие особенности. Микробный пейзаж очагов хирургической инфекции при осложненном течении заболевания характеризовался частым выделением ассоциаций, состоящих из двух и более различных видов возбудителей (табл. 2).

В случаях длительного течения заболевания также чаще выявлялись ассоциации возбудителей, в отличие от случаев заболевания, длительность которых составила менее 18 суток (средний срок продолжительности заболевания среди всех обследованных больных) и при которых возбудители преимущественно выделялись в монофлоре (табл. 3).

Сравнительный анализ уровня АЛА возбудителей, выделенных от больных с различной длительностью течения гнойно-воспалительного заболевания, показал, что при длительном течении из очагов хирургической инфекции преимущественно выделялись стрептококки и псевдомонады, обладающие антилизоцимной активностью 1 мкг/мл и более, а также стафилококки и энтеробактерии, антилизоцимная активность которых была не менее 3 мкг/мл и 5 мкг/мл соответственно (табл. 4).

Анализ полученных данных показал взаимосвязь частоты возникновения гнойно-септических осложнений, требующих повторного оперативного вмешательства, с выраженностью способности возбудителей к инактивации БАС.

Приведенные в табл. 5 результаты свидетельствуют о высоком уровне способности к инактивации БАС возбудителей, выделенных от больных с неблагоприятным течением (возникновением гнойно-септических осложнений, потребовавших повторного оперативного вмешательства) гнойно-воспалительного заболевания. Штаммы стафилококков со значением указанного признака 60% и выше встречались в 21 раз чаще при неблагоприятном течении заболевания, чем при благоприятном. Штаммы энтеробактерий с величиной признака 60% и выше были выделены исключительно от больных с неблагоприятным течением хирургической инфекции. Псевдомонады и стрептококки с аналогичным уровнем способности к инактивации БАС были изолированы преимущественно от больных с осложненным течением заболевания.

Таким образом, установленные различия определяют возможность получения правильного результата прогнозирования неблагоприятного течения (возникновения гнойно-септических осложнений, требующих повторного оперативного вмешательства) гнойно-воспалительного заболевания с вероятностью ошибки 12% в случае обнаружения у возбудителя способности к инактивации БАС 60% и выше. Изменение прогностического порога показателя выше или ниже указанной величины нецелесообразно ввиду увеличения при этом ошибки прогнозирования (табл. 5).

Полученные в ходе проведенных исследований данные позволили подойти к использованию в прогнозировании неблагоприятного течения гнойно-воспалительного заболевания выраженности биологических свойств возбудителей: их антилизоцимной активности и способности к инактивации БАС, а также видового разнообразия ассоциаций бактериальных патогенов. Проведение сравнительного анализа количества возбудителей, их антилизоцимной активности и способности к инактивации БАС, выделенных от 106 больных с различным характером течения гнойно-воспалительного заболевания (табл. 6), позволило выявить следующие закономерности. При неосложненном, длительном течении заболевания микробный пейзаж очагов хирургической инфекции характеризовался преимущественно присутствием ассоциаций бактериальных патогенов (количество возбудителей 2 и более) с наличием хотя бы у одного из возбудителей АЛА, равной или превышающей соответствующий диагностический порог, приведенный в табл. 4 (для энтеробактерий АЛА5 мкг/мл, для стафилококков АЛА3 мкг/мл, для стрептококков и псевдомонад АЛА1 мкг/мл). Микробный пейзаж очагов хирургической инфекции при осложненном, непродолжительном течении заболевания характеризовался преимущественно присутствием ассоциаций бактериальных патогенов (количество возбудителей 2 и более) с наличием хотя бы у одного из возбудителей СИБАС 60% и выше, а также значениями АЛА для стафилококков ниже 3 мкг/мл, стрептококков ниже 1 мкг/мл, энтеробактерий ниже 5 мкг/мл, псевдомонад ниже 1 мкг/мл. Осложненное, длительное течение заболевания характеризовалось исключительно присутствием в очаге хирургической инфекции ассоциаций возбудителей (количество бактериальных патогенов 2 и более) с наличием хотя бы у одного из них СИБАС 60% и выше, а также с наличием хотя бы у одного из возбудителей АЛА для энтеробактерий 5 мкг/мл и выше, для стафилококков 3 мкг/мл и выше, для стрептококков и псевдомонад 1 мкг/мл и выше.

Таким образом, обнаружение у выделенных в ассоциациях возбудителей комплекса антилизоцимной активности и способности к инактивации БАС с указанными выше количественными характеристиками позволяет получить правильный результат прогнозирования неблагоприятного течения гнойно-воспалительного заболевания, подобрать оптимальные схемы лечения, сокращающие сроки пребывания больного в стационаре.

Способ осуществляется следующим образом.

1. Проводят взятие пробы патологического материала и выделяют чистые культуры возбудителей, которые идентифицируют до вида по общепринятым методикам (19).

2. В случае выделения из исследуемого материала двух и более видов микроорганизмов, определяют у выделенных чистых культур возбудителей антилизоцимную активность и способность к инактивации бактерицидной активности сыворотки крови (АЛА и СИБАС соответственно) по известным методикам (16, 17).

3. При уровне выраженности АЛА хотя бы у одного из возбудителей: для энтеробактерий 5 мкг/мл и более, для стафилококков - 3 мкг/мл и более, для стрептококков и псевдомонад - 1 мкг/мл и более, и для всех видов возбудителей СИБАС менее 60% прогнозируют длительное течение гнойно-воспалительного заболевания без возникновения гнойно-септических осложнений, а при выявлении хотя бы у одного из возбудителей СИБАС на уровне 60% и более прогнозируют длительное течение гнойно-воспалительного заболевания с возникновением гнойно-септических осложнений, требующих повторного оперативного вмешательства; а при уровне антилизоцимной активности для энтеробактерий менее 5 мкг/мл, для стафилококков - менее 3 мкг/мл, для стрептококков и псевдомонад - менее 1 мкг/мл и при выявлении хотя бы у одного из возбудителей СИБАС на уровне 60% и более прогнозируют непродолжительное течение заболевания с возникновением гнойно-септических осложнений, требующих повторного оперативного вмешательства.

Примеры конкретного выполнения.

Пример 1. Больная Л. была госпитализирована с диагнозом "флегмона тыльной поверхности левой стопы". Из полученного во время операции патологического материала были выделены и идентифицированы с использованием биохимических тестов "Lachema" (Чехия) два вида возбудителей - Staphylococcus epidermidis и Providencia stuartii. На следующем этапе работы у выделенных культур возбудителей были определены антилизоцимная активность и способность к инактивации БАС, составившие: у Staphylococcus epidermidis АЛА=1 мкг/мл и СИБАС= 34% и у Providencia stuartii АЛА=8 мкг/мл и СИБАС=52%. Наличие у выделенной в ассоциации с эпидермальным стафилококком P. stuartii АЛА выше установленного порога в заявляемом способе, позволило сделать прогноз о длительном течении гнойно-воспалительного заболевания без возникновения гнойно-септических осложнений.

Дальнейшее течение заболевания подтвердило правильность прогностического заключения, сделанного с использованием заявляемого способа. Течение флегмоны у больной Л. характеризовалось длительным сохранением гнойного отделяемого из очага хирургической инфекции в течение 24 суток. Гнойно-септических осложнений в ходе заболевания не было.

Пример 2. У больного В. с диагнозом "постинъекционный абсцесс правого бедра" из полученного во время операции патологического материала были выделены Staphylococcus aureus, обладающий АЛА=1 мкг/мл и СИБАС=78%, и Klebsiella pneumoniae, АЛА которой составила 4 мкг/мл и СИБАС=52%. На основании полученных данных был сделан прогноз о непродолжительном течении гнойно-воспалительного заболевания с возникновением гнойно-септического осложнения. Прогноз был подтвержден в ходе проведенного лечения: на шестые сутки после операции был диагностирован гнойный затек, распространяющийся дистальнее первичного очага хирургической инфекции, что потребовало повторного оперативного вмешательства. Больной был выписан в удовлетворительном состоянии на 15-е сутки с момента первой операции.

Пример 3. Бактериологическое исследование патологического материала, полученного во время операции у больного Н. с диагнозом "комиссуральная флегмона правой кисти" осуществлялось согласно примеру 1. Из очага хирургической инфекции были выделены Enterococcus faecalis, обладающий СИБАС=37% и АЛА= 0 мкг/мл, Escherichia coli, обладающая АЛА=8 мкг/мл и СИБАС=45%, и Proteus mirabilis, обладающий АЛА=5 мкг/мл и СИБАС=68%. На основании полученных данных был сделан прогноз о длительном течении заболевания с возникновением в ходе последнего гнойно-септического осложнения. Дальнейшее течение заболевания подтвердило правильность сделанного прогноза. На 5 сутки с момента операции у больного был диагностирован гнойный затек в проксимальном направлении от первичного очага хирургической инфекции в области тыльной поверхности правой кисти и нижней трети правого предплечья, что потребовало повторного оперативного вмешательства. Гнойное отделяемое из раны сохранялось в течение 28 суток с момента первой операции.

Таким образом, предлагаемый способ прогнозирования неблагоприятного течения гнойно-воспалительного заболевания микробной этиологии позволяет своевременно выявлять больных с потенциально неблагоприятным течением гнойно-воспалительных заболеваний микробной этиологии и подобрать оптимальные схемы лечения, сокращающие сроки пребывания больного в стационаре. Предложенный способ прогнозирования неблагоприятного течения гнойно-воспалительного заболевания микробной этиологии был испытан в отделении гнойно-септической хирургии Первой городской муниципальной клинической больницы скорой помощи города Оренбурга. Эффективность прогнозирования, проведенного в соответствии с заявляемым способом, составила 90,6%.

Список литературы

1. Кузин М.И., Костюченок Б.М., Карпов В.А. Раны и раневая инфекция. М.: Медицина. 1981. - 688 с.

2. Стручков В.И., Гостищев В.К., Стручков Ю.В. Хирургическая инфекция. - М., 1991. - 560 с.

3. Бухарин О. В., Фадеев С.Б., Исайчев Б.А. Динамика видового состава, антилизоцимной активности и антибиотикорезистентности возбудителей хирургической инфекции мягких тканей.// Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. - 1997. - N 4. - С. 51-54.

4. Finland M. , Barner M. Changing etiology of bacterial infections. - Antibiot. Chemother., - 1976. - N 21. - P. 170 - 175.

5. Новокрещенов Л. Б. , Андрушенко О.Н., Эберт Л.Я. Иммунологические исследования в диагностике хирургического сепсиса и гнойно-резорбтивной лихорадки.// Хирургия. - 1984. - N 7. - С. 92 - 95.

6. Кочнев О. С., Измайлов С.Г., Федоров Р.В. Определение антимикробной активности раневого отделяемого для оценки заживления раны. // Хирургия. - 1993. - N 11. -С.19 - 23.

7. Бухарин О.В., Усвяцов Б.Я.. Бактерионосительство (методико-экологический аспект). Екатеринбург: УрО РАН, 1996. - 207 с.

8. Патент РФ по заявке N 95102027, п.р. от 20.01.97, МПК⁶ G 01 N 33/543.

9. Желтова В.И., Шульга И.А., Сафронов А.А. Антилизоцимная активность и биологические свойства стафилококков при гнойно-септических заболеваниях.// Персистенция микроорганизмов./ Под ред. О.В. Бухарина. - Куйбышев, 1987. -С. 19 - 22.

10. Зак В.И., Швецов С.А. Роль антилизоцимной активности возбудителя в патогенезе холецистита.// Персистенция бактерий./ Под ред. О.В. Бухарина. - Куйбышев, 1990. - С.61 - 65.

11. Grazyna M.-L., Kryspina G.-H., Jankowski S. Sensitivity of Shigella strains to bacterial activity of human serum. 1. Participation of two independently active mechanism in bactericidial action against Shigella sonnei phase 2.//Acta Microbiol. Pol.-1990.-N 3-4.-P.111 - 120.

12. Бухарин О.В., Брудастов Ю.А., Гриценко В.А., Дерябин Д.Г.. Роль способности бактерий к инактивации факторов естественной противоинфекционной резистентности в их устойчивости к бактерицидному действию крови (сыворотки крови). // Бюл. эксперим. биол. и мед. - 1996. - N 2. - С.174 - 176.

13. Дерябин Д.Г., Курлаев П.П., Брудастов Ю.А. Роль персистентных характеристик в определении затяжного течения гнойно-воспалительного процесса.// Журн. микробиол. , эпидемиол. и иммунобиол. - 1996. - N 3. - С. 74 - 77. (Прототип)

14. Курлаев П.П., Дерябин Д.Г., Брудастов Ю.А., Бухарин О.В.. Связь длительность течения постинъекционных абсцессов с биологическими особенностями вызывающих их микроорганизмов.// Вест. хир. - 1996. - N 6. - С. 54 - 56.

15. Бухарин О.В., Созыкин В.П. Фотонефелометрический метод определения бактерицидной активности сыворотки крови.// Факторы естественного иммунитета. - Оренбург, 1979. - С. 43 - 45.

16. Фадеев С.Б., Черкасов С.В., Иванов Ю.Б., Райцелис И.В., Чернова О.Л. Метод определения способности микроорганизмов к подавлению бактерицидной активности сыворотки.// Вертикаль: вест. мол. науки Урала. - Т.2, N 2. - С. 61 - 66.

17. Бухарин О.В., Усвяцов Б.Я., Малышкин А.П., Немцева Н.В.. Метод определения антилизоцимной активности микроорганизмов.// Журн. микробиол. эпидемиол. и иммунобиол. - 1984. - N 2. - С. 27 - 28.

18. Бигон М., Харпер Дж., Таунсенд К.. Экология. Особи, популяции и сообщества: Пер. с анг. - М., 1989. - Т.2. - С. 118 - 121.

19. Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования./ Биргер М.О. - М., 1982. - 464 с.