среда для заключения гистологических срезов

Формула изобретения

Среда для заключения гистологических срезов на основе смолы в ксилоле, отличающаяся тем, что в качестве смолы содержит 19 - 21%-ный раствор пенопласта в ксилоле, стабилизированный диметилфталатом из расчета 1:100.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к медицине и биологии, а конкретно к способам заключения и хранения гистологических препаратов.

Цель изобретения - замена дорогих и практически недоступных синтетических смол для заключения окрашенных срезов тканей и их длительного хранения с последующей быстрой обработкой для повторного исследования.

Поставленная цель достигается использованием для заключения гистологических срезов широко распространенным видом одного из полимеров - раствора пенопласта в ксилоле, который после высыхания образует прозрачную пленку, легко отделяется от предметного стекла, вследствие чего отпадает необходимость в покровных стеклах. Полученные препараты можно хранить длительное время в бумажных пакетах в темном месте, причем основные красителя при этом не обесцвечивается. При необходимости повторного исследования среза пленка из пенопласта быстро растворяется в ксилоле, освобожденный срез можно наклеить на предметное стекло.

Наиболее частой средой, используемой в отечественной практике для заключения и хранения окрашенных гистологических препаратов, являются канадский или пихтовый бальзамы, представляющие собой растворы натуральных смол в ксилоле. Вместе с тем, в процессе высыхания за счет улетучивания растворителя под покровное стекло нередко засасываются пузырьки воздуха, что в значительной мере затрудняет исследование препарата. Нередко смола с краев попадает на верхнюю поверхность покровного стекла и, засыхая, образует неровности, что также мешает наблюдению под микроскопом. При длительном хранении (более года) бальзамы принимают желтую окраску, высыхая, трескаются, тем самым разрушая препарат. Последнее явление чаще наблюдается при заключении и хранении толстых срезов. К тому же, основные анилиновые красители в таких препаратах обесцвечиваются, а берлинская лазурь и эозин довольно быстро выцветают. Для избежания этих недостатков были предложены различные синтетические смолы (например, трикапрат целлюлозы, пластифицированный малеиновый полимер, циклопарафиновый полимер, полистирол). Большинство из них нейтральны, в них хорошо сохраняются основные анилиновые красители, показатели преломления света у них удовлетворяют целям микроскопии, но в то же время они очень дорогие и практически недоступны. Для хранения стекол с заключенными в смолы срезами необходимо иметь или специальные коробки или же громоздкие приспособления в виде шкафов с выдвижными ящиками.

Рабочим является раствор пенопласта в ксилоле. Для целей микроскопии наилучшим является концентрация в пределах 19-21% (при большей или меньшей концентрации четкость изображения в микроскопе в значительной степени уменьшается). Для приготовления 300 мл раствора 60 г сухих и чистых кусочков пенопласта, употребляемого как упаковочный материал, растворяют в 300 мл о-ксилола. Чтобы замедлить процесс высыхания для предотвращения сморщивания среза после полного растворения пенопласта добавляется универсальный стабилизатор - диметилфталат из расчета 1:100 (в данном случае 3 мл). Полученный прозрачный и бесцветный раствор можно хранить неопределенно долгое время в склянках с притертой крышкой в обычных условиях без доступа прямых солнечных лучей.

Заключение срезов производится следующим образом. После окраски и обезвоживания на предметное стекло со срезом наносится капля раствора для пропитывания. Через 40-60 мин вновь наносится раствор в таком количестве, чтобы он, расплываясь, выходил за края среза на 2,0-2,5 см. Раствор полностью высыхает в течение 20-24 ч, после чего срез можно исследовать под микроскопом. При необходимости пленка со срезом легко отделяется от предметного стекла, на ее краях можно сделать надписи или обозначения. Окрашенные срезы, заключенные в пленку из пенопласта, можно хранить в простых бумажных пакетах-конвертах. На контрольных препаратах даже через один-полтора года выцветания или же повреждения срезов не наблюдалось. При необходимости повторного исследования пленку можно легко растворить в ксилоле, освобожденный срез наклеить на предметное стекло.