способ определения эффективной дозы антисептического препарата, электролизного раствора гипохлорита натрия, для лечения и профилактики гнойно-воспалительных заболеваний

Формула изобретения

Способ определения эффективной дозы антисептического препарата - электролизного раствора гипохлорита натрия для лечения и профилактики гнойно-воспалительных заболеваний путем инкубирования возбудителя в среде с различными концентрациями препарата и выявления минимальной бактериостатической концентрации препарата, отличающийся тем, что дополнительно определяют суббактериостатическую концентрацию препарата, параллельно высевают исследуемый материал из проб с суббактериостатической концентрацией препарата и контрольной пробы на питательную среду, содержащую интерферон, инкубируют посевы, выросшие колонии возбудителя убивают парами хлороформа, заливают поверхность среды слоем питательного агара с индикаторным штаммом тест-культуры, вновь инкубируют и об эффективности дозы препарата судят по отсутствию роста тест-культуры вокруг исследуемого штамма в опытной пробе по сравнению с контролем.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к медицине, а именно медицинской микробиологии, и может быть использовано в клинической практике для лечения гнойно-воспалительных заболеваний и их профилактики, в частности, путем санации стафилококкового бактерионосительства.

Традиционный способ выбора эффективной дозы препаратов типа антисептиков и антибиотиков при лечении и профилактике гнойно-воспалительных заболеваний основан на определении минимальной бактериостатической концентрации (МПК) для выделения штамма возбудителя [1].

Однако использование в таких концентрациях антибиотиков и антисептиков часто вызывает побочное действие на организм: токсический эффект, аллергические реакции [2] . Согласно данным литературы в офтальмологии, например, местная фармакотерапия с использованием антибиотиков наиболее часто приводит к развитию тяжелых осложнений - до 30,2% [3].

В настоящий момент с целью лечения и профилактики гнойно-воспалительных заболеваний активно применяются антисептики нового типа. К таким препаратам относятся электролизные водные растворы солей, в частности гипохлорит натрия (NaOCl), получаемый методом электролиза 0,89% изотонического раствора хлористого натрия на аппаратах типа ЭДО (электрохимический детоксикатор организма) [4].

Электролизный раствор гипохлорита натрия обладает мощными антимикробным, детоксицирующим и иммуномодулирующим свойствами. Препарат не вызывает аллергических реакций и эффективен как в отношении грамположительных, так и грамотрицательных бактерий, - возбудителей гнойно-воспалительных заболеваний [5].

Препарат относится к разряду антисептиков, применяемых в определенных концентрациях не только наружно, но и внутривенно. Как сильный окислитель является активатором перекисного окисления липидов и может воздействовать на проницаемость клеток различных тканей [6].

Препарат в бактерицидных концентрациях (выше 5000 мг/л) может оказывать раздражающий эффект на кожу и слизистые [5], что вызывает субъективные жалобы больных на чувство жжения, сухость, неприятные ощущения, например, при применении препарата в высоких концентрациях с целью санации назального стафилококкового бактерионосительства. Кроме того, в связи с высокими бактерицидными свойствами электролизного водного раствора гипохлорита натрия возможно развитие местного дисбактериоза при использовании его на поверхности кожи и слизистых.

Таким образом, для получения положительного терапевтического результата и исключения побочных воздействий на организм необходим эффективный подбор доз антисептического препарата - электролизного раствора гипохлорита натрия.

Наиболее близким к заявляемому способу по назначению и совокупности существенных признаков является способ определения эффективной дозы антисептического препарата - электролизного раствора гипохлорита натрия - для лечения и профилактики гнойно-воспалительных заболеваний путем инкубирования возбудителя в среде с различными концентрациями препарата и выявлением минимальной бактериостатической концентрации препарата [7].

Однако известный способ не обеспечивает высокой точности определения терапевтически эффективной и экономически целесообразной дозы антисептического препарата, электролизного раствора гипохлорита натрия, при лечении и профилактике гнойно-воспалительных заболеваний.

Задачей изобретения является повышение точности определения терапевтически эффективной и экономически целесообразной дозы антисептического препарата, электролизного раствора гипохлорита натрия, для лечения и профилактики гнойно-воспалительных заболеваний.

Для решения указанной задачи согласно способу определения эффективной дозы антисептического препарата, электролизного раствора гипохлорита натрия, для лечения и профилактики гнойно-воспалительных заболеваний путем инкубирования возбудителя в среде с различными концентрациями препарата и выявлением минимальной бактериостатической концентрации препарата дополнительно определяют суббактериостатическую концентрацию препарата, параллельно высевают исследуемый материал из проб с суббактериостатической концентрацией препарата и контрольной пробы на питательную среду, содержащую интерферон, инкубируют посевы, выросшие колонии возбудителя убивают парами хлороформа, заливают поверхность среды слоем питательного агара с индикаторным штаммов тест-культуры, вновь инкубируют и об эффективности дозы препарат судят по отсутствию роста тест-культуры вокруг исследуемого штамма в опытной пробе по сравнению с контролем.

Новым в заявляемом способе является то, что дополнительно определяют суббактериостатическую концентрацию препарата, параллельно высевают исследуемый материал из проб с суббактериостатическими концентрациями препарата и контрольной пробы на питательную среду, содержащую интерферон, инкубируют посевы, выросшие колонии возбудителя убивают парами хлороформа, заливают поверхность среды слоем питательного агара с индикаторным штаммом тест-культуры, вновь инкубируют и об эффективности дозы препарата судят по отсутствию роста тест-культуры вокруг исследуемого штамма в опытной пробе по сравнению с контролем.

Достигаемый при осуществлении изобретения технический результат состоит в том, что заявляемый способ позволяет наиболее точно определить эффективные дозы антисептического препарата, электролизного водного раствора гипохлорита натрия, для лечения и профилактики гнойно-воспалительных заболеваний, что обеспечивает благоприятный как лечебный, так и экономический эффекты. При этом снижается вероятность развития местного дисбактериоза и раздражающего воздействия, так как применяются меньшие концентрации препарата. Уменьшение вероятности развития побочных эффектов в совокупности с применением меньших доз препарата, подобранных по данному способу, позволяет значительно снизить себестоимость лечения данным препаратом.

Кроме того, в связи с широким распространением хронических и затяжных вялотекущих форм инфекционного процесса, обусловленных способностью возбудителей к персистенции [9], эффективен подбор препаратов и их дозировки по подавлению факторов персистенции патогена [8, 9]. При таком способе подбора эффективных препаратов и их дозировки обеспечивается снижение вероятности хронизации заболевания и формирования реконвалесцентного бактерионосительства.

Известен способ определения суббактериостатических концентраций антибактериальных препаратов [1].

Известен способ определения антиинтерфероновой активности бактерий чашечным методом с использованием индикаторного штамма Corynebacterium Xeposis [10].

Авторами экспериментально и клинически установлено свойство суббактериостатических концентраций электролизного водного раствора гипохлорита натрия подавлять антиинтерфероновую активность возбудителя, один из известных факторов персистенции патогена.

Антиинтерфероновая (антиинтерцидная) активность (АИА) бактерий - это способность бактерий нейтрализовать бактерицидную составляющую человеческого лейкоцитарного интерферона (интерцид) [10]. Антиинтерфероновая активность характерна для клинических штаммов бактерий и частот выявляется у возбудителей при тяжелом и длительном течении инфекционных процессов [11].

Применение отобранных по предлагаемому способу концентраций данного препарата в клинике, в частности в офтальмологической практике при лечения гнойно-воспалительных заболеваний и в стационарах хирургического и акушерского профиля для санации стафилококкового бактерионосительства продемонстрировало его эффективностью.

Обоснованием для создания настоящего способа послужили исследования, в которых были отобраны 8 клинических штаммов Ps.aeruginosa и 8 штаммов S.aureus, выделенных от резидентных бактерионосителей.

При этом одномиллиардная (1 млрд.) взвесь исследуемого штамма (приготовленная по стандарту мутности 10 ед. оптической плотности) смешивалась в соотношении 1:10 с электролизным раствором гипохлорита натрия в различных концентрациях (от 240 до 2,9 мг/л) и смесь выдерживалась в течение различного времени при комнатной температуре (от 10 до 60 мин), а затем производился посев 0,1 мл смеси на чашки Петри с 1,5% МПА. После суточной инкубации в термостате осуществлялся подсчет колоний и определялись минимальная бактерицидная (МБК) и минимальная бактериостатическая (МПК) концентрации препарата. Результаты исследований представлены в табл. 1.

Как видно из табл. 1, концентрация препарата электролизного раствора гипохлорита натрия 23,5 мг/л является МБК для синегнойной палочки и золотистого стафилококка при экспозиции 20, 30 и 60 минут. Концентрации от 12 до 3 мг/л препарата являлись бактериостатическими при экспозиции в течение 10, 20, 30 и 60 мин. Таким образом, суббактериостатическими концентрациями препарата электролизного раствора гипохлорита натрия для золотистого стафилококка и синегнойной палочки являются концентрации меньше 3 мг/л при экспозиции в течение 10, 20, 30 и 60 мин.

В соответствии с этим в опыт для выявления антиперсистентного эффекта данного препарата были выбраны суббактериостатические концентрации мг/л: 2,9; 1,9; 1,7; 1,5, электролизного раствора гипохлорита натрия и экспозиция в течение 10 мин (минимальное время для проявления эффекта при воздействии препарата).

Для выявления антиперсистентного эффекта 1 млрд. взвесь чистой культуры возбудителя смешивалась с электролизным раствором гипохлорита натрия в данных концентрациях в соотношении 1:10. Смесь выдерживалась в течение 10 мин при комнатной температуре. Для постановки контроля 1 млрд. взвесь исследуемого штамма смешивалась в том же соотношении 1:10 с физиологическим раствором (вместо электролизного раствора гипохлорита натрия) и выдерживалась также в течение 10 мин при комнатной температуре. Затем из опытных и контрольных пробирок делался посев петлей в виде "пятачков" на 1,5% МПА, содержащий препарат человеческого лейкоцитарного интерферона (производство НИИ, г. Уфа) в минимальной подавляющей концентрации (МПК) для тест-штамма Corynebacterium xerosis.

Затем осуществлялось определение АИА возбудителя в опыте (после воздействия суббактериостатической концентрации препарата) и в контроле (без действия препарата). Для этого через сутки выросшие на среде с интерфероном культуры убивали парами хлороформа и чашки заливали 0,7% МПА, содержащим 0,1 мл 1 млрд. взвеси тест-культуры Corynebacterium xerosis штамм N 181 (ГИСК им. Л.А.Тарасевича). Посевы инкубировали при 37^oC в течение суток. Действие данной концентрации препарата считали эффективным, если вокруг исследуемого штамма в опыте отсутствовал рост тест-культуры, а в контроле такой рост наблюдался, т. е. было выявлено подавление АИА возбудителя. Результаты опыта представлены в табл. 2.

Как видно из табл. 2, суббактериостатические концентрации препарата электролизного раствора гипохлорита натрия от 2,9 до 1,5 мг/л вызывают подавление АИА штаммов стафилококка, выделенных у резидентных носителей. Наиболее эффективными концентрациями препарата в отношении подавления АИА оказались концентрации 1,9 - 1,7 мг/л гипохлорита натрия (подавление АИА у 48,1% штаммов).

Способ осуществляется следующим образом.

Выделенный микроорганизм - возбудитель гнойно-воспалительного заболевания идентифицируют общепринятыми методами Из чистой культуры выделенного штамма возбудителя готовят 1 млрд. взвесь по стандарту мутности (10 ед. оптической плотности). Определяют минимальную бактериостатическую концентрацию данного препарата для исследуемого штамма методом серийных разведений. Для этого из цельного раствора со стандартными концентрациями 1200 мг/л или 600 мг/л готовят в бульоне серию разведений препарата, электролизного раствора гипохлорита натрия, в концентрациях 600-2,9 мг/л. Готовят контрольную пробирку с бульоном без препарата. В опытные и контрольные пробирки засевают исследуемый штамм и выдерживают в течение 18-24 ч в термостате, после чего определяют МПК препарата. Дополнительно определяют суббактериостатическую концентрацию препарат. Затем готовят ряд разведений препарата в суббактериостатических концентрациях, причем "шаг" между ними может выбираться произвольно (например, 2,9 мг/; 1,9-1,7 мг/л; 1,5 мг/л). Смешивают 1 млрд. взвесь данного штамма возбудителя с каждым разведением препарата соответственно в соотношении 1: 10. Для поставки контроля смешивают взвесь данного штамма с физиологическим раствором в том же состоянии. Выдерживают полученные смеси в течение 10 мин при комнатной температуре и затем делают посев в виде "пятачков" отдельно из каждой опытной пробы и контроля на 1,5% МПА, содержащий человеческий лейкоцитарный интерферон в МПК для Cor.xerosis. Через сутки выросшие культуры убивают парами хлороформа и чашки заливают 0,7% МПА, содержащим 0,1 мл 1 млрд. взвеси тест-культуры Corynebacterium xerosis (ГИСК им. Л. А. Тарасевича, штамм N 181). Посевы инкубируют в термостате и определяют АИА по наличию роста тест-культуры вокруг колоний испытуемых штаммов в опыте и контроле. Подавление АИА возбудителя под действием данной концентрации препарата регистрируется, если в опытных посевах штамма (после воздействия суббактериостатических концентраций препарата) отсутствует рост тест-культуры вокруг макроколонии, а в контрольных посевах того же штамма отмечается рост тест-культуры вокруг макроколонии. Концентрация электролизного раствора гипохлорита натрия, вызывающая подавление АИА штамма, по сравнению с контролем, оценивается как эффективная для лечения гнойно-воспалительных заболеваний. Если рост тест-штамма отсутствует как в опыте, так и в контроле, используемые концентрации препарата не рекомендуются для лечения гнойно-воспалительного процесса в данном случае, так как не гарантируется положительный эффект. Это связано с тем, что исследуемый штамм возбудителя при таком результате изначально не обладал АИА. Следовательно, суббактериостатические концентрации препарата в этом случае не могут гарантированно обеспечивать положительного терапевтического эффекта за счет воздействия на данные персистентные свойства возбудителя. В таком случае предлагаемый способ подбора доз препарата электролизного раствора гипохлорита натрия не применим.

Пример 1. Больная М., 65 лет, поступила в офтальмологическое отделение с диагнозом: "Послепервичный древовидный герпетический кератит, гнойный инфильтрат роговицы". Поступила с жалобами на светобоязнь, слезотечение, покраснение глаза. При осмотре: передний отрезок глаза OS - выражена светобоязнь, слезотечение, смешанная инъекция глазного яблока, на роговой оболочке с "4" до "7" часов инфильтрат с нарушением целостности эпителия в виде веточки дерева с выраженной поверхностной васкуляризацией по всему нижнему лимбу. Через 4 дня после традиционного лечения появилась гнойная инфильтрация в оптическом центре роговицы. При поступлении Visus OD/US = 0,8/0,03 н/к. Из гнойного отделяемого выделен и идентифицирован штамм S. aureus. Из чистой культуры выделенного штамма возбудителя готовили взвесь по стандарту мутности (10 ед. оптической плотности). Для определения методом серийных разведений МПК препарата из цельного раствора с стандартными концентрациями 1200 мг/л или 600 мг/л готовили ряд разведений препарата в концентрациях 600 - 2,9 мг/л. Для постановки контроля брали пробирку с бульоном, не содержащую препарата. Исследуемый штамм засевали в опытные и контрольные пробирки и помещали их в термостат. Пробы выдержали в течение 18-24 ч при температуре 37^oC, после чего учитывали МПК препарата в отношении исследуемого штамма возбудителя, равную 3 мг/л. Соответственно дополнительно определяли суббактериостатическую концентрацию препарата, равную 2,9 мг/л, после чего готовили несколько разведений препарата в суббактериостатических концентрациях (2,9 мн/л; 1,9-1,7 мг/л; 1,5 мг/л). Смешивали 0,05 мл 1 млрд. взвеси штамма возбудителя с 0,5 мл препарата каждого разведения соответственно. Для постановки контроля смешивали 0,05 мл взвеси с 0,5 мл физиологического раствора. Выдерживали полученные смеси в течение 10 мин при комнатной температуре и затем делали посев петлей "пятачками" из каждой опытной и контрольной проб на 1,5% МПА, содержащий человеческий интерферон в концентрации, равной МПК, для тест-культуры. Через 214 ч выросшие колонии убивали парами хлороформа и чашки заливали 0,7% МПА, содержащим 0,1 мл 1 млрд. взвеси тест-культуры C.xerosis. Посевы инкубировали в течение 24 ч в термостате и учитывали результат как положительный при отсутствии роста тест-культуры вокруг испытуемого штамма в опыте по сравнению с контролем, где есть рост тест-культуры вокруг испытуемого штамма. Такой результат регистрировался при применении концентрации препарата 2,9 мг/л и меньше. Соответственно эта концентрация препарата (2,9 мг/л) применялась для лечения больной в течение 6 дней. Лечение оказалось эффективным: Visus OS = 0,3 - 0,4 н/к, роговичный синдром исчез, глаз спокоен, на месте инфильтрата помутнений и окрашивания нет.

Пример 2. Больная К. , 60 лет, поступила в стационар с диагнозом: "Гнойный инфильтрат, бельмо роговицы OS". При поступлении Visus OS = 0,02 н/к, передний отрезок глаза OS - глазная щель сужена, умеренная смешанная инъекция глазного яблока, роговица отечная, матовая, шероховатая с внутренней стороны, на "7-11" часов в оптической зоне помутнение серого цвета. При посеве гнойного отделяемого в баклаборатории выделен штамм S.aureus. Через 5 дней после применения препарата электролизного раствора гипохлорита натрия в концентрации, отобранной предлагаемым способом в соответствии с примером 1, были получены следующие данные: Visus OS = 0,5-0,6 н/к; передний отрезок глаза спокоен, инфильтрация на роговице уменьшилась до точечной в параоптической зоне. Лечение оказалось эффективным.

Пример 3. Больной Л. , 30 лет, поступила в стационар с диагнозом: "Гнойная язва роговицы. Гипотонический иридоциклит". При поступлении Visus OS = 0,09 н/к; OS = 0,3/+/2,0 = 1,0. Глаз раздражен, на роговице в оптической зоне с переходом на нижний отдел параоптической зоны обширная инфильтрация с изъявлением (дефект эпителия 23 мм). Передняя камера средней глубины, гипотония, радужка гиперемирована. При посеве в баклаборатории выделен штамм S.aureus. Через 2 недели после применения электролизного раствора гипохлорита натрия в концентрации, отобранной по предлагаемому способу (см. пример 1), помутнение роговицы локализовалось только в параоптической зоне, глаз спокоен. Лечение оказалось эффективным.

Пример 4. В ходе обследования на назальное стафилококковое бактерионосительство студентов, работающих в стационаре хирургического профиля, был выявлен резидентный носитель S. aureus М., 25 лет. Показатель микробной обсемененности (ПМО) при первичном обследовании был равен 510⁵ КОЕ/тампон. У выделенного штамма S. aureus были выявлены факторы вирулентности и колонизации: лецитиназа, плазмокоагулаза, гемолизин, антагонизм к тест-штаммам M. luteus, C. xerosis; персистентные характеристики - антилизоцимная (АЛА) и антиинтерфероновая активности. Для санации был использован препарат электролизного раствора гипохлорита натрия в концентрации, подобранной по предлагаемому способу (методика примера 1). При применении препарата в данных дозах жалоб на жжение, сухость, неприятные ощущения на слизистой носовой полости не отмечалось. Через неделю, при вторичном обследовании: ПМО S. aureus снизился до 110⁵ КОЕ/тампон. При дополнительном обследовании еще через неделю ПМО был снижен до 110⁴ КОЕ/тампон, причем штамм S. aureus утратил такие факторы вирулентности, как гемолитическую, лецитиназную и антиинтерфероновую активности. Следовательно, санация препаратом электролизного раствора гипохлорита натрия в дозах, отобранных по предлагаемому способу, оказалась успешной, и данное лицо перестало представлять опасность для окружающих как источник распространения возбудителя гнойно-воспалительных заболеваний.

Пример 5. При обследовании на стафилококковое бактерионосительство, проводившееся по общепринятой методике, был выявлен резидентный носитель S. aureus - Ф., 20 лет (ПМО = 510⁵ КОЕ/тампон). Выделенный штамм S.aureus обладал факторами вирулентности и колонизации: гемолитической и лецитиназной активностями, плазмокоакулазой, факторами персистенции (АЛА и АИА). Для более детального исследования биоценоза слизистой носовой полости был произведен посев на кровяной агар исследуемого материала, взятого тампоном со слизистой носовой полости. Кроме S.aureus, в составе биоценоза были выявлены S. warneri (ПМО = 8,910⁴ КОЕ/тампон), обладающий гемолитической и антилизоцимной активностями; S. hominis (ПМО = 9,510³ КОЕ/тампон) с АЛА и C. pseudodiphtheriticum (ПМО = 1,610⁴ КОЕ/тампон). Была проведена санация электролизным раствором гипохлорита натрия в дозах, отобранных по предлагаемому способу (см. пример 1). Субъективных жалоб на раздражающее действие препарата не отмечалось. После курса лечения в составе биоценоза сохранились: штамм S. aureus (ПМО = 1,510³ КОЕ/тампон), утративший АИА; S. warneri (ПМО = 1,110⁴ КОЕ/тампон) и C. pseudodiphtheriticum (ПМО = 2,910⁴ КОЕ/тампон). Таким образом, результат санации оказался успешным: в 100 раз уменьшилось количество S. aureus и штамм утратил фактор персистенции (АИА); был устранен штамм S. hominis с фактором персистенции (АЛА); в 8 раз снизился ПМО S. warneri с гемолитической и антилизоцимной активностью; в то же время количество облигатной нормальной микрофлоры (C. pseudodiphtheriticum) осталось на прежнем уровне.

Подобный положительный эффект был получен при санации электролизным раствором гипохлорита натрия в дозах, подобранных по предлагаемому способу, 24 резидентных носителей S. aureus - студентов Оренбургской государственной медицинской академии, работавших в стационарах хирургического и акушерского профиля. Наблюдалось снижение ПМО S. aureus до уровня транзиторного носительства (110³ КОЕ/тампон) у 87,5% просанированных резидентных носителей, подавление вирулентных и персистентных свойств у штаммов S. aureus (в 32,5% и 56% случаев) без существенных изменений в количественном и качественном составе нормальной микрофлоры слизистой носа. Следовательно, предлагаемый способ определения эффективной дозы антисептического препарата, электролизного раствора гипохлорита натрия, позволяет проводить качественную санацию стафилококковых бактерионосителей: подавление носительских штаммов S. aureus и сохранение эубиоза в нормальной микрофлоре слизистой носа.

При использовании данного препарата, согласно предлагаемому способу, в офтальмологической клинике при лечении гнойно-воспалительных заболеваний переднего отрезка глаза была выявлена его высокая эффективность: полного извлечения достигли у 75% больных при использовании предлагаемого способа подбора доз, в то время как при лечении по традиционной методике аналогичного эффекта достигли только у 48,1% больных. При этом сроки пребывания больных в стационаре сократились почти в 1,5 раза и количество неорганосохранных операций уменьшилось с 25,9 до 8,3%. Также улучшались качественные характеристики зрения после лечения электролизным раствором гипохлорита натрия по предлагаемому методу: функции глаз у больных были выше (у 75% - визус десятые; у 16,7% - визус сотые; светоощущение - 8,3%) по сравнению с традиционным методом (11,1% - десятые; 35,1% - сотые; светоощущение - 27,1%). Таким образом, использование предлагаемого способа определения эффективных доз препарата электролизного раствора гипохлорита натрия позволит при существенном экономическом эффекте (снижении стоимости лечения не менее чем на 90%) достигать значительных клинических результатов.

Предлагаемый способ определения эффективной дозы антисептического препарата, электролизного раствора гипохлорита натрия, для лечения и профилактики гнойно-воспалительных заболеваний дает возможность повысить экономичность и эффективность лечения за счет точного и достоверного определения эффективной дозы лечебного средства.

Источники информации, в которых содержатся сведения об аналогах изобретения

1. Навашин С.М., Фомина И.П. Справочник по антибиотикам. - М.: Медицина, 1974 - с. 38-40.

2. Красильников А.П. Справочник по антисептике. - Мн.: Выш. шк. 1995. - С. 339-349.

3. Майчук Ю.Ф. Аллергические заболевания глаз. - М.: Медицина, 1983. - С. 80.

4. Авторское свидетельство СССР N 1194425, кл. A 61 M 1/03, 1985.

5. Патент Российской Федерации N 2022566, кл. A 61 K 33/14, 1994.

6. Тез. докл. Всес. конф. "Электрохимические методы в медицине". - Дагомыс, 1991. - С. 35-38.

7. Тез. докл. Всес. конф. "Электрохимические методы в медицине". - Дагомыс, 1991. - С. 21-26 /прототип/.

8. Авторское свидетельство СССР N 1455303, кл. G 01 N 33/46, C 12 N 1/100, 1986.

9. Бухарин О.В. Механизмы бактериальной персистенции //В сб.: Персистенция бактерий, 1990. - С. 11.

10. Авторское свидетельство СССР N 1564191, кл. C 12 Q 1/02, C 12 R 1/15, 1988.

11. Зыкова Л.С. и др. Клиническое значение антиинтерфероновой активности энтеробактерий при пиелонефрите у детей //В сб.: Персистенция бактерий, 1990, с. 93-99.