вещества с иммуномодулирующим действием, фармацевтическая композиция на их основе, способ иммуномодулирования

Формула изобретения

1. Применение рацемического N,N"-диацетилцистина, N.N"-дибутирилцистина, N,N"-диизовалерилцистина, N,N"-дикаприлилцистина, сложного диметилового эфира N, N"-диацетилцистина, сложного диэтилового эфира N,N"-диацетилцистина, сложного диметилового эфира N,N"-диизовалерилцистина или их физиологически приемлемой соли в качестве веществ с иммуномодулирующим действием.

2. Применение L-оптических изомеров, N,N"-диацетилцистина, N,N"-дибутирилцистина, N, N"-диизовалерилцистина, N, N"-дикапролилцистина, сложного диметилового эфира N,N"-диацетилцистина, сложного диэтилового эфира N,N"-диацетилцистина, сложного диметилового эфира N,N"-диизовалерилцистина или их физиологически приемлемой соли в качестве веществ с иммуномодулирующим действием.

3. Применение по п. 1 рацемического N,N"-диацетилцистина, N,N"-дибутирилцистина, N, N"-диизовалерилцистина, N,N"-дикаприлилцистина, сложного диметилового эфира N,N"-диацетилцистина, сложного диэтилового эфира N,N"-диацетилцистина, сложного диметилового эфира N,N"-диизовалерилцистина или их физиологически приемлемой соли в качестве веществ с действием против хронического бронхита.

4. Применение по п. 2 L-оптических изомеров N,N"-диацетилцистина, N, N"-дибутирилцистина, N,N"-диизовалерилцистина, N,N"-дикаприлилцистина, сложного диметилового эфира N,N"-диацетилцистина, сложного диэтилового эфира N, N"-диацетилцистина, сложного диметилового эфира N,N"-диизовалерилцистина или их физиологически приемлемой соли в качестве веществ с действием против хронического бронхита.

5. Применение по п. 1 рацемического N,N"-диацетилцистина, N,N"-дибутирилцистина, N,N"-диизовалерилцистина, N,N"-дикарилилцистина, сложного диметилового эфира N,N"-диацетилцистина, сложного диэтилового эфира N,N"-диацетилцистина, сложного диметилового эфира N,N"-диизовалерилцистина или их физиологически приемлемой соли в качестве веществ действующих против астмы.

6. Применение по п. 2 L-оптических изомеров N,N"-диацетилцистина, N, N"-дибутирилцистина, N,N"-диизовалерилцистина, N,N"-дикаприлилцистина, сложного диметилового эфира N,N"-диацетилцистина, сложного диэтилового эфира N, N"-диацетилцистина, сложного диметилового эфира N,N"-диизовалерилцистина или их физиологически приемлемой соли в качестве веществ против астмы.

7. Применение по п. 1 рацемического N,N"-дицетилцистина, N,N"-дибутирилцистина, N, N"-диизовалерилцистина, N,N"-дикаприлилцистина, сложного диметилового эфира N,N"-диацетилцистина, сложного диэтилового эфира N,N"-диацетилцистина, сложного диметилового эфира N,N"-диизовалерилцистина или их физиологически приемлемой соли в качестве веществ против ринита.

8. Применение по п. 2 L-оптических изомеров N,N"-диацетилцистина, N, N"-дибутирилцистина, N,N"-диизовалерилцистина, N,N"-дикаприлилцистина, сложного диметилового эфира N,N"-диацетилцистина, сложного диэтилового эфира N, N"-диацетилцистина, сложного диметилового эфира N,N"-диизовалерилцистина или их физиологически приемлемой соли в качестве веществ против ринита.

9. Применение по п. 1 рацемического N,N"-диацетилицистина, N,N"-дибутирилцистина, N, N"-диизовалерилцистина, N,N"-дикаприлилцистина, сложного диметилового эфира N,N"-диацетилцистина, сложного диэтилового эфира N,N"-диацетилцистина, сложного диметилового эфира N,N"-диизовалерилцистина или их физиологически приемлемой соли в качестве веществ против диабета.

10. Применение согласно п. 2 L-оптических изомеров N,N"-диацетилцистина, N, N"-дикаприлилцистина, сложного диметилового эфира N,N"-диацетилцистина, сложного диэтилового эфира N,N"-диацетилцистина, сложного диметилового эфира N, N"-диизовалерилцистина или их физиологически приемлемой соли в качестве вещества против диабета.

11. Применение по п. 1 рацемического N,N"-диацетилцистина, N,N"-дибутирилцистина, N, N"-диизовалерилцистина, N,N"-дикаприлилцистина, сложного диметилового эфира N,N"-диацетилцистина, сложного диэтилового эфира N,N"-диацетилцистина, сложного диметилового эфира N,N"-диизовалерилцистина или их физиологически приемлемой соли в качестве веществ против ревматоидного артрита.

12. Применение по п. 2 L-оптических изомеров N,N"-диацетилцистина, N, N"-дибутирилцистина, N, N"-диизовалерилцистина, N, N"-дикаприлилцистина, сложного диметилового эфира N,N"-диацетилцистина, сложного диэтилового эфира N, N"-диацетилцистина, сложного диметилового эфира N,N"-диизовалерилцистина или их физиологически приемлемой соли в качестве веществ против ревматоидного артрита.

13. Применение по п. 1 рацемического N,N"-диацетилцистина, N,N"-дибутирилцистина, N, N"-диизовалерилцистина, N,N"-дикаприлилцистина, сложного диметилового эфира N,N"-диацетилцистина, сложного диэтилового эфира N,N"-диацетилцистина, сложного диметилового эфира N,N"-диизовалерилцистина или их физиологически приемлемой соли в качестве веществ против злокачественных заболеваний.

14. Применение по п. 2 L-оптических изомеров N,N"-диацетилцистина, N, N"-диикаприлилцистина, сложного диметилового эфира N,N"-диацетилцистина, сложного диэтилового эфира N,N"-диацетилцистиина, сложного диметилового эфира N,N"-диизовалерилцистина или их физиологически приемлемой соли в качестве веществ против злокачественных заболеваний.

15. Применение по п. 1 рацемического N,N"-диацетилцистина, N,N"-дибутирилцистина, N, N"-диизовалерилцистина, N,N"-дикаприлилцистина, сложного диметилового эфира N,N"-диацетилцистина, сложного диэтилового эфира N,N"-диацетилцистина, сложного диметилового эфира N,N"-диизовалерилцистина или их физиологически приемлемой соли в качестве веществ против инфекций ВИЧ/СПИДа.

16. Применение по п. 2 L-оптических изомеров N,N"-диацетилцистина, N, N"-дикаприлилцистина, сложного диметилового эфирра N,N"-диацетилцистина, сложного диэтилового эфира N,N"-диацетилцистина, сложного диметилового эфира N,N"-диизовалерилцистина, или физиологически приемлемой соли в качестве веществ против ВИЧ инфекций/СПИДа.

17. Применение по п. 1 рацемического N,N"-диацетилцистина, N,N"-дибутирилцистина, N, N"-диизовалерилцистина, N,N"-дикаприлилцистина, сложного диметилового эфира N,N"-диацетилцистина, сложного диэтилового эфира N,N"-диацетилцистина, сложного диметилового эфира N,N"-диизовалерилцистина или их физиологически приемлемой соли в качестве веществ против атеросклеротического заболевания.

18. Применение по п. 2 L-оптических изомеров N,N"-диацетилцистина, N, N"-дибутирилцистина, N,N"-диизовалерилцистина, N,N"-дикаприлилцистина, сложного диметилового эфира N,N"-диацетилцистина, сложного диэтилового эфира N, N"-диацетилцистина, сложного диметилового эфира N,N"-диизовалерилцистина или их физиологически приемлемой соли в качестве веществ против атеросклеротического заболевания.

19. Применение по п. 2 N,N"-диацетил-L-цистина.

20. Фармацевтическая композиция с иммуномодулирующим действием для использования в терапевтических целях, включающая в качестве активного ингредиента иммуномодулирующее соединение с фармацевтически приемлемым наполнителем, отличающаяся тем, что в качестве активного соединения содержит соединение по п. 1 или 2 в количестве 0,5 - 500 мг.

21. Фармацевтическая композиция по п. 20, отличающаяся тем, что представлена в форме стандартных доз.

22. Фармацевтическая композиция по пп. 20 - 21, отличающаяся тем, что содержит в качестве активного ингредиента N,N"-диацетил-L-цистин.

23. Способ иммуномодулирования у млекопитающих, в том числе у человека, отличающийся тем, что хозяину, нуждающемуся в таком лечении, вводят эффективное количество рацемического N,N"-диацетилцистина, N,N"-дибутирилцистина, N,N"-диизовалерилцистина, N,N"-дикаприлилцистина, сложного диметилового эфира N, N"-диацетилцистина, сложного диэтилового эфира N,N"-диацетилцистина, сложного диметилового эфира N,N"-диизовалерилцистина или их физиологически приемлемой соли необязательно с фармацевтически приемлемым носителем.

24. Способ иммуномодулирования млекопитающих, в том числе у человека, отличающийся тем, что хозяину, нуждающемуся в таком лечении, вводят эффективное количество L-оптических изомеров N,N"-диацетилцистина, N,N"-дибутирилцистина, N,N"-диизовалерилцистина, N,N"-дикаприлилцистиина, сложного диметилового эфира N,N"-диацетилцистина, сложного диэтилового эфира N,N-диацетилцистина, сложного диметилового эфира N,N"-диизовалерилцистиина или их физиологически приемлемой соли, необязательно вместе с фармацевтически приемлемым носителем.

Описание изобретения к патенту

Настоящее изобретение относится к новому терапевтическому применению N, N"-диацетилцистина; N,N"-дибутирилцистина; N,N"-диизовалерилцистина; N,N"-дикаприлилцистина; N,N"-диацетилцистиндиметилового сложного эфира; N,N"-диизовалерилцистиндиметилового сложного эфира в виде рацемической смеси или в виде оптических D- или L-изомеров.

В частности, настоящее изобретение относится к применению вышеуказанных соединений для изготовления лекарственных препаратов с иммуномодулирующим действием, а особенно, с иммуностимулирующим действием.

N-Ацетил-L-цистеин является известным соединением, которое широко используется для лечения заболеваний, связанных с хронической обструкцией дыхательных путей, и хронических бронхитов /более подробно см. Multicentre Study Group. Long-term oral acetylcysteine in chronic oronchitis. A double-blind controlled study. Eur. J. Respir. Dis. 19, 80, 61 (suppl. 111), 93-108; Boman, G., Backer, U., Larsson, S., Melander, S., and Wahlander, L.Oral acetylcysteine reduces exacerbation rate in chronic bronchitis. Report of a trial organized by the Swedish Society for Pulmonary Disease. Eur. J. Respir. Dis. 1983, 64, 405-415; и British Thoracic Society Research Committee. Oral N-acetylcysteine and exacerbation rates in patients with chronic Bronchitis and severe airway obstruction. Thorax, 1985, 40, 832 - 835). Механизм действия указанного соединения в литературе не описан; однако, в некоторых работах действие этого соединения приписывают его муколитическим свойствам /см. Multicentre Study Group. Long-term oral acetylcysteine in chronic Bronchitis. A double-blind controlled study. Eur. J. Respir. Dis. 1980, 61 (supple. 111), 93 - 108; Boman G., Backer U., Larsson, S., Melander B., and Wahlander, L. Oral acetylcysteine reduces exacerbation rate in chronic Bronchitis. Report of a trial organized by the Swedish Society for Pulmonary Descasc. Eur. J. Respir. Dis. 1983, 64, 405 - 415; и British Thoracic Society Research Committee. Oral N-acetylcysteine and exacerbation rate in patients with chronic bronchitis and severe airway obstruction. Thorax 1985, 40, 832 - 835); противоокислительным свойствам (см. Aruoma, O.I., Halliwell, B., Hoey B. M. , и Butler J, Free Radical Siol. Med. 1989, 6, 593 - 597); а также иммуномодулирующим свойствам (см. Bergetrand H., Bjornson A., Eklund A., Aernbrand R., Larsson K., Linden M., и Nilsson A., Stimuli - induced superoxide radical generation in vitro by human alveolar macrophages from smokes: Modulation by N-Acetylcysteine treatment in vivo. J. Free Radicals Biol. Med. 2, 1986, 119 - 127).

В настоящем изобретении рассматриваются следующие соединения: дисульфид N-ацетилцистеина, то есть N,N"-диацетилцистин (обозначаемый далее DiNAC), имеющий формулу



N, N"-дибутирилцистин (обозначаемый далее diBUT), то есть, соединение формулы



N, N"-диизовалерилцистин (обозначаемый далее diVAL), т.е., соединение формулы



N, N"-дикаприлилцистин (обозначаемый далее diCAP), т.е. соединение формулы



N, N"-диацетилцистиндиметиловый сложный эфир (обозначаемый далее diMeNAC), т.е., соединение формулы



N,N"-диацетилцистиндиэтиловый сложный эфир (обозначаемый далее diEtNAC), т.е. соединение формулы



N, N"-диизовалерилцистиндиметиловый сложный эфир (обозначаемый далее diMeVal), т.е., соединение формулы



Вышеуказанные соединения, рассматриваемые в настоящем изобретении, могут быть как в виде отдельных D- и L-изомеров, так и в виде их рацемических смесей. Особый интерес представляют собой соединения, имеющие L-конфигурацию, в частности N,N"-диацетил-L-цистин.

Соединения, рассматриваемые в настоящем изобретении, могут также представлять собой физиологически приемлемые соли вышеуказанных соединений, например, соли натрия, калия, аммония, кальция или магния. Соли соединений diNAC, diBUT, diVAL и diCAP, образованные с фармацевтически приемлемыми органическими основаниями, также представляют интерес для целей настоящего изобретения.

Вышеупомянутые соединения были ранее описаны в патентной и специальной литературе. Например, DiNAC описан в следующих публикациях: США 4827016; ЕР 300100; США 4724239; США 4708965; Е 2326444; Wilson I.D. и Nicholson J.K., Analysis of thiols and disulfides in Sulphur-containing drugs and related organic compounds. Chemistry, Biochemistry and Toxicology (td. L.A.Damani) Vol. 2A. Analytical, biochemical and toxicological aspects of sulphur xenobiochemistry. Ellis Horwood Series in Biochemical Pharmacology (Halstred Press: a division of John Wiley & Sons) Chichester 1989, p. 45 u Sjodin K., Nilsson E., Hallberg A. and Tuneka; Metabolism of N- Acetyl-L-cysteine. Some structural requirements for the deacetylation and consequences for the oral biovailability. Biochem. Pharmacol. 1989, 38, 3981 - 3985.

Соединение, описанное в патенте США, является эффективным при местном применении для лечения воспалительных заболеваний кожи, индуцируемых и распространяемых лейкотриенами.

Остальные из вышеупомянутых соединений описаны, например, в следующих публикациях: diMeNAC описан Bowman W.R., Richardson G.D. B Tetrahedron Lett. 1981, 22, 1551 - 1554; diEtNAC описан Damico K.A., Boggs R.W. в патенте США N 3952115 /1976/; diVAL, diMeVAL описаны Martin T.A. в J.Med. Chem. 1969, 12, 950 - 953; diCAP описан в FR 8205 М; а diBUT описан в FR 2503151.

Однако, ни в одной из известных публикаций нет каких-либо указаний на фармакологическое и/или терапевтическое применение вышеуказанных соединений для воздействия на иммунологические системы или для лечения воспалительных заболеваний легких, например, хронических бронхитов.

Испытания in vivo на N-клеточную реактивность на живых моделях, а именно, испытания на реакцию гиперчувствительности замедленного типа (DTH) у мышей, неожиданно показали, что вышеупомянутые соединения diNAC, diBUT, diVAL, diCAP, diMeNAC, diEtNAC и diMeVAL являются очень сильными и эффективными иммуностимуляторами; причем, эффективность некоторых из них в 100 - 1000 раз превышает эффективность тиолNAC. Таким образом, в вышеуказанной модели эти соединения являются эффективными иммуностимуляторами с активностью и эффективностью, превышающей или равной эффективности известных иммуностимуляторов, таких, как диэтилдитиокарбонат (DTC) или гидроксиэтилдисульфид (HEDS, см. St. Georgiev V. New synthetic immunomodulating agents. Trends in Pharmacological Science, 1988, 446 - 451).

Поэтому соединения DiNAC, diBUT, diVAL, diCAP, diMeNAC, diEtNAC, diMeVAL и их оптические D- и L-изомеры могут быть использованы для лечения заболеваний, связанных с имеющимися или подозреваемыми расстройствами иммунной системы и/или недостаточной иммунной защитой организма.

Примерами таких заболеваний могут служит хронические бронхиты и другие воспалительные заболевания дыхательных путей, такие как астма и риниты; а также некоторые формы аутоиммунных заболеваний, таких как диабет, ревматоидный артрит или/и различные злокачественные опухоли. Эти соединения могут быть также использованы при лечении ВИЧ-инфекций или СПИД"а. Вышеуказанные соединения можно также использовать в качестве средства для лечения атеросклероза.

Доза эффективного количества соединений diNAC, diBUT, diVal, diCAP, diMeNAC, diEtNAC, diMeVAL и их оптических D- и L-изомеров, используемых для лечения вышеуказанных соединений, составляет порядка 0,5 - 500 мг, а предпочтительно 5 - 50 мг в день.

Соединения diNAC, diBUT, diVAL и diCAP могут быть получены, например, из L-цистина путем ацилирования (см. , US 4827016, EP 300100; US 4724239; US 4708965; DE 2326444; Marshall R., Winitz M., Birnbaum S.M. и Greenstein J.P. , J. Am. Chem. Soc. 1957, 79, 4538 - 4544; и Cecil R., McPhee J.B., Biochem. J. 1957, 66, 538 - 543), или путем дегидродимеризации соответствующих ацилцистеинов (см. Snow J.T. Finley J.W. Friedman M., Biochem. Biophys. Res. Commun., 1975, 64, 441 - 447).

Сложные эфиры diMeNAC, diEtNAC и diMeVAL могут быть синтезированы аналогичным образом, т.е. путем ацилирования метилового или этилового сложных эфиров цистина, или путем дигидродимеризации соответствующих метилового или этилового сложных эфиров N-ацетилцистина или метилового сложного эфира N-изовалерилцистина. См. например Bonnett R., Nicolaidow P. J., Chem. Soc. Percin Trans. 1979, 1069 - 1077. Schaad L. J., Werner K. M., Dillon L., Field L. , Tate C. E. J. Med. Chem. 1975, 18, 344 - 351 и Martin T.A.J. Med. Chem. 1969, 12, 950 - 953.

Способность соединений diNAC, diBUT, diVAL, diCAP, diMeNAC, diEtNAC и diMeVAL к стимуляции иммунного ответа может быть проиллюстрирована путем их испытания на реакцию гиперчувствительности замедленного типа (PTH) у мышей.

Для испытаний были использованы мыши Balb/c (как самцы, так и самки, полученные из Bomholtsgaard, Дания и Charlie Rivers, Англия) весом 18 - 20 г. В этом испытании в качестве антигена служил 4-этоксиметилен-2-фенилоксазолон (OXA), который был закуплен у ВНД (Англия).

Для проведения эксперимента мышей сенсибилизировали (День 0) путем нанесения на кожу гладко выбритой грудки и живота 150 мкл раствора абсолютного этанола и ацетона (3:1), содержащего 3% OXA. Обработку L-формой соединений diNAC, diMeNAC, diEtNAC, diMeVAL или наполнителем (фосфатным буфером, pH 7,0), путем перорального введения при кормлении, начинали сразу после сенсибилизации и продолжали ежедневно в течение шести дней. На седьмой день (день 6) после сенсибилизации всем мышам проводили антигенную провокацию путем наружного нанесения на уши (с обеих сторон) 20 мкл 1% ОХА, растворенного в арахисовом масле. Толщину уха измеряли перед провокационной пробой и через 24 часа или 48 часов после провокационной пробы с помощью кронциркуля Oditest. Провокационные пробы и измерения проводили под легкой анастезией пентабарбиталом. Интенсивность ТН-реакций определяли по формуле: T_t24/48 - T_t0 мкм ед., где to, t24 и t48 представляют собой толщину уха перед провокацией, через 24 или 48 часов после провокации, соответственно, в отдельном тесте (Т). Результаты выражали как средние величины ср. кв. ош.

Уровень значимости между средними величинами групп получали с помощью двустороннего критерия Стьюдента. В таблицах 1 и 2 представлены результаты измерений (через 24 и 48 часов соответственно), полученные при проведении эксперимента с использованием L-изомера diNAC. Эти результаты показывают, что L-diNAC, после перорального введения, вызывает значительное увеличение толщины уха в зависимости от концентрации.

В таблице 3 приводятся соответствующие данные толщины уха, полученные через 24 и 48 часов после провокационной обработки животных, предварительно обработанных diMeNAC и diEtNAC.

Фармацевтические композиции.

Описанные выше активные соединения могут быть включены в состав различных лекарственных форм, таких как таблетки, таблетки с покрытием, желатиновые капсулы, растворы и аэрозоли.

При изготовлении таблеток, таблеток с покрытием и желатиновых капсул активные соединения могут быть объединены с фармацевтически приемлемыми материалами, такими как лактоза, крахмал, дикальцийфосфат, микрокристаллическая целлюлоза, поливинилпирролидон, желатин, производные целлюлозы, коллоидный кремнезем, тальк и стеариновая кислота или ее соли.

Для изготовления пероральных растворов подходящими наполнителями являются вода, сахароза, глюкоза, сорбит, фруктоза и ксилит.

Помимо вышеупомянутых наполнителей, лекарственные формы могут содержать консерванты; стабилизаторы; агенты, регулирующие вязкость; эмульгаторы; подслащивающие средства; красители; ароматизирующие агенты; тонизирующие средства; буферы или антиоксиданты. Эти лекарственные формы могут также содержать и другие терапевтически ценные вещества.

Пример 1. Таблетки, содержащие 10 мг активного соединения на одну таблетку:

Активное соединение - 10 мг

Лактоза - 100 мг

Картофельный крахмал - 50 мг

Поливинилпирролидон - 5 мг

Микрокристаллическая целлюлоза - 15 мг

Стеарат магния - 1 мг

Пример 2. Таблетки, полученные с помощью прямого прессования и содержащие 5 мг активного соединения на одну таблетку:

Активное соединение - 5 мг

Лактоза безводная - 150 мг

Микрокристаллическая целлюлоза - 50 мг

Коллоидный кремнезем - 1 мг

Стеарат магния - 2 мг

По желанию, полученные таблетки могут быть покрыты оболочкой, например, гидроксипропилметилцеллюлозой, гидроксипропилцеллюлозой, или сополимером диметиламиноэтилметакрилата и сложного эфира метакриловой кислоты.

Пример 3. Раствор для инъекций, содержащий 1 мг/мл активного соединения:

Активное соединение - 1,0 мг

Хлорид натрия - 8,8 мг

Вода для инъекций - до 1 мл

Пример 4. Раствор для перорального введения, содержащий 1 мг/мл активного соединения:

Активное соединение - 1,0 мг

Сорбит - 150 мг

Глицерин - 100 мг

Динатрийэдетат - 0,5 мг

Консервант - дост. кол.

Отдушка - дост. кол.

Очищенная вода - до 1 мл.

Пример 5. Тонкодисперсный аэрозоль с дозировкой 1 мг на дозу.

Измельченное активное соединение может быть введено в устройство для ингаляции порошка, например, Turbuhaler^R, с дозировкой 1 мг/доза.