препарат "теотропин" для дезинфекции объектов санитарного надзора
Классы МПК: | A61L2/16 с использованием химических веществ A61L2/18 жидких веществ |
Автор(ы): | Зубаиров М.М., Миколайчук С.В., Рудобельский Э.В., Лагуткин Н.А., Киселев А.В., Вишняков И.Ф., Власов Н.А., Селиверстов В.В., Гаврилов В.А., Котляров В.М., Кузнецов А.И., Коломыцев А.А., Срибный Н.И., Коржевенко Г.Н., Числов Ю.В., Стрижаков А.А., Бузун А.И., Мосин В.М. |
Патентообладатель(и): | Всероссийский научно-исследовательский институт ветеринарной вирусологии и микробиологии |
Приоритеты: |
подача заявки:
1997-03-20 публикация патента:
20.12.1998 |
Изобретение относится и области ветеринарии и медицины и касается разработки технологичного и экологически безопасного дезинфектанта - теотропина (C8H16N4) и его применения для обеззараживания от патогенных вирусов и бактерий помещений, оборудования, инвентаря, посуды, инструментов, приборов и пр. объектов санитарного надзора. Сущность изобретения заключается в том, что для дезинфекции (обеззараживания) используют препарат Теотропин, обладающий вирулицидным и бактерицидным действием, имеющий низкий уровень токсичности и химической агрессивности. Дезинфекцию проводят 0,1 - 5%-ными водными растворами препарата методом орошения или аэрозольно. Теотропин не оказывает токсического действия на животных и птиц, синтезируется из производимого в стране сырья и сохраняет дезинфицирующие свойства в водных растворах не менее 120 сут. 4 табл.
Рисунок 1, Рисунок 2
Формула изобретения
Соединение тетраметилендиэтилентетрамин структурной формулыобладающее вирулицидным и бактерицидным действием для дезинфекции объектов санитарного надзора.
Описание изобретения к патенту
Изобретение относится к области ветеринарии и медицины и касается разработки препарата для дезинфекции (обеззараживания) от патогенных вирусов и бактерий помещений, оборудования, инвентаря, посуды, инструментов, приборов растворами экологически и коррозийно-безопасного препарата - теотропина и может быть использовано на животноводческих фермах, производственных, технологических и складских объектах, в научно-исследовательских и лечебных учреждениях, предприятиях биологической и пищевой промышленности. Дезинфекция может проводиться путем орошения или аэрозольным методом, в том числе и в присутствии животных. Известно, что для дезинфекции методом орошения применяют различные дезинфицирующие средства, в том числе: 10-20%-ную взвесь свежегашеной извести, 5%-ный горячий раствор кальцинированной соды, 3%-ную горячую эмульсию дезинфекционного креолина, 2%-ную горячую эмульсию ксилонафта, 5%-ную эмульсию нафтализола, 3%-ный горячий раствор каустифицированной содопоташной смеси, 1%-ный раствор формальдегида, 2%-ный раствор едкого натра, раствор хлорной извести, содержащий 2% активного хлора, 5%-ный раствор хлорамина и др., из расчета 1 - 2 л на 1 м2 обеззараживаемой поверхности в зависимости от ее плотности. Горячие растворы должны иметь температуру не ниже 70oC, а растворы кальцинированной соды не ниже 90oC. Если дезинфекцию проводят аэрозольным методом, то применяют: 6%-ный раствор перекиси водорода, формалин-креалиновую смесь или формалин (36 - 40%-ный водный раствор формальдегида) (Ветеринарное законодательство. -М.: Колос, 1973). Однако известно, что во многих используемых в настоящее время дезинфектантах действующим началом являются агрессивные ядовитые газы, такие как хлор, формальдегид, атомарный кислород и др., которые могут создавать взрывоопасные смеси, приводить к внештатным ситуациям и отравлениям животных и людей. Это делает опасным и практически невозможным проведение дезинфекции в присутствии животных. Растворы таких дезинфектантов являются электролитами, вызывающими коррозию металлических поверхностей, агрегатов, их деталей и узлов. Агрессивные газы, выделяющиеся при дезинфекции, вызывают обесцвечивание пигментов и изменения в структуре органических полимеров, обуславливая порчу объектов, имеющих защитные или изоляционные покрытия из лакокрасочных и полимерных органических соединений. Предлагаемый препарат устраняет перечисленные недостатки. Среди описанных в отечественной и зарубежной литературе, а также указанных в "Ветеринарном законодательстве" дезинфектантов не удалось найти даже близкого по химической структуре аналога-прототипа. Задача - разработать экологически безопасный дезинфектант, обладающий бактерицидным и вирулицидным действием, и способ его применения для дезинфекции животноводческих, лечебных, технологических и складских помещений и объектов. Сущность предлагаемого способа заключается в том, что для дезинфекции применяют растворы теотропина, для которого в применяемых концентрациях, характерно: отсутствие токсичности для людей и животных, отсутствие неприятного запаха и раздражающего действия на кожные покровы и слизистые оболочки, отсутствие коррозийного действия на металлы и агрессивного действия на лакокрасочные и синтетические полимерные материалы и покрытия, высокая растворимость в воде и устойчивость водных растворов в широком диапазоне температур, выраженное бактерицидное и вирулицидное действие в диапазоне температур от +4 до +40oC, возможность проведения дезинфекции в присутствии животных и птиц. Указанным требованиям отвечают водные растворы теотропина. Препарат Теотропин впервые синтезирован в Московском институте тонкой химической технологии доктором химических наук Кузнецовым А.И., являющимся соавтором предлагаемого изобретения. Синтез теотропина проводится по следующей схемеВзаимодействием этилендиамина с формальдегидом в водной среде при температуре 10-12oC получен тетраметилендиэтилентетрамин (теотропин). Строение полученного соединения подтверждено данными элементного анализа, ЯМР1H и N14, ход реакции контролировался по ТСХ. В круглодонную колбу емкостью 1000 мл помещают 120,0 г (1 моль) этилендиамина и 324 мл формалина (4 моля формальдегида, 120 г), реакцию охлаждают до температуры 10-12oC, выдерживают при этой температуре 4 ч, добавляют КОН или NaOH, осадок отфильтровывают и кристаллизуют. Получают 168 г (70%) тетраметилендиэтилентетрамина (теотропина). Найдено, %: C - 57,0; H - 9,5; N - 33,2. Вычислено, %: C - 57,1; H - 9,5: N - 33,3. Температура плавления 196-201oC. Препарат Теотропин структурной формулы
Химическое название - тетраметилендиэтилентетрамин;
- 1,8,3,6-диэндометилен-1,3,6,8-тетраазациклодекан;
- 1,3,6,8-тетраазатрицикло/4.4.1.1.3.8./додекан. Эмпирическая формула - C8H16N4. Молекулярная масса - 168. Физическое состояние - кристаллы белого и желтоватого цвета, хорошо растворимые в воде. Эффективность предлагаемого способа обоснована экспериментально в лабораторных условиях и подтверждена производственными испытаниями. Вирулицидное действие теотропина изучали с ДНК- и РНК-содержащими вирусами-возбудителями: африканской чумы свиней (АЧС), классической чумы свиней (КЧС), болезни Ауески (БА), ящура, везикулярной экзантемы свиней (ВЭС), везикулярной болезни свиней (ВБС), катаральной лихорадки овец (КЛО), болезни Тешена (БТ), гриппа птиц (ГП) и болезни Ньюкасла (БН), руководствуясь "Методическими указаниями по отбору, испытаниям и оценке антивирусных химиопрепаратов", М., 1984. Вирулицидное действие определяли по снижению титра вируса в опытных образцах относительно контроля после 18-20 ч контакта опытного образца с раствором теотропина и выражали в lg ГАЕ50 (гемадсорбирующих единиц), lg ТЦД50 (тканевых цитопатических доз), lg БОЕ50 (бляшкообразующих единиц), lg ЭЛД50(эмбриональных летальных доз). В табл. 1 приведены результаты определения инактивирующего действия теотропина на ряд ДНК - и РНК-содержащих вирусов, возбудителей болезней животных. Из данных, представленных в табл. 1, видно, что теотропин в концентрации 0,1% (1000 мкг/мл) за 18-20 ч экспозиции при 37oC полностью инактивировал образцы как ДНК-содержащих, так и РНК-содержащих вирусов, возбудителей особоопасных болезней животных и птиц. Антибактериальную активность теотропина изучали с возбудителями сибирской язвы в споровой и вегетативной формах, колибактериоза, микоплазмоза и листериоза согласно "Методическим указаниям по определению чувствительности к антибиотикам возбудителей инфекционных болезней с/х животных", М., 1972. Минимальную бактерицидную концентрацию (МБК) определяли по результатам сравнительного титрования контрольных и опытных (экспонированных с теотропином) проб бактерий методом серийных разведений в мясопептонном бульоне (МПБ) с последующим высевом на мясопептонный агар (МПА). В табл. 2 представлены результаты этих исследований. Из данных табл.2 видно, что теотропин в концентрации 0,65% (6,5 мг/мл) за 24 ч инактивирует споровые формы возбудителя сибирской язвы, а в концентрации 0,06% (0,6 мг/мл) - возбудителей колибактериоза, микоплазмоза и листериоза. Дезинфицирующее действие теотропина было проверено на тест-объектах, имитирующих объекты животноводческих помещений, стеклопосуде и спецодежде. На тест-объекты из дерева, стекла, стали, кирпича, кафеля, бетона, метлахской плитки наносили суспензию сибиреязвенных спор из расчета 50 млн. спор/мл и подсушивали их на воздухе. После этого тест-объекты раскладывали в термостате при +37oC и распыляли из электрозольного генератора 30 мл 5%-ного раствора теотропина, т. е. из расчета 60 мл/м3. По истечении 18-20 ч с поверхности тест-объектов стерильными ватиками делали смывы в МПБ с последующим высевом в чашки Петри с МПА. Через 3-4 сут. инкубации в чашках Петри с высевами смывов с опытных тест-объектов роста колоний возбудителя сибирской язвы не наблюдали, тогда как в чашках с высевами смывов с контрольных тест-объектов, обработанных не раствором теотропина, а водой, отмечали сплошной рост колоний возбудителя сибирской язвы. В опытах с вирулентным вирусом африканской чумы свиней (АЧС) на стерильные тест-объекты наносили по 0,25 мл вируссодержащей крови и по 0,2 г стерильного свиного навоза, тщательно смешивали шпателем и равномерно распределяли по поверхности тест-объекта. После просушивания (2-3 ч при 20-23oC) опытные тест-объекты равномерно орошали испытуемыми растворами (2,3 и 5%-ными) теотропина из расчета 1 л/м2. На контрольные тест-объекты вместо раствора теотропина наносили такое же количество воды. После 18-20 ч инкубации при 20-23oC с тест-объектов соскабливали вируссодержащий материал, суспендировали его в 5 мл раствора среды Хенкса, экстрагировали в течение 30 мин при 20-23oC и осветляли центрифугированием при 3000g в течение 30 мин. Надосадочной жидкостью заражали культуру клеток костного мозга свиней (ККМС) с последующими двумя пассажами и интактных подсвинков (биопроба). Результаты проверки полноты обеззараживания тест-объектов, контаминированных вирусом АЧС, представлены в табл.3. Из данных табл.3 видно, что 5 и 3%-ные растворы теотропина обеззараживают контаминированные вирулентным вирусом АЧС тест-объекты, имитирующие фрагменты животноводческих помещений. Стеклопосуду, контаминированную вирусом АЧС, погружали в 2, 3 и 5%-ные растворы теотропина (в соотношении 1/10 по объему) на 18 - 20 ч при 20-23oC, а затем использованные растворы исследовали в ККМС и в биопробе на свиньях. Куски хлопчатобумажных, шерстяных, клеенчатых тканей размерами 15Х15 см и резиновые перчатки, контаминированные вируссодержащей кровью, погружали в 2, 3 и 5%-ные растворы теотропина (в соотношении 1/10 по объему) в течение 18-20 ч при 20-23oC. После обработки материалы извлекали из дезрастворов, измельчали в фарфоровой ступке, переносили в раствор Хенкса, экстрагировали при перемешивании в течение 30 мин и экстрагирующим раствором заражали ККМС и подсвинков. В этих исследованиях были испытаны растворы теотропина, хранившиеся в 15, 20 и 120 сут (срок наблюдения) при 20-23oC. В качестве контроля использовали воду. Результаты оценки полноты обеззараживания стеклопосуды, тканевых и резиновых материалов, контаминированных вирусом АЧС, представлены в табл.4. Из данных табл. 4 видно, что 2, 3 и 5%-ные растворы теотропина, хранившиеся до 120 сут (срок наблюдения), за 18-20 ч полностью обеззараживают стеклопосуду, тканевые и резиновые материалы. Результаты подтверждены биопробой на свиньях, которые не заболели в течение 30 сут, тогда как животные, инъецированные материалами контрольных (необработанных теотропином тест-объектов), заболели АЧС в острой форме и пали на 6-8 сут, титр вируса в крови павших свиней был в пределах 6,5-8,0 lg ГАЕ50/мл. Акт комиссионных испытаний, подтверждающих эти результаты, прилагается. При изучении токсичности установлено, что эмбриональная летальная доза (ЭЛД50) для развивающихся куриных эмбрионов составляет 364 мкг/кг, а ЛД50 (летальных доз) для белых мышей 375 мл/кг массы при подкожном введении. Теотропин не проявлял эмбриотоксического и тератогенного действия. При аэрозольном применении из расчета 40 мл 10 и 25%-ного раствора на 1 м3 и экспозиции в течение 60 мин теотропин не оказывал токсического действия на цыплят и свиней. Акты комиссионных и производственных испытаний имеются. Таким образом, предлагаемый препарат Теотропин для дезинфекции (обеззараживания) объектов санитарного надзора прост в исполнении и промышленно применим в животноводческих хозяйствах, в лечебных и в научно-исследовательских учреждениях, производственных, технологических и складских объектах, предприятиях биологической и пищевой промышленности. Теотропин отечественного производства синтезируется из производимого в стране сырья и сохраняет дезинфицирующие свойства в водных растворах не менее 120 сут (срок наблюдения).
Класс A61L2/16 с использованием химических веществ