способ аналгезии и снятия воспалительной реакции у человека

Формула изобретения

Способ аналгезии и снятия воспалительной реакции у человека путем введения эффективного количества производного 3-ацил-2-оксиндол-1- карбоксамида, отличающийся тем, что вводят 6-хлор-5-фтор-9-(2- теноил)-2-оксиндол-1- карбоксамид или его фармацевтически приемлемую основную соль, при этом дополнительно проводят определение в моче пациента содержания белка и креатинина и при сохранении нормального соотношения уровня белка к уровню креатина проводят болеутоляющую терапию, а при противовоспалительной терапии вводят такое количество указанного соединения, которое не вызывает протеинурии.

Описание изобретения к патенту

Изобретение касается способа достижения обезболивания и способа терапии воспалительного заболевания у человека без инициирования протеинурии.

Кейдин (Kadin) в патенте США N 4556672 описывает некоторые 2-оксиндиол-1-карбоксамидные соединения с ацильными заместителями в 3-положении, которые являются ингибиторами циклооксигеназных и липооксигеназных ферментов. Эти соединения являются полезными для использования у млекопитающих в качестве обезболивающих средств и полезными для ослабления или устранения болевого ощущения, такого как боль, испытываемая пациентами после хирургического вмешательства или травмы. Эти соединения являются также полезными для длительного введения млекопитающим с целью ослабления симптомов хронических заболеваний, таких как воспаление и боль, связанная с наличием ревматоидных артритов и остеоартритов. Кейдин, в частности, заявляет способ выявления аналгезирующей реакции, а также способ терапии воспалительного заболевания у млекопитающего, который включает в себя лечение упомянутого млекопитающего эффективным количеством препарата, выбранного из группы 2-оксиндол-1-карбоксамидов. В эту группу входит химическое соединение, называемое 6-хлор-5-фтор-3-(2-теноил)-2-оксиндол-1-карбоксамидом. Однако об использовании этого последнего соединения ничего не говорится. Упоминаемые Кейдином 2-оксиндол-1-карбоксамиды являются высокоэффективными аналгетиками и противовоспалительными средствами, однако, как было установлено, 5-хлор-3-(2-тениол)-2-оксиндил-1-карбоксамид, входящий в эту группу соединений, инициирует у некоторых пациентов появление непрогрессирующей обратимой протеинурии. 6-Хлор-5-фтор-2- (2-тениол)-2-оксиндол-1-карбоксамид не инициирует появление протеинурии.

Настоящее изобретение касается усовершенствованного способа достижения болеутоляющей или противовоспалительной реакции у человека посредством введения эффективно действующего количества обезболивающего или противовоспалительного средства в виде 2-ацил-2-оксиндол-1-карбоксамидного соединения. При этом усовершенствование состоит в достижении наступления болеутоляющей или противовоспалительной реакции при сохранении нормального соотношения содержания белка в моче к креатинину у пациента путем введения эффективного болеутоляющего или противовоспалительного и неэффективного в отношении протеинурии количества 6-хлор-5-фтор-3- -(2-теноил)-2-оксиндол-1-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой основной соли.

Соединение 6-хлор-5-фтор-3-(2-теноил)-2-оксиндол-1-карбоксамид (I) получают проведением следующей последовательности реакций, как это описано в патенте США N 4556672, упоминаемом здесь со ссылкой и в синтезах 1-3.

Соединение 6-хлор-5-фтор-3-(2-теноил)-2-оксиндол-1-карбоксамид является кислотным и образует с основаниями соли. Все такие основные соли подпадают под настоящее изобретение и они могут быть получены обычными способами. Например, они могут быть получены простым соединением кислой и основной составляющих частей, взятых обычно в стехиометрическом соотношении, что достигается либо взаимодействием в водной, неводной или частично водной среде, как это требуется, либо взаимопревращением при взаимодействии одной соли с еще одной. Соли выделяют либо фильтрованием, осаждением с использованием еще одного растворителя с последующим фильтрованием, выпариванием растворителя, как это требуется, либо в случае водных растворов лиофилизацией. Предпочтительными солями являются таковые сложных эфиров обычно встречающихся аминокислот.

Считается, что 6-хлор-5-фтор-3-(2-теноил)-2-оксиндол-1- карбоксамид существует в нескольких фенольных формах; все такие таутомеры подпадают под настоящее изобретение.

Под "значительным повышением или понижением" эффектов от воздействия протеинурии здесь понимается повышение или понижение, имеющее статистический смысл, что устанавливается проведением дисперсионного анализа. Во-первых, по данным для отношения содержаний балка к креатинину, полученным для каждого пациента и периода терапии, строят линию регрессии и определяют наклон. Наклон затем анализируют проведением дисперсионного анализа, устанавливая эффекты от воздействия последовательности, периода и характера терапии, что определяют по различию, наблюдаемому между контрольной и тестируемой группами.

6-Хлор-5-фтор-3-(2-теноил)-2-оксиндол-1-карбоксамид и его соли обладают болеутоляющей активностью. Эта активность может быть продемонстрирована на мышах посредством блокады абдоминального растягивания, индуцированного введением 2-фенил-1,4-бензохинона. Этот способ основывается на данных работы Зигмунда и др. (Siegmund et al. , Proc. Soc. Exp. Riol. Med., 95, 729-731 (1957)), как он принят в случае высоких доз (см. далее работу Милна (Milne) и Туми (Twomey), Agents and Actions, 10, 31-37 (1980)). Мыши, использованные в этих экспериментах, являлись мышами Каруорта (Carworth), альбиносная линия CF-1, массой 18 - 20 г. Перед введением лекарства и тестированием всех мышей не кормили в течение ночи.

6-Хлор-5-фтор-3-(2-теноил)-2-оксиндол-1-карбоксамид растворяют или суспендируют в носителе, состоящем из этанола (5%), эмульфора 620 (смесь полиоксиэтиленовых сложных эфиров жирных кислот, 5%) и солевого раствора (90 %). Этот носитель также использовали при проведении контрольных опытов. Дозировку производили по логарифмической шкале (т.е. брали 0,32, 0,1, 3,2, 10,32 мг/кг) и при проведении расчетов исходили из веса используемой соли. Был выбран оральный способ введения при концентрациях, меняющихся таким образом, чтобы достигалась неизменная дозировка в 10 мл на 1 кг веса мыши. Названный выше способ Милна и Туми использовали для определения эффективности и активности лекарственного вещества. Мышей обрабатывали орально и по прошествии одного часа после введения интраперитонеально 2-фенил-1,4-бензохинона в расчете 2 мг/кг. Отдельных мышей затем сразу же помещали в обогреваемую камеру из люсита и по истечении пяти минут после введения 2-фенил-1,4-бензохинона на протяжении последующих пяти минут регистрировали число абдоминальных сокращений. Степень аналгезирующей защиты - максимальный возможный эффект (% МРЕ) - рассчитывали по подавлению абдоминальных сокращений в сравнении с числом сокращений у одновременно проверяемых контрольных животных, подвергаемых тестированию в тот же день. При получении данных по воздействию дозы, необходимых для нахождения МРЕ₅₀, проводили, по крайней мере, четыре таких определения, причем наилучшей оценкой дозы считали такую, при которой абдоминальные сокращения снижались до 50 % от контрольного уровня.

6-Хлор-5-фтор-3-(2-теноил)-2-оксиндол-1-карбоксамид обладает также противовоспалительной активностью. Эта активность может быть продемонстрирована на крысах по способу с проведением стандартного теста с отеком крысиной ноги, индуцированным карагеном (Winter et al., Proc. Soc. Exp. Riol. Med., III, 544 (1963)).

Неанастезированных взрослых альбиносных крыс (мужские особи) весом от 150 до 190 г перенумеровывали, взвешивали и метили чернилами, помещали метку на правую латеральную лодыжку. Каждую лапу погружали в ртуть, делая это точно до чернильной метки. Ртуть помещали в стеклянный сосуд, присоединенный к датчику давления фирмы "Статор". Выход датчика был через блок управления подключен к микровольтметру. Считывали объем ртути, вытесненный погруженной лапой. Лекарство вводили через желудочный зонд. Через час после введения лекарства вызывали появление отека введением 0,05 мл 1%-ного раствора карагена в планарную ткань помеченных лап. Сразу после этого измеряли объем инъекцированной ноги. Возрастание объема ноги за три часа после впрыскивания карагена составляет индивидуальную воспалительную реакцию.

Аналгезирующая активность 6-хлор-5-фтор-3-(2-теноил)-2-оксиндол- 1-карбоксамида и солей такового делает их пригодными для экстренного введения млекопитающим с целью контроля болевого ощущения, например послеоперационного болевого ощущения и болевого ощущения, вызванного травмой. Кроме того, 6-хлор-5-фтор-3-(2-тиноил)-2-оксиндол-1-карбоксамид является полезным для длительного введения млекопитающим с целью ослабления симптомов хронических заболеваний, таких как воспаление при ревматоидных артритах, и боль, связанная с наличием воспаления при остеоартритах и других мышечно-скелетных и воспалительных заболеваний.

У нормальных людей в мочу обычно выделяются большие количества креатинина и значительно меньшие количества белка; и отношение содержаний белка к креатинину обычно поддерживают примерно в пределах от 0,05 до 0,1. Под нормальным отношением содержаний белка в мочи к креатинину здесь понимается такое отношение содержаний белка к креатинину, которое обнаруживается у субъекта до введения любого медицинского препарата. Под "невызывающим протеинурию количеством" здесь понимается доза аналгезирующего или противовоспалительного соединения, которая не повышает существенно величину отношения содержаний белка в моче к креатинину у субъекта в сравнении с нормальной величиной.

Установлено, что 5-хлор-3-(2-теноил)-2-оксиндол-1-карбоксамид вызывает появление протеинурии у 10 - 15 % пациентов в пределах четырех недель при 80 мг/день; протеинурия не является прогрессирующей и является обратимой при прерывании введения медицинского препарата. Соединение, отвечающее настоящему изобретению, не вызывает появление протеинурии при дозе в 320 мг/день (см. примеры 1 и 2).

При необходимости использования 6-хлор-5-фтор-3-(2-теноил)- 2-оксиндол-1-карбоксамида или фармацевтически приемлемой соли такового в виде аналгезирующего средства, либо противовоспалительного средства его можно вводить человеку либо как таковой, либо, что более желательно, в сочетании с фармацевтически приемлемыми носителями или разбавителями в виде фармацевтической композиции, что делается в соответствии со стандартной фармацевтической практикой. Соединение может быть введено орально или парентерально. К парентеральному введению относятся внутривенное, внутримышечное, интраперитонеальное, подкожное и местное введение.

У фармацевтической композиции, содержащей 6-хлор-5-фтор-3-(2- теноил)-2-оксиндол-1-карбоксамид или фармацевтически приемлемую соль такового, весовое отношение носителя к активному ингредиенту обычно находится в области от 1: 4 до 4:1 и, что более желательно, в области от 1:2 до 2:1. Однако в любом данном случае выбираемая величина отношения будет зависеть от таких факторов, как растворимость активного компонента, предлагаемая дозировка и точный способ введения.

В случае орального использования 6-хлор-5-фтор-3-(2-теноил)- 2-оксиндол-1-карбоксамида соединение может быть введено, например, в форме таблеток или капсул или же в виде водного раствора или суспензии. В случае таблеток, предназначенных для орального использования, обычно используемыми носителями являются лактоза и кукурузный крахмал; и туда обычно добавляют смазывающие вещества, такие как стеарат магния. В случае орального введения в форме капсул приемлемыми разбавителями являются лактоза и высушенный кукурузный крахмал. При необходимости использования водных суспензий, предназначенных для орального использования, активный ингредиент сочетают с эмульгирующими и суспендирующими веществами. При желании могут быть добавлены некоторые подслащивающие вещества и (одновременно или по отдельности) коррегенты. В случае внутримышечного, интраперитонеального, подкожного и внутривенного использования обычно готовят стерильные растворы активного ингредиента; и в этом случае у растворов должна надлежащим образом устанавливаться и поддерживаться величина pH. В случае внутривенного использования должна контролироваться общая концентрация растворенных веществ, чтобы препарат оказывался изотоническим.

При использовании человеком 6-хлор-5-фтор-3-(2-теноил)-2-оксиндол-1-карбоксамида или соли такового дневная доза обычно устанавливается лечащим врачом. При этом доза должна меняться с учетом возраста, веса и реакции данного пациента, а также с учетом остроты симптомов у пациента и активности данной композиции, предназначенной для введения. Однако при срочном введении для снятия боли эффективная доза в большинстве случаев составляет, как это необходимо, от 0,01 до 0,5 г (например, через каждые 4 - 6 ч). В случае длительного введения эффективная доза в большинстве случаев составляет от 0,01 до 1,0 г в день, а лучше - от 1 до 320 г в день и еще лучше - от 40 до 160 мг в день при однократном и разделенном приеме. С другой стороны, в некоторых случаях может оказаться необходимым использовать дозы, выходящие за эти пределы.

Следующие примеры и синтезы приводятся исключительно с целью дальнейшей иллюстрации.

Пример 1. Проводя тестирование по дважды слепой схеме с использованием плацебо, 6-хлор-5-фтор-3-(2-теноил)-2-оксиндол-1- карбоксамид вводили 36 пациентам с дозой в 40, 80, 160 и 320 мг, делая это 1 раз в день. Единичную дозу давали на первый день, после чего следовал семидневный период вымывания, а затем дозу продолжали давать еще в течение 21 дня. При каждом уровне дозы девять субъектов получали 6-хлор-5-фтор-3-(2-теноил)-оксиндол-1-карбоксамид, и три субъекта получали плацебо, причем плацебо давали в идентичной, схожей форме. Исследование являлось дважды слепым в отношении порядка расположения в пределах группы и однократно слепым в отношении порядка расположения между группами. Для отнесения субъектов к различным режимам обработки использовали компьютер, посредством которого осуществляли рандомизацию. Каждую дозу (лекарственное вещество и плацебо) вводили после голодания в течение ночи, используя 240 мл воды. На первый и последний день введения дозы брали кровь в количестве, достаточном для получения 1 мл плазмы, причем кровь брали через 0 (для получения линии отсчета), 0,5, 1, 2, 3, 4, 6, 8, 12, 16, 24, 48, 72, 96, 120, 144 и 168 ч после введения дозы (в последний день брали также образцы крови по истечении 192, 216 и 240 ч после приема дозы). На первый и последний день введения дозы собирали также мочу (за 24 ч), необходимую для определения содержания креатинина, мочевой кислоты, 2-микроглобулина, альбумина и суммарного белка. Кроме того, для количественного определения содержания белка и креатинина отбирали одну аликвоту мочи объемом 20 мл, что делали на 2-, 8- и 22-й день терапии и по истечении 240 ч после введения последней дозы, причем мочу отбирали после первого утреннего мочеиспускания, но до введения исследуемого лекарственного препарата. В период проведения этих исследований не наблюдали существенного различия у величины отношения содержаний белка в моче к креатинину у групп, получающих лекарственный препарат, и групп, получающих плацебо.

Пример 2. Проводя тестирование по дважды слепой схеме с перекрещиванием и использованием плацебо, 6-хлор-5-фтор-3-(2-теноил)- 2-оксиндол-1-карбоксамид вводили 25 пациентам при уровне дозы в 80 мг/день. Пациентов подвергали рандомизации, в результате чего они получали либо 6-хлор-5-фтор-3-(2-теноил)-2-оксиндол-1-карбоксамид в течение четырех недель с последующим получением плацебо в течение четырех недель, либо получали плацебо в течение четырех недель с последующим получением 6-хлор-5-фтор-3-(2-теноил)-2-оксиндол-1-карбоксамида в течение четырех недель. Пациенты могли переходить на второй вариант терапии раньше, если симптомы становились непереносимыми. Перед началом проведения терапии прекращали прием всех существенных нестероидальных противовоспалительных медицинских препаратов и прибегали к вымыванию продолжительностью в одну неделю. Величину отношения содержаний белка в мочи к креатинину определяли для базисной линии и еженедельно на протяжении всего исследования. Необходимо было собирать мочу в течение 24 ч, чтобы фиксировалось всякое возрастание за 24 ч выделения белка в мочу, устанавливаемое по величине отношения содержаний белка к креатинину. Не наблюдали существенных изменений у величины отношения содержаний белка в мочи к креатинину при проведении терапии с использованием 6-хлор-5-фтор-3-(2-тиноил)-2-оксиндол-1-карбоксамида, и не наблюдали существенных различий у величины отношения содержаний белка к креатинину при проведении терапии с использованием 6-хлор-5-фтор- 3-(2-теноил)-2-оксиндол-1-карбоксамида и плацебо.

Синтез 1. 6-Хлор-5-фтор-2-оксиндол.

К 130 мл толуола добавляли при перемешивании 24,0 г (0,165 моль) 3-хлор-4-фторанилина и 13,5 мл (0,166 моль) пиридина. Полученный раствор охлаждали примерно до 0^oC и добавляли 13,2 мл (0,166 моль) хлористого 2-хлорацетаила. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 ч и затем дважды экстрагировали 100 мл 1 н. раствора хлористоводородной кислоты с последующим использованием 100 мл насыщенного раствора хлорида натрия. Полученный толуольный раствор сушили, используя сульфат магния, и затем концентрировали в вакууме, в результате чего получали 32,6 г (выход 88 %) N-(2-хлорацетил)-3-хлор-4-фторанилина.

Образец N-(2-хлорацетил)-3-хлор-4-фторанилина, взятый в количестве 26,63 г, тщательно перемешивали с 64 г безводного хлорида алюминия, и смесь грели при 210- 230^oC в течение 8,5 ч. Реакционную смесь выливали затем в смесь льда с 1 н. раствором хлористоводородной кислоты, что делали при перемешивании. Перемешивание продолжали в течение 30 мин и затем фильтрованием собирали твердое вещество (22,0 г). Твердое вещество растворяли в смеси этилацетата с гексаном (1:1) и подвергали хроматографии на 800 г силикагеля. Элюированием из колонки с последующим упариванием фракций получали 11,7 г N-(2-хлорацетил)-3-хлор-4-фторанилина, а затем 3,0 г 6-хлор-5-фтор-2-оксиндола. Последнее вещество перекристаллизовывали из толуола, в результате чего получали 1,70 г (выход 7 %) названного соединения, обладающего температурой плавления 196-206^oC. Из результатов анализа способом ЯМР следовало, что продукт загрязнен некоторым количеством 4-хлор-5-фтор-2-оксиндола.

Синтез 2. 6-Хлор-5-фтор-2-оксиндол-1-карбоксамид.

К шламу, состоящему из 6-хлор-5-фтор-2-оксиндола (0,04 моля) в ацетонитриле (80 мл), добавляли хлорсульфонилизоцианат (6,65 г, 0,047 моль), и смесь перемешивали в течение 45 мин. Затем добавляли воду (100 мл) и водную смесь перемешивали в течение одного часа. Осадок, который при этом образовывался, отфильтровывали и выкристаллизовывали из ацетонитрила, в результате чего получали 0,92 г названного продукта. Экстракцией фильтрата из водной реакционной смеси этилацетатом (300 мл) с последующей сушкой экстракта над сульфатом магния и упариванием при пониженном давлении получали дополнительное количество продукта. Перекристаллизацией из ацетонитрила дополнительно получали 2,2 г продукта, имеющего температуру плавления 229 - 231^oC.

Синтез 3. 6-Хлор-5-фтор-3-(2-теноил)-2-оксиндол-1-карбоксамид.

Перемешиваемый шлам, состоящий из 0,1 моль 6-хлор-5-фтор- оксиндол-2-карбоксамида и 26,9 г (0,22 моль) 4-(N,N-диметиламино) пиридина в 200 мл N, N-диметилформамида, охлаждали до температуры ледяной бани и затем по каплям добавляли раствор, состоящий из 16,1 г (0,11 моль) хлористого 2-теноила в 50 мл N,N-диметилформамида. Перемешивание продолжали в течение примерно 30 мин и затем реакционную смесь выливали в смесь, состоящую из 1 л воды и 75 мл 3 н. раствора хлористоводородной кислоты. Результирующую смесь охлаждали на ледяной бане и затем твердое вещество собирали фильтрованием. Твердое вещество промывали водой и затем выкристаллизовывали из 1800 мл уксусной кислоты, в результате чего получали 26,6 г названного соединения, имеющего вид мелкокристаллических желтых кристаллов и обладающего температурой плавления 220 - 221^oC.